大鼠脊髓损伤后GDNFmRNA表达变化及意义

目的　探讨 GDNFm RNA在大鼠脊髓损伤后表达变化及其意义。方法　改良 Allen’s脊髓撞击 (10 g× 7.5 cm)致伤大鼠 T1 段脊髓 ,以 β- Actin为内参照物 ,应用半定量 RT- PCR方法 ,观察大鼠脊髓损伤前及损伤后不同时间 GDNFm RNA表达变化。结果　 GDNFm RNA在正常成年大鼠脊髓微量表达 ,脊髓损伤后 2 4h表达增加 5倍 ,72 h增加 2 0倍 ,7d增加 4倍 ,10 d仍高于正常水平。结论　脊髓损伤后早期 GDNFm RNA表达增加 ,是神经元自我保护作用的一种表现 ;损伤神经元修复需要大量 GDNF,应用 GDNF治疗脊髓损伤时应早期用药     

大鼠脊髓损伤后一氧化氮合酶基因表达的变化

目的　探讨大鼠脊髓损伤后3种类型一氧化氮合酶（NOS）mRNA表达的变化规律。方法　成年SD大鼠36只,随机分为种类6组,每组6只大鼠。建立大鼠脊髓压迫伤模型,以逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法测定伤段脊髓组织神经型（nNOS）、诱导型（iNOS）及内皮型（eNOS）一氧化氮合酶的mRNA表达情况。结果　脊髓压迫伤后nNOSmRNA及NOSRNA表达增强,伤后6h达到高峰0.633±0.012、1.236±0.207;iNOSmRNA表达亦增高,但在伤后24h才达到高峰1.043±0.049。结论　脊髓损伤后NOSmRNA的表达增强,但不同类型的NOSmRNA变化规律不同,增强或抑制不同NOSmRNA的表达可能减轻脊髓继发性损伤。     

大鼠脊髓损伤后坐骨神经GDNFmRNA表达变化及意义

目的：探讨大鼠脊髓损伤后GDNFmRNA在坐骨神经的表达变化及其意义。方法：Allen's方法致大鼠T13段脊髓不完全损伤后，以β-Actin为内参照物，应用半定量RT-PCR方法，观察大鼠坐骨神经在脊髓损伤前、后不同时间GDFNmRNA表达变化。结果：脊髓损伤前GDNFmRNA在大鼠坐骨神经仅有微量表达，脊髓损伤后24h表达增加4倍，72h增加15倍，7d增加3倍，10d仍高于正常水平。结论：脊髓损伤后坐骨神经高表达GDNFmRNA，是神经元通过“胞体--轴突--靶器官”途径自我保护的一种反应形式，GDNF治疗脊髓损伤时应早期用药以获得最佳效果。     

中药脊髓康对脊髓损伤大鼠Nogo-NgR基因表达的影响

目的 :观察中药脊髓康对急性大鼠脊髓损伤后Nogo-A,Ng R基因表达的影响,探讨其对急性脊髓损伤的治疗保护作用及机制。方法:180只雌性SD大鼠,随机分为假手术组、模型组、强的松组及脊髓康高、中、低剂量组,每组30只。假手术组:切除T10节段椎板,不损伤脊髓;其余组采用改良Allen法建立脊髓损伤模型。强的松组:术后至处死前每日灌胃强的松0.06 g/kg,首次在术后30 min给药。脊髓康高、中、低剂量组:在同一时间分别给予脊髓康,每日50、25、12.5 g/kg。术后3、7、14 d分批处死动物,取损伤节段脊髓9例,分别利用Western Blot及Real-time PCR检测脊髓组织中Nogo-A、Ng R蛋白及m RNA表达水平。结果:假手术组在各时间点Nogo-A及Ng R的表达维持在基础水平。与模型组比较,各时间点假手术组、强的松组及脊髓康中剂量组Nogo-A、Ng R蛋白表达差异均有统计学意义,脊髓康高、低剂量组差异无统计学意义。术后3 d,各治疗组Nogo-A、Ng R m RNA水平均低于模型组;术后7 d,模型组Nogo-A、Ng R m RNA水平升至最高,14 d时有所下降,但仍高于其他治疗组,其中强的松、脊髓康中剂量组效果最显著,两者之间差异无统计学意义。结论:在Allen急性大鼠脊髓损伤后,脊髓康能调节Nogo-A及Ng R基因表达,激活Nogo-Ng R信号通路,促进脊髓损伤后神经细胞再生。     

