三七总皂苷部分逆转黏附诱导的骨髓瘤细胞耐药性

目的：研究三七总皂苷（PNS）对骨髓瘤细胞RPMI8226黏附及黏附诱导耐药的影响．方法：采用MTT法检测PNS和／或阿霉素（Adr）对RPMI8226细胞的毒性作用；荧光染料二醋酸盐琥珀酰亚胺酯（CFSE）标记并流式细胞术检测RPMI8226细胞与纤连蛋白（FN）黏附率．结果：RPMI8226细胞与FN黏附2，12h，其黏附率分别为（55．63±1．56）％，（65．42±2．46）％；经亚细胞毒浓度PNS（50mg／L）预处理后，其黏附率分别降为（33．24±1．29）％，（34．16±1．59）％，处理前后差异有统计学意义（P〈0．05）；FN黏附12h后，瘤细胞对Adr的IC50值为（2．70±0．24）μmol／L，高于BSA对照组（2．03±0．13）μmol／L（P〈0．05），经PNS处理后FN组Adr IC50值降至（1．08±0．09）μmol／L，与BSA对照组（0．82±0．07）μmol／L相比无统计学差异（P〉0．05）．结论：PNS可降低RPMI8226细胞与FN的黏附率，并能部分逆转黏附介导的骨髓瘤耐药．     

紫杉醇脂质体对子宫内膜癌HEC-1A细胞体外杀伤作用的研究

目的探讨注射用紫杉醇脂质体对人子宫内膜癌细胞系的体外杀伤作用。方法以0．01μmol／L、0．1μmol／L、1μmol／L、10μmol／L、100μmol／L浓度梯度的合注射用紫杉醇脂质体培养基作用于人子宫内膜癌细胞系HEC-1A细胞，并设对照（普通培养基），通过MTT、显微镜观察细胞形态、流式细胞分析技术检测该药对细胞生长的影响。结果经上述浓度紫杉醇脂质体作用48h后，细胞存活率下降；镜下观察显示部分细胞皱缩变形，崩解坏死，细胞脱壁悬浮；流式细胞结果显示细胞凋亡率逐渐增加，分别为（2．44±0．98）％、（7．30±2．11）％、（13．64±5．46）％、（15．26±9．73）％、（16．46±11．20）％、（25．61±12．32）％；细胞周期各时相中，S期比例减少。结论紫杉醇脂质体可抑制子宫内膜癌HEC-1A细胞的生长。     

外源性一氧化氮对新生大鼠神经干细胞/前体细胞分化的影响

目的探讨外源性一氧化氮（NO）对培养状态下的新生大鼠神经干细胞／前体细胞（NSCs／NPs）分化的影响。方法采用常规方法分离新生大鼠脑室下带（SVZ）组织，进行NSCs／NPs体外培养。用二乙烯三胺／一氧化氮聚合物（DETA／NO）作为外源性NO供体培养NSCs／NPs。用免疫细胞化学方法检测NSCs／NPs标记巢蛋白（nestin）、神经元标记神经元特异性微管相关蛋13（Tuj-1）和星型胶质细胞标记胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）。同时用Greiss还原法检测培养液中总NO的浓度。结果原代或次代培养的神经球均为nestin阳性；DETA/NO对体外培养的NSCs／NPs作用5d后，40μmol／L、50μmol/L、60μmol／L DETA／NO实验组分别释放出（62．0±6．4）μmol／L、（64．8±15．7）μmol／L、（68．5±11．6）μmol／L的NO，相应实验组分化的神经元数分别为（53．1±4．7）％、（54．1±6．9）％、（63．8±9．5）％，较对照组[（38．8±7．2）％]，显著增加，差异有高度统计学意义（P〈0．01）；50μmol／L、60μmol／L DETA/NO实验组分化的星型胶质细胞数分别为（38．2±6．7）％、（41±10．5）％，较对照组[（32．8±5．5）％]，有所增加，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论外源性NO主要促进体外培养的NSCs／NPs向神经元方向分化。     

