胶体金试剂盒快速诊断鼠疫的现场应用

胶体金标免疫结合试验(GICA)是在酶免疫结合试验的基础上发展起来的一种固相标记免疫检测新技术,因其检测速度快、灵敏度高、特异性好、易于操作,适合野外现场检测及突发疫情的快速判定[1-3].     

免疫胶体金渗滤法快速诊断试剂盒对包虫病患者血清的检测

囊型包虫病又称囊型棘球蚴病 ,是人类感染细粒棘球绦虫的幼虫 (细粒棘球蚴 )所致的一种慢性寄生虫病 ,棘球蚴可以寄生在人体的任何部位。医学影像学是目前诊断本病的可靠方法。血清抗体的检测也有一定的诊断价值。我院从1999- 2 0 0 3年共有 2 4例经彩超诊断和手术证实的囊型包虫病患者 ,现将采用新疆兆丰生物技术工程公司生产的免疫胶体金渗滤法———快速诊断试剂盒检测这些患者血清的结果见表 1:经过统计分析在 2 4例经手术证实的包虫病人中 ,用本试剂进行血清学检测的敏感度为 5 0 %。其中男性患者血清检测的敏感度较高 ,为 6 2 .5 % ,…     

检测鼠疫抗体胶体金试剂盒的应用评价

对青海省地方病预防控制所研制的检测鼠疫F1抗体的胶体金免疫层析（GICA）试剂盒进行评价，并对青海省鼠疫疫源地内的人及动物血清进行检测，取得了良好效果，现报道如下。     

胶体金免疫层析测试条快速诊断鼠疫应用研究

目的观察胶体金免疫层析测试条快速诊断鼠疫的效果。方法用胶体金免疫层析抗体(抗原)测试条与鼠疫间接血凝试验(IHA)/反向间接血凝试验(RIHA)两种方法平行检测鼠疫的抗体(或抗原)。结果通过对实验感染动物、青海鼠疫疫源地内鼠疫患者(尸体)及染疫动物等396份样品的检测,两种方法符合率为100%。结论胶体金免疫层析法操作简单、方便、快速,适用于现场应用和鼠疫的快速诊断。     

胶体金标法快速诊断鼠疫的现场应用

鼠疫是一种古老的疾病，它传染性强，传播速度快，病死率高，在世界上曾有过3次大流行，造成数亿人死亡，世界卫生组织将鼠疫重新列为流行的20种传染病之一。只有实验室具备快速、准确、敏感、特异的诊断方法，方能适应在鼠疫监测现场、疫情应急处理等方面的要求。     

金标免疫渗滤法诊断试剂盒诊断血吸虫病的价值研究

目的：评价金标免疫渗滤法诊断试剂盒（DIGFA－kit)用于血吸虫病血清流行病学调查的价值。方法：采用DIGFA与ELISA单盲平行检测各期血吸虫病病人血清,非流行区人群血清,疫区人群血清和血吸虫病已控制地区人群血清共2304份。结果：DIGFA检测血吸虫抗体的敏感性为96．8％,对非流行区健康人群的特异性为100％,该法检测疫区居民血清508份,抗体阳性检出率为35．6％,在Kato法粪检阳性的81人中,其中抗体阳性79人,阳性符合率为97．5％;检测血吸虫病已控制地区人群血清,抗体阳性率为4．6％,根据DIGFA的敏感性和对非流行区人群的特异性,计算其Youden's指数为0．926,上述各项结果与ELISA比较,差异无显著性（P＞0．05）,结论：DIGFA与ELISA有相似的敏感性和特异性,且方法简便,快速,胶体金标记物制备容易,试剂稳定,运送方便,在现场和临床诊断更具有优越性。     

