组织因子在肝癌血管生成中作用的实验研究

目的探索组织因子(TF)在人肝细胞肝癌(HCC)血管生成中的作用。方法用免疫组织化学EnVisionTM法检测50例HCC及相应的癌旁肝组织标本中TF和CD34的表达。结果HCC中TF表达与患者静脉浸润、肝内外转移、无或包膜不完整有关,MVD与静脉浸润、肝内外转移、肝硬化有关(P0.05);HCC中TF阳性组与阴性组的MVD值之间差异有统计学意义(F=5.487,P=0.023);Cox模型提示TF的表达是影响HCC患者总生存率的独立因素之一。结论TF可能参与HCC微血管生成,TF对评估HCC患者预后有参考价值。     

肝细胞性肝癌组织中LVD和MVD的表达及其与肝癌侵袭转移的关系

[摘要] 目的 研究肝细胞性肝癌组织中淋巴管密度（lymphatic vessel density,LVD）和微血管密度（microvessel density,MVD）在肝细胞性肝癌中的表达,及其与肝癌侵袭和转移的关系。方法 采用免疫组织化学Supervision法分别检测40例肝细胞性肝癌患者的癌组织、癌旁组织以及10例非肝癌患者的肝脏组织中LVD和MVD的表达情况,分析其与肝癌肝内转移、门脉癌栓和淋巴转移间的关系;分析癌旁组织LVD与癌组织MVD表达之间的关系。结果?在40例肝细胞性肝癌患者的癌组织、癌旁组织及10例非肝癌患者的肝脏组织中平均LVD值分别为（10.65±3.75）、 （8.98±2.52）、 （3.15±1.49）;癌组织与癌旁组织及正常组织的LVD值差异有均统计学意义（均 P ＜0.01）。癌组织、癌旁组织及正常肝脏组织平均MVD值分别为 （71.08±43.19）、 （23.20±4.70）、 （16.80±3.01）,癌组织与癌旁组织及正常组织的MVD值差异有统计学意义（均 P ＜0.01）。结论 肝细胞性肝癌组织中LVD及MVD高表达,与肝内转移、门静脉癌栓及淋巴转移有关。     

Survivin在原发性肝癌组织中的表达及与MVD的关系

目的 研究原发性肝癌组织中Survivin的表达及其与微血管密度(microvessel density,MVD)的关系,探讨它们之间及其与原发性肝癌临床病理特征的相互关系. 方法 用ABC免疫组化法测定56例原发性肝癌组织及癌旁组织中Survivin的表达水平及MVD. 结果 56例原发性肝癌组织中Survivin的阳性表达率(62.5%)和MVD计数均值[(55.43±6.72)个/HP],明显高于癌旁组织中Survivin的阳性表达率(14.3%)及MVD计数均值[(21.04±3.26)个/HP](P值均<0.05);Survivin的表达情况及MVD与原发性肝癌组织的分化程度、肿瘤有无转移、肿块直径、门静脉、肝静脉癌栓关系密切(P<0.05);原发性肝癌组织中Survivin表达评分与MVD之间存在正相关关系(P<0.01). 结论 Survivin和MVD的表达可能与原发性肝癌的发生、发展及血管生成密切相关.     

HtrA1丝氨酸蛋白酶在原发性肝癌中的表达及其临床意义

目的 探讨原发性肝细胞癌(HCC)中HtrA1丝氨酸蛋白酶(HtrA1 serine protease)的表达水平及其与临床病理特征之间的关系.方法 采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(Realtime-PCR)检测手术切除的肝细胞癌患者的肝癌组织标本及癌旁肝组织标本中HtrA1 mRNA的表达.结果 肝癌组织中HtrA1 mRNA值为1.2729±0.9911,癌旁组织中的HtrA1 mRNA值3.8667±2.8099,肝癌组织中 HtrA1 mRNA明显低于相应的癌旁肝组织中的表达(P=0.000).多因素Logistic回归分析显示HtrA1 mRNA表达,肝内外转移及包膜是影响肝癌静脉浸润的独立因素.结论 HtrA1在肝癌中的表达可望作为判断肝癌预后或转移复发的指标之一.     