骨形态发生蛋白-4对人始基卵泡的作用

【目的】观察骨形态发生蛋白-4（BMP-4）对人卵巢组织体外培养中始基卵泡存活和生长发育的影响。【方法】34例卵巢组织切成2mm×2mm×1mm皮质片，每例标本的皮质片均随机分成3组：研究组（BMP-4组）、对照组和非培养组，培养15d后行组织学检查、雌孕激素测定和凋亡分析。【结果】培养结束后对照组和研究组始基卵泡比例分别为58％±35％和48％±40％，低于非培养组（91％±9％），P〈0．05；窦前卵泡比例分别为52％±40％和42％±35％，高于非培养组（9％±9％），P〈0．05。研究组间质细胞凋亡指数和培养液孕激素浓度分别为（0．16±0．08）μg／L和（3．6±2．0）μg／L，低于对照组，对照组分别为（0．41±0．16）μg／L和（6±4）μg／L（P〈0．05）。【结论】BMP-4可以促进始基卵泡向窦前卵泡转化，降低细胞凋亡率，抑制孕激素分泌，是卵泡生长发育过程中的促进因子。     

吸烟致重金属集聚及DNA损伤的探讨

目的探讨习惯性吸烟对血浆内重金属含量及DNA损伤的影响。方法随机选择湘南学院94名健康大学三年级男生,其中20名不吸烟者（对照组,C组）;74名吸烟者。测定每个大学生血浆内汞、镉、铅及8-羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）的含量。吸烟者按照吸烟数量分为E1组（≤20L／周）和E2组（〉20支／周）。结果C组、E1组、E2组血浆中：（1）汞含量分别为（22±16）nmol／L、（36±18）nmol／L、（58±13）nmoI／L,3组之间差异有统计学意义（P〈0．01）;（2）镉与铅分别为（0．012±0．008）μmol／L与（0．209±0．028）μmol／L、（0．020±0．010）μmol／L与（0．251±0．018）μmoL／L、（O．031±0．013）μg／L与（0．272±0．032）μmol／L,3组之间差异均有统计学意义（P〈0．01）;（3）8-OHdG分别为（204．2±28．5）μg／L、（354．8±36．1）μg／L、（517．1±19．7）μg／L,3组之间差异有统计学意义（P〈0．01）;（4）吸烟者吸烟指数与血浆中镉、铅及8-OHdG的含量均呈正相关（r值分别为0．65、0．52、0．74,P〈0．05）,吸烟指数与血浆中汞含量无相关性（r=0．20,P〉0．05）。结论习惯性吸烟能够导致机体重金属的集聚性中毒,并且伴有机体DNA的损伤。随着吸烟量与吸烟时间的累积,这种有害效应的危险性也将显著增大,     

柔红霉素诱导急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞凋亡的作用因素研究

目的探讨柔红霉素（DNR）致急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞株凋亡的作用因素。方法不同浓度（0、0．05、0．1、0．5、1μg／mL）DNR及N-乙酰半胱氨酸（NAC）预处理组作用于Jurkat细胞株,采用MTT法检测细胞活力,Hoechst／PI双染法观察细胞凋亡,流式细胞术检测细胞活性氧（ROS）浓度及凋亡,RT—PCR法检测bax、survivin、bcl-2和bcl—xl基因的表达。结果DNR可明显抑制Jurkat细胞株的活性,0、0．05、0．1、0．5、1μg／mL的DNR及NAC预处理组分别作用于Jurkat细胞株24h后,ROS水平分别为（7．98±0．55）％、（8．88±0．86）％、（9．46±0．98）％、（17．48±2．98）％、（24．46±2．43）％和（11．59±1．29）％,加入NAC后ROS生成受到抑制（P〈0．01）;细胞凋亡率分别为（11．41±1．44）％、（34．96±3．32）％、（45．58±3．12）％、（84．19±2．65）％、（87．93±1．74）％和（80．47±0．63）％,NAC预处理组与0．5μg／mL DNR组比较,细胞凋亡率变化无统计学意义（P〉0．05）。NAC抑制bax基因mRNA表达,上调survivin、bcl-2和bcl—xl表达（均P〈0．05）。结论DNR能够诱导Jurkat细胞株凋亡;ROS参与了DNR诱导的Jurkat细胞株凋亡;凋亡相关基因bax、bcl-2、bcl-xl及survivin能够与ROS相互作用,调节DNR诱导的Jurkat细胞株凋亡。     

