长链游离脂肪酸对滋养细胞线粒体三羟基酰基辅酶A脱氢酶基因启动子区甲基化程度的影响

目的 探讨长链游离脂肪酸对胎盘滋养细胞线粒体β氧化循环长链三羟基酰基辅酶A脱氢酶(LCHAD)基因启动子区甲基化程度影响,以及对甲基化修饰的时间效应.方法 体外培养原代人绒毛滋养细胞及HTR-8/SVneo永久性人滋养细胞,研究组采用长链游离脂肪酸孵育滋养细胞(LC-FFA组),并以短链游离脂肪酸(SC-FFA组)和中链游离脂肪酸(MC-FFA组)作为不同链长游离脂肪酸对照组,空白对照组无脂肪酸(F-FFA组).分别在孵育24、48及72 h收集细胞并提取DNA.在LCHAD基因转录起始位点上游2 000 bp区域内序列预测CpG岛位置,设计甲基化检测位点和引物.采用Sequenom MassArray甲基化DNA定量分析平台检测不同组CpG岛各CpG位点的甲基化程度后进行各甲基化位点和CpG岛的统计学分析.结果 (1)在LCHAD基因转录起始位点上游2 000bp区域内的17个CpG位点中获得11个位点(65％)的甲基化程度,8个为单独位点,3个为复合位点(-984、-960、-899、-853、-811、-796、-774、-727、-615、-595、-579).在不同研究组中每个位点的甲基化变化程度各不同,其中-899位点变化最明显.(2)LCHAD基因启动子区CpG岛甲基化程度变化分析:①长、中链游离脂肪酸对LCHAD基因启动子区CpG岛甲基化程度影响伴随时间的延长呈现升高趋势:LC-FFA组孵育72 h(0.55±0.08)比孵育48 h(0.35±0.12)及24 h(0.31±0.04)均明显升高(P＜0.05),48 h虽比24 h升高,但差异无统计学意义(P＞0.05).MC-FFA组孵育72 h(0.44±0.05)比孵育24 h(0.31±0.04)明显升高(P＜0.05).②不同链长游离脂肪酸在不同作用时间影响LCHAD基因启动子区CpG岛甲基化程度比较:LC-FFA组孵育72 h的甲基化程度比MC-FFA、SC-FFA组及F-FFA组的72、48及24 h均明显升高(P＜0.05).(3)作用72 h游离脂肪酸对LCHAD基因启动子区11个CpG位点甲基化程度影响比较:在LC-FFA组和MC-FFA组-899位点甲基化程度明显高于其他位点(P＜0.05).(4)长链游离脂肪酸对LCHAD基因启动子区-899位点甲基化程度影响伴随时间的延长呈现升高趋势(P＜0.05).LC-FFA组孵育72 h比MC-FFA、SC-FFA组及F-FFA组的72、48及24 h均明显升高(P＜0.05).结论 长链游离脂肪酸比中链和短链游离脂肪酸呈现较大的滋养细胞LCHAD基因启动子区甲基化的修饰作用,并伴随作用时间延长表现出明显的时间依赖效应;甲基化程度改变主要发生在LCHAD基因启动子区-899位点.     

ABAD/HADH Ⅱ在喉鳞状细胞癌与声带息肉组织中的表达

目的:检测喉癌组织中ABAD/HADHⅡ的表达,探讨ABAD/HADHⅡ在喉鳞状细胞癌增殖中的作用。方法:选用福建医科大学附属第一医院2002~2005年的27例喉癌手术标本及12例声带息肉手术标本,采用免疫组化检测ABAD/HADHⅡ的表达及分布情况。结果:ABAD/HADHⅡ主要表达在鳞状细胞癌的细胞浆,在生长活跃的细胞表达较高;ABAD/HADHⅡ在喉鳞状细胞癌组织中的表达比在息肉组织中的表达高(P<0.05)。结论:ABAD/HADHⅡ在喉癌组织中表达较正常组织高,与喉鳞状细胞癌的增殖有一定的关系。     

