山莨菪碱减轻兔肺缺血再灌注后肺水肿的实验研究

目的观察山茛菪碱减轻兔肺缺血再灌注后肺水肿的作用并探讨其可能的机制。方法建立在体兔肺缺血再灌注动物模型。10-12周龄健康家兔24只,雌雄不拘,体重2．2～2．6kg,随机分为3组,每组8只。山莨菪碱组于左肺缺血再灌注处理前静脉给予山莨菪碱3mg／kg预处理,对照组进行左肺缺血再灌注处理,假手术组只开胸并套带,不行缺血再灌注处理。各组左肺缺血1h并再灌注3h后结扎并切取左肺下叶,部分行组织学观察,部分通过测量肺湿干重的方法计算肺含水量,余肺组织按试剂盒说明书检测组织髓过氧化物酶（MPO）含量。最后经兔股静脉注射2％伊文思兰（1．5ml／kg）,然后取左肺上叶,比较3组肺血管通透性。结果缺血再灌注处理后,对照组肺含水量、MPO含量及伊文思兰含量分别为（6．6±0．5）g惶干组织、（1．16±0．14）U／g蛋白质和（173±16）μg／g湿组织,明显高于假手术组的（4．3±0．4）g/g于组织、（0．53±0．09）u／g蛋白质和（103±11）μg儋湿组织（P〈0．05）,组织损伤严重并可见严重的肺水肿;山莨菪碱组上述指标水平分别为（5．6±0．4）g／g干组织、（0．82±0.11）U／g蛋白质和（124±18）μg／g湿组织,较对照组明显下降（P〈0．05）,组织损伤轻微,肺水肿程度很轻。结论山莨菪碱通过抑制中性粒细胞生成、降低肺血管通透性等作用显著减轻了肺缺血再灌注后肺水肿的程度。     

改良构建兔心肌缺血再灌注模型的体会

目的 探讨制作兔心肌缺血再灌注模型的改进方法.方法 20只新西兰大白兔,“六线六结”改良法开胸后,随机以“双线双结”法结扎兔冠状动脉左前降支（常规组,10只）和左室支（观察组,10只）30 min,松结实施再灌注2h后,取心测梗死面积.术前及再灌注2h后,检测血肌钙蛋白Ⅰ.结果 两组制模成功率均为70％;两组手术后肌钙蛋白Ⅰ较术前均明显升高,左室支结扎组升高更明显;观察组造成的心肌梗死面积明显大于常规组（P＜0.05）,且变异小.结论 改良法可有效地提高兔心肌缺血再灌注模型构建的成功率.     

用结扎法建立小型猪心肌缺血再灌注损伤模型

目的用结扎法建立小型猪心肌缺血再灌注损伤模型,为研究干细胞移植对小型猪心肌缺血再灌注损伤后的治疗作用提供基础。方法选用中国小型猪25头,结扎冠状动脉左前降支中远1/3处,90 min后松开。在结扎前后及松开时分别进行冠状动脉造影和描记心电图,4周后处死, 进行心肌TTC染色、HE染色和PTAH染色。结果造模成功率为92％(23/25),结扎法阻断冠状动脉血流及重新开放血流血管再通的成功率均为100％。模型猪心肌经病理显微镜检查有坏死心肌。结论结扎法阻断冠状动脉血流及血管再通的成功率均为100％,此法是建立小型猪心肌缺血再灌注损伤模型的较好方法。     

无心跳供体肺移植的研究进展

综述了无心跳供体(non-heart-beating-donor,NHBD)肺移植方面的研究进展,包括NHBD供肺可耐受的缺血时间、针对NHBD供肺的抗凝和溶栓的研究、不同通气模式和吸入药物的影响、供肺保存期间所采取的干预措施如尸体内原位表面冷却以及在保存液中添加各种药物的效果和作用机制等.使用NHBD供肺有望成为缓解供肺短缺的主要解决途径.     