组织因子 mRNA在肝癌患者组织中表达升高的意义

目的 检测组织因子(TF)在肝癌组织中的表达并探讨其临床意义.方法 采用RT-PCR方法检测肝癌、癌旁及对照组肝组织(各27例)中TF mRNA的表达,并结合临床病理资料进行分析.结果 TF在肝癌组织中的表达阳性率及相对表达强度分别为62.96%(17/27)和0.567±0.268,均较癌旁组织的33.33%(9/27)和0.469±0.184及对照组肝组织的29.63%(8/27)和0.353±0.121高(P＜0.05),其相对表达强度与肿瘤大小、肝内和肝外转移及门静脉癌栓有关(P＜0.05),而与患者性别、AFP、HBsAg、是否合并肝硬变、肿瘤分化程度、癌灶数目、包膜浸润及淋巴转移均无关(P＞0.05).结论 TF在肝癌组织中的表达升高与部分侵袭转移指标有关,提示其可能参与了肝细胞癌的发生及侵袭、转移.     

Survivin在原发性肝细胞癌中的表达及其与侵袭、转移的关系

目的 研究Survivin基因在原发性肝细胞癌中的表达水平及其与肝癌侵袭转移的相关性.方法 收集4种肝细胞癌细胞株,35例原发性肝癌组织标本及相应的癌旁组织,以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Survivin mRNA转录情况;Western blot法检测Survivin蛋白表达.结果 在mRNA水平4株肝癌细胞株随侵袭转移能力升高Survivin表达依次升高(P＜0.01),HC-CLM6细胞株中Survivin表达水平最高.肝癌组织Survivin mRNA表达均为阳性,而癌旁组织内无一例阳性表达,Survivin mRNA的表达水平在肝内转移组(1.082±0.213)显著高于肝内无转移组(0.799±0.324,P＜0.05).Western blot的结果与RT-PCR结果一致,肝内转移组Survivin蛋白表达(0.892±0.198)显著高于肝内无转移组(0.342±0.237,P＜0.05).结论 Survivin在原发性肝细胞癌中表达,且与侵袭转移等肿瘤的恶性生物学行为有关,Survivin基因高表达可作为判断HCC侵袭性和进展的一个潜在重要指标.     

Livin蛋白在原发性肝细胞癌组织中的表达和意义

目的 探讨凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptosis protein,IAP)Livin在人原发性肝癌(HCC)组织中的表达及其与HCC血管生成的关系.方法 应用免疫组织化学法检测42例HCC及对应癌旁组织和12例正常肝组织内Livin的表达情况,观察Livin蛋白与HCC病理学特点及微血管密度(microvessel density,MVD)之间的关系.结果 免疫组织化学(SP)染色结果显示,Livin蛋白在正常肝组织中均不表达,而在42例HCC中的阳性表达率(73.81%)显著高于癌旁组织(4.76%)和正常肝脏组织,有显著统计学意义(X2=39.13,P＜0.05;X2=17.89,P＜0.05);Livin蛋白在病理分级Ⅲ～Ⅳ组阳性表达率(85.12%)强度明显高于病理分级Ⅰ～Ⅱ组(53.33%),两者比较差异有显著统计学意义(X2=4.690,P＜0.05);Livin蛋白在有转移HCC中的阳性表达率(89.47%)明显高于无转移组(60.89%),有统计学意义(X2=4.404,P＜0.05);Livin蛋白阳性表达HCC中的MVD值明显高于Livin蛋白阴性表达HCC中MVD值(23.56±5.12/17.63±4.86;P＜0.05).结论 Livin蛋白基因在原发性肝癌组织中高表达,提示该基因可能参与了肝癌的发生发展过程;Livin蛋白在HCC组织中的表达明显上调且与血管生成和浸润转移有关.     