以运动后反复血尿起病的极长链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症1例报告

<正>极长链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症（very long chain acyl-Co A dehydrogenase deficiency,VLCADD）(OMIM#201475)是一种罕见的常染色体隐性遗传病。因发病率低,临床缺乏特异性,往往易漏诊误诊。本研究报道2019年10月南京医科大学附属儿童医院收治的1例运动后反复血尿起病的VLCADD临床资料和基因检测结果,总结该病临床特点并文献复习已报道的病例资料,以提高临床医师对该病的认识,为早期诊断和治疗、遗传咨询提供依据。     

北京市新生儿短链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症筛查、临床特征及基因突变分析

目的：探讨北京市新生儿短链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症（SCADD）的发病率、临床特征及基因突变特点。方法：采用串联质谱法检测2014年8月至2022年3月北京市100?603名新生儿干血斑中酰基肉碱水平,采用气相色谱-质谱法检测尿有机酸,高通量测序检测基因突变。对SCADD确诊患儿进行临床、生化指标检查及基因突变特点分析,并随访患儿的生长发育和智能发育情况。结果：100 603名活产新生儿中初筛丁酰基肉碱（C4）浓度升高或伴C4/丙酰基肉碱（C3）比值升高196名,召回131名新生儿,确诊SCADD患儿5例,SCADD发病率为4.97/10万（1/20?121）。5例确诊患儿均无明显临床表现,血C4及C4/C3比值均增加,其中4例尿乙基丙二酸增加。5例确诊患儿中,ACADS基因检测到7种突变,均为已报道错义突变,其中1例患儿为纯合突变,其余均为复合杂合突变。5例患儿的随访年龄中位数为33（4~40）个月,随访期间均未出现临床症状,体格及智力发育正常。结论：北京市SCADD发病率为1/20?121,通过新生儿筛查确诊的SCADD患儿无明显临床症状,预后较好。     

婴幼儿极长链酰基辅酶A脱氢酶缺陷症5例诊治特点分析

目的探讨婴幼儿极长链酰基辅酶A脱氢酶(VLCAD)缺陷症的临床诊断和治疗方法。方法对5例VLCAD缺陷症患儿的临床表现、实验室检查及治疗与转归进行分析。结果患儿表现为反复抽搐、智力落后、肌力低下、肝脏肿大和肌酸激酶显著增高等,严重者急剧恶化昏迷,迅速死亡。本组5例患儿中均见乙酰基肉碱(C2)水平明显降低,月桂酰基肉碱(C12)、肉豆蒄酰基肉碱(C14)和肉豆蒄烯酰基肉碱(C14∶1)显著增高。本症无特殊治疗,基因治疗仍处于实验阶段。结论应用串联质谱技术检测血中酰基肉碱水平可对脂肪酸代谢病高危新生儿进行筛查和确诊,治疗主要通过高糖饮食、辅以中链脂肪酸,限制长链脂肪酸的摄入。     

丁酰基肉碱代谢异常新生儿的基因型和生化表型分析

目的:探讨丁酰基肉碱（C4）代谢异常新生儿的基因型和生化表型特征。方法:收集2018年1月至2023年6月在浙江大学医学院附属儿童医院经串联质谱法筛查单纯C4增高的120例新生儿初筛和召回复查的C4、C4/C3检测数据，并换算为C4增高倍数。采用液相捕获技术靶向捕获酰基辅酶A脱氢酶8(ACAD8)和短链酰基辅酶A脱氢酶（ACADS）基因的外显子及邻近50 bp区域，通过高通量测序和生物信息学分析获取基因变异信息，参考美国医学遗传学与基因组学学会分类标准进行致病性评估。采用威尔科克森秩和检验分析不同基因型新生儿C4增高倍数的差异。结果:共检出32种ACAD8基因变异型，其中7种变异型未见报道；检出41种ACADS基因变异型，其中17种变异型未见报道。ACAD8双等位基因变异39例，ACAD8单等位基因变异3例，ACADS双等位基因变异34例，ACADS单等位基因变异36例，ACAD8和ACADS双基因变异5例。ACAD8双等位基因变异组、ACADS双等位基因变异组C4增高倍数初筛值和召回值均高于ACADS单等位基因变异组（均P<0.01），且ACAD8双等位基因变异组C4增高倍数初...     

