豫医无毛小鼠中期染色体标本中无毛基因的原位PCR检测

目的确立豫医无毛小鼠无毛基因的原位PCR荧光检测方法。方法应用原位PCR的方法对豫医无毛小鼠中期染色体标本的无毛基因进行检测，并设立PCR反应液中无Taq DNA聚合酶、无引物、无bIo-11—dU/TP等进行多组对照。结果染色体标本上出现1—2个黄绿色的扩增信号，而对照组则无。结论本实验为以后进行该基因的精确染色体定位打下了良好基础。     

豫医无毛小鼠无毛基因部分DNA序列分析

目的：探讨豫医无毛小鼠的无毛基因突变情况.方法：采用PCR方法扩增豫医无毛小鼠无毛基因的部分DNA序列,并进行克隆测序,将测序结果与国外公布的小鼠、大鼠及人无毛基因的cDNA序列做同源性比较和分析,确定该鼠无毛基因的特异性.结果：克隆测序结果为一923 bp的片段,相当于Genbank上公布的小鼠无毛基因cDNA序列的3 150～3 565 bp位置,包含4个外显子（外显子13～16）及3个内含子（内含子13～15）;与本室以前所测昆明小鼠无毛基因部分DNA序列100%同源,其外显子部分共416 bp,可编码138个氨基酸,与国外公布的小鼠、大鼠、人的无毛基因核苷酸同源性分别为100%、95%、84%,氨基酸同源性分别为100%、97.8%、84%.结论：①克隆定序了豫医无毛小鼠无毛基因的部分DNA序列;②排除了豫医无毛小鼠无毛基因的突变发生于本段序列的可能;③无毛基因在哺乳动物体内同源性很高,应属保守基因,其蛋白质产物可能在一些基本的调节途径中起重要作用,推测豫医无毛小鼠的无毛基因可能也位于14号染色体.     

豫医无毛小鼠无毛基因的比较生物学分析

目的:分析豫医无毛小鼠与其他物种间无毛基因组成的差异.方法:采用RT-PCR方法对豫医无毛小鼠无毛基因的cDNA序列进行克隆测序,并借助生物信息学分析技术对小鼠、大鼠、猴和人的无毛基因及其所编码的氨基酸序列进行比较生物学分析.结果:获得了豫医无毛小鼠无毛基因的全长4 014 bp的cDNA序列 (GenBank 登录号:AY547390).豫医无毛小鼠与国内外报道的2种小鼠、大鼠、猴、人等5种动物的核苷酸同源性分别为99.9%、99.7%、94.3%、 81.7%、 81.8%,氨基酸同源性分别是99.8%、99.7%、94.5%、79.8%、80.0%.结论:无毛基因是一个高度保守基因,不同物种间具有高度同源性.     

豫医无毛小鼠无毛基因部分内含子突变研究

目的 研究豫医无毛小鼠突变的分子机制。方法 对豫医无毛小鼠和昆明小鼠的基因组DNA进行PCR扩增,对二者扩增片段克隆后测序,对结果进行比较,以确定豫医无毛小鼠无毛基因的特异性程度。结果 本实验共测出豫医无毛小鼠DNA序列1746bp和昆明小鼠DNA序列1733bp,两者不同之处有32处,均位于内含子,突变形式包括插入、缺失和点突变。结论 无毛性状的产生可能与内含子中的插入、缺失和点突变有关。     

豫医无毛小鼠近交系毛色基因遗传学测试

目的：考核豫医无毛小鼠（YYHL）近交系纯化程度及毛色基因型。方法：用复隐性基因小鼠DBA／2、615分别对YYHL近交系进行了毛色基因测试。结果和结论：杂交的性的F1代全部为野生色,表明其毛色基因为纯合,其基因型为AABBccDD。豫医无毛小鼠近交系已达到近交系的国际标准。     

豫医无毛小鼠近交系毛色基因遗传学测试

目的考核豫医无毛小鼠(YYHL)近交系纯化程度及毛色基因型.方法用复隐性基因小鼠DBA/2、615分别对YYHL近交系进行了毛色基因测试.结果和结论杂交所生的F1代全部为野生色,表明其毛色基因为纯合,其基因型为AABBccDD.豫医无毛小鼠近交系已达到近交系的国际标准.     

豫医无毛小鼠无毛基因突变部位的定位和分析

目的:研究豫医无毛小鼠(YYHL)突变的分子机制.方法:对豫医无毛小鼠和昆明小鼠的基因组DNA进行PCR扩增,对扩增片段克隆后测序,并与Mus muscnlus进行同源性分析.结果:共测出YYHL DNA序列1 824bp和昆明小鼠DNA序列1816 bp,其不同之处有27处,变异方式包括插入、缺失和点突变.其中在12外显子中有一无义突变(G→A),导致该部位由编码色氨酸的UGG转变为终止密码子UGA.结论:YYHL无毛性状的产生可能与基因组的变异有关.     

豫医无毛小鼠眼睑超微结构观察

胞内出现由染色质形成的新月形凋亡小体并伴有空泡.结论:YYHL眼睑的结构变化导致其视力下降;YYHL眼睑皮肤毛囊细胞凋亡是导致其眼睑无毛的主要原因.     

