伯氏疟原虫免疫抑制因子对小鼠T淋巴细胞的作用

观察了伯氏疟原虫的免疫抑制因子对小鼠Ｔ淋巴细胞亚群的作用。结果，注射免疫抑制因子小鼠牌细胞中的ＣＤ４Ｔ细胞阳性百分数明显下降，ＣＤ６Ｔ细胞则明显升高，ＣＤ４／ＣＤ８Ｔ细胞幽会显著降低；注射因子对小鼠皮肤抗ＤＮＣＢ的ＤＴＨ反应也明显下降。提示：免疫抑制在子具有诱导、激活ＣＤ８Ｔ细胞活性的功能，使其数目增多，同时造成ＣＤ４Ｔ细胞百分数相对下降，通过抑制ＤＴＨ反应耐影响细胞免疫功能。     

肿瘤负荷对卵巢癌患者外周血T细胞亚群的影响

应用ＯｒｔｈｏＫｕｎｇＴ细胞（ＯＫＴ）系列单克隆抗体检测卵巢癌患者外周血Ｔ细胞亚群。结果发现，卵巢癌患者外周血Ｔ细胞表面分化抗原（ＣＤ抗原）ＣＤ４＋细胞显著低于正常妇女，而ＣＤ８＋细胞显著高于正常妇女，ＣＤ４＋／ＣＤ８＋比值则显著低于正常妇女。ＣＤ４＋细胞随肿瘤增大而减少，ＣＤ８＋细胞随肿瘤增大而增加，ＣＤ４＋／ＣＤ８＋比值随肿瘤增大而逐步降低。切除肿瘤后，ＣＤ４＋细胞及ＣＤ４＋／ＣＤ８＋比值明显回升。说明肿瘤负荷与带瘤机体免疫功能抑制有关，消除肿瘤负荷有利于机体恢复免疫功能。     

恶性疟原虫多价重组疫苗的研制及其免疫活性的初步鉴定

为了探讨含Ｔ、Ｂ淋巴细胞双重激活表位的重组复合症疾抗原的免疫原性和保护作用，作者设计合成了编码恶性疟原虫红内期３个保护性抗原位点和２个外源性Ｔ细胞激活位点的复合基因ＨＧＦＣ，并构建了多连体复合基因ＨＧＦＣＡＣ。两种复合基因分别与表达载体ｐＷＲ４５０－１重组，并在大肠杆菌中表达出含外源蛋白和β－半乳糖苷酶部分氨基酸的融合蛋白（分子量分别为６５０００和７７０００），表达量为３５％。表达产物可与小鼠及兔抗恶性疟原虫抗体发生特异性免疫反应。用纯化的融合蛋白免疫家兔制备的免疫血清可特异地识别恶性疟原虫抗原，并对疟原虫体外生长有显著抑制作用。抑制程度与免疫血清浓度及作用时间呈正相关，在２０％浓度下作用７２小时，抑制率可达８２％，并引起疟原虫发育不良和死亡。研究结果说明，制备的恶性疟原虫重组复合抗原具有免疫原性和一定的免疫保护作用，可作为恶性疟疫苗候选物。     

亚性疟原虫多价重组疫苗的研制及其免疫活性的初步鉴定

为了探讨Ｔ、Ｂ淋巴细胞双重激活表位的重组复合症疾抗原的免疫原性和保护作用，作者设计合成了编码亚性疟原虫红内期３个保护性抗原位点和２个外源性Ｔ细胞激活位点的复合基因ＨＧＦＣ，并构建了多连体复合基因ＨＧＦＣＡＣ。两种复合基因分别与表达载体ｐＷＲ４５０－１重组，并在大肠杆菌中表现出含外源蛋白和β－半乳糖苷酶部分氨基酸的融俣蛋白，表达量为３５％。     