兔心肌缺血再灌注心电图分析

目的 探讨兔心肌缺血40min再灌注40min心电图变化。方法 采用兔缺血再灌注模型10只，观察心电图Ⅰ、Ⅱ导联ST段、T波、QRS波群的变化及心律失常的发生情况。结果 ①ST—T改变：9只在结扎即刻—20min ST段、T波进行性抬高，此后相对恒定；再灌注早期ST段、T被快速回落，8只20min内ST段回落＞50％。②QRS波群改变：5例在缺血早期5min内出现R波增高(急性损伤阻滞)，4只在缺血期出现R波降低或q波加深(其中1只R波降低同时出现终末r’波)。③心律失常发生情况：缺血期1只发生室性期前收缩；再灌注期3只发生室性心律失常。结论 兔急性心肌缺血早期常表现为ST段抬高、T波增高；再灌注早期ST段快速回落，20min内ST段回落＞50％，可作为免冠状动脉再通的指标。     

逐步再灌注对肺再灌注损伤的影响

肺缺血-再灌注损伤多见于肺栓塞溶栓和介入治疗、肺动脉血栓内膜剥脱术、肺移植及体外循环后。本组实验对球囊阻塞法进行了改良，建立了犬肺缺血-再灌注损伤动物模型。并在此模型上应用逐步再灌注，以探索其对肺再灌注损伤的影响。     

凯时注射液对无心跳兔供体肺缺血再灌注损伤的影响

目的研究凯时注射液对无心跳兔肺缺血再灌注损伤的影响,并探讨其可能的作用机制。方法将24只健康新西兰大白兔随机平均分为三组,肝素化后处死,对照组立即予以LPD液灌注及保存,实验组1在处死后1h予LPD液灌注及保存,实验组2将凯时注射液（20ug／L）加入LPD液灌注及保存,两实验组在4℃保存5h后再灌注1h,对照组保存6h后灌注1h;测定经肺氧合后动脉血氧分压值（PaO2）和肺气道峰压值（PawP）,于再灌注结束后取右上肺组织,测其湿重（W）与干重（D）、计算湿／干重比（W／D）、ELISA法检测超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）含量,免疫组化法检测核因子-κB及ICAM-1的表达．并用光学显微镜和透射电子显微镜观察再灌注后肺组织结构的病理变化。结果再灌注45min后,实验组1的PaO2降低最明显、PawP升高最显著,实验组2及对照组的PaO2降低程度及PawP的升高程度均低于实验组1（P〈0．01）;实验组1的（SOD）明显低于对照组及实验组2,实验组1的（MDA）降低程度明显高于实验组2及对照组,实验组1的肺组织（W／D）、NF—κB及ICAM-1的表达高于对照组及实验组2（P〈0．01）,肺组织的病理变化实验组1最重。结论凯时注射液能减轻无心跳兔肺缺血／再灌注损伤,改善肺功能,具有肺保护功能。     

ICAM-1在兔无心跳供体肺移植术后的表达及意义

将30只拟行肺移植术的大白兔随机分三组,每组5对分别为供受体。一组为有心跳供体肺（HBD组）,另两组供体肺分别为无心跳供体热缺血30 min（NHBD-30组）及60 min（NHBD-60组）;另选15只作为对照组。建立兔无心跳供体左单肺肺移植模型,切除的受体左肺作为对照,采用免疫组化法检测供体肺缺血期间和移植再灌注肺组织内皮细胞间黏附分子-1（ICAM-1）表达水平。结果与HBD组、NHBD-30组比较,NHBD-60组左肺移植再灌注后肺泡区、小动脉区ICAM-1表达明显上调（P〈0.05）;与对照组比较,三组右肺冷保存10 h后无显著差异,与NHBD-60组左肺移植再灌注后比较均有显著差异（P〈0.05）。认为无心跳供体肺短时间热缺血未造成严重肺组织损伤,未能触发ICAM-1表达明显上调;ICAM-1表达上调发生于再灌注期间。     