中链酰基辅酶A脱氢酶增强乳腺癌细胞的侵袭和转移能力

目的探讨中链酰基辅酶A脱氢酶（ACADM）对乳腺癌细胞侵袭和转移能力的影响及潜在作用机制。方法采用大型癌 症基因组数据库分析ACADM在乳腺癌组织及正常组织中表达量。上调及沉默乳腺癌细胞（MCF-7及T47D）中ACADM的表 达,进行体外功能实验（噻唑蓝增殖实验、EdU实验、Transwell小室实验、Boyden体外侵袭实验）,探究ACADM对乳腺癌细胞体 外增殖、迁移及侵袭能力的影响,通过Western blot检测相关信号通路蛋白表达量,建立裸鼠尾静脉转移模型验证ACADM功 能,利用苏木精-伊红染色法诊断肿瘤组织。结果Oncomine样本集提示ACADM的表达水平在乳腺癌组中显著高于正常乳腺 组（P<0.05）,过表达ACADM可提高乳腺癌细胞（MCF-7、T47D）的迁移和侵袭能力且促进了乳腺癌细胞上皮-间质转化过程,而 沉默ACADM后乳腺癌细胞迁移和侵袭能力下降,动物实验进一步验证了ACADM能促进乳腺癌细胞侵袭及迁移能力。结论 ACADM可促进乳腺癌细胞上皮-间质转化过程并提高其迁移、侵袭能力,在乳腺癌中扮演促癌基因的角色。     

ACAT1低甲基化在儿童肾病综合征发病机制中的作用研究

目的 探讨酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(ACAT1)基因在儿童原发性肾病综合征发病机制中的作用.方法 选取2018年6月至2019年12月温州医科大学附属第二医院收治的原发性肾病综合征患儿16例,为肾病组;另选同时期在医院体检的健康儿童16例为对照组.提取两组儿童外周静脉血单个核细胞的DNA和总mRNA,采用亚硫酸氢...     

儿童极长链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症诊疗新进展

极长链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症 （VLCADD）是线粒体脂肪酸β氧化初始阶段酶的缺陷所致脂肪酸代谢障碍疾病。发生在从出生到青春期的任意阶段, 临床表型存在异质性, 其严重程度和时间具有显著特征。常见的确诊方法是血浆酰基肉碱谱和ACADVL基因分子检测,亦可通过酶学检测、脂肪酸氧化流量分析、二代测序（NGS）、体外探针测定、免疫印迹法等辅助诊断。治疗应避免长时间禁食,补充中链三酰甘油 (MCT) 、低长链脂肪酸、高碳水化合物饮食,应用提高残余酶活性药物、补充三羧酸循环中间代谢产物等方式改善代谢异常。因此通过早期积极筛查及诊断,指导临床医生对疾病认识并早期干预治疗,可极大地降低患儿的病死率。     

AMACR在前列腺癌组织中的表达与血脂的相关性研究

日的研究前列腺癌组织中α-甲基酰基辅酶A消旋酶(AMACR)蛋白的表达与前列腺癌患者血脂的相关性及临床诊断价值。方法采用免疫组织化学方法检测38例前列腺癌和30例前列腺增生组织中AMACR蛋白的表达。结果AMACR在前列腺癌和前列腺增生组织中平均积分光密度值(IOD)分别为3．23±0．79和0．75±0．28;AMACR蛋白在前列腺癌与前列腺增生组织的表达差异有统计学意义(P<0．05);在前列腺癌患者中体重指数大于和小于26者,其AMACR的IOD分别为2．56±0．32和3．54±0．83,两者比较差异有统计学意义(P<0．05);AMACR的IOD与患者总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇之间有正相关性(P<0．05)。结论AMACR参与支链脂肪酸的β-氧化,在前列腺癌中过度表达,参与前列腺癌患者血脂代谢,可作为前列腺癌新的特异和敏感的标记物。     

