肥胖儿童血浆瘦素及可溶性瘦素受体质量浓度的变化

目的观察单纯性肥胖儿童血浆瘦素及可溶性瘦素受体质量浓度的变化,探讨其相互之间及与体重指数(BMI)之间的关系。 方法于2005-06北京儿童医院采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对40例3~6岁的单纯性肥胖儿童及按性别、年龄1∶1配对的40例正常儿童进行了血浆瘦素及可溶性瘦素受体质量浓度的检测。 结果肥胖儿童血浆瘦素质量浓度(2226±230)μg/L较正常儿童(336±023)μg/L明显升高,可溶性瘦素受体质量浓度(10010±2460)μg/L较正常儿童(13231±3017)μg/L则明显降低(P<0001)。相关性分析显示,瘦素与可溶性瘦素受体水平之间呈负相关;BMI与瘦素呈正相关,而与可溶性瘦素受体呈负相关(P<005)。 结论学龄前肥胖儿童已存在明显的瘦素抵抗现象,而可溶性瘦素受体表达减少,可能参与了瘦素抵抗的发生。     

多不饱和脂肪酸对3T3-L1细胞分化过程中脂肪聚积的影响

目的 体外探讨n-6和n-3二类多不饱和脂肪酸(PUFAs)对脂肪细胞分化过程中脂肪聚集的影响及其机制.方法 对313-L1细胞进行体外诱导分化实验,使用n-6 PUFAs和n-3 PUFAs对细胞进行干预.在细胞被诱导分化的第5天,在培养基中分别加入油酸(OA)、花生四烯酸(AA)、二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)(0.125 mmol/L)培养12 h,以牛血清清蛋白作为对照;然后应用油红O染色观察细胞形态学变化.采用甘油磷酸氧化酶-过氧化物酶-4-氨基安替比林和酚法(GPO-PAP)对细胞内和培养基中三酰甘油(TG)水平进行测定;过氧化物酶增长因子活化受体γ(PPARγ)表达的测定应用EIJSA方法.结果 显微镜下观察显示,与对照组比较,在培养基中分别加入AA、EPA和DHA后细胞内脂滴颗粒减少,细胞和培养基中TG水平均有所降低(F=3.96,4.34 Pa＜0.05),但3组间未见显著性差异;而在培养基中加入OA后,细胞内脂滴数量和TG水平无显著性变化.同时,脂肪酸干预后细胞培养基中PPARγ水平在OA、AA、EPA和DHA组均显著高于对照组(F=9.56 P＜0.01);进一步分析显示DHA组PPARγ表达量显著低于OA、AA和EPA组(F=6.87 P＜0.01).结论 n-6与n-3 PUFAs具有同样的抑制3T3-L1细胞脂肪聚积的作用,但DHA对PPARγ表达的影响作用明显小于其他脂肪酸.     

瘦素及其受体在哮喘BALB/c小鼠肺组织中的表达及布地奈德的干预作用

目的 探讨不同严重程度哮喘小鼠及布地奈德干预后肺组织中瘦素及其受体表达的变化规律。方法 将40 只Balb/c 小鼠随机分成对照组、诱喘3 d 组、诱喘7 d 组和布地奈德干预组, 每组10 只。采用卵清蛋白(OVA)致敏后分别激发3 d 和7 d 建立小鼠哮喘模型;布地奈德干预组于激发前1 h 雾化吸入布地奈德混悬液干预;对照组不予任何处理。苏木精- 伊红染色观察各组小鼠气道炎症情况;免疫组化、Western blot 和Real-time PCR 方法检测肺组织中的瘦素及其受体蛋白和mRNA 的表达。结果 哮喘组气道病理学改变较对照组、布地奈德干预组明显, 而哮喘组中, 诱喘7 d 组改变较诱喘3 d 组明显。肺组织中瘦素蛋白及mRNA 表达在诱喘3 d 组较对照组显著增高(P<0.01), 诱喘7 d 组较3 d 组显著增高(P<0.01);瘦素受体蛋白表达在诱喘3 d组较对照组显著降低(P<0.01), 布地奈德干预组较诱喘7 d 组明显增高(P<0.01);瘦素受体mRNA 表达在4组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 哮喘肺组织中瘦素呈高表达, 而瘦素受体呈低表达;布地奈德可以上调瘦素受体的表达, 而对瘦素表达无明显影响。     

