Nodosin灌注对离体SD大鼠肝脏组织血红素

探讨中草药溪黄草有效成分Nodosin对离体SD大鼠肝脏血红素加氧酶-1（HO-1）表达的影响。采用质量浓度为10 μg/mL的Nodosin溶液灌注离体SD大鼠肝脏,以乳酸钠林格氏液灌注作为对照,用RT-PCR和Western bloting方法观察两组离体肝脏组织HO1的蛋白和mRNA表达的变化。实验结果表明：经Nodosin溶液和乳酸钠林格氏溶液灌注保留1 h和2 h,肝脏组织中HO-1在蛋白和mRNA水平上表达较灌注完毕时均有上调(P<0.01),且实验组较对照组上调作用更加明显(P<0.01)。该结果说明溪黄草有效成分Nodosin具有诱导上调离体肝脏组织HO-1表达,从而对大鼠肝移植后缺血再灌注损伤起到有效的保护作用。     

核黄素和川芎嗪对大鼠氧反常心脏作用的比较

离体大鼠心脏缺氧灌注１５ｍ ｉｎ 后,复氧再灌１５ｍ ｉｎ,可诱发氧反常损伤的疾病模型。结果表明,Ｒ和Ｔ组心肌组织ＳＯＤ活性后者显著高于前者（Ｐ＜ ０．０５）,心肌ＭＤＡ含量则低于前者（Ｐ＜ ０．０５）。此外核黄素和川芎嗪还能降低心律失常发生率,提示核黄素和川芎嗪对氧反常心脏均有明显保护作用。     

高氧保存液对供肝保护作用的实验研究

目的研究高氧保存液对大鼠供肝的保护作用。方法采用大鼠肝脏非循环离体灌注模型，分别以乳酸钠林格氏液和高氧乳酸钠林格氏液对大鼠肝脏低温保存0、1、3、6h，随后进行常温灌注30min，测定灌注流出液氧自由基代谢产物丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）的含量、肝细胞内Ca^2＋浓度；观察肝脏组织形态学变化。结果在同一时段，高氧乳酸钠林格氏液组大鼠肝脏细胞内Ca^2浓度及流出液MDA含量较乳酸钠林格氏组低，而SOD含量较高。光镜、电镜观察两组肝脏组织形态学变化也有一定的差别。结论高氧乳酸钠林格氏液对大鼠供肝保护作用优于乳酸钠林格氏液，即高氧保存液对供肝有更好的保存作用。     

川芎嗪对大鼠脑急性缺血缺氧损伤的保护作用

利用脑片技术、电镜及检测自由基代谢指标，从离体与整体、功能与形态结构结合上，观察了川芎嗪对大鼠不完全性脑缺血的影响。结果表明，川芎嗪可以提高海马脑片的耐缺氧能力，并呈量效关系；能抑制神经突触传递和服细胞过度兴奋，有效地防止缺氧对脑细胞造成的不可逆性损伤；对脑缺血大鼠大脑皮层的超微结构有显著保护作用；能减少大鼠缺血脑组织中血清脂质过氧化物（ＬＰＯ）的生成，增加血清超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）和谷胱甘肽过     

三七总皂甙和维拉帕米对大鼠肝脏低温保存作用的比较研究

目的比较三七总皂甙（PNGS）及维拉帕米（Ver）对大鼠肝脏低温保存的效果和机制。方法采用大鼠离体肝脏再灌注模型（IPRL），用Fura-2法测定低温保存2h后肝细胞内钙离子浓度；经乳酸林格氏液（LR）低温保存24h的肝脏再灌注30man后进行肝脏功能检测、氧自由基代谢产物、能量物质和胆汁流量测定及形态学观察，乳酸林格氏液（LR）和DMEM液中加入不同浓度PNGS和Ver20mg。结果大鼠肝细胞内钙离子浓度、MDA、SOD、AST、ALT、LDH、ATP、TAN、AEC及胆汁流量等项指标各实验组明显好于对照组（P〈0．01）。PNGS对大鼠肝脏的保护作用显示出剂量依赖性，在200～600mg范围内随剂量增加保护作用随之增强（P〈0．01），在800～1000mg范围内虽有增强，但无明显差别（P〉0．05）。维拉帕米20mg对大鼠肝脏的保护作用仅同PNGS200～400mg时的作用相当（P〉0．05）。结论PNGS对大鼠肝脏低温保存的保护作用总体上优于ver20mg，估计与其抑制钙超载和抗氧自由基损伤机制不同有关。     

