猪苓多糖联合硼替佐米促进多发性骨髓瘤U266细胞的凋亡和自噬

目的研究猪苓多糖(PPS)联合硼替佐米(BTZ)对人多发性骨髓瘤U266细胞的影响。方法 (1)PPS 12.5～400μmol·L^-1或BTZ 10～80 nmo·L^-1处理U266细胞48 h,PPS 50μmol·L^-1+BTZ 10～80 nmol·L^-1处理U266细胞48 h,CCK-8法检测细胞存活率。PPS 12.5～50μmo·L^-1+BTZ 10～80 nmol·L^-1处理U266细胞48 h,Calcusyn软件分析计算联合用药指数(CI),并确定联合用药的浓度。(2) U266细胞分为细胞对照组、PPS 20μmol·L^-1组、BTZ 25 nmol·L^-1组和PPS 20μmol·L^-1+BTZ 25 nmol·L^-1组,孵育48 h。流式细胞术检测细胞凋亡率,Western印迹法检测细胞Bax、Bcl-2、活化胱天蛋白酶3、胱天蛋白酶3、自噬...     

甘草水提物联合Erastin对二肽基肽酶4诱导结直肠癌细胞铁死亡的作用

目的:探究甘草水提物(licorice extracts, LE)联合铁死亡诱导剂Erastin能否通过二肽基肽酶4(dipeptidyl peptidase-4,DPP4)诱导人结直肠腺癌上皮细胞(DLD-1)发生铁死亡。方法:将DLD-1细胞随机分为Control组、L-LE组(50μg·mL^-1 LE)、H-LE组(100μg·mL^-1 LE)、H-LE+Erastin组(100μg·mL^-1 LE+30 nmol·L^-1 Erastin)、H-LE+Erastin+Sita(DDP4抑制剂)组(100μg·mL^-1 LE+30 nmol·L^-1 Erastin+31.25μg·mL^-1 Sita),药物干预24 h。行细胞克隆实验和EDU-594细胞增殖实验测定细胞克隆及增殖情况,ELISA检测细胞Fe²⁺含量及DPP4活性变化,流式细胞术检测细胞活性氧(reactive oxygen species, ...     

亚精胺对脂多糖诱导损伤的人脐静脉内皮细胞自噬的影响及机制

目的 探讨亚精胺(SPD)对血管内皮细胞损伤后自噬的影响及机制。方法 (1) SPD 50,100 和200 μmol·L^-1预处理人脐静脉内皮细胞(HUVEC)3 h,加脂多糖(LPS)1 mg·L^-1孵育 24 h,CCK-8 检测细胞存活率。(2) HUVEC 细胞分成 7 组,细胞对照组、模型组、模型+SPD(100 μmol·L^-1预处理 3 h)组、模型+腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)抑制剂多索霉素(Dor,10 μmol·L^-1预处理 1 h)组、模型+SPD+Dor 组、模型+AMPK激活剂阿卡地新(Aicar,0.5 mmol·L^-1预处理1.5 h)组和模型+SPD+Aicar组,药物预处理结束,模型组和用药组加 LPS 1 mg·L^-1共孵育 24 h。流式细胞术检测细胞凋亡,免疫荧光和 Western印迹法检测微管相关蛋白 1 轻链 3-Ⅰ(LC3-Ⅰ)、LC3-Ⅱ和 P62 蛋白表达水平,Western 印迹法检测细胞 AMPK/...     

