右美托咪定对大鼠肾缺血/再灌注损伤保护作用的研究

目的探讨右美托咪定对大鼠肾缺血/再灌注损伤的保护作用。方法选择SPF级雄性SD大鼠40只,随机分为4组,每组10只,分别为对照组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)、右美托咪定预处理组(Pre/Dex组)及右美托咪定后处理组(Post/Dex组)。S组行右肾切除;I/R组行右肾切除,左肾缺血45 min,再灌注60 min,造肾缺血再灌注模型;Pre/Dex组于大鼠股静脉穿刺置管后泵注1μg/kg右美托咪定;Post/Dex组于左肾再灌注后静脉泵注1μg/kg右美托咪定,10 min后改为0.5μg/kg,泵注30 min停止。于再灌注后6 h留取全血标本,分离血清,测定肌酐和尿素氮浓度;ELISA法检测血清IL-1β和TNF-α含量;同时,取肾组织,制作病理切片,HE染色观察各组病理组织学变化。结果肾脏病理组织学观察,S组肾脏未见明显变化,I/R组肾脏损伤严重,炎症明显,肾小管扩张,有肾小球肾炎表现;炎症因子及血生化检测结果显示,与S组相比,I/R组、Pre/Dex组和Post/Dex组血清中肌酐、尿素氮、IL-1β和TNF-α含量均显著升高(P<0.05),Pre/Dex组和Post/Dex组明显低于I/R组(P<0.05),但Pre/Dex组和Post/Dex组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论右美托咪定可减轻肾缺血再灌注中的炎性反应,改善肾功能,具有一定的肾保护作用。     

右美托咪定预处理对大鼠肢体缺血再灌注肺损伤时血红素加氧酶-1的影响

目的探讨右美托咪定预处理对大鼠肢体缺血再灌注诱发肺损伤时血红素加氧酶-1的影响。方法健康SD大鼠30只,体重300³50 g,随机分为3组,每组10只:假手术组(Sham组);肢体缺血再灌注组(IR组),右美托咪定组(Dex组)。Dex组于缺血前10 min经腹腔注射右美托咪定25μg/kg体重,IR组、Sham组输注等容量的生理盐水。再灌注末,观察肺组织病理变化,测定肺组织湿/干质量比(W/D),行血气分析,测定血红素加氧酶-1(HO-1)的含量。结果与Sham组比较,IR组和Dex组PaO2、PaCO2降低,W/D、HO-1含量升高(P<0.05),且出现病理损伤;与IR组比较,Dex组肺损伤明显减轻,PaO2、PaCO2升高,W/D降低,HO-1含量升高(P<0.05)。结论右美托咪定预处理能增加肢体缺血再灌注诱发肺损伤大鼠肺组织中HO-1的活性,上调HO-1蛋白的表达,减轻肺缺血再灌注损伤。     

右美托咪啶与远隔缺血后处理联用对脑缺血老龄大鼠认知功能的影响

目的:探讨远隔缺血后处理与右美托咪啶联用对老龄大鼠脑缺血再灌注损伤时TNF-a、ICAM-1的表达及术后认知功能的影响。方法:选择健康SD老龄大鼠60只(月龄为18~20月),体质量为280~320 g,将其随机分为5组(n=12),即假手术组(S组)、脑缺血再灌注组(I/R组)、远隔缺血后处理组(R组)、右美托咪啶组(D组)、远隔缺血后处理联合右美托咪啶组(R+D组);采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型(MCAO);D组大鼠在缺血即刻静脉注射右美托咪啶3μg/kg,随后以3μg/(kg·h)速率输注120 min;R组大鼠夹闭右下肢股动脉阻断血流5 min,恢复5min,重复3次;R+D组大鼠在给予右美托咪啶同时夹闭右下肢股动脉阻断血流5 min,恢复5 min,重复3次;S组和I/R组、R组再灌注恢复前给予等容量0.9%氯化钠注射液;再灌注24,48和144 h,每组随机取2只大鼠处死,取大脑组织,采用放射免疫法(RIA)测定TNF-α含量和免疫组织化学染色检测ICAM-1的表达;其余大鼠行Morris水迷宫实验,测定其认知功能。结果:与I/R组比较,第1~5天R组、D组、R+D组大鼠逃避潜伏期明显缩短(P<0.05);与D组和R组比较,第2~5天R+D组大鼠逃避潜伏期缩短(P<0.05),穿越平台次数增多;与I/R组大鼠比较,R组、D组和R+D组大鼠各时点脑组织TNF-α和ICAM-1的表达水平下调;与R组和D组比较,R+D组各时点脑组织TNF-α和ICAM-1的表达水平下调更明显。结论:远隔缺血后处理与右美托咪啶联用可抑制脑损伤后细胞因子TNF-α和ICAM-1的表达,从而改善老龄大鼠术后认知功能。     