肝细胞癌中iNOS和P53蛋白的表达及其与肿瘤血管形成的关系

目的　研究诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)和p5 3蛋白在肝细胞癌中的表达及其与肿瘤血管形成的关系。方法　采用免疫组化和图像分析技术检测 5 9例肝细胞癌患者肿瘤组织中iNOS和p5 3蛋白的表达 ,CD34单克隆抗体免疫组化染色检测肿瘤组织微血管密度 (MVD)。结果　①iNOS和p5 3蛋白在肝细胞癌组织中表达阳性率分别为 81.4 % ( 4 8/ 5 9)和 6 4 .4 % ( 38/ 5 9) ,表达强度 (IOD值 )分别为 5 6 35± 12 87和 335 2± 873。②MVD为 32 .5± 2 .73,以肿瘤边缘和癌旁组织微血管较密集。③iNOS的表达与p5 3蛋白表达呈显著正相关 (r=0 .6 5 ,P<0 .0 5 ) ;iNOS的表达与MVD呈显著正相关 (r=0 .75 ,P<0 .0 5 ) ;p5 3蛋白的表达与MVD呈显著正相关 (r=0 .72 ,P<0 .0 5 )。结论　肝细胞癌组织中存在iNOS和p5 3蛋白的高表达 ;iNOS和p5 3可促进肝癌血管形成     

胃癌中微血管密度及一氧化氮合酶表达与肿瘤浸润、转移的相关性分析

目的研究胃癌组织中微血管密度(MVD)的高低,一氧化氮合酶(NOS)的表达及与肿瘤病理特征间的关系,探讨MVD、NOS在胃癌浸润、转移中的意义及其间的相关性。方法应用免疫组化SP法检测56例手术切除胃癌组织石蜡包埋标本的iNOS、eNOS、nNOS的蛋白表达,对肿瘤微血管以CD34抗体染色并检测MVD。结果56例胃癌组织MVD平均为(36.25±6.32);i-NOS、eNOS、nNOS的阳性表达率分别为75.0%、80.4%、83.9%;不同浸润深度、淋巴结转移程度及TNM分期的胃癌中MVD值的差异有统计学意义(P<0.01);iNOS、eNOS、nNOS的表达随胃癌浸润深度的加深,淋巴结转移程度的提高而上调(P<0.01);iNOS阳性表达胃癌组织中的MVD值为(44.76±4.16),明显高于阴性表达者的(32.14±4.89)(P<0.01)。结论随着胃癌浸润,转移程度进展,肿瘤MVD值增高,NOS的表达上调;胃癌中iNOS的表达与肿瘤MVD有关,提示iNOS在胃癌生长,浸润及转移中促进肿瘤新生血管形成。     

CD146与VEGF在人肝细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的 该研究旨在观察人肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中CD146与VEGF的表达及其关系,探讨它们在HCC中与血管生成的关系及其临床意义.方法 采用免疫组化法检测60例HCC癌组织及癌旁肝组织中CD146、VEGF的表达情况,用CD34标记免疫组化法检测微血管密度(microvessel density,MVD),分析它们的表达与临床病理指标的关系.结果 CD146、VEGF在癌组织中的阳性率分别为66.67%和63.33%,而在癌旁组织中的阳性率分别为30%和33.33%,癌组织与癌旁组织比较差异有显著性(P＜0.05).癌组织的MVD为54.92±8.55/200倍视野,癌旁组织的MVD为21.36±6.63/200倍视野,两者差异有显著性(P＜0.05).与癌旁组织相比,癌组织中CD146、VEGF表达及MVD明显增加.CD146在人肝癌组织中的表达与临床分期、门静脉癌栓及肝外转移明显有关,而与术后复发、肿瘤个数、肿瘤直径、血清AFP水平及肿瘤分化程度无明显关系.VEGF在人肝癌组织中的表达与术后复发、肝外转移、临床分期、门静脉癌栓、肿瘤直径相关,而与肿瘤个数、血清AFP水平及肿瘤分化程度无明显关系.在癌组织中MVD与CD146、VEGF的表达呈正相关,CD146与VEGF亦呈正相关.结论 肝癌组织中CD146及VEGF高表达,与肿瘤血管形成和转移密切相关,分析它们的表达有助于综合判断HCC的预后.     