丹酚酸A抑制NF-κB信号通路减轻脂多糖诱导的BV2小胶质细胞炎症反应

目的 利用脂多糖(LPS)刺激BV2小胶质细胞构建体外神经炎症模型，探讨丹酚酸A(SalA)对神经炎症的抑制作用及机制。方法 (1) BV2细胞分为细胞对照组(正常培养24 h)、LPS(1 mg·L^-1孵育24 h)组、SalA(0.01,0.05,0.5,5,10和20μmol·L^-1培养24 h)组和LPS+SalA(加入LPS 1 mg·L^-1及SalA 0.01,0.05,0.5,5,10和20μmol·L^-1共同培养24 h)组，MTT法检测细胞存活率。(2)除LPS+SalA组SalA给药浓度为0.05,0.5和5μmol·L^-1外，其他分组处理同方法(1)。Griess法检测BV2细胞一氧化氮(NO)分泌水平，ELISA检测BV2细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL^-1β)和IL-6分泌水平，实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测TNF-α,IL^-1β和IL-6 mRNA表达水平，Western印迹...     

基于细胞代谢组学的柴胡皂苷b2对皮质酮诱导PC12细胞损伤的保护作用研究

目的 研究柴胡皂苷b2(SSb2)对皮质酮(CORT)诱导PC12细胞损伤的保护作用及其机制。方法 (1)将细胞分为细胞对照组(RPMI-1640培养基培养24 h),CORT(100～800μmol·L^-1孵育24 h)组和SSb2(1.5625,3.125,6.25,12.5,25,50和100μmol·L^-1孵育24 h)组,MTT法检测细胞存活率。(2)将细胞分为细胞对照组(RPMI-1640培养基培养24 h),模型组(CORT 400μmol·L^-1孵育24 h)和模型+SSb2组(SSb2 1.5625,3.125,6.25,12.5和25μmol·L^-1预处理3 h,去上清,然后加入CORT 400μmol·L^-1及对应浓度SSb2共孵育24 h)。MTT法检测细胞存活率,微板法检测PC12细胞乳酸脱氢酶(LDH)释放率。(3)将细胞分为细胞对照组、模型组和模型+SSb2 12.5μmol·L^-1组,采用AnnexinV-FITC/PI流式...     

萝卜硫素通过调控OGG1基因抑制动脉粥样硬化相关巨噬细胞脂质积聚的研究

目的 探讨萝卜硫素对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的巨噬细胞脂质积聚的影响和作用机制。方法 将细胞分为对照组、ox-LDL组(100μg·mL^-1 ox-LDL)、萝卜硫素低剂量组(100μg·mL^-1 ox-LDL+5μmol·L^-1萝卜硫素)、萝卜硫素高剂量组(100μg·mL^-1 ox-LDL+10μmol·L^-1萝卜硫素)、si-OGG1组(100μg·mL^-1 ox-LDL+10μmol·L^-1萝卜硫素+转染si-OGG1)。以蛋白质印迹法检测各组细胞蛋白表达水平,以酶联免疫吸附测定法检测各组细胞炎性因子及8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)表达水平,以氧化酶法检测细胞内胆固醇水平,以探针法检测活性氧(ROS)水平,以流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果 对照组、ox-LDL组、萝卜硫素低剂量组、萝卜硫素高剂量组、si-OGG1组的8-氧代鸟嘌呤DNA糖基化酶1(OGG1)蛋白相对表达水平分别为0.80±0.03、0.26±0....     

淫羊藿苷调控mTOR/Akt/CREB通路对高糖诱导的足细胞自噬及凋亡的影响

目的 探讨淫羊藿苷对高糖诱导的足细胞自噬、凋亡及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(Akt)/环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)通路的影响。方法 将小鼠足细胞MPC5分为5组：正常对照组(5.5 mmol·L^-1葡萄糖)、高糖组(30 mmol·L^-1葡萄糖)、淫羊藿苷组(30 mmol·L^-1葡萄糖+5μmol·L^-1淫羊藿苷)、GDC-0349组(30 mmol·L^-1葡萄糖+50μmol·L^-1 GDC-0349)、淫羊藿苷+GDC-0349组(30 mmol·L^-1葡萄糖+5μmol·L^-1淫羊藿苷+50μmol·L^-1 GDC-0349)。培养48 h后，噻唑蓝法检测MPC5细胞活力；吖啶橙染色观察MPC5细胞自噬情况；流式细胞术检测MPC5细胞凋亡；蛋白印迹法检测MPC5细胞自噬[微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅱ、LC3Ⅰ、自噬相关蛋白(Beclin-1...     