三磷酸腺苷-氯化镁对兔肺再灌注损伤的保护作用

目的利用家兔左肺灌注模型，探讨三磷酸腺苷一氯化镁ATP-MgCl2）对缺氧再灌注肺线粒体内钙离子浓度和肺组织水分的影响。方法观察ATP-MgCl2对再灌注肺组织线粒体内钙离子浓度和肺组织水分的影响。结果（1）家兔左肺灌注模型均获成功。（2）缺氧再灌注组线粒体内钙离子浓度显著高于正常对照和缺氧组（P〈0．01）；ATP-MgCl2加用再灌注组线粒体内钙离子浓度显著低于缺氧再灌注组（P〈0．01）。（3）缺氧再灌注组肺组织湿干重比值（LW／DR）显著高于正常对照和缺氧组（P〈0．01）；ATP-MgCl2加用再灌注组LW／DR显著低于缺氧再灌注组（P〈0．01）。结论本模型具有操作简便、成功率高的优点，是可行的肺离体研究模型；ATP-MgCl2明显抑制家兔缺氧再灌注肺线粒体内钙沉积和肺组织水肿，提示ATP-MgCl2对肺缺血再灌注损伤具有保护作用。     

川芎嗪对缺血再灌注肾保护作用的研究

研究川芎嗪对缺血再灌注肾脏的保护作用。将缺血性肾衰模型大鼠随机分为对照组和川芎嗪组，通过组织病理学观察和肾功能检测，观察川芎嗪对大鼠缺血再灌注肾的保护作用。结果显示对照组大鼠缺血再灌注损伤肾组织变性和肾功能恢复比川芎嗪组慢。结论：川芎嗪对大鼠缺血再灌注损伤肾组织具有保护作用。     

镁对缺氧大鼠皮质神经元保护作用的研究

目的研究镁对离体培养的缺氧大鼠脑皮质神经元的影响。方法将大鼠皮质神经元分别给予MgSO4和Mg^2＋-ATP处理后连续给予97．5％N2和2．5％CO2混合气体,制成大鼠皮质神经元体外缺氧试验模型,分别观察缺氧后1、2、4h不同时间神经元死亡率、神经细胞内Ca^2＋浓度（Fluo-3标记,激光共聚焦显微镜检测）的动态变化和培养液中LDH、K^＋、NSE浓度的变化。结果MgSO4和Mg^2＋-ATP能减少缺氧状态下的脑皮质神经元钙内流（P〈0．05）,降低培养液中LDH、K^＋、NSE浓度（P〈0．05）,明显降低神经元死亡率（P〈0．05）。结论镁对离体培养的皮质神经元缺氧损伤有肯定的保护作用。     

川芎嗪对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨川芎嗪对离体心脏缺血再灌注损伤的作用。方法取大鼠离体心脏,用Langendorff灌流装置进行恒速逆行灌流,连续记录心功能指标HR、LVP、±dp/dtmax和CF,并测量心肌肌酸肌酶的释放量。结果川芎嗪和维拉帕米能显著改善再灌注所致心功能损伤并减少肌酸激酶的释放。结论川芎嗪和维拉帕米能保护心脏对抗缺血再灌注损伤。     

异氟烷改善离体鼠肝缺氧-复氧后氧供耗平衡

目的:研究异氟烷对离体鼠肝在缺氧-复氧状态下肝流量和肝氧耗的作用.方法:建立离体鼠肝灌流模型.将大鼠肝脏取下,置于离体鼠肝灌流仪中,以经95%O2/5%CO2饱和的改良克-林碳酸氢盐缓冲液恒压灌流(有氧状态用1.2 kPa,缺氧状态用0.2 kPa),另外加入葡萄糖10 mmol/L维持营养,加入1%牛血清白蛋白维持胶体渗透压,控制在生理pH值和温度,实时监测氧分压和肝流量变化.不同浓度异氟烷随混合气带入离体鼠肝灌注的人工肺.结果: (1)异氟烷对基础状态下鼠肝流量无明显影响,但可改善缺氧后复氧状态下鼠肝流量的减少.(2)异氟烷对基础状态下鼠肝氧耗有降低作用,但在复氧状态下却改善了鼠肝氧耗的下降.结论:异氟烷能改善离体鼠肝缺氧-复氧后氧供耗平衡,保护肝脏功能.     