一种恶性疟原虫保护性抗原重组复合基因表达产物的细胞免疫…

检测一种恶性疟原虫保护性原重组复合基因表达产物诱导小鼠细胞免疫的反应，方法：免疫小鼠的巴细胞，体外分别经ＣｏｎＡ，ＨＲＡ和可溶性裂殖子抗原的刺激。＾３Ｈ－ＴｄＲ参入法检测淋巴细胞的增殖水平。结论：ＨＲＡ上的Ｔ细胞位点发挥了效应。具肝一这一的突破ＭＨＣ限制的能力。     

恶性疟的两种重组复合抗原的纯化与鉴定

用我们构建的高效表达恶性疟原虫复合抗原融合蛋白的工程菌ＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉｐＷＲ－Ｃ／ＪＭ１０９和ｐＷＲ－ＣＡＣ／ＪＭ１０９进行发酵培养，收集菌体经超声波破菌、硫酸铵分级沉淀、分子筛层析、离子交换层析等步骤纯化后，纯度可达８２．０％。纯化后的融合蛋白保持β－半乳糖苷酶的活性。用等电聚焦技术测定纯化蛋白等电点分别为８．４０和８．２５．用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法测定纯化蛋白的免疫原性，证实纯化的重组蛋白可与小鼠抗恶性疟原虫抗体及疟区病人血清发生特异性免疫反应。重组蛋白加弗氏佐剂免疫家兔制备的抗血清可与４种工程菌表达产物发生特异免疫反应，并可识别恶性疟原虫海南株和云南株红内期抗原。说明纯化的重组融合蛋白为具有恶性疟原虫抗原活性的重组复会抗原。     

T细胞亚群在再生障碍性贫血的变化

目的探讨再生障碍性贫血（ＡＡ）患者中Ｔ细胞亚群的变化。方法应用免疫酶标技术对１０例再障Ｔ细胞亚群测定与２０例健康人Ｔ细胞亚群含量进行比较分析。结果再障中ＣＤ３、ＣＤ４降低，ＣＤ８增多，ＣＤ４／ＣＤ８比值降低（Ｐ＜０．０５）。结论提示再障患者免疫平衡失调，免疫功能降低。     

32例白血病免疫表型分析

目的 探讨白血病免疫表型在各类白血病中的分布和特征。方法 用１６种单克隆抗体（ＣＤ）,以碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶免疫酶标法测定３２例白血病病例。结果 急性淋巴细胞性白血病,Ｔ－ＡＬＬ除表达Ｔ系淋巴细胞抗原ＣＤ２,ＣＤ３,ＣＤ７,ＣＤ８外,同时也表达Ｂ－ＡＬＬ抗原和髓系白血病抗原;Ｂ－ＡＬＬ表达Ｂ系抗原为ＨＬＡ－ＤＲ,ＣＤ９,ＣＤ１０,ＣＤ１９,ＣＤ２３,同时也表达Ｂ／Ｍ,Ｔ／Ｂ／Ｍ抗原;髓系白血病,     

淋巴细胞趋化因子基因修饰增强肿瘤抗原多肽致敏的树突状细胞的抗肿瘤免疫效果

目的：通过选择性增强树突状细胞（ＤＣ）与Ｔ细胞的体内相互作用,优化其体内抗原提呈的微环境,为进一步增强ＤＣ介导的肿瘤免疫治疗效果。方法：体外培养的小鼠骨髓树突状细胞体外经Ｌｔｎ重组腺病毒感染后（Ｌｔｎ－ＤＣ）,用３ＬＬＬｅｗｉｓ肺癌细胞株的Ｍｕｔｌ抗原肽冲击致敏,按不同剂量免疫正常同系小鼠体内,观察其体内诱导的细胞毒性Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）活性保护性免疫反应;通过体内阻断试验探讨免疫细胞亚群及免疫分子在ＤＣ诱导肮肿瘤免疫应答中的作用;建立肺癌的自发性肺转移模型,观察免疫治疗作用。结果：抗原肽Ｍｕｔｌ刺激的Ｌｔｎ－ＤＣ能更有效地诱导特异ＣＴＬ活性,能使免疫动物产生更有效的免疫保护作用,抵抗肿瘤细胞的攻击。在抗肿瘤免疫排斥反应的诱导过程中,必需有ＣＤ４＋Ｔ和ＣＤ８＋Ｔ细胞的参与;而在其效应阶段,则依赖于ＣＤ８＋Ｔ细胞、Ｂ７／ＣＤ２８的共刺激信号途径及γ干扰素（ＩＦＮ－γ）的参与,并在诱导过程中起着重要作用。抗原肽刺激的Ｌｔｎ－ＤＣ能有效抑制３ＬＬ细胞的自发性肺转移,具有更明显的治疗作用。结论：通过基因修饰增强树突状细胞对Ｔ细胞的体内选择性趋化活性,能更有效地诱导抗肿瘤免疫反应,为树突状细胞介导的肿瘤免疫治疗开辟了     