淫羊藿苷通过抑制Nod样受体家族蛋白3炎症小体相关蛋白表达抑制BV2小胶质细胞炎症反应

目的 研究淫羊藿苷(ICA)靶向Nod样受体家族蛋白3(NLRP3)炎症小体抑制BV2小胶质细胞炎症反应的作用机制。方法 用细菌脂多糖(LPS)+干扰素γ(IFN-γ)诱导小鼠BV2小胶质细胞,构建拟神经炎症反应的小胶质细胞模型。BV2细胞用DMEM高糖培养基培养,分为细胞对照组、ICA 10μmol·L^-1组、模型组及模型+ICA 5,10和20μmol·L^-1组。细胞对照和模型组加入DMEM高糖培养基培,ICA组加入ICA 10μmol·L^-1,模型+ICA组分别加入相应浓度的ICA,孵育24 h;随后模型和模型+ICA组加入LPS100μg·L^-1和IFN-γ 20μg·L^-1,细胞对照和ICA组用等体积培养基代替,孵育18 h;最后模型+ICA组加入相应浓度的ICA,其他各组加入等体积培养基,继续孵育24 h。用Luminex法检测细胞上清中白细胞介素3(IL-3)、IL-5、IL-17和单核/巨噬细胞趋化因子11(CCL11)含量;用细胞免疫荧光染色法检测CD16/C...     

天麻活性成分20C对6-羟基多巴胺诱导的PC12细胞损伤及帕金森病模型小鼠的保护作用

目的研究天麻活性成分20C对6-羟基多巴胺(6-OHDA)诱导的PC12细胞损伤及帕金森病(PD)模型小鼠的保护作用。方法 (1)用6-OHDA 100μmol·L^-1单独(模型组)或与20C 0.01,0.10和1.00μmol·L-1共同(模型+20C组)孵育PC12细胞6 h,采用MTT法检测细胞存活率;用6-OHDA 100μmol·L^-1和20C1.00μmol·L^-1共同孵育PC12细胞6 h,采用免疫荧光染色法检测细胞DNA和RNA氧化损伤。(2) C57BL/6小鼠分为正常对照组、模型组、模型+左旋多巴(L-dopa)组和模型+20C组。采用单侧纹状体双位点注射6-OHDA方法制备PD小鼠模型,造模3周后,模型+L-dopa组和模型+20C组小鼠开始ig给予20C 100 mg·L^-1或L-dopa 40 mg·g^-1,连续给药4周后,采用免疫组化法观察小鼠纹状体和黑质酪氨酸羟化酶(TH)的表达;Western印迹法检测黑质TH表达水平;透射电镜观察小鼠黑质神经...     

基于PI3K/Akt信号通路探讨姜黄素诱导A549细胞凋亡的机制

目的 观察并探讨姜黄素对非小细胞肺癌A549细胞的作用及其机制。方法 将A549细胞分为空白组(正常培养)和低、高剂量实验组(分别用40、80μmol·L^-1姜黄素干预48 h)及激动药+低、高剂量实验组(先用50μmol·L^-1 Recilisib Sodium干预24 h后，再分别用40、80μmol·L^-1姜黄素干预48 h)、抑制药+低、高剂量实验组(先用25μmol·L^-1 PI3K-IN-1干预24 h后，再分别用40、80μmol·L^-1姜黄素干预48 h)。用MTT法测定细胞增值率；用流式细胞术测定细胞凋亡情况；用实时荧光聚合酶链反应(qRT-PCR)检测磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶(Akt)mRNA的相对表达水平；用蛋白质印迹法检测PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt蛋白表达水平。结果 空白组、低剂量实验组、高剂量实验组、激动药+低剂量实验组、抑制药+低剂量实验组、激动药+高剂量实验组、抑制药+高剂量实验组的细胞活力分别为(100...     