离体大鼠肝灌流方法的改进

用含猪血红细胞的灌流液对离体大鼠肝灌流方法进行了改进，以灌流期间ＬＤＨ，ＧＰＴ，葡萄糖，流量和胆汁分泌量的改变作为肝脏活力的评价指标，比较了用不含猪血红细胞的普通灌流液和含猪血红细胞的灌流液灌流的结果，结果表明用不含猪血红细胞的灌流液灌流，肝脏活性仅能维持２ｈ，而用含猪血红细胞的灌流液灌流，４ｈ内肝脏能保持正常活力。     

高原慢性低氧对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的影响

目的 观察高原低氧对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的影响.方法 Wistar大鼠20只,随机分为低氧组和常氧组,每组10只.前期将低氧组大鼠置于低压氧舱内（5 000米,24h/d,维时20天）,制作慢性低氧模型;后期应用 Langendorff离体心脏灌注系统进行大鼠离体心脏缺血再灌注,记录稳定灌注期及复灌期1、5、10 min及复灌末系统灌注压、心脏LVSP、dp/dt max 和 -dp/dt min及心率等的变化情况,并收集稳定期及复灌期灌流液以备测CK、LDH等心肌酶学变化,最后留取心脏标本行组织病理学观察.结果 低氧组较常氧组：心脏LVSP、dp/dt max 和 -dp/dt min升高明显（P＜0.05）、心率下降、心肌酶学指标升高显著（P＜0.05）.心脏形态学变化明显.结论高原慢性低氧对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤存在影响.     

EXPERIMENTAL STUDY ON PRESERVATION OF RAT FATTY LIVER

Objective. To investigate the effects or cold preservation on rat ratty liver. Methods. We observed the changes of portal perfusion pressure, endothelin-1, enzymes relesase in the effluent and mortality of sinusoid lining cell after 0h, 6h, or 12h preservation respectively and a subsequent 30 min reperfusion in rat fatty liver groups and control groups by using isolated perfused rat liver model.And we compared fatty liver groups with control groups by these indices. Results. There was no obvious difference between mildly fatty liver group and control group after long time (12h)preservation, between moderately fatty liver group and control group after short time( 6h)preservation, between severely ratty liver group and control group without preservation(0h), while preservation reperfusion injury was more severe in moderately fatty liver group than in control group after long time (12h) preservation and in severely ratty liver group than in control group after short time (6h)preservation. Conclusions. The authors suggested that a mildly ratty liver donor could be used in the same way as nonfatty liver and a moderately fatty liver donor could he used depending on the time of preservation and the balance of the emergent needs of recipient and donor organ supply, while severely fatty liver doncr should be discarded without hesitation.     

评价大鼠离体肝灌流模型稳定性的方法

以自建的大鼠原位循环肝灌流模型为研究模型,建立一套实用的模型稳定性评价方法。首先进行一般稳定性评价,包括肉眼观察肝脏形态,监测门脉压、灌流液pH,定时检测灌流液K⁺浓度、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,肝组织病理检查等;要求在整个灌流过程中肝脏色泽均匀,无斑块状改变,以门静脉压始终无骤变,稳定在8~14 mmHg范围内,变化不超过0.5 mmHg/30 min,pH始终处于7.4~7.2,变化不超过0.1/30 min,K⁺浓度无突然升高现象,灌流液中ALT、AST水平随时间无显著性变化,肝组织病理检查不出现除空泡性变以外的病变为标准,确定模型可维持稳定的时间。在满足一般稳定性的基础上,根据不同的研究目的对模型进行功能稳定性评估,要求研究所用的指标能在空白灌流组和阳性药灌流组之间体现显著性差异;本研究以药物肝损伤研究为例,以灌流液ALT、AST、LDH(乳酸脱氢酶)水平为指标,并进行肝组织病理检查,结果两组出现极显著性差异,故判定用所建立的灌流模型进行肝损伤研究可真实反映受试药的肝损伤情况,一般不会出现假阴性和假阳性结果。     