射频消融对兔肝癌肿瘤微血管密度及血管内皮细胞生长因子的影响

目的　探讨射频消融术对兔肝肿瘤模型的肿瘤微血管密度、血管内皮细胞生长因子的影响。方法　用 32只新西兰白兔制成VX2 细胞肝癌模型 ,分为对照组 (4只 )和射频组 (2 8只 ) ,即术后即时、2、6、12、2 4、4 8、16 8h取材 ,用免疫组织化学SP法观察并测量肿瘤组织的微血管密度 (mir crovesseldensity ,MVD)和血管内皮生长因子 (vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)的表达。 结果　射频治疗后肿瘤组织MVD和VEGF的表达较术前明显降低 (P <0 .0 1) ,射频组内不同时间点间无明显差别 (P >0 .0 5 )。结论　射频消融可以有效地破坏肿瘤组织的微血管 ,有效的抑制血管形成并减少肿瘤组织的血液供应。     

新生血管生成与肝细胞癌侵袭、转移和预后的关系

目的　探讨原发性肝细胞癌 (HCC)新生血管生成与临床病理指标的关系及其可否用于预测HCC侵袭、转移和预后。方法　采用免疫组织化学方法 ,检测了 2 0例正常肝组织、2 0例肝硬化组织、85例HCC及癌旁组织中CD34的表达 ,以及HCC的微血管密度 (MVD)。结果　CD34的染色定位在血管内皮细胞上 ,HCC窦样血管CD34表达为强阳性 ;除门管区小血管分支及中央静脉外 ,癌旁肝组织、肝硬化组织、正常肝组织基本不表达CD34 ;HCC的MVD范围 (18～ 36 0 ) / 0 74mm2 、(15 6 5±6 2 4) / 0 74mm2 。HCC的MVD与肿瘤大小、病灶数目、分化程度、门静脉瘤栓形成、包膜状况均有显著关系 (P <0 0 5或 0 0 1) ;与HBsAg是否阳性、术前AFP水平无关 (P >0 0 5 ) ;与预后亦有关 ,少血管组(MVD <15 6 )预后显著优于多血管组 (MVD≥ 15 6 ) ,术后平均无瘤生存期少血管组为 5 3个月 ,多血管组为 14个月 ,(P <0 0 0 1)。结论　CD34的表达反映了HCC的新生血管化 ,与HCC的发展有关。MVD可作为判断HCC侵袭、转移和预后的指标。     

肝细胞癌的MSCT征象、病理与血管生成的相关性

目的探讨肝细胞癌（HCC）的MSCT征象、病理与血管生成的关系。方法用免疫组化SP法检测48例经病理证实的HCC患者MVD和血管内皮生长因子（VEGF）的表达,分析HCC的MSCT征象（包括肿瘤直径、包膜、瘤内坏死液化、侵袭转移）、病理分级与MVD、VEGF阳性表达率的关系。结果VEGF阳性表达者的MVD高于VEGF阴性表达者（P〈0．01）。HCCⅠ级的MVD、VEGF阳性表达率低于Ⅲ、Ⅳ级,Ⅱ级低于Ⅳ级（P均〈O．05）。包膜不完整、瘤内有坏死液化及有侵袭转移的HCC的MVD及VEGF阳性表达率分别高于包膜完整、瘤内无坏死液化及无侵袭转移者（P均〈0．05）。结论HCC包膜是否完整、瘤内有无坏死液化、有无侵袭转移等MSCT征象与MVD、VEGF表达密切相关,新生血管在HCC的生长、浸润转移中起着重要作用。     