辛基酚影响MCF-7细胞凋亡及bcl_2、caspase3表达

目的观察辛基酚（0P）对乳腺癌MCF-7乳腺癌细胞凋亡的影响。方法以流式细胞分析、DNA断端末端标记（TUNEL）试验、DNA片断率分析、流式细胞仪免疫荧光和荧光定量PCK等方法观察OP对MCF-7细胞凋亡、bcl2、bax、caspase3表达的影响。结果8、16μmol／LOP作用MCF-7细胞，TUNEL细胞阳性率和DNA片断百分率增加，48h时的凋亡率分别为（6．6±1．32），（16，3±3.48）『对照（43±1．18）]；bcl2荧光量分别为（63．5±5．84），（30．3±2．49）[对照（57．2±4．07）]。4μmol／LOP明显上调MCF-7细胞中bcl2 mRNA表达；16μmol／L OP则明显降低细胞中bcl2 mRNA表达，且bax、caspase3 mRNA表达明显增加。结论8、16μmol／L OP能明显诱导MCF-7乳腺癌细胞的凋亡，增加DNA片断百分率，其机制可能是通过下调细胞中bcl2的表达、上调bax、caspase3的表达来实现。     

高血压与高尿酸血症的相关性分析

目的探讨高血压与高尿酸血症之间的相关性。方法比较高血压病人和正常血压组的血尿酸水平,分析高血压与高尿酸血症之间的关系。结果高血压组平均血尿酸水平为（365.2±130.2）μmol／L。其中,男性为（375．6±126.3）μmol／L,女性为（347.5±124.5）μmol／L。健康组平均血尿酸水平为（315.2±102．8）μmol／L。其中,男性为（326.4±108.3）μmol／L,女性为（310.6±102.9）μmol／L。高血压组平均血尿酸水平明显高于健康组（P〈0．01）。结论高血压病与血尿酸水平密切相关。     

CD20单抗对Burkitt淋巴瘤细胞Bcl-2和p38MAPK蛋白表达的影响

目的研究CD20单抗对Burkitt淋巴瘤细胞Bcl-2和p38MAPK蛋白表达的影响,探讨其抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡的作用机制。方法选用CD20（＋）的Raji和Namalwa细胞株,使用不同浓度（12．5、25．0、50．0μmol／L）CD20单抗处理12、24、48和72h后,用MTT法检测细胞增殖抑制率,以选择适当的药物浓度及作用时间;设置实验组（50μmol／LCD20单抗处理48h）及对照组,使用流式细胞术测定Raji和Namalwa细胞株的凋亡率（AnnexinV^＋和PI^-细胞比例）,以明确CD20单抗对其凋亡的影响;使用Western blot法检测Raji和Namalwa细胞株中Bcl-2和p38MAPK蛋白表达的变化。结果不同浓度CD20单抗处理Raji细胞株12、24、48和72h后测定细胞增殖抑制率,以50．0μmol／LCD20单抗处理48h后最高,为（71．91±2．05）％;采用此浓度处理48h后,流式细胞术检测显示,Raji细胞株的细胞凋亡率由对照组的（2．03±0．94）％增加至（31．52±2．48）％（P〈0．05）;Namalwa细胞株的细胞凋亡率由对照组的（1．49±0．87）％增加至（21．84±1．69）％（P〈0．05）。在CD20单抗处理后的Raji细胞株中,Bcl-2蛋白表达由（1．48±0．05）下降为（0．42±0．02）（P〈0．05）;p38MAPK蛋白表达由（1．76±0．08）下降为（0．37±0．05）（P〈0．05）。结论CD20单抗能直接抑制淋巴瘤细胞增殖,通过下调Bcl-2和p38MAPK蛋白的表达,诱导CD20（＋）的naji和Namalwa淋巴瘤细胞株凋亡。     

