反相高效液相色谱法测定大鼠血浆中9-硝基喜树碱浓度

目的建立一种简单、快速测定9-硝基喜树碱血药浓度的反相高效液相色谱法。方法血浆样品加喜树碱作内标,用正己烷-二氯甲烷-异丙醇(100∶50∶5)提取,氮气吹干,残渣用流动相溶解进样。色谱条件:分析柱为C18反相柱,流动相为3%甲酸溶液-乙腈(体积比65∶35),流速为2.0 mL.m in-1,在紫外检测波长370 nm处进行检测。结果9-硝基喜树碱及内标在5min内完全分离,检测限为25 ng.mL-1,在25~1600 ng.mL-1内线性关系良好,r=0.999 6,低、中、高浓度的回收率、日间及日内精密度均符合方法学要求。结论本法简便、快速、稳定、重现性好,适用于9-硝基喜树碱临床前药动学研究。     

高效液相色谱法测定大鼠组织及血浆中9-硝基喜树碱含量高效液相色谱法测定大鼠组织及血浆中9-硝基喜树碱含量

目的 建立高效液相色谱法测定大鼠血浆及组织样品中9-硝基喜树碱,并研究其在大鼠体内的分布特点。方法 血浆及组织样品经液-液萃取后,分别以乙腈-水-甲酸(35∶65∶2)或乙腈-水-甲酸(30∶70∶2)为流动相,使用Hypersil BDS C₁₈色谱柱进行分离,检测波长为UV 370 nm。结果该法测定9-硝基喜树碱在血浆中线性范围为25～1 600 μg·L^-1。药物iv后在大鼠体内广泛分布,肺中浓度最高,并在肺和肝中有蓄积现象。ig给药后,药物在胃中浓度最高,肠组织次之,大多数组织中药物浓度较低。结论该法操作简便、快速,适用于9-硝基喜树碱临床前药代动力学研究。     

高效液相色谱法测定人血浆中9-硝基喜树碱的含量

目的:建立高效液相色谱(HPLC)法检测人血浆中9-硝基喜树碱的浓度。方法:采用KromasilC18色谱分析柱,以甲醇-磷酸盐缓冲液(48∶52,pH2.5)作为流动相,流速为1.0mL·min-1,柱温30℃,检测波长370nm,喜树碱为内标,血浆样品用C18固相萃取小柱处理,采用加权最小二乘法计算回归方程。结果:9-硝基喜树碱的线性范围为5~1000μg·L-1,r=0.9999,最低检测限为5μg·L-1。该方法的提取回收率为83.5%~114.4%,批间和批内RSD<15%。结论:该方法简便、准确、重现性好且灵敏度高,适用于9-硝基喜树碱临床人体药动学研究。     

高效液相色谱法测定9-硝基喜树碱及其有关物质的含量

目的：建立高效液相色谱法测定9-硝基喜树碱(9-NC)及有关物质的含量。方法：采用Eclipse~(?) XDB-C18色谱柱(5μm,4．6 mm×150 mm)；以乙腈-水(28．5：71．5,V/V)为流动相；UV检测波长368 nm；流速1．0 mL·min~(-1)。结果：9-NC在0．005～0．3g·L~(-1)范围内具有良好的线性关系(r=0．99998),最低检测限0．17 ng；样品溶液在3h内稳定,日内精密度和日间精密度良好(RSD＜1．5%)；回收率为100．4%；3批样品的标示百分含量(%)分别为99．94,99．31,98．88,有关物质的百分含量分别为0．24,0．23,0．28。结论：本方法简便、灵敏,结果可靠准确,可用于9-NC及其有关物质的含量测定。     

HPLC法测定人血浆中9-硝基喜树碱内酯型浓度和总浓度

目的:建立以高效液相色谱法测定人血浆中9-硝基喜树碱内酯型浓度和总浓度的方法。方法:血浆样品采用—20℃甲醇快速沉淀蛋白后进行测定,其中色谱柱为shim-packCLS-ODS,流动相为甲醇∶1%三乙胺(冰醋酸调pH6.5)=55∶45,流速为1.0mL·min-1,检测波长370nm,进样量为50μL,柱温为40℃。测定总浓度的样品采用冰醋酸酸化上清液。并以该法测定了不同时间点离体人血浆中9-硝基喜树碱内酯型、羧酸盐型浓度和总浓度的变化。结果:9-硝基喜树碱血药浓度在0.10～10.0μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9991),定量下限为0.10μg·mL-1,平均方法回收率、酸化回收率各为101.02%、101.46%。结论:本法操作简便、快速,适用于9-硝基喜树碱内酯结构稳定性的研究。     