右美托咪啶预处理对肥厚心肌缺血再灌注损伤的影响及机制

目的探讨右美托咪啶预处理对肥厚心肌缺血再灌注损伤的影响及机制。方法选取实验培养的100只大鼠,其中20只作为正常心肌对照组(正常对照组),不做任何处理,其余制备模型后,将离体心脏分为四组,即缺血再灌注为对照组(20例)、Dex组(20例)、Dex/wortmannin组(20例)、Dex/L-NAME组(20例),分析右美托咪啶预处理对肥厚心肌缺血再灌注损伤的影响。结果 LDH、CK-MB、cTNⅠ、NO、NOS、MMP-2、IL-1β、心肌梗死面积各项指标在五组间差异具有统计学意义(P<0.05),其中Dex组、Dex/wortmannin组、Dex/L-NAME组的LDH、CK-MB、cTNⅠ、MMP-2、IL-1β及心肌梗死面积均低于对照组、正常对照组相应值,并且以上指标Dex/wortmannin组和Dex/L-NAME组低于Dex组相应值(P<0.05)。结论右美托咪啶可有效减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤,改善心功能,发挥心肌保护作用。     

硫喷妥钠对心肌缺血-再灌注损伤大鼠心肌Toll样受体4和核因子-κB表达的影响

目的探讨硫喷妥钠对心肌缺血-再灌注损伤的大鼠心肌组织Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)信号通路的影响。方法 20只健康SD大鼠制备大鼠(I/R)动物模型随机分为假手术组(sham组)、缺血-再灌注组(I/R组)、缺血-再灌注+硫喷妥钠组(I/R+T组)、缺血-再灌注+硫喷妥钠组+TLR-4激活剂组(I/R+T+Neoseptin 3组),qRT-PCR、Western blot和ELISA实验分别检测4组大鼠心肌组织中TLR-4、NF-κB在mRNA和蛋白水平的表达及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素1β(IL-1β)水平。结果与sham组比较,I/R组大鼠心肌组织中TLR-4、NF-κB在mRNA和蛋白水平的表达均显著上调,差异有统计学意义(P<0.05)。经I/R处理的I/R组大鼠心肌组织TNF-α和IL-1β水平显著高于sham组,差异有统计学意义(P<0.05)。I/R+T组大鼠心肌组织中TLR-4、NF-κB在mRNA和蛋白水平的表达显著低于I/R组,差异有统计学意义(P<0.05)。经硫喷妥钠麻醉后,I/R模型大鼠心肌组织TNF-...     

PI3K-Akt-HIF-α信号通路在右美托咪定减轻大鼠肝缺血/再灌注致肺损伤中的作用

目的:通过研究右美托咪定对大鼠肝缺血/再灌注致急性肺损伤中的作用及其可能作用机制.方法:建立大鼠肝缺血/再灌注肺损伤模型,以随机数字表法分为假手术组、肝缺血/再灌注组(I/R组)、I/R+右美托咪定组(D组)和I/R+右美托咪定组+wortmannin(DW组),通过ELISA和Western blot检测细胞炎症因子及PI3K-Akt-HIF-α信号传导通路蛋白的表达.结果:I/R组中MDA和MPO含量、 细胞炎症因子表达及p-Akt和HIF-α蛋白含量较假手术组均明显升高;D组中上述肺损伤指标较I/R组均显著下调;与D组相比,DW组中MDA和MPO含量、细胞炎症因子表达及p-Akt和HIF-α蛋白含量均上调.     