卵清蛋白诱导的过敏小鼠模型中多不饱和脂肪酸代谢变化

目的：观察卵清蛋白（OVA）诱导的过敏小鼠模型中多不饱和脂肪酸（PUFA）代谢的变化。方法：以缺乏n-3 PUFA饲料饲养雌鼠的仔鼠（21日龄）24只,随机分为空白组、OVA组和PBS组,各8只。实验第1 d,空白组心脏采血处死。实验第1 和15 d,OVA组腹腔注射含50 μg OVA和1.3 mg氢氧化铝凝胶的PBS 0.2 mL,PBS组腹腔注射等量PBS。实验第29~39 d,OVA组以含50 mg OVA的PBS 0.3 mL隔日灌胃,共6次;PBS组予等量PBS灌胃。实验第39 d末次灌胃后,OVA组和PBS组均心脏采血处死,取空肠组织和脾组织。 OVA过敏小鼠模型成功建立的判断标准：观察灌胃后小鼠腹泻情况,对空肠组织切片进行形态学观察（HE染色）和肥大细胞计数（甲苯胺蓝染色）,血清sIgE水平检测（ELISA 法）,脾组织中IL-4和IFN-γ检测（ELISA法）。提取各组小鼠血清中的脂肪酸,采用液相色谱法检测α 亚麻酸（ALA）、二十碳五烯酸（EPA）、二十二碳六烯酸（DHA）、花生四烯酸（AA）和亚油酸（LA）水平。结果：①成功建立OVA诱导过敏小鼠模型：与PBS组比较,OVA组在灌胃后发生急性腹泻;小肠绒毛有大量炎症细胞浸润,潘氏细胞脱颗粒,固有层中肥大细胞聚集脱颗粒,肥大细胞数目增加（P＜0.05）;血清OVA-sIgE 水平、脾细胞培养上清中IL-4和IL-4/IFN-γ升高（P＜0.05）。②PBS组血清DHA、EPA和LA水平较空白组降低,AA水平升高,差异均有统计学意义,OVA组较PBS组血清DHA水平降低。结论：OVA过敏小鼠出现以DHA降低为主的脂肪酸代谢紊乱。     

瘦素对Hep G2细胞瘦素受体mRNA表达的影响(英文)

目的　瘦素抵抗被认为是单纯性肥胖儿童的主要发病机制。瘦素受体水平及其下游信号通路可能与瘦素抵抗有关。本实验研究瘦素对瘦素受体基因表达的影响 ,探讨瘦素抵抗的发生机制。方法　以HepG2细胞株为实验模型 ,利用细胞培养、DNA序列测定及半定量的RT PCR等方法 ,检测不同浓度 (0 ,10 -9,10 -8,10 -7,10 -6M )的瘦素对HepG2细胞瘦素短型受体 (OB Ra :OB R2 19.1,OB R2 19.3)及长型受体 (OB Rb)mRNA的表达的影响。结果　HepG2细胞含有OB Ra及OB Rb。当HepG2细胞与不同浓度的瘦素培养 2 4h后 ,10 -7-10 -6M浓度瘦素明显抑制了OB Rb的mRNA表达 ,并在 10 -6M浓度时作用最强 (0 .4 3± 0 .14vs 1.0 1± 0 .2 2 )。10 -8～ 10 -6M浓度的瘦素亦明显抑制了OB R2 19.1及OB R2 19.3的mRNA表达 ,并在 10 -7和 10 -6M浓度时分别达到最大抑制 ,为不含瘦素对照组的 4 4 %和 4 9%。结论　瘦素对HepG2细胞瘦素受体表达有下调作用 ,这可能是体内瘦素抵抗的机制之一。     