T细胞亚群改变与乙型肝炎病毒携带关系的初探

本文应用Ｔ细胞ＯＫＴ单克隆抗体，采用荧光免疫法对１４例乙肝病毒携带者Ｔ细胞亚群进行了检测。结果表明：乙肝病毒携带者ＣＤ＋４细胞百分率低于对照组（Ｐ＜０．０５），而ＣＤ＋３细胞百分率、ＣＤ＋８细胞百分率、ＣＤ＋４／ＣＤ＋８比值均显著低于对照组，Ｐ＜０．０１。结果提示：ＣＤ＋３细胞减少，使ＴＣＲ—ＣＤ＋３不足，则ＣＤ＋４细胞和ＣＤ＋８细胞难以发挥作用；ＣＤ＋４细胞和ＣＤ＋８细胞减少提示机体已形成免疫耐受，是乙肝病毒携带的分子免疫基础。     

全血涂片免疫酶染法检测T细胞亚群

采用全血涂片免疫酶染法建立了检测T细胞亚群的新方法。该法具有良好的敏感性、特异性、稳定性与重复性。经与传统的间接免疫荧光法及单个核细胞涂片免疫酶染法作对比研究,证明该法具有需血量少、省时、经济和简便等优点。应用该法检测了48例EHF患者及32例慢性HBV感染患者的外周血T细胞亚群。结果显示EHF患者极期CD8~+T细胞百分比明显升高,CD4~+/CD8~+比值下降或倒置。慢性HBV感染患者也显示CD8~+细胞百分比升高,CD4~+/CD8~+比值下降。本文还对EHF和慢性HBV感染患者T细胞亚群变化的意义进行了讨论。     

手足口病患儿T淋巴细胞亚群与CD3+CD4-CD8-双阴性调节性T细胞的检测及其临床意义

目的探讨外周血T淋巴细胞亚群及CD3+CD4-CD8-双阴性调节性T细胞在手足口病病人发病中的临床意义。方法采用流式细胞术检测了46例手足口病患者以及17例健康体检者外周血T细胞亚群CD3+、CD3+CD4-CD8+、CD3+CD4+CD8+、CD3+CD4+CD8-与CD3+CD4-CD8-双阴性调节性T细胞水平。结果与正常对照组相比,手足口病患者组CD3+、CD3+CD4-CD8+、CD3+CD4-CD8-双阴性调节性T细胞的百分率降低(P值分别为0.008、0.050、0.025),CD3+CD4+CD8+、CD3+CD4+CD8-百分率以及CD4/CD8比值差异无统计学意义(P值分别为0.847、0.775、0.149),以上各细胞亚群的百分率以及CD4/CD8比值在年龄与性别方面差异无统计学意义。结论手足口病患者CD3+CD4-CD8-双阴性调节性T细胞、CD3+、CD3+CD4-CD8+异常变化提示其免疫功能异常。     