调控microRNA-99b表达对宫颈癌SiHa细胞增殖和凋亡的作用

【目的】探讨上调microRNA-99b（miR-99b）表达对宫颈癌SiHa细胞增殖和凋亡的作用及可能的机制。【方法】宫颈癌SiHa细胞分正常对照组、阴性对照组和miR-99b调控组。利用siPORT NeoFX Transfection Agent，阴性对照组细胞转染Cy3 dye labeled PremiR Negative Control，miR-99b调控组细胞转染Pre-miR-hsamiR-99b miRNA Precursor。实时定量PCR方法检测miR-99b表达，四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞增殖能力，流式细胞术检测细胞凋亡率，Western blot检测靶基因细胞分裂周期25A（CDC25A）蛋白表达。【结果】实时定量PCR结果显示，miR-99b调控组细胞，miR-99b表达增加107．23倍。正常对照组、阴性对照组和miR-99b调控组细胞增殖率分别为（3．26±0．44）％、（3．65±0．47）％和（2．24±0．45）％，细胞凋亡率分别为（8．12±1．54）％、（8．75±1．67）％和（14．26±1．70）％，细胞CDC25A蛋白表达分别为0．50±0．06、0．59±0．05和0.31±0．05。与正常对照组和阴性对照组比较，miR．99b调控组细胞增殖率、凋亡率和CDC25A蛋白表达差异均有统计学意义（P〈0．05）。【结论】上调miR-99b表达可通过降低靶基因CDC25A表达，抑制细胞增殖，诱导细胞凋亡，miR-99b可能成为宫颈癌治疗的靶基因。     

尿多酸肽(CDA-2)诱导多发性骨髓瘤细胞RPMI8226凋亡的实验研究

[目的]观察尿多酸肽(CDA-2)对多发性骨髓瘤细胞RPMI8226抑制增殖和凋亡作用。[方法]应用MTT法,检测CDA-2对多发性骨髓瘤细胞株RPMI8226增殖的影响。通过Hochest33258染色、流式细胞仪(AnnexinV和PI双染色)检测细胞凋亡。[结果]CDA-2明显抑制RPM18226细胞的增殖。CDA-2作用RPM18226细胞增殖24h的半数抑制浓度(IC50)分别为1.64mg/g。采用Hochest33258染色,荧光显微镜下观察CDA-2以2mg/g及4mg/g终浓度作用于RPM1822624h后细胞形态改变,可见明显的凋亡小体出现。AnnexinV-PI双标记法流式细胞仪分析结果显示,RPMI8226细胞2mg/gCDA-2作用6、12、24h后,早期凋亡细胞百分数分别为5.43%、12.02%、29.07%,明显高于空白对照组4.88%。[结论]CDA-2对MM细胞株RP-MI8226有生长抑制作用,可能是通过诱导其发生凋亡而起作用。     

尿多酸肽（CDA-2）诱导多发性骨髓瘤细胞RPMI8226凋亡的实验研究

[目的]观察尿多酸肽（CDA-2）对多发性骨髓瘤细胞RPMI8226抑制增殖和凋亡作用。[方法]应用MTT法,检测CDA-2对多发性骨髓瘤细胞株RPMI8226增殖的影响。通过Hochest33258染色、流式细胞仪（AnnexinV和PI双染色）检测细胞凋亡。[结果]CDA-2明显抑制RPM18226细胞的增殖。CDA-2作用RPM18226细胞增殖24h的半数抑制浓度（IC50）分别为1.64mg/g。采用Hochest33258染色,荧光显微镜下观察CDA-2以2mg/g及4mg/g终浓度作用于RPM1822624h后细胞形态改变,可见明显的凋亡小体出现。AnnexinV-PI双标记法流式细胞仪分析结果显示,RPMI8226细胞2mg/gCDA-2作用6、12、24h后,早期凋亡细胞百分数分别为5.43%、12.02%、29.07%,明显高于空白对照组4.88%。[结论]CDA-2对MM细胞株RP-MI8226有生长抑制作用,可能是通过诱导其发生凋亡而起作用。     