壳寡糖预处理对大鼠肠缺血再灌注损伤回肠NF-κB表达的影响

目的:研究壳寡糖预处理对大鼠肠缺血再灌注损伤(I/R)回肠核转录因子κB(NF-κB)表达的影响。方法:某院于2015年2月~2015年7月间将实验室饲养的40只健康雄性SD大鼠随机分为I/R组、壳寡糖预处理组两组,每组各20只。I/R组术前60min生理盐水灌胃,并通过手术建立肠I/R模型;壳寡糖预处理组在肠I/R模型建立前5d按1500mg/kg给予壳寡糖灌胃预处理,连续5d,并于建模前30min再灌胃1次,建立I/R模型。灌注处死大鼠后通过病理组织切片观察和免疫组化分析,观察两组肠黏膜损伤程度和NF-κB检测表达。结果:壳寡糖预处理肠黏膜损伤Chiu(2.64±0.11)分、NF-κB蛋白表达(0.17±0.01)、NF-κB mRNA(0.57±0.05)较I/R组(4.18±0.14)分、(0.23±0.03)、(0.70±0.05)均较低,相较差异显著(P0.05)。结论:壳寡糖能较好的抑制NF-κB表达,对减轻回肠缺血再灌注黏膜损伤效果显著。     

右美托咪啶对肾脏缺血再灌注损伤大鼠肾组织血红素氧合酶-1表达的影响

目的评价右美托咪啶对肾脏缺血再灌注损伤大鼠肾组织血红素氧合酶-1表达的影响。方法健康Wistar大鼠36只,雌雄不限,体重300~350g,随机分为3组:假手术组(S组)、肾脏缺血再灌注组(IR组)和右美托咪啶组(D组),各12只。采用动脉压夹夹闭双侧肾动脉60min、恢复灌注4h建立大鼠肾脏缺血再灌注模型。D组于夹闭双侧肾动脉前10min尾静脉注射右美托咪啶3μg/kg;IR组于夹闭双侧肾动脉前10min尾静脉注射等容量生理盐水;S组不夹闭双侧肾动脉,分离肾动脉后尾静脉注射等容量生理盐水。术后再灌注4h时处死大鼠取肾组织,采用PCR技术检测血红素氧合酶-1mRNA的表达,Westernblot法测定血红素氧合酶-1(HO-1)蛋白水平,光镜下观察肾组织病理学结果。结果与S组比较,IR组和D组肾组织血红素氧合酶-1mRNA和HO-1蛋白的表达上调(P<0.05);与IR组比较,D组肾组织血红素氧合酶-1mRNA和HO-1蛋白的表达上调(P<0.05),肾组织病理学损伤减轻。结论右美托咪啶减轻大鼠肾脏缺血再灌注损伤与其上调肾组织血红素氧合酶-1的表达有关。     

PI3K/Akt信号传导通路在右美托咪定抗大鼠肢端缺血/再灌注致急性肺损伤中的作用

目的:探讨PI3K/Akt信号传导通路在右美托咪定对大鼠肢体缺血/再灌注致急性肺损伤中的作用.方法:通过止血带捆扎大鼠双后肢根部从而建立大鼠缺血/再灌注肺损伤模型,通过随机数字表法分为对照组、缺血/再灌注组(I/R组)、I/R+右美托咪定组(D组)和I/R+右美托咪定组+LY294002(DL组),通过ELISA和Western blot检测细胞炎症因子及PI3K/Akt信号传导通路蛋白的表达.结果:I/R组中MDA和MPO含量、细胞炎症因子表达及p-Akt蛋白含量较对照组均明显升高;D组中上述肺损伤指标较I/R组均显著下调;与D组相比,DL组中MDA和MPO含量、细胞炎症因子表达及p-Akt蛋白含量均上调.     