原发性肝癌患者癌组织中IL-18的表达与机体细胞免疫关系研究

目的探讨原发性肝癌（PHC）患者癌组织中白介素-18（IL-18）的表达情况及其与机体NK细胞、CD4^＋和CD8^＋T细胞的关系。方法取PHC患者癌组织,免疫组化检测癌组织中IL-18的表达情况,同时流式细胞术检测患者术前和术后的NK细胞、CD4^＋和CD8^＋T细胞的表达,并探讨它们的相关性。结果 PHC患者癌组织和癌周组织中的IL-18积分值分别为（2.16±1.84）分和（2.89±3.11）分;术前术后外周血CD4^＋T细胞、CD8^＋T细胞和NK细胞表达频数分别为（35.9±7.2）%、（32.3±10.7）%、（12.1±5.8）%和（39.9±11.2）%、（20.6±7.5）%、（16.3±11.0）%。讨论PHC患者术后NK细胞、CD4^＋T细胞表达升高,CD8^＋T细胞表达降低,癌组织中IL-18含量与NK细胞、CD4^＋、CD8^＋T细胞的表达具有相关性。     

免疫表型及非髓系分化抗原表达分析： 对急性髓细胞白血病的诊断和预后判定有应用价值

目的 探讨急性髓细胞白血病（AML）免疫表型和非髓系分化抗原表达特征及其临床应用价值。方法 采用 BDFACSCalibur流式细胞仪对109例AML患者进行免疫表型检测,分析AML免疫表型、非髓系分化抗原表达的特点及与预后疗效完全缓解（CR）率的关系。结果 免疫表型显示AML细胞髓系分化抗原阳性率由高到低依次为CD13、CD117、CD33、MPO、CD15,其中CD117、CD13、CD33、MPO阳性率差异无统计学意义（P>0.05）,并且均高于CD15阳性率（P<0.05）;AML细胞非髓系分化抗原CD9、CD200、CD56、CD7阳性率依次降低,均高于CD25、CD19、CD2、CD10、CD4、CyCD79a、CyCD3阳性率（P<0.05）;109例AML中CD7、CD34、CD56、CD25呈阳性的患者CR率均低于阴性患者（P<0.05）;MPO、CD19呈阳性的患者CR率均高于阴性患者（P<0.05）;伴AML1-ETO阳性表达的15例AML-M2b患者中CD56阳性组1疗程CR率低于CD56阴性组,CD56阳性组1年内复发率高于CD56阴性组（P<0.05）。结论 免疫表型和非髓系分化抗原表达分析对AML的诊断及预后判定有重要临床意义,是AML诊疗的主要依据之一。     

术期未输血及输血对口腔癌患者T细胞亚群的影响

目的　探讨术期未输血对Ｔ细胞亚群的影响；方法　应用Ｔ细胞单克隆抗体ＯＫＴ系列检测了４２ 例口腔癌患者及２０ 例口腔颌面部良性肿瘤患者。其中检测了２２ 例术期未输血和２０ 例术期输血的口腔癌患者的Ｔ细胞亚群。结果　癌瘤患者的ＣＤ３ 、ＣＤ４／ＣＤ８ 值比健康人、口腔良性肿瘤患者明显降低、而ＣＤ８ 值却明显升高；术后ＣＤ８ 值降低，ＣＤ４／ＣＤ８ 值升高。对４２ 例口腔癌患者术后的Ｔ细胞亚群进行了动态观测，术期未输血患者及术期输血患者在术后第３ 、７ 天，ＣＤ３ 、ＣＤ４ 值下降，ＣＤ８ 值降低；术后第１４ 天，未输血组患者ＣＤ３ 、ＣＤ４ 、及ＣＤ８ 值，ＣＤ４／ＣＤ８ 值恢复至术前水平；输血组患者ＣＤ３ 、ＣＤ４ 、ＣＤ８及ＣＤ４／ＣＤ８ 值未恢复至术前水平；术后第２１ 天，未输血组ＣＤ４／ＣＤ８ 值恢复正常而输血组未恢复正常。结论　输血可影响患者免疫功能的恢复进程。     