高效液相色谱梯度洗脱法测定克拉霉素的含量

目的建立高效液相色谱梯度洗脱法测定克拉霉素的含量。方法采用kromasil-C18(4.6mm×150mm,5μm)柱,乙腈-0.476%磷酸二氢钾溶液(pH值4.4)为流动相梯度洗脱,检测波长为205nm,流速1.1mL/min。结果克拉霉素在0.49～2.48mg/mL内呈良好的线性相关性,相关系数r为0.9999,检测限为0.8ng/mL,定量限为2.4ng/mL。结论该方法准确可靠,灵敏度高,可用于克拉霉素的含量测定及质量控制。     

静脉注射9-硝基喜树碱脂质体后原形药物经大鼠胆汁的排泄

目的:考察静脉注射9-硝基喜树碱脂质体后原形药物经大鼠胆汁的排泄。方法:建立了利用HPLC法测定大鼠胆汁中9-硝基喜树碱浓度的方法;测定了9-硝基喜树碱在大鼠空白胆汁中的内酯型浓度、总浓度和内酯型比例的变化;测定了静脉注射3mg.kg-19-硝基喜树碱溶液和脂质体后大鼠胆汁中原形药物的排泄情况。结果:9-硝基喜树碱内酯型结构在胆汁中不稳定,内酯型浓度和比例迅速下降但总浓度保持恒定。静脉注射9-硝基喜树碱溶液和脂质体后12h胆汁中原形药物的累积排泄量分别为给药剂量的7.9%和8.1%。结论:脂质体包封对于9-硝基喜树碱静脉注射后的胆汁排泄没有显著影响     

9-硝基喜树碱胶囊溶出过程的研究

目的建立9-硝基喜树碱(9-NC)胶囊的溶出度测定方法。方法考察了不同溶出介质、转速和温度对溶出试验的影响;选择HPLC法测定9-NC的含量,同时对该测定方法的准确度、精密度、重复性和线性范围进行了评价,测定了同一规格3批样品的溶出曲线。结果 0.05～8μg.mL-19-NC与峰面积的线性关系良好(r=0.9999),平均回收率为99.32%,RSD=0.93%;3批样品在45 min内溶出百分率均大于90%,释放行为符合威布尔分布模型与多项式模型中的四次多项式模型。结论将9-NC释放行为作为控制的指标,能保证其胶囊的质量。     

9-硝基喜树碱片剂溶出度方法的考察

目的:建立9-硝基喜树碱片剂的溶出度方法,并评价其质量。方法:采用RP-HPLC测定含量。分别对不同溶出介质、转速等条件进行比较,选择合适的溶出条件,考察溶出方法的均一性、稳定性。结果:本测定方法在0.2～6μg·mL~(-1)浓度范围内,特异性、线性良好;回收率、精密度均符合2000年版《中国药典》规定。建立了以0.05％吐温-80-0.1mol·L~(-1)HCl 500mL为溶出介质,温度(37.0±0.5)℃,桨法,转速75r·min~(-1)作为9-硝基喜树碱片剂的溶出方法,该方法均一性、稳定性良好。结论:本试验所建立的9-硝基喜树碱片剂溶出度方法可行,能够客观地反映片剂的溶出情况,从而控制片剂质量。     

9-硝基喜树碱的稳定性初步考察

目的:研究影响因素试验(光线、温度、湿度)、加速试验、长期试验中9-硝基喜树碱(9-NC)的外观性状、有关物质(12-NC)及含量的变化,初步考察其稳定性。方法:利用高效液相色谱法,通过与对照品比较,观察变化的情况。色谱柱:Eclipse~XDB-C_(18)(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相:乙腈-水(28.5:71.5);流速:1.0 mL·min~(-1);检测波长:368 nm;柱温:25℃。结果:9-NC 仅对光不稳定,其外观性状、有关物质及含量在高温、高湿度试验,加速试验和长期试验中无明显变化。结论:9-NC 应当避光保存,保证其相对稳定。     