山东省淄博市241297名新生儿中链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症筛查及随访结果分析

目的：分析山东省淄博市中链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症（MCADD）的发病率、表型、基因型及临床预后。方法：选择山东省淄博市2013年11月至2022年1月出生的241 297名新生儿作为研究对象。采用非衍生化串联质谱法检测血游离肉碱及酰基肉碱谱进行新生儿筛查,召回初筛及复筛辛酰基肉碱（C8）不低于0.25μmol/L或合并C8/癸酰基肉碱（C10）不低于1.5的患儿,采用高通量测序进行基因检测并诊断。结果：241 297名新生儿中,检出MCADD患儿6例,男性2例,女性4例,发病率约为1/40 216。患儿均检测到ACADM基因2个突变位点,共检出12个突变8种突变类型,热点突变为c.449＿452del(p.T150Rfs*4)和c.387+1delG,检出1个新发突变为11号外显子c.1076C>T(p.A359V),未发现表型与基因型的相关性。6例MCADD患儿中,1例出生后第4天死亡;5例随访2～60个月,均未特殊饮食治疗,生长发育、智力发育正常,常规生化指标未见异常。结论：淄博市MCADD发病率较国内其他地区高,ACADM基因热点突变为c.449＿452del(p.T150...     

肿瘤标志物α-甲基酰基辅酶A消旋酶在前列腺疾病诊断中的价值

目的观察α-甲基酰基辅酶A消旋酶(P504S)在前列腺病变组织中的表达,以评价其在前列腺疾病中的鉴别诊断价值。方法200例前列腺疾病组织及部分相关转移灶标本,其中前列腺癌(PCa)组织标本77例,前列腺小细胞癌(SCCP)1例,不典型小腺体增生(ASAP)2例,良性前列腺增生(BPH)118例,前列腺上皮内瘤变(HGPIN)2例。应用免疫组织化学EnVision二步法检测P504S在各类病变组织中的表达,此外部分标本还同时检测细胞角蛋白(CK)34βE12及前列腺基底细胞核染色的标记物p63的水平。分析Gleason评分与P504S表达水平的关系、手术方式对P504S表达水平的影响。结果PCa组织标本的P504S阳性率为91.2%(73/80),BPH组织标本的阳性率为0,2例HGPIN组织标本均示P504S 。不同Gleason评分PCa组织标本的P504S阳性率的差异有统计学意义(x~2=35.052,P<0.01),不同手术方式获取的PCa组织标本中P504S阳性率的差异也有统计学意义(x~2=18.882,P<0.05)。BPH组织标本中,绝大多数腺体均具有完整的基底层,34βE12的阳性率达98.3%;PCa组织标本中,70例典型缺乏基底层,10例可见不完整基底层。2例HGPIN组织标本的腺体基底细胞34βE12也呈阳性表达,但相对BPH组织标本强度有所减弱。本研究中仅83例组织标本进行p63标记,所有BPH组织标本(39例)都呈阳性表达;而44例PCa组织标本中,39例呈阴性表达,5例呈阳性表达。结论检测P504S蛋白表达有助于辅助PCa的病理诊断,特别适用于体积较小的前列腺穿刺标本的良、恶性鉴别。P504S与34βE12、p63联合应用则更有帮助,为临床早期发现、早期治疗PCa提供了有力的理论依据。     