阿帕替尼联合阿霉素对外周T细胞淋巴瘤的抑制作用及机制研究

目的探讨抗血管生成药物阿帕替尼与常用化疗药物阿霉素联合应用对外周T细胞淋巴瘤Hut78细胞株的抑制作用以及相关分子作用机制,为开发外周T细胞淋巴瘤治疗新方法提供实验依据。方法将Hut78细胞分为不同浓度药物处理组:阿帕替尼单药(10、20、40、60μmol·L^-1)、阿霉素单药(1、2、4μmol·L^-1)、阿帕替尼+阿霉素[(40+1)μmol·L^-1、(40+2)μmol·L^-1、(60+1)μmol·L^-1、(60+2)μmol·L^-1],分别作用72 h,采用CCK-8法检测药物对细胞的增殖抑制作用。采用流式细胞术检测不同浓度药物处理组{阿帕替尼单药(40μmol·L^-1)、阿霉素单药(1、2μmol·L^-1)、阿帕替尼+阿霉素[(40+1)μmol·L^-1、(40+2)μmol·L^-1]}作用24 h后对Hut78细胞凋亡的影响。采用流式细胞术检测不同浓度阿帕替尼(10、20、40μmol·L^-1)作用24 h后对Hut78细胞周期的影响。采用蛋白印迹法检测不同浓度药物处理组{阿帕替尼单药(40μmol·L^-1)、阿霉素单药(1、2μmol·L^-1)、阿帕替尼+阿霉素[(40+1)μmol·L^-1、(40+2)μmol·L^-1]}作用24 h后,Hut78细胞中PI3K/Akt信号转导通路相关蛋白PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt及凋亡相关蛋白Bcl-2、Casepase-3、Bax的表达变化。结果不同浓度(10、20、40、60μmol·L^-1)的阿帕替尼作用72 h后,细胞抑制率分别为(13.42±2.19)%、(19.52±4.16)%、(31.49±3.16)%、(52.88±3.37)%,72 h的IC₅₀值为(59.34±0.31)μmol·L^-1,各药物处理组与对照组两两比较,差异具有统计学意义(χ²=10.116,P=0.018);不同浓度(1、2、4μmol·L^-1)的阿霉素分别作用72 h后,细胞抑制率分别为(15.82±3.23)%、(31.70±4.79)%、(42.34±5.23)%,72 h的IC₅₀值为(5.52±0.18)μmol·L^-1,各药物处理组与对照组两两比较,差异具有统计学意义(χ²=10.532,P=0.015);阿帕替尼+阿霉素[(40+1)μmol·L^-1、(40+2)μmol·L^-1、(60+1)μmol·L^-1、(60+2)μmol·L^-1]作用72 h的细胞抑制率分别为(51.70±2.09)%、(56.62±4.83)%、(61.35±1.79)%、(65.13±3.88)%。两药的联合指数(CI)<1,说明二者具有药物协同作用。阿帕替尼单药(40μmol·L^-1)、阿霉素单药(1、2μmol·L^-1)作用24 h的细胞凋亡率分别为(15.65±0.75)%、(13.85±2.15)%、(23.60±1.30)%,阿帕替尼+阿霉素[(40+1)μmol·L^-1、(40+2)μmol·L^-1]作用24h的细胞凋亡率分别为(27.00±1.90)%、(33.20±2.30)%,各药物处理组与对照组[(6.10±0.90)%]比较,差异有统计学意义(χ²=16.251,P=0.006)。不同浓度(10、20、40μmol·L^-1)的阿帕替尼作用24 h后,G₀/G₁期细胞比例随浓度升高而升高[(49.27±0.45)%、(50.34±1.24)%、(59.16±1.23)%],S期细胞比例随浓度升高而降低[(42.81±2.22)%、(39.19±2.71)%、(34.08±1.01)%],各药物处理组与空白对照组[G₀/G₁期(39.26±0.65)%,S期(49.40±2.52)%]比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。阿帕替尼单药(40μmol·L^-1)、阿霉素单药(1、2μmol·L^-1)以及阿帕替尼+阿霉素[(40+1)μmol·L^-1、(40+2)μmol·L^-1]作用24 h后,PI3K/Akt信号通路相关蛋白PI3K、p-PI3K、p-Akt和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平呈下降趋势,促凋亡蛋白Casepase-3和Bax的表达水平呈上升趋势,Akt蛋白的表达水平无明显变化,各药物处理组p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、Bcl-2、Casepase-3及Bax蛋白表达水平与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论阿帕替尼可抑制外周T细胞淋巴瘤细胞的增殖并诱导其凋亡,同时具有细胞周期阻滞作用,其作用可能是通过抑制PI3K/Akt信号通路激活实现的。阿帕替尼联合阿霉素对外周T细胞淋巴瘤细胞具有协同抑制作用。     