糖尿病伴感染病人细胞免疫表型的检测意义

目的探讨2型糖尿病伴感染病人外周血T细胞亚群、NK细胞变化及检测意义。方法用流式细胞仪以单克隆免疫荧光法检测2型糖尿病伴感染病人23例（感染细）和2型糖尿病无感染病人20例（无感染组）T细胞亚群及NK细胞，并与健康体检者对照（对照组）。结果2型糖尿病伴感染组较健康对照组CD3^＋、CD4^＋、NK细胞明显降低（P〈0．01）；2型糖尿病无感染组较健康对照组CD3^＋、CD4^＋、NK细胞显著下降（P〈0．05）；2型糖尿病伴感染组与无感染组比较CD3^＋、CD4^＋、NK细胞显著下降（P〈0．05，P〈0．05，P〈0．01）；2型糖尿病病人CD8^＋、CD4^＋／CD8^＋比值与健康对照组无显著性差异（P〉0．05）。结论2型糖尿病病人存在机体免疫功能的下降，糖尿病合并感染时可使机体的免疫功能进一步下降，这可能是糖尿病病人易合并感染的重要原因。     

血吸虫病患者外周血IL-2水平、T细胞亚群和抑制性T细胞功能的改变

检测了各期血吸虫病患者外周血单个核细胞体外诱生IL-2的水平、T细胞亚群和抑制性T细胞(Ts)功能。急性组由血吸虫抗原诱生出高水平的IL-2,CD_3~+、CD_4~+和CD_8~+T细胞百分比均显著升高,其中IL-2水平与CD_4~+T细胞百分比呈正相关;慢性和晚期组由血吸虫抗原诱生的IL-2水平显著低于急性组,但明显比对照组高,CD_3~+T细胞百分比和CD_4~+/CD_8~+比值降低,CD_8~+T细胞百分比和Ts功能升高,IL-2水平与CD_8~+T细胞百分比和Ts功能呈负相关,其中晚期组由PHA诱生的IL-2水平明显降低。     

免疫组织化学技术检测Kikuchi淋巴结炎

目的探讨免疫组化在检测Kikuchi 淋巴结炎(KFD)中的意义。方法采用单克隆抗体CD20、CD45RO、CD57、CD68、CD8和多克隆抗体髓过氧化物酶(MPO)对42例KFD活检标本进行HE染色及免疫组化检测。结果淋巴结受损区域由组织细胞、免疫母细胞、浆样单核细胞、小淋巴细胞及核碎片组成。所有病例均出现组织细胞,绝大多数组织细胞共同表达MPO/CD68。免疫母细胞、浆样单核细胞在增生期容易观察到。T细胞呈灶状阳性, 而NK及B细胞呈散在阳性。所有病例中性粒细胞很少或缺乏。结论免疫组化分析可以作为鉴别诊断KFD的重要指标。     

肺癌患者淋巴细胞亚群CD3~+CD4~+和CD3~+CD8~+及其表面受体NKG2D、NKG2A的表达及相关分析

目的观察非小细胞肺癌患者外周血淋巴细胞亚群CD3+CD4+和CD3+CD8+及其表面受体NKG2D、NKG2A的表达水平,分析其表达水平与肺癌肿瘤免疫逃逸的相关性。方法采集34例肺癌患者外周血,按照TNM分期分为早期组(Ⅰ期和Ⅱ期)和晚期组(Ⅲ期、Ⅳ期),用流式细胞仪检测外周血,分析淋巴细胞亚群CD3+CD4+和CD3+CD8+及其表面受体NKG2D、NKG2A的表达及相关性。结果晚期组CD3+CD4+的表达水平较早期组降低,而CD3+CD8+的表达水平升高(P<0.05);晚期组肺癌患者CD3+CD4+NKG2D表达率(6.69±3.58%)高于早期组的表达率(2.38±1.13%),CD3+CD4+NKG2A表达率(2.28±0.88%)低于早期组的表达率(5.46±2.09%)(P<0.01);晚期组肺癌患者CD3+CD8+NKG2D表达率(90.57±2.49%)低于早期组的表达率(93.51±3.19%),CD3+CD8+NKG2A表达率(12.32±4.24%)高于早期组的表达率(7.15±3.30%)(P<0.01)。结论非小细胞肺癌病理分期间淋巴细胞亚群CD3+CD4+和CD3+CD8+表达水平的改变,NKG2D、NKG2A在CD3+CD4+和CD3+CD8+表面的表达失衡,可能是肿瘤免疫逃逸的机制之一。