STUDY ON MODIFIED COLD STORAGE METHOD OF RAT LIVERS WITH SELF-MADE HYD SOLUTION

ＩＮＴＲＯＤＵＣＴＩＯＮ　　Ｔｈｅｍｅｔｈｏｄｏｆｃｏｌｄｌｉｖｅｒｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎｉｓａｃｒｕｃｉａｌｌｉｍｉｔ ｉｎｇｆａｃｔｏｒｉｎｔｈｅｄｕｒａｔｉｏｎｏｆｌｉｖｅｒｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎ .Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｅｖｉｄｅｎｃｅｈａｓｓｈｏｗｎｔｈａｔｎｏｎｐａｒｅｎｃｈｙｍａｌｃｅｌｌｓａｒｅｍｏｒｅｖｕｌｎｅｒａｂｌｅｔｏｈｙｐｏｔｈｅｒｍｉｃｓｔｏｒａｇｅｔｈａｎｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ,ｉｎｄｉｃａｔｉｎｇｔｈａｔｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎｏｆｔｈｅｍｉｃｒｏｖａｓｃｕｌａｔｕｒ…     

丹参注射液与凯时注射液对抗离体鼠肾灌注压升高作用的影响

目的：为解析丹参注射液与凯时注射液缓解慢性肾病进程的作用环节,采用离体大鼠肾脏灌流系统,对两种药物对抗离体肾脏灌注压升高作用进行比较。方法：应用离体肾灌流装置,观察丹参注射液与凯时注射液对离体大鼠肾脏灌注压的影响。结果：2 mg·g-1·L-1去甲肾上腺素可升高正常离体鼠肾的灌注压,其效应可持续30 min,丹参和凯时...     

κ-阿片受体介导缺血后处理的心肌保护作用及其受体后机制

目的:探讨κ-阿片受体是否参与缺血后处理的对抗心肌缺血/复灌(I/R)损伤和心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的作用及其机制。方法:采用离体大鼠心脏Langendorff灌流模型,全心停灌30 m in、复灌120 m in复制I/R模型,测定心室力学指标和复灌各时点冠脉流出液中乳酸脱氢酶(LDH)含量。实验结束测定心肌组织form azan含量。酶解分离的心肌细胞采用缺氧60 m in、复氧60m in复制H/R模型,测定心肌细胞存活率。结果:在离体心脏模型上,与I/R组相比,缺血后处理组心肌组织的form azan含量明显增高,复灌期间冠脉流出液中LDH含量明显降低,同时缺血后处理明显改善心室力学指标,缓解冠脉流量的减少;在分离心肌细胞模型上,缺氧后处理明显提高心肌细胞存活率。κ-阿片受体阻断剂nor-b inaltorph im ine(nor-BN I)和线粒体ATP敏感性钾通道(m itoKATP)阻断剂5-hydroxydecanoate(5-HD)在离体大鼠心脏模型和分离心肌细胞模型上均能明显减弱缺血后处理的作用。同时在心肌细胞模型上,与H/R组相比,κ-阿片受体激动剂U 50488H明显提高心肌细胞存活率,其作用可被m itoKATP阻断剂5-HD所阻断。结论:缺血后处理具有抗心肌缺血/复灌损伤的作用,这种保护作用可能与其激活κ-阿片受体和m itoKATP有关。     

供体肝缺氧时间对肝移植大鼠生存率的影响

目的: 研究肝移植围手术期的缺氧损伤对肝移植大鼠生存率的影响.方法: SD大鼠随机分为4组,对照组:不进行低氧处理的原位肝移植组;A组:50只,供肝大鼠先进行10 min的低氧适应后在低氧处置下按传统的Kamada法行供肝切取;B组:40只,低氧处置同A组,但供肝切取按改进的取肝法,即不过度游离肝动脉,于灌肝后离断肝动脉.C组:15只,假手术组.观测各组大鼠手术后24 h和1 w的生存率.结果: 在低氧条件下,采用改进的快速取肝法手术的B组与采用常规的Kamada取肝法的A组大鼠相比,B组大鼠供肝切取时间显著缩短,一周生存率明显提高,但仍低于对照组的一周生存率.结论: 肝移植大鼠一周存活率与供肝的实际热缺血时间呈负相关.肝移植围手术期中各种因素引起的肝脏缺氧是导致供肝实际热缺血损伤的主要原因.     

离体肝灌流方法及其质量控制

采用离体肝灌流方法，在麻醉状态下，使大鼠肝脏形成体外循环。结果：灌流２ｈ后，肝脏外观呈粉红色、质地均匀，无斑块状改变，经肝切片组织学检查，其显微结构基本正常，流出液丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）活性和蛋白质含量无异常改变。提示：此法可维持肝脏正常生理、生化功能至少２ｈ；该模型可用于物质代谢和中毒机理等方面的研究。