桑皮苷A对人肺癌细胞A549紫杉醇化疗的增敏作用及其机制研究

目的 研究桑皮苷A(Mul A)对人肺癌细胞A549紫杉醇(Taxol)化疗作用的影响及机制。方法 将A549细胞分为溶媒对照组(二甲基亚砜)、紫杉醇单用组(50 nmol·L^-1紫杉醇处理48 h)、桑皮苷A组(10、20、40μmol·L^-1 桑皮苷A处理48 h)、紫杉醇联用桑皮苷A组(50 nmol·L^-1 紫杉醇+10、20、40μmol·L^-1桑皮苷A处理48 h)。用噻唑蓝(MTT)法检测药物对细胞增殖的影响;用流式细胞仪检测药物对细胞凋亡和细胞周期分布变化的影响;分别用聚合酶链反应(PCR)和蛋白质印迹(Western blot)法检测桑皮苷A对A549细胞中P-糖蛋白(P-gp)mRNA表达、蛋白表达及核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)通路相关蛋白的影响。结果 桑皮苷A可显著增强紫杉醇对人肺癌A549细胞增殖的抑制作用,其中20, 40μmol·L^-1桑皮苷A与紫杉醇联用可分别使细胞存活率显著下降约17.28%和27.38%。同时,...     

奈比洛尔对血管内皮细胞胰岛素抵抗的影响

目的 观察奈比洛尔改善人主动脉内皮细胞(HAEC)胰岛素抵抗(IR)的作用及机制。方法 HAEC分为空白组(正常培养,胰岛素不刺激),对照组(正常培养,胰岛素刺激),不同浓度奈比洛尔+对照组(对照组基础上加奈比洛尔0.1,1,10μmol·L^-1),IR组(高糖33.3 mmol·L^-1+胰岛素1×10^-7 mol·L^-1),不同浓度奈比洛尔+IR组(IR基础上加奈比洛尔0.1,1,10μmol·L^-1)。48 h后,细胞无血清饥饿处理12 h。以噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性,以葡萄糖氧化酶法测HAEC葡萄糖消耗量,以硝基还原酶法检测上清液一氧化氮(NO)水平,以蛋白质印迹法测定蛋白表达。结果 与对照组(100%)比较,IR组细胞活性无显著性改变(95.13±2.10)%,且不同浓度奈比洛尔(0.1、1、10μmol·L^-1)预处理对IR组和对照组细胞活性均无显著性影响。IR组的细胞葡萄糖消耗量和上清液NO水平分别为(0.53±0.17) mmol·L<...     