Euro－Collins液加前列腺素E_1与低钾右旋糖酐液低温保存供体兔肺18h的实验研究

目的：对比研究Ｅｕｒｏ－Ｃｏｌｉｎｓ（ＥＣ）液＋前列腺素Ｅ１与低钾右旋糖酐（ＬＰＤ）液的肺保存效果。方法：实验分３组（ｎ＝６），Ａ组为未经保存的正常对照组，Ｂ组和Ｃ组供体兔肺分别用ＬＰＤ液和ＥＣ液＋前列腺素Ｅ１灌洗并低温（１０℃）保存１８小时。３组供体兔肺均在离体兔肺连续再灌注模型上进行检测。结果：ＬＰＤ液保存组供体肺在气体交换、肺动脉平均压、呼吸道峰压、病理改变及再灌注后供体肺含水量等方面均显著优于ＥＣ液＋前列腺素Ｅ１，且部分检测指标近似于正常对照组。结论：ＬＰＤ液显著优于ＥＣ液加用前列腺素Ｅ１的肺保存效果。     

改良法创建兔心房室结缺血再灌注损伤模型

目的　利用对左冠状动脉缺血再灌注损伤模型的改进建立房室结缺血再灌注损伤模型。简化操作 ,不需人工辅助呼吸 ,更接近生理状态具有明显优越性。方法　健康兔 30只 ,雌雄不拘 ,随机分为两组 ,单纯缺血再灌注组(n =15 ,缺血 30min ,再灌注 2 4 0min)正常对照组 (n =15 ,丝线于右冠状动脉下穿过 ,但不结扎 )。结果　 (1)单纯缺血再灌注组血清天冬酸氨基转移酶 (AST)、乳酸脱氢酶 (LDH)、肌酸肌酶 (CK)明显升高 ,氯化 2 ,3,5 三苯基四氮唑(TTC)法测定心肌梗死范围明显 ,免疫组化检测房室结BCL 2基因蛋白高表达。 (2 )假手术组AST、LDH、CK未升高 ,TTC法心肌梗死范围不明显 ,免疫组化检测房室结BCL 2基因蛋白未见表达。结论　本改良法从操作、理论上都证明方法简化和符合病理生理情况 ,房室结缺血再灌注损伤模型是成功的。     

一氧化氮供体对离体大鼠心脏心肌缺血再灌注损伤不同时间的作用

目的：探讨在心肌缺血再灌注过程的不同时期补充一氧化氮（ＮＯ）对心肌损伤的影响。方法：以离体灌流大鼠心脏作为缺血（３０分钟）再灌注（６０分钟）模型。４８只心脏分为４组：Ａ组（ｎ＝１１）仅于再灌注期初２０分钟内给予硝酸甘油（ＮＯ供体）；Ｂ组（ｎ＝１２）于低流量缺血期及再灌注期初２０分钟内均给予硝酸甘油；Ｃ组（ｎ＝１４）为缺血再灌注对照组；Ｄ组（ｎ＝１１）仅于低流量缺血期给予硝酸甘油。测定心功能及肌酸激酶漏出量，同时测定心脏ＮＯ释放量。结果：Ｂ组及Ｄ组缺血后心功能的恢复明显低于Ｃ组和（或）Ａ组。Ｂ组缺血后冠状动脉流量的恢复显著低于Ａ组。Ｂ组及Ｄ组缺血再灌注期肌酸激酶漏出量明显大于Ｃ组及Ａ组。结论：Ｂ组对心肌组织的损伤最重；Ｄ组可损伤心肌细胞；Ａ组对心肌组织无损害。     

通气状态下离体肺保存的实验研究

目的应用兔离体肺再灌注模型研究通气在离体肺保护中的作用。方法10只实验用兔20个单肺,分成A、B两组。A组为通气状态下低温再灌注组;B组为单纯低温再灌注组。分别在保存0、3、6．9、12、15、18h时取保存组织送组织学检查及引流灌注液测血气分析。结果在保存9h时A、B两组组织学结构发现差别,A组优于B组。血气分析示：A、B两组二氧化碳分压及PH无明显差别,氧分压有显著差别。结论在通气状态下低温灌注保存离体肺的效果明显优于单纯低温灌注保存方法。在通气状态下低温灌注保存离体肺的有效时限可达18h。     