川芎嗪对大鼠脊髓损伤后bcl-2、bax基因表达的影响

目的 探讨川芎嗪对脊髓损伤后脊髓组织bcl-2、bax基因表达的影响。方法 120只SD 大鼠随机分成两组:生理盐水(SAL)组、川芎嗪(TMP)组;采用Allen WD法以10g×2．5cm致伤力损 伤T8脊髓,TMP组术后即刻给予川芎嗪[200mg／kg]腹腔注射,SAL组腹腔注射等量生理盐水。采用 RT-PCR和免疫组织化学染色(SABC方法)分别检测SCI后基因bcl-2、bax的mRNA水平和蛋白表 达变化。结果 ①bcl-2mRNA和蛋白在脊髓损伤后2h、6h、12h、24h、48h均有表达,随时间的推移 逐渐升高,24h达到高峰,后逐渐下降;而TMP组bcl-2mRNA和蛋白各时间点的表达均明显升高,与 SAL组相比,各时相点均有非常显著性差异(P<0．01)。②SAL组baxmRNA在SCI后2h、6h、12h、24h、 48h均有表达,随时间的推移逐渐升高,24h达到高峰,后逐渐下降;而TMP组baxmRNA各时间点的 表达均明显降低,与SAL组相比,伤后6h有显著性意义(P<0．05),而其余各时相点均有非常显著性 差异(P<0．01)。结论 TMP可以促进脊髓损伤后bcl-2基因表达和蛋白产物的增加,抑制bax基因 的表达和蛋白产物的增加,这可能是TMP对脊髓损伤具有保护作用的分子机制之一。     

大鼠脊髓损伤后坐骨神经GDNFmRNA表达变化及意义

目的 探讨大鼠脊髓损伤后坐骨神经表达GDNFmRNA的变化及其意义。方法 Allen’s方法致伤大鼠T13段脊髓,造成不完全性脊髓损伤,截取坐骨神经,以β-Actin(β-肌动蛋白)为内参照物,应用半定量RT-PCR方法,观察大鼠坐骨神经在脊髓损伤前、后不同时间GDNFmRNA表达变化。结果 脊髓损伤前GDNFmRNA在大鼠坐骨神经仅有微量表达,脊髓损伤后24小时表达增加4倍,72小时增加15倍,7天增加3倍,10天仍高于正常水平。结论 脊髓损伤后坐骨神经高表达GDNF,是神经元通过“胞体—轴突—靶器官”途径自我保护的一种反应形式,GDNF治疗脊髓损伤时应早期用药。     

大鼠脊髓损伤后坐骨神经GDNFmRNA表达变化及意义

目的探讨大鼠脊髓损伤后坐骨神经表达GDNFmRNA的变化及其意义.方法 Allen's方法致伤大鼠T13段脊髓,造成不完全性脊髓损伤,截取坐骨神经,以β-Actin(β-肌动蛋白)为内参照物,应用半定量RT-PCR方法,观察大鼠坐骨神经在脊髓损伤前、后不同时间GDNFmRNA表达变化.结果脊髓损伤前GDNFmRNA在大鼠坐骨神经仅有微量表达,脊髓损伤后24小时表达增加4倍,72小时增加15倍,7天增加3倍,10天仍高于正常水平.结论脊髓损伤后坐骨神经高表达GDNF,是神经元通过"胞体-轴突-靶器官"途径自我保护的一种反应形式,GDNF治疗脊髓损伤时应早期用药.     

大鼠脊髓损伤后诱导型一氧化氮合酶基因表达变化的实验研究

目的探讨大鼠脊髓损伤后诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达的变化规律.方法SD大鼠48只,随机分为8组,采用Allen's脊髓损伤打击模型,以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定伤段脊髓组织iNOS mRNA表达情况.结果iNOS mRNA在脊髓损伤前即有表达,损伤后早期无明显变化,伤后72h开始升高,1周时达到高峰.结论脊髓继发性损害的持续时间可能大于传统观念,针对继发性损害所作的治疗应持续至脊髓损伤后较长的一段时间.     