GPR37在骨髓瘤细胞黏附介导的耐药中的作用及意义

目的：研究G蛋白耦联受体37（orphan G protein-coupled receptor 37,GPR37）在细胞黏附介导的多发性骨髓瘤细胞耐药过程中的表达变化及其生物学作用.方法：采用多发性骨髓瘤细胞株RPMI 8226与纤黏蛋白（fibronectin,FN）或骨髓基质细胞株HS-5共培养构建细胞黏附模型.Western Blot检测GPR37分别在悬浮和黏附状态的RPMI 8226细胞中的蛋白表达水平.钙黄绿素实验检测改变GPR37的表达对RPMI 8226细胞黏附的影响,并采用化疗药物多柔比星处理细胞,CCK-8试剂盒检测上述处理对RPMI 8226细胞活力的影响.结果：Western Blot结果显示GPR37在RPMI 8226细胞黏附模型中低表达.钙黄绿素实验结果显示RPMI 8226细胞过表达GPR37后其黏附能力显著降低.CCK-8实验结果表明GPR37过表达能显著增强RPMI 8226细胞对化疗药物多柔比星的敏感性.结论：GPR37可能通过影响骨髓瘤细胞与基质细胞的黏附能力从而影响其对化疗药物的敏感性.     

冬凌草甲素对多发性骨髓瘤细胞细胞周期和凋亡的影响及其机制研究

目的探讨冬凌草甲素(oridonin,Ori)对人多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞的细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响及其涉及机制。方法利用MTT比色法检测Ori对细胞增殖活性的影响;碘化丙啶(PI)单染流式细胞术检测细胞周期;TUNEL法检测细胞凋亡;Western blot技术检测p65核蛋白水平。结果 Ori能明显抑制RPMI 8226细胞增殖,其抑制作用呈时间、剂量依赖性;能同时引起细胞G2/M细胞周期阻滞、细胞凋亡和p65核蛋白水平下降;吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)抑制核因子κB(NF-κB)活性后进一步促进了Ori所致的细胞G2/M细胞周期阻滞和凋亡。结论 Ori能明显抑制RPMI 8226细胞增殖,引起G2/M细胞周期阻滞,诱导细胞凋亡,该效应与NF-κB活性抑制相关。     

苦参碱对多发性骨髓瘤细胞的体外作用机制研究

目的:阐明苦参碱对多发性骨髓瘤(MM)细胞的作用和内在机理。方法:MTT法检测苦参碱对多发性骨髓瘤细胞株RPMI8226和多发性骨髓瘤原代细胞增殖的影响;根据中效原理分析苦参碱联合亚砷酸对RPMI8226细胞株的联合作用;应用DAPI染色检测细胞凋亡。结果:M1TT比色法检测结果显示,苦参碱对RPMI8226细胞及MM原代细胞均有生长抑制作用,与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。体外联合亚砷酸作用RPMI8226细胞抑制率>50%时联合指数(CI)<1。DAPI荧光染色,荧光显微镜下观察苦参碱以终浓度2.0g/L作用于RPMI8226细胞12h后可见明显的凋亡小体出现。结论:苦参碱对RPMI8226细胞和MM原代细胞均有生长抑制作用,体外联合亚砷酸作用MM细胞株RPMI8226细胞,抑制率>50%时呈协同作用。苦参碱通过诱导细胞凋亡抑制RPMI8226细胞的增殖。     