依托咪酯对糖尿病大鼠肾脏缺血再灌注后心肌的影响

目的观察糖尿病大鼠肾缺血再灌注对远隔器官心肌组织的损伤作用,探讨依托咪酯对心肌组织的保护作用。方法健康成年雄性wistar大鼠36只,体质量300～350g,用链脲佐菌素(STZ)诱发大鼠糖尿病。糖尿病大鼠随机分为A组假手术组(n=12),B组肾缺血再灌注组(n=12),C组肾缺血再灌注+依托咪酯组(n=12),实验结束,24h后处死大鼠,光镜观察心肌组织的形态学改变,采用免疫组织化学法对TNF-α和NF-κB进行定性、半定量检测。结果与A组相比,B组大鼠心肌组织TNF-α和NF-κB表达上调(P<0.05),C组大鼠心肌组织TNF-α和NF-κB表达差异无统计学意义(P>0.05),与B组相比较,C组大鼠心肌组织TNF-α和NF-κB表达下调(P<0.05)。结论糖尿病大鼠肾缺血再灌注继发心肌组织损伤,依托咪酯能够明显减轻这种损伤,其保护作用可能与TNF-α表达抑制,TNF-α/NF-κB正反馈信号阻断有关。     

右美托咪定对心肌缺血大鼠超氧化物歧化酶、丙二醛及髓过氧化物酶的影响

目的 观察右美托咪定对心肌缺血再灌注大鼠超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及髓过氧化物酶(MPO)水平的影响.方法 健康成年雄性SD大鼠50只,体质量250～300 g,随机均分成5组:假手术组(S组),心肌缺血再灌注组(I/R组),右美托咪定组(Dex组),线粒体ATP敏感性钾离子通道(mitoKATP)阻断剂5-羟葵酸组(5-HD组),5-羟葵酸+右美托咪定组(5-HD+Dex组).建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,S组仅仅穿线不结扎;Dex组于结扎前经尾静脉输注负荷剂量1μg·kg-1的右美托咪定,注入时间10 min,然后以0.5μg·kg-1·h-1的速率维持15 min;5-HD组于结扎前经尾静脉输注5 mg·kg-1的5-HD,注入时间5 min;5-HD+Dex组于结扎前先输注5-HD(同5-HD组),再输注右美托咪定(同Dex组).于再灌注结束后,取大鼠心脏,测定心肌组织SOD、MDA和MPO的水平,并检测心肌梗死体积.结果 与S组比较,其余各组SOD水平降低,MDA及MPO水平升高,心肌梗死体积增大(P<0.05);与I/R组比较,Dex组SOD水平升高,MDA及MPO水平降低,心肌梗死体积减小(P<0.05);与Dex组比较,5-HD+Dex组SOD水平降低,MDA及MPO水平升高,心肌梗死体积增大(P<0.05).结论 右美托咪定可减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤,其机制可能与mitoKATP的开放有关.     

右美托咪定预处理对大鼠肢体缺血再灌注肺损伤时脂质过氧化的影响

目的探讨右美托咪定预处理对大鼠肢体缺血再灌注肺损伤时脂质过氧化反应的影响。方法 30只Wister雄性大鼠随机分成3组:假手术组(C组),肢体缺血再灌注组(M组),右美托咪定组(P组)。大鼠肢体缺血再灌注后肺损伤模型建立后,P组大鼠于缺血前30 min经尾静脉给予25μg/kg体重右美托咪定,其余两组给予相同容量的生理盐水。各组于再灌注末行血气分析,观察肺组织病理学变化,测定肺组织湿/干重比(W/D),测定肺组织中丙二醛(MDA)的含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果与C组比较,M组和P组均出现肺损伤;PaO2和SOD活性降低;W/D及MDA含量升高(P<0.05);与M组比较,P组肺组织损伤明显减轻;PaO2和SOD活性升高,W/D及MDA含量降低(P<0.05)。结论右美托咪定预处理可抑制肢体缺血再灌注肺损伤大鼠脂质过氧化反应而发挥肺保护作用。     