重组瘦素干预对营养性肥胖大鼠脑组织瘦素受体表达的影响

目的观察重组瘦素(leptin)对营养性肥胖大鼠脑组织瘦素特异性受体(OB-R和OB-Rb)mRNA表达的影响,探讨OB-R和OB-Rb表达水平的变化及与肥胖发生的关系,以期更加深入地研究肥胖症发生的中枢信号转导机制。方法雄性大鼠54只随机分成2组,分别喂以普通饲料和高营养饲料共7周;模型制备后再将正常组和肥胖组分别分成3组:正常对照组、正常leptin干预组、正常生理盐水干预组和肥胖对照组、肥胖leptin干预组、肥胖生理盐水干预组,每组各9只。参照Noble法及大鼠脑冠状面定位图谱,给大鼠行右侧脑室插管。恢复7d后,每日10Am在大鼠清醒状态下从导管注入重组leptin5μL(1μg/μL)或等量的生理盐水,连续5d。大鼠处死前,经升主动脉灌注4%多聚甲醛固定,制作石蜡切片、制备地高辛标记的RNA探针,应用原位杂交技术及DIG-AP-NBT-BCIP免疫学检测观察OB-R和OB-RbmRNA的表达水平。结果肥胖leptin干预组大鼠(A=0.336±0.060,t=5.45P<0.01)和正常各组脑组织中大鼠(A分别为0.312±0.072、0.347±0.077和0.341±0.078)OB-RbmRNA的表达水平均较肥胖对照组(A=0.164±0.051,t=4.91P<0.01)、肥胖生理盐水组(A=0.172±0.057)明显增高,而各组间OB-RmRNA的表达未见显著性差异(F=0.334P=0.89)。结论重组leptin干预可增加脑组织中OB-RbmRNA的表达,OB-Rb表达水平的变化可能参与肥胖发生的中枢信号转导机制。     

ω-3多不饱和脂肪酸对脓毒症大鼠淋巴细胞凋亡率的影响

目的探讨ω-3多不饱和脂肪酸对脓毒症大鼠胸腺和脾脏淋巴细胞凋亡的影响。方法将80只7~8周龄雌性Sprague-Dawley大鼠随机分成模型组、传统脂肪乳剂治疗组(每日0.1 g/kg)、ω-3PUFAs低剂量治疗组(每日0.1 g/kg)、ω-3PUFAs中剂量治疗组(每日0.2 g/kg)和ω-3PUFAs高剂量治疗组(每日0.3 g/kg)。采用盲肠结扎穿孔法建立脓毒症大鼠模型,造模后各治疗组分别给予脂肪乳剂和不同剂量ω-3PUFAs葡萄糖稀释液尾静脉注射给药,模型组予等量葡萄糖注射液尾静脉注射。按处死时间将各组大鼠随机分为24 h和72 h两个亚组,每组8只大鼠。采用苏木精-伊红染色观察各组大鼠胸腺和脾脏的病理改变;采用TUNEL法检测各组大鼠脾脏和胸腺淋巴细胞凋亡指数。结果不同剂量ω-3PUFAs组大鼠胸腺小叶结构完整,皮髓质结构清晰,模型组和传统脂肪乳剂治疗组皮髓质界限不清,淋巴细胞明显减少;ω-3PUFAs组脾脏红髓和白髓结构尚能保持,可见脾小结存在,而模型组和传统脂肪乳剂治疗组红髓和白髓结构紊乱,脾小结明显缩小或消失。不同剂量ω-3PUFAs组24 h和72 h胸腺和脾脏淋巴细胞凋亡率均较模型组、传统脂肪乳剂治疗组显著降低(P0.01),ω-3PUFAs高剂量治疗组24 h和72 h脾脏淋巴细胞凋亡率均较ω-3PUFAs低剂量治疗组显著降低(P0.05)。结论ω-3多不饱和脂肪酸有减轻脓毒症大鼠胸腺和脾脏淋巴细胞凋亡的作用,并且可能与剂量相关。     

肥胖儿童运动减肥治疗前后的瘦素抵抗血脂及炎症状态分析

目的：研究显示C-反应蛋白（CRP）、瘦素(Lp)、可溶性瘦素受体(sLR) 及多种血脂成分均参与了肥胖的发生发展。本研究旨在探讨运动减肥治疗前后肥胖儿童瘦素抵抗、血脂及炎症状态的改变,以期明确运动对肥胖儿童内分泌环境的影响。方法：对51例12岁肥胖儿童进行为期2月的运动减肥治疗,观察血清高敏C反应蛋白（hs-CRP）、Lp、sLR、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平变化。40例健康体检儿童作为对照组。结果：肥胖儿童组血清Lp、TG、TC、LDL-C和hs-CRP水平及体重指数（BMI）均显著高于对照组（均P<0.01）,sLR水平低于对照组（P<0.05）。运动减肥治疗后肥胖儿童组血清hs-CRP、Lp、TC、TG和LDL-C水平及BMI与治疗前比较显著下降（P<0.05）。相关性分析显示肥胖儿童血清Lp水平与血脂及hs-CRP呈显著正相关（P<0.05）;Lp、hs-CRP与sLR呈显著负相关（P<0.05）;hs-CRP与血脂呈显著正相关（P<0.01）。结论：肥胖儿童已存在瘦素抵抗及血脂和炎症状态的改变,运动减肥治疗可不同程度地改善这些改变。［中国当代儿科杂志,2010,12（1）：40-42］     