金标免疫渗滤法诊断试剂盒诊断血吸虫病的价值研究

目的　评价金标免疫渗滤法诊断试剂盒（DIGFA-kit）用于血吸虫病血清流行病学调查的价值。方法　采用DIGFA与ELISA单盲平行检测各期血吸虫病病人血清、非流行区人群血清、疫区人群血清和血吸虫病已控制地区人群血清共2304份。结果　DIGFA检测血吸虫抗体的敏感性为96.8%,对非流行区健康人群的特异性为100%;该法检测疫区居民血清508份,抗体阳性检出率为35.6%,在Kato法粪检阳性的81人中,其中抗体阳性79人,阳性符合率为97.5%;检测血吸虫病已控制地区人群血清,抗体阳性率为4.6%;根据DIGFA的敏感性和对非流行区人群的特异性,计算其Youdens指数为0.926。上述各项结果与ELISA比较,差异无显著性（P>0.05）。结论　DIGFA与ELISA有相似的敏感性和特异性,且方法简便、快速,胶体金标记物制备容易,试剂稳定,运送方便,在现场和临床诊断更具有优越性。     

鼠疫胶体金法快速诊断试剂盒的研制

目的 研制一种敏感、特异、快速并适用于非专业人员的鼠疫胶体金法快速诊断鼠疫FI抗体的试剂盒。方法 采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒，标记金黄色葡萄球菌A蛋白作为探针，同时用鼠疫多糖抗原致敏硝酸纤维素膜，共同组装成基于免疫层析原理的胶体金法快速诊断盒。结果 间接血凝法检测阳性300份血清标本，胶体金法检测全部为阳性，间接血凝法检测阴性100份血清标本，胶体金法检测全部为阴性，两种方法符合率100％；并且鼠疫胶体金法快速诊断盒不与假结核耶尔森氏菌等相关细菌的免疫血清发生交叉反应。结论 鼠疫胶体金法快速诊断盒具有较好的特异性和敏感性，并且具有更简便快速的优点，适合基层单位现场使用。     

胶体金免疫层析法快速诊断鼠疫的实验研究

目的建立一种快速、简易的检测鼠疫F1抗原的胶体金免疫层析法(GICA).方法采用直径为20nm胶体金颗粒,标记F1单克隆抗体,并将标记物以6μL/cm喷于玻璃纤维;将另1株F1单克隆抗体与羊抗鼠IgG以1μL/cm喷线固定于硝酸纤维素膜上,装配后以4mm/条切割制成免疫层析检测试条.分别用粗制F1抗原和EV菌对该试纸条的敏感性进行测定,同时用44株鼠疫近缘菌及昆明小鼠、黄胸鼠、褐家鼠、大足鼠的正常血清等标本进行特异性检测.结果本试纸条可在15min之内完成实验,检测粗制F1抗原的浓度可达0.5ng/mL,最小检出EV菌菌量为10万个;本方法的特异性为100%.结论 GICA检测鼠疫F1抗原特异性强、灵敏度高、简便快速,无需特殊仪器设备,有广泛应用价值.     

胶体金免疫层析法诊断鼠疫的特异性试验

目的研究胶体金免疫层析法用于鼠疫快速诊断的特异性。方法采用胶体金免疫层析测试条和鼠疫反向间接血凝试验(RIHA)平行检测。结果检测鼠疫菌F1抗原具有很强的特异性,不与包括小肠结肠炎和假结核耶尔森等其他细菌发生交叉免疫反应。结论该方法简便、快速、敏感,适合现场鼠疫监测。     

鼠疫菌快速检测和疾病快速诊断的研究进展

鼠疫是由鼠疫耶尔氏菌引起的一种致死性和传播性均很强的细菌性疾病，可引起啮齿动物（如大鼠、小鼠、野生动物）间的传染病，自然情况下，人间鼠疫流行是由寄生于感染鼠疫的啮齿动物的蚤类通过叮咬而将鼠疫菌传染给人，使人发生腺鼠疫。世界上有70多个国家每年都有发生鼠疫局部暴发流行的报道。尽管鼠疫发现已经有一个多世纪了，临床疑似患者的实验室诊断仍然存在不少困难，尤其是适合基层快速筛查的方法不多。不能对该病进行早期诊断治疗，是贫困及边远地区人群传播和死于该病的主要原因。     