阻断SDF-1／CXCR4轴对多发性骨髓瘤细胞株耐药性的影响

目的探讨阻断SDF-1／CXCR4轴后多发性骨髓瘤细胞株耐药性的影响及机制。方法将耐药细胞株RPM18226／DOX和RPM18226／LP与骨髓基质细胞共培养,实验组同时加入抗CXCR4抗体12G5,未加入抗体者为对照组,测定培养细胞的上清液中的SDF-1α、IL-6、VEGF浓度。进行细胞-基质粘附试验测定实验组和对照组骨髓瘤细胞与基质细胞的粘附性;MTT比色法测定实验组和对照组对阿霉素或马法兰的敏感性。结果实验组中SDF-1α、IL-6、VEGF浓度均略高于对照组,但差异元统计学意义（P〉0．05）。实验组骨髓瘤细胞对基质细胞粘附率低于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）。药物敏感性检测显示实验组骨髓瘤细胞对阿霉素或马法兰敏感性高于对照组。结论阻断SDF-1／CXCR4轴后可以部分逆转多发性骨髓瘤细胞株对化疗药物的耐药性,其机制与细胞因子无关,可能与下调骨髓瘤细胞与基质细胞的粘附性有关。     

5-氮-2′-脱氧胞苷对RPMI8226细胞增殖、凋亡及SOCS-1基因表达的影响

目的  研究DNA甲基转移酶抑制剂5-杂氮-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对人多发性骨髓瘤细胞株RPMI8226生物学活性以及SOCS-1基因表达的影响。 方法  不同浓度5-Aza-CdR（0.1、0.5、1.0、2.0、5.0μmol/L）对RPMI8226细胞干预后,采用MTT法检测细胞增殖活性;流式细胞术分析细胞凋亡及细胞周期的改变;Real-time PCR法检测各组细胞SOCS-1 mRNA的表达。结果  5-Aza CdR对RPMI8226细胞的生长抑制有明显的时间和剂量依赖性（P<0.05）;流式检测结果显示,0.1、0.5、1.0、2.0、5.0μmol/L 5-Aza-CdR作用于RPMI8226细胞72h后,细胞凋亡率分别为（29.62±2.87）%、（39.98±2.53）%、（49.07±3.51）%、（60.15±4.54）%和（69.88±3.49）%,且呈剂量依赖性（P<0.05）;与对照组相比,5-Aza-CdR处理RPMI8226细胞72h后,细胞阻滞于G0/G1期;Real-time PCR结果显示,SOCS 1基因在RPMI8226细胞中微弱表达,5-Aza-CdR作用后,SOCS-1 mRNA表达水平呈剂量依赖性逐渐升高（P<0.05）。结论  5-Aza-CdR显著抑制多发性骨髓瘤细胞RPMI8226增殖,可能与诱导SOCS-1 基因去甲基化和SOCS-1再表达有关。     

汉黄芩素对多发性骨髓瘤细胞周期及P-Wee1和P-Akt蛋白表达的影响

目的探讨汉黄芩素对多发性骨髓瘤RPMI8226细胞的增殖抑制作用及其可能的机制。方法以不同浓度的汉黄芩素(5～100μg/ml)作用于RPMI8226细胞24h,使用CCK-8法、流式细胞仪检测细胞的增殖活性和细胞周期的变化;运用Western-blot法检测汉黄芩素作用前后细胞内P-Wee1、P-Akt蛋白表达的变化。结果汉黄芩素对RPMI8226细胞具有增殖抑制作用,并有剂量依赖性,IC50为43.71μg/ml;汉黄芩素浓度为50μg/ml时,用药组的G2/M%为(25.4333±2.35433)%,明显高于溶剂对照组的(6.8333±1.52753)%;Western-blot检测结果显示,用药组汉黄芩素浓度≥50μg/ml时,与对照组相比,P-Wee1、P-Akt蛋白表达明显减少。结论汉黄芩素能明显抑制RPMI8226细胞的增殖,可能是通过Akt/Wee1途径使肿瘤细胞发生G2/M期阻滞,从而发挥增殖抑制作用。     