豫医无毛小鼠眼球组织学观察

目的:观察豫医无毛小鼠眼球组织学的结构,探讨豫医无毛小鼠视物能力差的原因.方法:取豫医无毛小鼠及昆明小鼠各5只,于室温(20～28 ℃)饲养,饲养期间观察2组小鼠眼睑、眼球外观,12周后采用颈椎脱臼法处死小鼠,取眼球组织进行HE染色观察.结果:豫医无毛小鼠仔鼠时期眼睑外观正常,12周龄时眼睑及皮肤有许多油脂黏附,头侧、眼睑及体侧出现皱纹和褶痕,眼睑松垂,眼球变混浊,视物能力、敏感性及行动性均降低.昆明小鼠饲养期间眼睑及眼球无明显变化.豫医无毛小鼠角膜、视网膜、睫状体组织学结构与昆明小鼠相比无明显差异.结论:豫医无毛小鼠眼球的组织学结构与昆明小鼠相同,其视物能力差可能是由眼睑松垂所致.     

豫医无毛小鼠乳腺功能的初步研究

为研究豫医无毛小鼠中无毛雌鼠的乳腺功能 ,采用与正常雄鼠交配的方法 ,通过与有毛雌鼠比较 ,证明无毛雌鼠卵巢的发育是正常的 ,乳腺的发育基本正常 ,但乳腺的泌乳能力差异很大 ,功能正常的只有 30 % ,是幼鼠死亡率高的直接原因 ,同时 ,随着增龄 ,无毛雌鼠的妊娠率也随之下降     

促性腺激素作用下豫医无毛小鼠超排卵效果观察

目的 :探讨近交系豫医无毛小鼠超排卵的最佳条件 ,提高超排卵效果。方法 :30只近交系豫医无毛小鼠随机分为 3组 ,分别用 5IU、8IU、10IU的孕马血清促性腺激素 (PMSG)和人绒毛膜促性腺激素 (HCG) ,间隔 4 8h注射 ,比较排出卵母细胞的数量。结果与结论 :腹腔间隔 4 8h各注射 8IU的PMSG和HCG超排卵效果最好 ;各剂量组右侧卵巢比左侧卵巢超排卵效果好 (P <0 .0 5 )。     

豫医无毛小鼠主要免疫器官组织学观察

目的：观察不同月龄豫医无毛小鼠主要免疫器官的组织结构。方法：取１月龄，２月龄，８月龄３个年龄组，颈椎脱臼处死，剖取主要免疫器官，１０％甲醛固定，行石蜡切片，ＨＥ染色。结果；１月龄，２月龄，８月龄豫医无毛小鼠的脾脏，腋下淋巴结正常，各组无明显差别。８月龄肠道未见明显的淋巴小结。     

豫医无毛小鼠生殖及乳腺功能观察

目的：研究皮肤无毛对豫医无毛雌鼠的生殖、乳腺功能的影响。方法：将无毛雌性小鼠与正常小鼠交配，统计胎次，妊娠，胎产子数，离乳数，离乳率。并与有毛雌鼠比较。结果：无毛雌鼠卵巢发育正常，乳腺发育基本正常，但泌乳能力差异很大，功能正常的只有30％，与有毛雌鼠相比，无毛雌鼠妊娠率（23％－70％），胎产子数（5．3－6．8）、离乳数（0－1．5只）及离乳率均低（0－26％），幼鼠死亡率高（74．6％－100％）。结论：皮肤无毛导致无毛小鼠泌乳能力、生产繁殖能力降低。     

豫医无毛小鼠体重与主要脏器重之间关系分析

目的：了解豫医无毛小鼠体重与主要脏器重之间关系。方法：剖取豫医无毛小鼠及杂合子有毛小鼠内脏器官,用ＬＩＢＲＯＲＬ １６０ＤＴＰ电子称重天平称重,对取得的数据进行统计学处理。结果：获取与主要脏器重之间关系资料。对豫医无毛小鼠及杂合子有毛小鼠进行ｔ检验,仅雌性动物心脏、胸腺有差异性。结论：豫医无毛小鼠及杂合子有毛小鼠仅雌性动物心脏、胸腺有差异,其它无差别。     

豫医无毛小鼠寿命观察

目的 :通过对豫医无毛小鼠寿命的观察 ,探讨突变基因对无毛小鼠寿命的影响。方法 :在正常生产繁殖状态下 ,随机选取无毛小鼠雌雄各 50只 ,杂合子有毛小鼠雌雄各 2 5只 ,饲养条件、营养状况、实验方法等均相同 ,观察每只小鼠自然衰老的过程 ,并计算出各自的寿命。结果 :纯合子无毛小鼠平均寿命雌性为 (30 3 .3± 35 .0 )d、雄性为 (2 61 .6± 41 .2 )d ,杂合子有毛小鼠平均寿命雌性为 (382 .7± 35 .7)d、雄性为 (353 .0± 37.2 )d。纯合子无毛小鼠与杂合子同性别有毛小鼠寿命相比差异有统计学意义 (P <0 .0 1 )。结论 :突变基因可能对无毛小鼠的寿命有影响 ,豫医无毛小鼠可作为衰老模型供科研应用     

豫医无毛小鼠骨髓嗜多染红细胞微核实验研究

采用骨髓嗜多染红细胞微核技术对豫医无毛小鼠进行骨髓微核实验研究。结果:(1)豫医无毛小鼠嗜多染红细胞自发微核率与正常昆明小鼠无显著性差异P>0.05。(2)腹腔注射环磷酰胺后,豫医无毛小鼠与昆明小鼠骨髓微核率均显著升高,但两者之间无显著性差异P>0.05。提示:豫医无毛小鼠与昆明小鼠自发微核率相似,对环磷酰胶诱变剂的敏感性相一致。     

豫医无毛小鼠染色体G带核型分析

分析了豫医无毛小鼠的22个骨髓细胞G显带核型,并以正常昆明小鼠做对照,两小鼠G显带标本均能观察到显示大带和小带的两种带型细胞,根据其带型能区分各号染色体,两种小鼠大带带型基本相同。