电针足三里穴对兔肺缺血再灌注损伤脂质过氧化反应的影响

目的研究电针足三里穴对在体家兔肺缺血再灌注损伤的影响。方法28只新西兰家兔采用在体肺热缺血再灌注损伤模型．随机分四组（n=7）。A组：假手术组。左开胸游离支气管和肺动脉、静脉后维持通气180min。B组：缺血再灌注组，左开胸游离支气管和肺动脉、静脉后阻断左肺门60min．开放再通气120min。C组：阻断左肺门60min后．开放再通气即刻电针足三里穴旁5mm处30 min．继续双肺通气90min。D组：电针足三里穴＋缺血再灌注组，阻断左肺门60min后。开放再通气即刻电针足三里穴30min．继续双肺通气90min。观察并记录各组动物术中平均动脉压和心率的改变及实验结束时肺组织丙二醛（MDA）和髓过氧化物酶（MPO）含量以及肺组织湿/干重比（W/D）和血气变化。结果各组动物相应时间点的心率比较，均无统计学意义（P〉0.05）。自再灌注30min开始，与B组比较。C组平均动脉压显著降低（P〈0．05），D组平均动脉压与B组比较无统计学意义（P〉0．05）。B组肺组织MDA和MPO含量、W／D及PaCO2值均较A组升高．pH和PaO2值显著降低（P〈0．05或P〈0．01）；D组肺组织MDA和MPO含量、W／D及PaCO2值均较B组降低，pH和PaO2值显著升高（P〈0．05或P〈0．01）。结论电针家兔足三里穴可明显抑制肺缺血再灌注损伤时肺组织MDA和MPO的产生，减轻肺水肿的发生，改善血气变化及酸碱失衡．对在体家兔肺缺血再灌注损伤有一定的保护作用。     

肺缺血再灌注细胞模型的建立及Bag-1表达

目的 建立肺缺血再灌注细胞模型并研究BCL-2结合抗凋亡基因(BCL-2 associated anthanogen-1,Bag-1)在肺缺血再灌注中的表达,以期为研究Bag-1在肺缺血再灌注疾病的作用机制提供实验基础。方法 本课题以A549细胞系作为肺缺血再灌注模型的细胞模型,实验分5组,将A549细胞给予不同缺氧时间：0 h、6 h、12 h、18 h、24 h缺氧,再复氧24 h处理后,通过低温、低氧、葡萄糖剥夺建立缺血再灌注细胞模型。通过比较5组细胞活性、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)以及活性氧自由基(reactive oxygen species, ROS)水平,确定建模效果,同时观察Bag在肺缺血再灌注中的表达。结果 不同缺氧时间处理后,缺氧组细胞活性均较正常组细胞活性降低(P<0.01),并随缺氧时间延长细胞活性下降,各时间点间细胞活性存在显著差异(F=85.03,P<0.001)。缺氧组LDH、ROS浓度均较正常组细胞明显升高(P<0.01),各时间点间LDH(F=107.67,P<0.001)、ROS(F=42...     

葛根素对兔脑缺血再灌注损伤的保护作用

脑缺血再灌注损伤是临床上脑血管疾病治疗的关键。葛根素为一种黄酮类药物 ,对脑缺血保护机制的研究主要集中在一氧化氮和自由基方面。本研究主要观察葛根素对脑缺血组织磷脂酶A2 (PLA2 )活性、梗死面积、含水量及病理改变的影响 ,旨在为临床上防治脑血管疾病提供实验依据。1　材料与方法河南医科大学动物实验中心提供健康新西兰大白兔 4 2只 ,雌雄不拘 ,3～ 7个月龄 ,体重 2 .2～ 3.1kg ,随机分为 3组 :(1)缺血再灌注组 18只 ,2 5 %氨基甲酸乙脂溶液 (1g kg)耳缘静脉麻醉后进行气管插管 ,暴露两侧颈总动脉 ,夹闭两侧动脉 2 0min ,造成脑…     