小剂量氯胺酮联用丁基苯酞的抗抑郁作用及其机制

目的 研究小剂量氯胺酮(Ket)联用丁基苯酞(NBP)的抗抑郁作用及其机制。方法 建立皮质酮(CORT)诱导PC12细胞损伤的体外抑郁模型,PC12细胞分成6组：空白对照组、模型对照组(CORT 400μmol·L^-1)、对照A组(CORT 400μmol·L^-1+NBP 1μmol·L^-1)、对照B组(CORT 400μmol·L^-1+Ket 0.01μmol·L^-1)、阳性对照组(CORT 400μmol·L^-1+Ket 0.1μmol·L^-1)、联合组(CORT 400μmol·L^-1+Ket 0.01μmol·L^-1+NBP 1μmol·L^-1)。CCK-8法检测细胞存活率,荧光显微镜观察细胞神经元形态变化,蛋白免疫印迹法评价联合用药对损伤细胞p-ERK/ERK、脑源性神经营养因子(BDNF)、synapsin蛋白表达变化。将ICR小鼠随机分为模型对照组、NBP...     

姜黄素抗抑郁作用的研究

目的 研究姜黄素在西罗莫司介导后的抗抑郁作用。方法 在细胞实验中,实验分为空白组、模型组、阳性对照组(1μmol·L^-1氟西汀)、对照组(1μmol·L^-1姜黄素)、实验组(0.1 nmol·L^-1西罗莫司)、联合组(0.1 nmol·L^-1西罗莫司+1μmol·L^-1姜黄素)。除空白组外,其余各组用皮质酮建立SH-SY5Y细胞损伤模型,用CCK-8法检测细胞存活率,用荧光显微镜观察细胞突触变化。在动物实验中,将40只雄性ICR小鼠随机分为空白组、对照A组(50 mg·kg^-1姜黄素)、对照B组(150 nmol·L^-1西罗莫司)、实验组(150 nmol·L^-1西罗莫司+50 mg·kg^-1姜黄素)。各组均给予小鼠急性应激造模,并考察行为学指标变化。结果 模型组、对照组和联合组的细胞存活率分别为(32.38±5.45)%,(61.67±4.53)%和(39.40±12.33)%,突触长度分...     

紫草素调控转化生长因子β1/Smad信号通路抑制人非小细胞肺癌A549细胞上皮-间充质转化和迁移能力

目的 探讨紫草素对转化生长因子β₁(TGF-β₁)诱导的人非小细胞肺癌A549细胞迁移、上皮-间充质转化(EMT)的影响及机制。方法 (1)紫草素0.75,1.50和3.00μmol·L^-1作用A549细胞24 h,ELISA法检测细胞培养上清液中TGF-β₁水平。(2)设细胞对照组、TGF-β₁9 pmol·L^-1组、TGF-β₁+紫草素0.75,1.50和3.00μmol·L^-1组,作用A549细胞24 h,分别采用划痕和Transwell实验检测细胞划痕愈合百分率和迁移细胞数,Western印迹法检测N-钙黏蛋白、锌指转录因子Snail、E-钙黏蛋白、Smad4、纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)蛋白水平及Smad2和Smad3蛋白磷酸化水平。结果 (1)与细胞对照组比较,紫草素0.75,1.50和3.00μmol·L^-1作用于A549细胞24 h后均未显著改变细胞培养上清液中TGF...     