基于PI3K/AKT/mTOR探索硼替佐米对多发性骨髓瘤侧群细胞的作用机制

目的 探讨26S蛋白酶体抑制剂硼替佐米对多发性骨髓瘤细胞系RPMI8226和骨髓瘤侧群(side population,SP)细胞的作用机制及其耐药性。 方法 在RPMI8226和SP细胞增殖以及生长周期和凋亡差异性研究基础上,采用Western blotting方法检测硼替佐米对2种细胞内信号通路PI3K/AKT/mTOR磷酸化水平的影响;通过硼替佐米耐药性研究,开展RPMI8226和SP细胞对硼替佐米耐药机制的探索。 结果 SP细胞48 h相对细胞活力(3.62±0.28)显著高于RPMI8226细胞(2.81±0.24,P=0.028);克隆形成能力结果显示SP细胞显著强于RPMI8226细胞(P<0.05)。流式细胞术检测显示硼替佐米增加了2种细胞S期、降低G₂/M期,对RPMI8226的促凋亡率(51.23±5.35)显著高于SP细胞凋亡率(29.62±2.61,P=0.008)。Western blotting结果显示硼替佐米显著降低RPMI8226和SP细胞AKT、mTOR及4E-RP1磷酸化水平;耐药性结果显示SP细胞耐药相关蛋白P-gp、Caveolin-1(Cav-1)、Fatty acid synthase(FASN)及CYP3A4表达显著高于RPMI8226细胞。 结论 硼替佐米主要通过细胞凋亡和降低PI3K/AKT/mTOR信号蛋白磷酸化水平,发挥对RPMI8226和SP细胞的抑制作用;通过P-gp、Cav-1、FASN以及CYP3A4耐药蛋白发挥对多发性骨髓瘤的耐药性。      

三氧化二砷诱导人骨髓瘤细胞RPMI8226自噬及凋亡关系的研究

目的通过引入自噬及凋亡抑制剂观察三氧化二砷（As2O3）作用于骨髓瘤细胞RPMI 8226引起自噬和凋亡之间的关系。方法①MTT法计算细胞生长抑制率。②流式细胞仪检测RPMI 8226细胞的自噬率及凋亡率的变化。③通过Western Blot方法检测不同实验组Beclin-1及Caspase-3表达的变化。结果①各浓度As2O3对人骨髓瘤细胞RPMI 8226都显示出明显的生长抑制作用（P〈0.05）,且呈时间-剂量依赖性。②与As2O3单独处理组相比,3-MA预处理组,As2O3诱导RPMI 8226细胞凋亡率呈下降趋势,有统计学意义（P〈0.05）;zVAD-fmk与As2O3联合处理组,凋亡率未见明显变化（P〉0.05）。与As2O3单独处理组相比,3-MA预处理组,As2O3诱导RPMI 8226细胞自噬率下降,有统计学意义（P〈0.05）;zVAD-fmk与As2O3联合处理组As2O3诱导RP-MI8226细胞自噬率亦下降,有统计学意义（P〈0.05）。③与As2O3单独加药组比较,3-MA预处理组As2O3诱导RPMI 8226细胞Procaspase-3蛋白表达明显升高,Beclin-1表达下降;zVAD-fmk预处理组亦表现为Procaspase-3蛋白表达明显升高,Beclin-1下降。结论①不同浓度组As2O3作用24、48、72h对RPMI8226细胞的增殖均有明显的抑制作用（P〈0.05）,且该作用成时间-剂量依赖关系。②As2O3可诱导RPMI 8226细胞发生凋亡及自噬,两者的关系表现为互为前提。抑制任何一方都会导致另一方过程受抑。③As2O3诱导RPMI 8226细胞凋亡过程中可能存在Caspase非依赖型细胞凋亡程序。