缺血再灌注对在体兔窦房结细胞凋亡影响的研究

探讨缺血再灌注对在体兔窦房结细胞凋亡的影响。取家兔 90只随机分为对照组 ,缺血 10 ,30 ,6 0 ,12 0min组及缺血 10 ,30 ,6 0 ,12 0min再灌注 4h组 ,每组 10只。通过结扎及放松右冠状动脉起始部制作窦房结缺血再灌注损伤模型 ,当达各预定时间点后 ,迅速切取窦房结组织固定 ,用TUNEL法检测窦房结细胞凋亡。结果 :①对照组、缺血10 ,30min组均未观察到明显的窦房结细胞凋亡现象。②缺血 6 0 ,12 0min组及缺血再灌注 4组中共有 6 8.3% (41/6 0 )的兔子窦房结细胞出现不同程度的凋亡现象 ,表明该部分兔子的窦房结动脉起源于右冠状动脉。③缺血 6 0 ,12 0min两组窦房结细胞凋亡率分别为 8.6 %与 16 .1% ,而缺血 10 ,30 ,6 0 ,12 0min再灌注 4h 4组中窦房结细胞凋亡率分别为 2 3.5 %、34.5 %、4 4 .7%与 31.2 %。结论 :缺血再灌注可诱导在体兔窦房结细胞凋亡 ,且随缺血时间延长 ,细胞凋亡率逐渐增加 ;再灌注组细胞凋亡率较相同时间缺血组明显增加 ,表明缺血再灌注损伤介导了窦房结细胞凋亡。     

犬肺原位常温缺血再灌注动物模型的建立及肺保护液的相关研究

目的 深入研究缺血再灌注对移植肺功能损害的发生机制,建立简便易操作的大动物左肺灌注模型,利用此模型探讨低钾右旋糖酐(LPD)液加硝普钠(SNP)对肺缺血再灌注损伤作用研究.方法 选用成年杂种犬12只,随机分为2组:对照组(肺缺血时用LPD液灌洗),实验组(肺缺血时用LPD液加SNP灌洗),建立左肺原位缺血模型.结果 实验组和对照组犬肺循环主肺动脉压力,左、右肺动脉压力以及肺损伤指数,血管壁水肿程度,湿干重比的差异均没有统计学意义(P＞0.05).结论 该动物模型能够较好反映缺血再灌注对犬移植肺功能的损害,为研究缺血再灌注损伤机制和肺保护液的研究提供了一种理想的动物模型.SNP加入至LPD液在肺缺血时局部灌洗没有确切的肺保护作用.     

不同剂量乌司他丁对离体兔肺保护作用的实验研究

目的研究不同剂量乌司他丁对离体兔肺的保护作用。方法选择36只新西兰大白兔作为研究对象,采用随机分组的方法,分为A、B、C 3组,各12只。A组给予UW液,为对照组;B组给予UW液+乌司他丁2万U/kg;C组给予UW液+乌司他丁5万U/kg。切取实验兔整体心肺作为离体心肺模型,分别在2h末和4h末,取肺部分标本做电镜分析,4h末取右肺检测测肺气道压力(Paw)、肺湿/干重比(W/D),用负压吸引真空试管取左心房血液做血气分析。结果 3组4h后Paw、W/D、二氧化碳分压(PCO2)、氧分压(PO2)比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。B组、C组Paw、W/D、PCO2、PO2与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01);C组上述指标与B组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。超微结构分析:B组和C组的Ⅰ型细胞形态稍好于A组,C组稍好于B组。结论乌司他丁对离体肺的保护具有显著作用,大剂量乌司他丁对离体兔肺保护作用更明显。     

大鼠脑缺血再灌注模型的建立

脑血管病具有发病率高、致残率高、死亡率高、复发率高和并发症多的特点,是中、老年人致死和致残的主要疾病.缺血性脑血管病约占全部脑血管病人的70%～80%.