异丙酚对大鼠心肌缺血/再灌注损伤时核因子-κB信号途径的影响

目的观察异丙酚对大鼠在体心肌缺血/再灌注时核因子-κB(NF-κB)信号途径的影响,以探讨异丙酚的心肌保护作用机制。方法阻断大鼠左冠状动脉前降支30min,再灌注2h引起心肌缺血/再灌注损伤。60只SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、缺血/再灌注组(I/R)和异丙酚3、6、12mg·kg-1·h-1组。分别于缺血前、缺血30min末、再灌注2h末记录心率、平均动脉压,并计算心率-血压指数。ELISA及放射免疫法分别测定血清、心肌中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)的含量。分别用原位杂交法(ISH)和半定量RT-PCR法检测心肌组织中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、粘附分子1(ICAM-1)的mRNA的表达。免疫组化染色分析心肌组织中NF-κB的核移位,Western blot检测心肌组织NF-κB的表达量。结果缺血/再灌注后各组大鼠的平均动脉压、血压-心率指数均呈进行性下降(与Sham组相比P<0.05)。异丙酚12mg·kg-1·h-1组在缺血/再灌注后的平均动脉压和血压-心率指数明显高于I/R组(P<0.05)。与Sham组相比,I/R组NF-κB活化,明显从细胞质移位于细胞核,表达量也增加(P<0.05);血清、心肌中TNF-α、IL-1β含量明显升高(P<0.01),心肌中iNOSmR-NA、ICAM-1 mRNA表达增强(P<0.01)。而异丙酚6、12mg·kg-1·h-1组,NF-κB从细胞质向细胞核的移位被明显限制,NF-κB的表达量也明显低于I/R组(均P<0.05);血清、心肌中TNF-α、IL-1β含量明显较I/R组降低(P<0.05),心肌中iNOS mRNA、ICAM-1 mRNA表达减弱(与I/R组相比,P<0.05,P<0.01)。结论异丙酚能减轻缺血/再灌注损伤,同时明显抑制心肌缺血/再灌注时NF-κB的活化,阻断NF-κB相关信号通路的传导,下调TNF-α、IL-1β、ICAM-1和iNOS等炎症相关因子的表达。     

灯盏花素对脑缺血再灌注大鼠海马核因子-κB表达的影响

目的探讨灯盏花素(Br)对脑缺血再灌注大鼠海马核因子(NF)-κB表达的影响。方法采用Zea-Longa法建立脑缺血再灌注动物模型。96只SD大鼠根据不同的处理因素分为:假手术组(Sham组,32只)、灯盏花素治疗组(Br组,32只)、缺血再灌注组(I/R组,32只)。Br组和I/R组依据缺血后再灌注的不同时间点再细分为3、12、24、48h4个小组。应用免疫组织化学方法和蛋白印迹方法检测各组大鼠海马NF-κB蛋白的表达。结果与假手术组相比,在缺血再灌注3h时,大鼠海马NF-κB的阳性表达已明显升高,在12h时表达最高,随后表达开始下降(P<0.05);与相同时间点的缺血再灌注组大鼠比较,3h时,Br组的NF-κB蛋白阳性表达未见明显降低(P>0.05),其余各时间点则明显降低(P<0.05);蛋白印迹方法也得到了相同的结论。结论灯盏花素很可能通过减少NF-κB蛋白的表达改善脑缺血再灌注损伤。     

氟比洛芬酯预先给药对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨氟比洛芬酯预先给药对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响.方法 健康雄性SD大鼠48只,体重250～300 g.随机分为假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)和氟比洛芬酯预先给药组(FB组),每组16例.I/R组和FB组参照Nauta法建立肝脏部分缺血再灌注损伤模型,左、中肝叶缺血60 min,再灌注6 h.S组仅分离血管.FB组在缺血前15min自尾静脉注射氟比洛芬酯10mg/kg,I/R组自尾静脉注射等容量的0.9%氯化钠溶液.再灌注6 h后经腹主动脉采血3 ml,并切取肝组织.检测血清丙氨酸氨基转氨酶(ALT)含量和透明质酸(HA)含量,肝组织的MDA含量和SOD活性,肝脏标本的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达和核因子-κB(NF-κB)的表达,在电镜下观察由伊红(HE)染色的肝组织的形态学改变.结果 与S组比较,I/R组肝组织的ALT、HA及TNF-α水平、MDA含量、NF-κB表达升高,SOD活性下降(P＜0.05);与I/R组比较,FB组ALT、HA及TNF-α水平、MDA含量、NF-κB表达降低,SOD活性增高(P＜0.05).结论 氟比洛芬酯预先给药可以降低对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响.     