DLL4和血管内皮生长因子在肝细胞癌的表达及其在肿瘤血管生成的作用

目的 探讨Delta样配体(DLL4)及血管内皮生长因子(VEGF)在肝细胞癌中的表达及其与血管生成的关系.方法 免疫组织化学法检测75例肝细胞癌(HCC)中DLL4和VEGF的表达,用CD34进行微血管内皮细胞染色,计算微血管密度(MVD),分析其相关性.结果 DLL4和VEGF表达在HCC组明显高于肝硬化组和正常肝组(P＜0.01),与HCC的临床病理学分级相关(P＜0.01),HCC组中的CD34表达与DLL4的表达呈明显负相关(P＜0.05,r=-0.778);与VEGF的表达呈明显正相关(P＜0.05,r=0.747),32例共表达DLL4和VECF蛋白者,其平均微血管数(19.70±5.82)个/HP,明显高于非共表达组(7.60±2.12)个/HP(P＜0.01).结论 DLL4、VEGF在肝细胞癌血管生成中可能起重要作用.     

P53及MVD与肝细胞性肝癌肝移植术后肿瘤复发的关系

目的 探讨肝细胞性肝癌(HCC)中P53蛋白表达及肿瘤微血管密度(MVD)与HCC肝移植术后肿瘤复发的关系.方法 采用免疫组化检测HCC组织中P53蛋白表达,CD34标记癌组织血管内皮细胞,计算MVD,统计分析两者及临床病理因素与肝移植术后肿瘤复发的关系、两者与临床病理因素之间及两者相互之间的关系.结果 单因素分析表明P53蛋白表达、MVD、肿瘤TNM分期及肿瘤脉管浸润对HCC肝移植术后肿瘤复发均有影响(P<0.05),多因素分析后,仅P53和MVD为独立的影响因素;P53蛋白表达和MVD与肿瘤脉管浸润显著正相关(P<0.05);P53蛋白表达阳性的肝癌组织MVD显著高于阴性表达者(P=0.01).结论 P53蛋白表达和MVD对预测HCC肝移植术后的肿瘤复发有重要价值;P53蛋白表达阳性和高MVD者易出现肿瘤脉管浸润;P53蛋白表达与肿瘤血管生成密切相关.     

SEMA3F蛋白在肝细胞癌中的表达及其预后价值

目的 研究SEMA3F蛋白在肝细胞癌(hepatocelluar carcinoma,HCC)中的表达及其预后价值.方法 采用Western Blotting法检测32例HCC及相应癌旁肝组织标本中SEMA3F蛋白的表达.运用免疫组织化学法检测38例HCC以及其相应癌旁组织中的SEMA3F蛋白的表达和微血管密度(microvassel dainty,MVD)值,分析SEMA3F蛋白表达水平与MVD的相关性.结果 SEMA3F蛋白在32例HCC组织中的表达明显低于相应的PCLT(447.78±48.26比618.93±61.23,P＜0.05).SEMA3F在HCC组织中的表达水平与肿瘤的结节数目及是否具有包膜结构密切相关(P＜0.05).SEMA3F低表达组的复发转移率显著高于高表达组(P＜0.01)而其术后生存率则显著低于高表达组(P＜0.01).SEMA3F高表达组的MVD值明显低于低表达组(86.56±17.94比115.6±30.38,P＜0.01).结论 SEMA3F在HCC组织中表达下调与肝癌复发转移率高和预后差密切相关,提示其可能是一个潜在的HCC预后分子标志物.