大鼠脊髓损伤后诱导型—氧化氮合酶基因表达变化的实验研究

目的：探讨大鼠脊髓损伤后诱导型-氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达的变化规律。方法：SD大鼠48只，随机分为8组，采用Allen’s脊髓损伤打击模型，以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定伤段脊髓组织iNOS mRNA表达情况。结果：iNOS mRNA在脊髓损伤前即有表达，损伤后早期无明显变化，伤后72h开始升高，l周时达到高峰。结论：脊髓继发性损害的持续时间可能大于传统观念，针对继发性损害所作的治疗应持续至脊髓损伤后较长的一段时间。     

大鼠脊髓损伤后诱导型-氧化氮合酶基因表达变化的实验研究

目的 :探讨大鼠脊髓损伤后诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)mRNA表达的变化规律。方法 :SD大鼠 48只 ,随机分为 8组 ,采用Allen’s脊髓损伤打击模型 ,以逆转录 -聚合酶链反应 (RT -PCR)法测定伤段脊髓组织iNOSmRNA表达情况。结果 :iNOSmRNA在脊髓损伤前即有表达 ,损伤后早期无明显变化 ,伤后 72h开始升高 ,1周时达到高峰。结论 :脊髓继发性损害的持续时间可能大于传统观念 ,针对继发性损害所作的治疗应持续至脊髓损伤后较长的一段时间     

Detection of gene expression pattern in the early stage after spinal cord injury by gene chip

Ｓｐｉｎａｌｃｏｒｄｉｎｊｕｒｙ (ＳＣＩ )ｉｓａｍｕｌｔｉｆａｃｔｏｒｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｐｒｏｃｅｓｓ ,ｗｈｉｃｈｄｅｔｅｒｍｉｎｅｓｔｈｅｃｏｍｐｌｅｘｉｔｙｉｎｉｔｓｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｎｄｔｈｅｄｉｆｆｉｃｕｌｔｙｉｎｔｈｅｒａｐｙ ,ｓｏｔｈｉｓｉｓｗｈｙｗｅｃａｎｎｏｔｅｘｐｅｃｔｓａｔｉｓｆａｃｔｏｒｙｒｅｓｕｌｔｉｆｏｎｌｙａｆｅｗｆａｃｔｏｒｓａｒｅｃｏｎｓｉｄｅｒｅｄ .Ｇｅｎｅｃｈｉｐ(ＤＮＡｍｉｃｒｏａｒｒａｙ)ｉｓａｎｅｗｌｙｄｅｖｅｌｏｐｅｄｔｅｃｈｎｉｑｕｅｃｈａｒ…     

大鼠胚胎脊髓移植对损伤脊髓GAP-43 mRNA表达的影响

目的观察大鼠胚胎脊髓移植对损伤脊髓 GAP－ 43 mRNA表达和大鼠后肢功能恢复的影响。方法成年 Wistar大鼠 66只,随机被分为脊髓半切洞损伤应用胚胎脊髓移植组 (脊髓移植组, 30只 )、单纯脊髓半切洞损伤明胶海绵填充组 (单纯损伤组, 30只 )、正常对照组 (6只 )。术后第 1、 3、 7、 14、 28 d,对大鼠进行 Tarlov评分和斜板试验检查后肢功能。应用原位杂交的方法观察 GAP－ 43 mRNA的表达,记录阳性细胞数,采用计算机图像分析技术,进行定量分析。结果脊髓损伤后第 1 d,在脊髓移植组和单纯损伤组的损伤脊髓灰质中都可见到 GAP－ 43 mRNA的表达。于损伤后迅速增加,第 7 d时达到高峰。脊髓移植组 GAP－ 43 mRNA蛋白表达为 39.24± 6.83,约是单纯损伤组 (21.48± 7.83)的 2倍 (P< 0.05)。胚胎脊髓移植后可使损伤的脊髓中 GAP－ 43 mRNA持续高表达至术后第 28 d,而单纯损伤组仅持续到术后第 14 d。增加的 GAP－ 43 mRNA阳性细胞数与神经功能的改善平行。结论胚胎脊髓移植后可使损伤大鼠脊髓高表达 GAP－ 43 mRNA,并促进大鼠功能的恢复。     