梯度洗脱反相高效液相色谱法测定拉呋替丁纯度及含量

目的:建立梯度洗脱反相高效液相色谱法测定拉呋替丁纯度及含量,并对其未知杂质进行研究。方法:采用梯度洗脱方法,色谱柱为大连依利特科学仪器有限公司Hypersil ODS C18柱(250 mm ×4．6 mm,5μm)。流动相A:0．01 mol．L-1磷酸二氢钾溶液,0．1％三乙胺,用磷酸调节pH 5．0;流动相B:乙腈。梯度洗脱条件:0-12 min,A-B(80:20);12-20min,A-B(40 :60);20-25min,A-B(80:20)。检测波长:220 nm;流速:1．0 mL·min-1。结果:拉呋替丁在0．01-0．50 mg·mL-1范围内线性良好,回归方程为Y=57．72X-21．31(n=5),r=0．9999。结论:建立的液相色谱法可完全分离拉呋替丁、各中间体、副产物等,该方法准确、灵敏、简便,专属性好。经液相色谱、质谱等鉴定确证,本品主要未知杂质为二氢拉呋替丁。     

HPLC法测定大鼠尿液中9-硝基喜树碱的浓度

目的:建立 HPLC 法测定大鼠尿液中9-硝基喜树碱(9-NC)浓度。方法:尿液样品中加入内标喜树碱后,用甲醇-乙腈(1:1)沉淀后离心取上清液进样。采用 Diamonsil C~(18)柱(250 mm×4.6 mm,5 μm)分离,流动相为乙-1%三乙胺(冰醋酸调 pH 至6.5)(45:55),流速1.0 mL·min~(-1),检测波长370 nm。测定静脉注射3 mg·kg~(-1)9-NC 溶液和其脂质体溶液后大鼠尿液中原形药物的排泄情况。结果:线性范围72～18000 ng·mL~(-1),定量限为72 ng·mL~(-1)。静脉注射9-NC 溶液和脂质体溶液后24 h 尿液中原形药物的累积排泄量分别为给药剂量的5.9%和7.6%。结论:本方法简便实用,定量准确,并成功应用于静脉注射9-NC 脂质体后原形药物肾排泄的研究。     

高效液相梯度洗脱法测定阿托伐他汀钙片有关物质

目的建立测定阿托伐他汀钙片有关物质的高效液相色谱法。方法采用梯度洗脱方法,色谱柱为Apollo C18 （4.6 mm×250 mm,5 μm）,以流动相A醋酸铵缓冲液［称取醋酸铵1.54 g,置1 000 mL水中,用冰醋酸调节pH至（4.50±0.05）］ 乙腈（70：30）,流动相B乙腈进行梯度洗脱,流速：1.1 mL&#8226;min－1,检测波长：244 nm,柱温：40 ℃,进样量：20 μL。对照杂质对照品对照法和不加校正因子的主成分自身对照法检查。结果阿托伐他汀主峰与各杂质峰均能良好分离。杂质A、B、C、D、H和I分别在0.190 4～9.519 8,0.203 2～10.160 0,0.191 2～9.560 0,0.208 0～10.400 0,0.198 8～9.940 0,0.205 2～10.260 0 μg&#8226;mL－1范围内具有良好的线性关系。平均回收率分别为100.24%,99.73%,94.47%,92.17%,103.76%,101.23%。结论该方法快速,结果准确可靠,可用于阿托伐他汀钙片的有关物质检查。     

不同内酯型比例9-硝基喜树碱对胆汁排泄的影响

目的考察9-硝基喜树碱(9-nitrocamptothecin,9-NC)不同形式(内酯型或羧酸盐型)给药对胆汁排泄的影响。方法建立HPLC测定胆汁中9-NC浓度的方法,比较不同内酯型比例的9-NC溶液以4 mg·kg?1剂量静脉注射后大鼠胆汁中原形药物的排泄量。结果静脉注射100%,75%,50%,25%,0%内酯型比例的9-NC在8 h内的胆汁累积排泄百分数分别为(7.03±2.23)%,(13.36±0.83)%,(22.68±4.83)%,(28.01±6.71)%,(32.65±2.82)%。结论 9-NC羧酸盐型更易经胆汁途径排泄。     

高效液相色谱梯度洗脱法测定注射用美洛西林钠-舒巴坦钠中有关物质

目的建立HPLC梯度洗脱法测定注射用美洛西林钠-舒巴坦钠有关物质的方法。方法使用ZORBAX SB-C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5.0μm）,以磷酸盐缓冲液（5.44 g L-1磷酸二氢钾溶液,用磷酸调节pH至3.8,即得）和乙腈为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL min-1,柱温为31℃,检测波长为215 nm。结果样品中有关物质完全洗出,美洛西林和舒巴坦主峰与有关物质峰均达到基线分离,舒巴坦杂质A、B分离度符合要求;舒巴坦杂质A、舒巴坦杂质B、舒巴坦和美洛西林与峰面积线性关系良好,相关系数（r）均〉0.997 2;舒巴坦杂质A相对舒巴坦校正因子为0.6,舒巴坦杂质B相对舒巴坦校正因子为0.5;舒巴坦杂质A、B检测限分别为3.11 ng和5.98 ng,定量限分别为10.36 ng和17.93 ng,舒巴坦检测限和定量限分别为8.46 ng和31.01 ng;美洛西林的检测限和定量限分别为12.20和40.25 ng;舒巴坦杂质A、B平均回收率（n=9）分别为100.9%和102.0%。结论该方法对注射用美洛西林钠舒巴坦钠有关物质的测定灵敏、准确、专属性强,适用于产品质量控制。     