利培酮治疗精神分裂症致肥胖患儿血浆瘦素水平的变化

目的探讨瘦素在经利培酮治疗致肥胖儿童精神分裂症患者血浆中的变化。方法 60例精神分裂症患儿经利培酮单药治疗10周,分别于治疗前、治疗10周进行血糖、血脂、胰岛素、血浆瘦素检测与身高、体质量测量,并对瘦素与上述其他指标进行相关性分析。同时选择在本院行体检的健康儿童60例作为健康对照组。结果治疗前精神分裂症患儿体质量指数(BMI)、血浆瘦素与健康对照组比较差异均无统计学意义(Pa>0.05)。治疗后BMI、血糖、胰岛素、血浆瘦素、胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、极低密度脂蛋白胆固醇均较治疗前显著升高(Pa<0.05)。瘦素与BMI、空腹血糖、胰岛素、胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇、极低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇水平均呈显著正相关。结论利培酮治疗精神分裂症患儿致肥胖与瘦素抵抗密切相关,瘦素在利培酮致肥胖中起重要作用。     

瘦素抵抗及其受体基因变异对单纯性肥胖患儿脂代谢的影响

目的探讨瘦素受体(LEPR)基因外显子突变与瘦素抵抗对单纯性肥胖患儿脂代谢的影响。方法选取6～14岁单纯性肥胖患儿102例(肥胖组)及非肥胖儿童83例(对照组)为研究对象,空腹12 h后抽取2组儿童外周静脉血,常规抽提基因DNA,用PCR限制性片断长度多态性及聚丙烯酰胺凝胶电泳法对2组儿童LEPR基因的第20外显子基因变异频率进行分析,采用放射性免疫分析法测定其血清瘦素水平及血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平及2组儿童身高和体质量。结果共检出3种LEPR基因第20外显子的基因型:AA型、AG型、GG型;与对照组儿童比较,单纯性肥胖患儿LEPR基因第3 057位核苷酸G→A突变率增高。AA基因型的肥胖患儿血清TC、TG、LDL-C水平均明显高于GG型者,而HDL-C水平低于后者。与对照组比较,肥胖组患儿存在血脂代谢紊乱,血清瘦素水平增高,79%存在瘦素抵抗。瘦素抵抗组患儿血清TC、TG、LDL-C显著高于瘦素敏感组,HDL-C低于瘦素敏感组。基因型为AA的瘦素抵抗者与基因型为GG的瘦素抵抗者比较,血清TG、LDL-C水平升高,HDL-C水平降低(Pa<0.05)。结论单纯性肥胖患儿存在瘦素抵抗及LEPR基因第20外显子基因突变,二者可影响儿童脂质代谢,且有一定的协同作用。临床表现为LEPR基因第20外显子AA基因型的瘦素抵抗个体更易发生血脂代谢紊乱。     

Effect of Glucagon on the Plasma Level of Free Fatty Acids

The effect of intravenously administrated glucagon on the plasma level of free fatty acids (FFA) and on blood sugar was studied in 24 girls, 11–19 years old, of which 10 had diabetes, 8 had obesity and 6 were controls. Fasting levels of FFA were significantly higher in the diabetes and obesity groups than in the control group. After glucagon there was a decrease of FFA which was more evident in the control and obesity groups than in the diabetes group. The blood sugar response was moderate and identical among the obese and the controls, but more marked and more prolonged among the diabetics. The mechanism behind the effect of glucagon on plasma FFA is discussed.     