雌激素预处理增强肝缺血再灌注损伤大鼠雌激素受体表达

目的探讨雌激素预处理对肝缺血再灌注(I/R)损伤大鼠雌激素受体(ERα)表达的影响。方法采用Pringle法阻断大鼠第一肝门制作95%肝I/R模型。肝缺血前1 h大鼠ip给予雌二醇4 mg·kg-1(雌二醇+I/R组)。分别取肝缺血前(0)、再灌注1,3,6和24 h共5个时间点的血液标本,检测血清谷丙转氨酶(ALT)水平;ELISA法测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;HE染色观察肝组织形态学变化,免疫组化方法检测肝核因子κB(NF-κB)和ERα的表达。结果与假手术组相比,I/R模型组和雌二醇+I/R组血清ALT和TNF-α水平、肝组织NF-κB和ERα表达明显升高(P<0.01);与假手术组相比,再灌注6 h,I/R和雌二醇+I/R组血清ALT水平分别升高了11.7倍和8.1倍(P<0.01),TNF-α水平分别升高5.2倍和3.2倍(P<0.01),但雌二醇+I/R组升高幅度明显低于I/R组(P<0.05);与假手术组相比,再灌注6 h I/R组和雌二醇+I/R组肝组织NF-κB表达分别升高了8.6倍和4.8倍,但雌二醇+I/R组升高幅度明显低于I/R组(P<0.01);ERα表达分别升高了4.2倍和7.4倍,雌二醇+I/R组升高幅度明显高于I/R组(P<0.01);雌二醇+I/R组肝组织损伤明显轻于I/R组。结论雌激素预处理可减轻I/R导致的肝组织损伤程度,此作用与增强ERα表达有关。     

右美托咪定预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及补体3蛋白的影响

目的：探讨右美托咪定预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及对补体3（C3）蛋白的影响。方法：sD雄性大鼠45只,随机分为3组（n=15）：假手术组（Sham组）、缺血再灌注组（I／R组）、右美托咪定预处理组（DEX组）。DEX组自缺血前2h持续静脉输注右美托咪定5mL·kg^-1（用0．9％氯化钠注射液将右美托咪定稀释为1gg·mL^-1）直到结扎心脏冠状动脉左前降支前停止,输注时间为2h;Sham组72．I／R组在相同的时间内按照5mL·kg^-1速率输注等量0．9％氯化钠注射液。再灌注120min时,取心脏组织,测定心肌梗死面积,用蛋白质印迹法（Westernblot）测定心肌组织中c3蛋白的表达。结果：与Sham组比较,I／R组和DEX组的心肌梗死面积、C3蛋白表达明显升高（P〈0．05）;与I／R组比较,DEX组的心肌梗死面积和C3蛋白表达明显降低（P〈0．05）。结论：右美托咪定预处理能够减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤,其机制与减少补体3蛋白表达有关。     

依托咪酯对缺血再灌注大鼠心肌损伤的保护作用

目的 本文探讨依托咪酯(Etomidate)对缺血再灌注大鼠心肌损伤的保护作用及其机制。方法 将大鼠随机分为5组：假手术组(Ctrl组)、模型组(I/R组)、I/R+ Etomidate (5 mg)组、I/R+ Etomidate (10 mg)组和I/R+ Etomidate (20 mg)组,采用冠状动脉结扎法建立缺血再灌注(Ischemia Reperfusion, I/R)模型。治疗组腹腔注射对应剂量的依托咪酯,假手术组和模型组给予等量生理盐水,每天给药1次,连续14天。对大鼠心肌组织进行HE染色,观察心肌损伤情况;Elisa检测血清样本中心损标记物肌钙蛋白(Cardiac troponin I, cTnI)、肌酸激酶同工酶(Creatine kinase-MB, CK-MB)和肌红蛋白(Myoglobin, Mb)表达水平,以及氧化应激指标丙二醛(malondialdehyde, MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)和乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase, LDH)的含量;TUNEL染色检测心肌凋亡情况;蛋白印迹法检测心肌组织凋亡蛋白Bcl-2和Bax的表达情况,P65磷酸化及下游靶基因IL-1β和TNF-α的蛋白表达水平。结果 依托咪酯能改善缺血再灌注大鼠心肌损伤程度,并剂量依赖性的降低cTnI、CK-MB和Mb表达(P＜0.05),增加SOD活性(P＜0.05)、降低LDH和MDA含量(P＜0.05),下调Bax(P＜0.05)、增加Bcl-2蛋白表达(P＜0.05),降低心肌凋亡水平(P＜0.05),抑制NF-κB p65的磷酸化(P＜0.05)及下游靶基因IL-1β、TNF-α的蛋白表达水平(P＜0.05)。结论 依托咪酯对缺血再灌注大鼠的心肌损伤起到保护作用,其机制与缓解氧化应激及抑制NF-κB p65的磷酸化相关。     