核黄素通过激活短链酰基辅酶A脱氢酶改善小鼠病理性心肌肥厚和纤维化

目的 研究核黄素(riboflavin)对主动脉弓缩窄(TAC)手术诱导的小鼠病理性心肌肥厚和纤维化的作用,初步探究其与短链酰基辅酶A脱氢酶(SCAD)的关系。方法 小鼠随机分为4组（n=10）：假手术+生理盐水（NS）灌胃组(sham+NS组)、TAC+生理盐水组(TAC+NS组)、假手术+核黄素组(sham+riboflavin组)、TAC+核黄素组(TAC+riboflavin组),各组小鼠手术前1周至手术后4周连续灌胃5周,核黄素灌胃剂量20mg·kg-1·d-1。手术后第5周检测各组小鼠尾动脉收缩压,超声心动图评价小鼠心脏结构功能,计算心脏体重比、心脏胫骨长比,观察小鼠心脏形态学变化,检测小鼠心肌肥厚标志物mRNA表达水平、心脏胶原表达水平、心脏SCAD表达及其酶活性,检测心肌SCAD的辅酶黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)含量、ATP及游离脂肪酸含量变化。 结果 核黄素能改善TAC手术诱导的小鼠病理性心肌肥厚与纤维化;同时增加心肌FAD含量(P<0.01),提高SCAD蛋白和mRNA的表达水平与SCAD酶活性(P<0.01),减少心肌游离脂肪酸含量(P<0.01),增加心肌ATP含量(P<0.01)。 结论 核黄素对小鼠病理性心肌肥厚和纤维化有改善作用,这种作用可能是通过提高心肌FAD含量、促进心肌SCAD表达、增强心脏脂肪酸β氧化、改善心脏能量代谢实现的。     

利用TCGA和GEPIA2公共数据库分析ACSM3与卵巢癌预后的关系

目的 研究肿瘤基因图谱(TCGA)数据库中酰基辅酶A合成酶中链家族成员3(ACSM3)在357例卵巢癌患者中的表达量及其与患者生存状况的关系。方法 对TCGA数据库中357例卵巢癌患者的ACSM3表达量及其与生存情况的关系进行分析,寻找其共表达基因并进行基因本体(GO)富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析。结果 多因素Cox回归分析进一步表明,ACSM3是卵巢癌患者预后的影响因素,其共表达基因富集分析结果与炎症应答和肿瘤中基因异常转录相关。结论 ACSM3的表达对卵巢癌患者的预后具有重要的意义,高表达预后较好。ACSM3可以成为指导临床医师评估卵巢癌患者预后的重要指标。     

瘦素基因甲基化水平与妊娠期糖尿病的相关性

目的 分析妊娠期糖尿病(GDM)孕妇及糖耐量正常(NGT)孕妇瘦素及其基因启动子区甲基化的动态变化水平,以进一步探索妊娠期糖尿病发病机制.方法 采用放射免疫法检测45例(GDM组20例,NGT组25例)孕妇妊娠晚期血清瘦素水平;逆转录PCR(RT-PCR)及实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测两组孕妇胎盘组织中瘦素mRNA的表达,并进一步应用蛋白印迹法(Western blot)检测瘦素蛋白的表达.利用氧化亚硫酸盐测序法及亚硫酸盐测序法检测两组孕妇瘦素基因启动子区甲基化及羟甲基化水平.结果 GDM组孕妇妊娠晚期血清瘦素水平明显高于NGT组(P<0.05);GDM孕妇胎盘组织瘦素mRNA及瘦素蛋白表达水平高于NGT组;两组孕妇瘦素基因启动子区均发生甲基化及羟甲基化,GDM组甲基化水平高于NGT组(P<0.05);两组孕妇部分位点羟甲基化水平存在差异,但无统计学意义.结论 妊娠期糖尿病孕妇瘦素水平高于糖耐量正常孕妇.瘦素基因启动子区甲基化动态变化过程与妊娠期糖尿病的发病有一定相关性.     

极长链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症筛诊治专家共识

极长链酰基辅酶A脱氢酶（VLCAD）缺乏症是一种长链脂肪酸氧化代谢障碍性疾病,临床表现有明显异质性,新生儿到成年均可发病,以心脏、肝脏、骨骼肌及脑损害为主。其中,心肌病型较为凶险,病死率高;肝病型和肌病型预后相对较好,但具有潜在致死性;反复发作的低血糖、能量代谢障碍、肝功能损害、心肌病或严重心律失常是导致患者死亡的主要原因。通过新生儿筛查可以早期发现绝大多数患者,及早诊治者预后良好。本共识旨在规范VLCAD缺乏症的筛查、诊断及治疗管理,以改善患者预后,减少患者死亡和残障。