贫困地区6～14岁儿童血清瘦素水平的变化

目的研究贫困地区儿童在营养状况相对较差时血清瘦素水平及与生长发育指标的关系。方法将研究对象分为≤9岁男童组、≤9岁女童组、>9岁男童组和>9岁女童组4组。调查其年龄、体质量、身高并计算体质量指数(BMI)、体脂百分量(BF%)及体脂含量(FM),使用双抗体夹心ELISA法检测瘦素浓度,比较各组间瘦素浓度的差异,同时分析各组瘦素与各指标间的相关性。结果男童:瘦素浓度>9岁组较≤9岁组高,但无显著性差异(P>0.05);女童:瘦素浓度9岁组较≤9岁组明显高(P<0.01);≤9岁组女童瘦素浓度较男童高,但无显著性差异(P>0.05);>9岁女童组瘦素浓度较男童明显高,且有显著性差异(P<0.01)。Pearson相关分析表明各组瘦素浓度均与BF%和BMI呈明显正相关(P均<0.01),≤9岁组男童瘦素与身高呈明显负相关(P<0.05);≤9岁组女童与FM呈显著性相关(P<0.05);>9岁组男童瘦素与其他指标无明显相关(P>0.05);≤9岁组女童瘦素与所有其他指标呈显著性相关(P均<0.01)。结论在营养状况相对较差的农村,6～14岁儿童中瘦素在女童青春期发育中起重要作用;不论性别和年龄,瘦素均与BF%和BMI密切相关。     

Effects of Formula Protein Level and Ratio on Infant Growth, Plasma Amino Acids and Serum Trace Elements II. Follow-up Formula

Abstract. Infants, that had been formula-fed from birth, were fed follow-up formula with 1.5, 2.2 or 2.9 g protein/dl together with 25 g of cereal/day as supplemental food, or formula only (15 g/dl). Formulas were started at 4 months of age and daily intake, anthropometric measurements and plasma samples taken at 5, 6 and 7 months. Protein intake was 2.0, 3.0 and 3.7 g/kg/d, respectively. Growth data were similar for all groups, as were hemoglobin and serum protein values. BUN values for the group fed only formula with 1.5 g protein/dl were lower than for the group fed the same formula with cereals and the other groups. Plasma amino acids were not affected by the addition of the small amount of cereals to the formula with 1.5 g protein/dl, but significantly higher levels of valine, leucine and histidine were found at 7 months for infants fed the two higher protein levels. The highest protein level also appeared to have a negative effect on plasma zinc levels. These results suggest that a protein level of 1.5 g/dl in follow-up formula (2.0 g/kg/d) is adequate during 4 to 7 months of age and that higher protein levels may be excessive.     

胰岛素样生长因子-1在病毒性心肌炎小鼠中的变化及对心肌的保护作用

目的 探讨病毒性心肌炎（VMC）小鼠血清胰岛素样生长因子-1（IGF-1）水平的变化及外源性IGF-1对凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达的影响。方法 Balb／c雄性小鼠随机分为3组：正常对照组、柯萨奇B3病毒（CVB3）感染组（感染组）和病毒感染加IGF-1治疗组。分别在实验d7、d14处死动物，留取血清、心肌标本。放射免疫法检测血清IGF-1水平，免疫组织化学法检测心肌组织Bcl-2和Bax蛋白表达。结果 感染组血清IGF-1水平较对照组明显降低，Bcl-2表达减少、Bax表达增加（P〈0．01）；治疗组较感染组Bcl-2表达增加、Bax表达减少（P〈0．01）。结论 IGF-1对VM小鼠的心肌细胞有保护作用。     

Effects of Formula Protein Level and Ratio on Infant Growth, Plasma Amino Acids and Serum Trace Elements I. Cow's Milk Formula

Abstract. The optimum level and ratios of protein to be used in cow's milk formula has recently been under discussion. Healthy term infants were fed from birth exclusively human milk or a formula that varied in protein level or whey:casein ratio: (A) 1.4 g/dl; 55:45, (B) 1.5 g/dl; 55:45, (C) 1.3 g/dl; 55:45, (D) 1.4 g/dl; 60:40, (E) 1.4 g/dl; 20:80. Infants were followed for 12 weeks and blood samples were taken at 2, 4, 8 and 12 weeks. Anthropometric indices did not show any significant differences among groups. Plasma amino acid and BUN levels of the C group were closest to the breast-fed group, while the formula with the highest protein level (B) resulted in high values for some amino acids. When comparing the formulas with 1.4 g protein/dl, the high casein group had the lowest plasma tryptophan levels. Taurine was added to all formulas at a level similar to that of breast milk; plasma taurine levels were similar for all groups. All formulas contained 0.7 mg iron and 0.7 mg zinc/dl; no differences were found among the groups in hematological indices or serum trace elements. These data show that feeding a formula with 1.3 g protein/dl and 55:45 whey: casein ratio from birth will result in growth and metabolic indices similar to those of breast-fed infants, although some plasma amino acid levels are not identical, 1990.