前列腺素E_1在大鼠肺缺血再灌注损伤中的作用研究

目的:探讨前列腺素E1在肺缺血再灌注损伤(IRI)中的作用。方法:取SD大鼠60只,随机均分为正常对照组、假手术组、缺血再灌注组(I/R组)和前列腺素E1(PGE1)高、中、低剂量组(20、10、5μg·kg-1);假手术组和I/R组给予0.5mL生理盐水尾静脉注射,其余各组给予相应药物;给药1h后建立肺IRI模型,再灌注6h后处死大鼠提取标本。检测各组肺组织湿/干重比(W/D)、丙二醛(MDA)、髓过氧化物酶(MPO)、核因子-κB(NF-κB)水平。结果:与正常对照组和假手术组比较,I/R组W/D、MDA、MPO和NF-κB水平显著升高(P<0.05);与I/R组比较,PGE1中、高剂量组肺W/D、MDA、MPO和NF-κB水平显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:PGE1可能通过抑制氧化应激和调节炎症反应对肺IRI产生保护作用。     

鞘内注射右美托咪定增加神经元自噬改善大鼠脊髓缺血再灌注损伤后神经运动功能

目的观察注射右美托咪定(Dexmedetomidine,DEX)预处理对在体大鼠脊髓缺血再灌注损伤(Spinal cord ischemia reperfusion injury,SCIRI)后神经元自噬和下肢运动功能的影响。方法 SD大鼠随机分为4组(每组30只):假手术组(Sham组)、缺血再灌注损伤组(IR组,鞘内注射30μL生理盐水)、Dex组(缺血前3 d鞘内注射右美托咪定10μg/30μL)、Dex+ATIP组(缺血前3 d鞘内注射10μg右美托咪定+10μg阿替美唑共30μL)。Sham组仅暴露主动脉弓而不结扎,其他各组开胸后无创动脉夹夹闭主动脉弓14 min后再开放,建立SCIRI模型。各组手术前均于L5-6鞘内置管并连续注射3 d。损伤后48 h内每12小时取5只大鼠,采用Tarlov法评价大鼠下肢运动功能;HE染色观察和计数损伤后48 h脊髓前角神经元形态和数量;Western blot和RT-PCR法测定损伤后48 h大鼠脊髓组织中自噬相关蛋白Beclin1、LC3蛋白及mRNA含量。结果与Sham组比较,术后各观察点IR组下肢运动功能明显受损,Tarlov评分下降,脊髓组织中Beclin1、LC3蛋白及mRNA的表达均明显降低(P<0.05);损伤前3 d鞘内注射10μg DEX(Dex组)可改善缺血再灌注损伤后下肢运动功能,提高Tarlov评分,改善脊髓Beclin1、LC3 mRNA蛋白的表达(P<0.05),而Dex+ATIP组与IR组比较差异无统计学意义(P>0.05)。损伤后48 h,HE染色显示,Sham组脊髓前角神经元轮廓清晰,结构完整,无出血、水肿等异常表现;IR组、Dex+ATIP组细胞质中的尼氏体消失,神经元胞核出现固缩或溶解,广泛空泡形成;而Dex组神经元形态明显规整,且正常神经元数量增多。结论鞘内注射右美托咪定预处理通过上调Beclin1、LC3蛋白和基因表达,增加神经元自噬,改善大鼠缺血再灌注后下肢运动功能。