桑皮苷A逆转K562/阿霉素耐药细胞化疗多药耐药的研究

目的 研究桑皮苷A对人白血病耐药细胞K562/阿霉素耐药细胞（K562/ADM）化疗耐药的影响。方法 实验分为溶媒（DMSO）对照组、阳性对照组(10μmol·L^-1维拉帕米处理48 h,再用5μg·mL^-1阿霉素孵育1 h或2μg·mL^-1罗丹明123孵育1.5 h)、阿霉素单用组(5μg·mL^-1阿霉素孵育1 h)、阿霉素合用桑皮苷A组(用5,10,20μmol·L^-1桑皮苷A处理48 h,再用5μg·mL^-1阿霉素孵育1 h)、罗丹明123合用桑皮苷A组(用5,10,20μmol·L^-1桑皮苷A处理48 h,再用2μg·mL^-1罗丹明123孵育1.5 h)。用噻唑蓝（MTT）实验初步确定桑皮苷A的逆转耐药作用;再以细胞内阿霉素蓄积实验,罗丹明123（Rho123）蓄积及外排实验进一步研究桑皮苷A的逆转耐药作用;分别用聚合酶链反应（PCR）和蛋白质印迹（Western blot）法检测桑皮苷A对K562/AD...     

吡咯喹啉醌对人卵巢癌细胞SKOV-3上皮间质转化的影响

目的 观察吡咯喹啉醌(PQQ)对人卵巢癌细胞SKOV-3上皮间质转化(EMT)的影响,并探讨可能机制。方法 取对数期SKOV-3细胞,随机分为Control组、PQQ组、PQQ+LiCl[Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)通路激活剂]组。Control组不处理,PQQ组加入PQQ 16μmol·L^-1培养24 h, PQQ+LiCl组加入PQQ 16μmol·L^-1培养24 h后再加入LiCl 60 mmol·L^-1培养24 h。以Transwell实验检测细胞侵袭能力;以划痕实验检测细胞迁移能力;以蛋白质印迹法检测细胞β-catenin、反式激活活性蛋白(c-myc)、糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)蛋白表达量。结果 Control组、PQQ组、PQQ+LiCl组每个视野细胞数分别为(95.20±11.39),(29.40±4.25)和(46.00±5.97)个,迁移率分别为(99.58±1.24)%,(18.19±2.36)%和(62.67±7.50)%;这3组细胞β-catenin蛋白表达量分别为1.10...     

Irisin通过Sirt1/UCP2拮抗二氯化钴诱导的心肌损伤作用

目的 探讨肌肉因子Irisin调节胞内保护蛋白Sirt1和线粒体解偶联蛋白2(uncoupling protein 2,UCP2)在心肌缺氧过程中发挥的作用及具体机制。方法 以CoCl₂作用H9c2心肌细胞24 h,构建心肌细胞体外缺氧模型。实验分为6组：control组、Irisin 10 nmol·L^-1组、Irisin 20 nmol·L^-1组、CoCl₂模型组、CoCl₂+Irisin 10 nmol·L^-1治疗组、CoCl₂+Irisin 20 nmol·L^-1治疗组。CCK-8法检测细胞存活率，Flow cytometry测定细胞凋亡和线粒体膜电位，探针法指示细胞内活性氧(reactive oxygen species, ROS)高低水平，Western blot法检测细胞内Sirt1、UCP2、Bcl-2、Bax、cleaved-caspase3的表达水平。结果 心肌细胞H9c2缺氧模型组细胞活力下...     

基于RhoA/ROCK通路探讨桔梗提取物对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖及转移的影响

目的 探讨桔梗提取物(PGE)对类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞增殖和转移的影响及其作用机制。方法 将成纤维样滑膜细胞MH7A细胞分为对照组、PGE-L组(25 mg·L^-1 PGE)、PGE-M组(50 mg·L^-1 PGE)、PGE-H组(100 mg·L^-1 PGE)、PGE+血管紧张素(Ang)Ⅱ组[100 mg·L^-1 PGE+100 nmol·L^-1 Ras同源基因家族成员A(RhoA)/Rho激酶(ROCK)通路激活剂AngⅡ],给予相应的处理。采用CCK-8法、流式细胞术、Transwell实验分别检测细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭情况,Western blot法检测相关蛋白表达水平,GST-pull down法检测细胞中RhoA活性。结果 与对照组比较,PGE-L组、PGE-M组、PGE-H组的吸光度值(PGE处理24、48、72h)、迁移及侵袭细胞数目、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、ROCK1、ROCK2蛋...