反相高效液相色谱梯度洗脱法测定注射用氨苄西林钠舒巴坦钠有关物质

目的 建立用反相高效液相色谱梯度洗脱法测定注射用氨苄西林钠舒巴坦钠有关物质.方法 色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱(UltimateTM AQ-C18,4.6mm×250mm,5μm),检测波长为254nm,采用A相[12%乙酸溶液:0.2mol/L磷酸二氢钾溶液:乙腈:水(0.5:50:50:900)]-B相[(12%乙酸溶液:0.2mol/L磷酸二氢钾溶液:乙腈:水(0.5:50:400:550)]为流动相进行梯度洗脱(A相起始比例为90%,保持15min,25min内下降至0,保持该比例10min),流速为1.0ml/min,柱温为25℃,进样量为20μl.结果 舒巴坦的碱性降解产物(舒巴坦青霉胺)、舒巴坦、氨苄西林的碱性降解产物、氨苄西林、头孢拉定和氨苄西林二聚物等相关物质在本色谱条件下均能实现较好分离,杂质相对检出率较高.结论 本法基线稳定,重现性好,准确度高,可同时测定氨苄西林钠舒巴坦钠的有关物质.     

高效液相梯度洗脱法测定氨苄西林丙磺舒分散片中的有关物质

目的:用高效液相色谱法测定氨苄西林丙磺舒分散片中的有关物质.方法:色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱;检测波长232 nm;采用A相(含20%磷酸盐缓冲液的乙腈溶液)-B相磷酸盐缓冲液[水-1 mol·L-1磷酸二氢钾溶液-1 mol·L-1醋酸溶液(909:10:1)]为流动相进行梯度洗脱(A相的起始比例为10%,30 min内上升至90%);流速为1 mL·min-1;柱温为30℃;进样量为10μL.结果:本法实现了在较短时间内将原料中引入的有关物质和强力破坏条件下产生的降解产物与主成分之间的基线分离.结论:本色谱条件适合氨苄西林丙磺舒分散片中的有关物质的测定.     

高效液相梯度洗脱法测定依巴斯汀片的有关物质

目的用高效液相色谱法测定依巴斯汀片的有关物质。方法采用氰基色谱柱Discovery cyano(150mm×4.6mm,5μm);检测波长为210nm;采用A相(磷酸盐缓冲液,pH5.0)-B相(乙腈650mL与A相350mL混合)为流动相进行梯度洗脱;流速为0.9mL.min-1;柱温为40℃;进样量为10μL,程序进样。结果本方法实现了将制剂中引入的有关物质与主成分之间的基线分离。结论本色谱条件适合依巴斯汀片有关物质的测定。     

9-硝基喜树碱犬体内药代动力学研究

目的:研究9硝基喜树碱在犬体内药动学规律。方法:犬静注或灌服3个剂量9硝基喜树碱,血浆9硝基喜树碱浓度用高效液相色谱法及液相质谱联用法检测,浓度时间数据用3P97药代动力学软件进行分析,计算药动学参数,分析AUC、Cmax及ke与剂量的线性关系。结果:犬静注0.5、1、2mg·kg-19硝基喜树碱,t12分别为2.2±2.2、1.8±1.7和0.8±0.6h;AUC0-t分别为105±71、272±81和396±93ng·h·ml-1;犬灌胃1、2、4mg·kg-19硝基喜树碱,Cmax分别为9.3±8.2、42.2±35.7和63.6±5.9ng·ml-1,Tmax分别为0.3±0.1、0.2±0.1、0.4±0.1h,t12分别为1.9±1.3、1.0±0.6和2.8±1.5h,AUC0-t分别为8.9±7.2、16.3±12.3和59.5±25.5ng·h·ml-1;各剂量组t12及ke与剂量无关(P>0.05);口服生物利用度<6%。结论:静脉及灌胃给药后,9硝基喜树碱在犬体内的动力学过程符合二室模型,在本实验所用的剂量范围内为线性动力学过程。9硝基喜树碱灌胃给药后吸收迅速,口服生物利用度低。