大鼠牵张性脊髓损伤后细胞凋亡及相关基因表达的实验研究

目的观察大鼠牵张性脊髓损伤后细胞凋亡现象,检测脊髓损伤后凋亡相关基因的表达。方法大鼠脊髓T13～L2经牵张损伤,皮层体感诱发电位(CSEP)监测P1N1波幅下降至术前波幅70%后,分别于术后30min、6h、1、4、7、14、21d处死大鼠,取材(n=4)。应用流式细胞仪、原位末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导dUTP标记(TUNEL)技术观察脊髓细胞凋亡情况,用免疫组化检测p53、bax和bcl2的表达。结果流式细胞仪及TUNEL法检测显示,损伤组术后6h凋亡细胞开始增多,术后7d细胞凋亡率达高峰,随后开始回落,持续21d,与空白对照组及椎板切除组比较,差异有显著性意义(P<005,001)。TUNEL法染色显示,白质中出现大量胶质细胞凋亡。免疫组化染色显示损伤组术后6h开始,p53、bax和bcl2阳性表达开始增多,p53阳性细胞数术后4d达高峰,bax和bcl2术后7d达高峰,损伤组各时相点的阳性表达与空白对照组与椎板切除组比较差异有显著性意义(P<005,001)。结论牵张性脊髓损伤后存在细胞凋亡现象,从形态上看包括神经元和胶质细胞凋亡,细胞凋亡是牵张性脊髓损伤继发损害中细胞死亡的一种重要形式,也是继发损伤期的重要病理变化。凋亡相关基因p53、bax大量表达,可能在脊髓细胞凋亡过程中起重要作用。     

大鼠脊髓中血红素氧合酶基因的表达及其意义

目的观察正常大鼠脊髓中血红素氧和酶(H0)的表达和分布。方法雌性SD大鼠10只，按体重配成5对。每对随机分为正常组和诱导组，后者予以42℃热水浸泡躯体20min。取其中3对大鼠胸腰段脊髓，提取RNA后进行北方印迹分析；2对做免疫组织化学检测。结果HO-1探针检测到1．8kb mRNA，诱导组的丰度数倍于正常组。HO-2探针检测到两组标本都表达两种同源mRNA(1．3kb和1．9kb)，表达量相仿。免疫组织化学显示HO-1阳性细胞主要分布于前角神经元，诱导鼠中间带也可出现；HO-2阳性细胞散布于整个灰质中。结论HO参与脊髓信号传导和应激反应。     

Gene expression of inducible nitric oxide synthase in injured spinal cord tissue

ＮＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＯｒｔｈｏｐｅｄｉｃｓ ,ＺｈｕｊｉａｎｇＨｏｓｐｉｔａｌ,ＴｈｅＦｉｒｓｔＭｉｌｉｔａｒｙＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ,Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ 5 10 2 82 ,Ｃｈｉｎａ (ＬｉｕＣＬ ,ＪｉｎＡＭ ,ＺｈｏｕＣＳａｎｄＣｈｅｎＢ)ＴｈｉｓｗｏｒｋｗａｓｓｕｐｐｏｒｔｅｄｂｙｔｈｅＮａｔｉｏｎａｌＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＦｏｕｎｄａｔｉｏｎｏｆＣｈｉｎａ (Ｎｏ :3980 0 16 6 )ｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ (ＮＯ) ,ａｈｉｇｈｌｙ ａｃｔｉｖａｔｅｄｍｏｌｅｃｕｌｅ ,ｉｓｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎ…     

神经毒素在脊髓损伤中的作用

目的 探讨神经毒素兴奋性氨基酸（ＥＡＡ）和神经肽在脊髓损伤的作用。方法 应用高效液相色谱法检测脊髓损伤后伤段组织中谷氨酸（Ｇｌｕ）天门冬氨酸（Ａｓｐ）两种ＥＡＡ的含量变化；应用放射免疫分析技术测定脊髓损伤段组织中神经肽之一强腓肽ＤｙｎＡ１－１３含量的变化；观察了蛛网膜下腔注射Ｇｌｕ，ＤｙａｎＡ１－１３兴奋性氨基酸受体拮抗剂３－（２－羧基哌嗪）丙基－１－磷酸（ＣＰＰ），ＤｙｎＡ１－１３抗血清（Ａｎ－