Abstract：

Objective To investigate the expression of Semaphorin 3F (SEMA3F) protein in hepatocellular carcinoma (HCC) and to demonstrate its relationship with clinicopathological features and prognosis of HCC. Methods Western Blotting was carried out in 32 hepatocellular carcinoma samples and matched perineoplastic tissues to detect the expression of SEMA3F protein. The relationship between SEMA3F protein expression and clinicopathological features as well as prognosis of HCC patients was analyzed. Immunohistochemistry was used to show the location of SEMA3F in HCC cells and its relationship with microvessel density (MVD). Results The expression of SEMA3F protein in HCC tissues was significantly higher than in the perineoplastic tissues (447.78± 48.26 vs 618.93 ±61.23, P＜0. 05) and it was correlated closely with tumor capsulation and tumor nodular number (P＜0.05). Based on the Western Blotting and clinical follow-up data, we found that the survival time of HCC patients with a higher SEMA3F expression level was longer than those with a lower level, and the recurrent/metastatic time of HCC patients was significantly different between these two groups (P＜0.01). Immunohistochemistry demonstrated that SEMA3F protein localized in the cytoplasm of HCC cells and its expression correlated with HCC MVD. MVD in the low-level group was higher than the high-level group (115.6±30.38 vs 86. 56±17.94, P＜0.01). Conclusions SEMA3F expression in HCC was significantly down-regulated and correlated closely with tumor-capsulation, nodular number, and MVD, implicating SEMA3F may play an important role in recurrence and metastasis of HCC. It can be regarded as a prognostic marker in HCC patients.     

TSP-1和VEGF在肝细胞癌新生血管生成中的作用

目的　研究血小板反应蛋白 1(TSP 1)和血管内皮生长因子(VEGF)的平衡在肝细胞 癌(HCC)新生血管生成中的作用。方法　采用免疫组织化学SABC法检测37例HCC及其癌旁肝 组织和6例正常肝组织中TSP 1、VEGF和CD34的表达情况,研究TSP 1和VEGF的表达与HCC 的临床病理资料及新生血管生成的关系。结果　37例HCC中TSP 1阳性率为62.2%(23/37),低 于相应的癌旁肝组织和正常肝组织(P<0.05)。HCC中VEGF的阳性率为97.3%(36/37),高于相 应的癌旁肝组织和正常肝组织(P<0.05)。有镜下静脉浸润的HCC组织中TSP 1的表达低于无镜 下静脉浸润者,而VEGF的表达则高于无镜下静脉浸润者(P<0.05)。等级相关分析显示,HCC中 VEGF的表达与CD34的表达呈正相关关系,(rs=0.333,P<0.05),而TSP 1的表达与CD34的表达 则呈负相关关系,相关系数(rs=-0.393,P<0.05)。结论　TSP 1低表达与VEGF过表达之间的 不平衡性是决定HCC组织中新生血管生成的关键因素之一。     

膜型基质金属蛋白酶-1在浸润性肝细胞癌组织的表达及其意义

目的 探讨在浸润性肝细胞肝癌(HCC)中,膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)的表达和意义.方法 随机选取2004年1月至2006年12月间根治性手术切除的HCC标本123例,通过对肿瘤的个数、包膜是否完整、门静脉有无癌栓、有无肝外转移等标准的划分,将其分为浸润转移组(74)及无浸润组(49).术前所有病例均采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清血管内皮生长因子(VEGF)水平;并通过免疫组织化学法(ABC),测定两组术后标本癌组织的MT1-MMP蛋白及肿瘤微血管密度(MVD)的表达;定量聚合酶链反应(PCR)测定癌组织MT1-MMP mRNA的表达.结果 浸润组术前血清VEGF:(1 33.89±68.56) μg/L;无浸润组:(100.64±81.37) μg/L,差异有统计学意义(P＜0.01).MT1-MMP主要定位表达在肝癌细胞的胞膜和间质.在浸润组中,MT1-MMP蛋白及mRNA表达量明显高于无浸润组(P＜0.05);浸润组MVD:11.24±1.49,无浸润组:8.11±2.51,两者比较浸润组MVD的形成量明显增多(P＜0.01).结论 在浸润性肝细胞肝癌中,MT1-MMP的表达明显增高,并伴随血清VEGF的表达上调、癌组织内新生肿瘤微血管的形成增多.MT1-MMP高表达可作为浸润性肝癌的判定指标,并提示临床预后较差.