斑点金免疫渗滤法检测鼠疫菌的方法研究

目的　建立一种简便、快速的胶体金免疫渗滤法 (DIGFA)用于鼠疫菌的快速诊断。方法　用柠檬酸钠还原法制备 10nm的胶体金标记鼠疫多价抗体 ,制备成鼠疫抗体金探针。结果　鼠疫胶体金渗滤法对鼠疫FI抗原的最低检出限为 10ng/ml;对EV76的最低检出限为 2 .4× 10 5cfu ;除 4株鼠疫菌外 ,不与包括小肠结肠炎和假结核耶尔森菌等其他细菌发生交叉免疫反应 ;整个反应过程在 10min内完成。结论　该方法简便、快速、特异、敏感 ,不需任何特殊仪器设备 ,适合于现场鼠疫监测。     

胶体金免疫渗滤法快速检测幽门螺杆菌血清抗体的研究和应用

目的建立一种简便、快速、准确的检测胃幽门螺杆菌(H.pylori)抗体的新型血清学诊断方法。方法用胶体金标记技术与渗滤法相结合,建立了快速胶体金免疫渗滤法(DIGFA),与ELISA对比检测145份H.pylori感染血清,并与病理学检查对比检测108份H.pylori血清。做阻断试验和IgG标准品最小蛋白含量的检出观察,对其敏感性、特异性做了分析并调查了216例不同年龄组的人群感染率。结果本法与ELISA相比,两者符合率为95.1％;与病理组织染色检查比较,两者符合率为88.8％。DIGFA可检出IgG标准品的最小蛋白量为10μg     

鼠疫F1单克隆抗体的胶体金标记及斑点渗滤法检测F1抗原方法的建立

目的建立斑点渗滤法快速检测鼠疫F1抗原的方法。方法粗提鼠疫F1单克隆抗体,在pH8.2下对其进行胶体金标记,以兔抗F1抗体与金标记的单克隆抗体建立斑点渗滤快速检测鼠疫F1抗原的方法,并对该方法进行特异性与敏感性试验。结果成功建立斑点渗滤法快速检测鼠疫F1抗原的方法,该检测可在15min内完成,敏感性为3.12mg/L,对假结核、小肠结肠炎等近缘菌的特异性实验未发现交叉反应。结论该方法可作为鼠疫快速诊断的手段,但实验敏感性有待进一步提高。     

胶体金标法快速检测鼠疫F1抗体的现场应用

目的了解胶体金标快速检测试剂盒检测鼠疫FI抗体的现场应用。方法按鼠疫快速诊断盒(胶体金标法)的使用说明进行,并与间接血凝微量法(IHA)进行比较。结果检测了来自云南家鼠鼠疫流行区和非流行区血清共335份,检出腺鼠疫病人血清阳性32份,与IHA法结果一致。结论胶体金标鼠疫FI抗体快诊盒诊断鼠疫简便、快速、特异、敏感,便于现场鼠疫监测应用。     

全血快速诊断包虫病试剂盒的初步研究

为建立一种快速、简便、可靠的包虫病诊断方法,给现场流行病学调查提供一个有效的诊断试剂盒,在已建立的检测包虫病组合抗体的血清金标免疫渗滤法的基础上,以土豆凝集素与全血混合达到快速凝血的目的,并对170例临床标本做诊断实验,显示该法对临床确诊的包虫病患的阳性检出率为89．5％（34／38）,对40份流行区体检全血血样阳性检出率为2．5％（1／50）,对52份非流行区健康体检全血血样阳性检出率为0（0／52）,与40例其它非包虫性肝肺占位疾病（10例肝囊肿、10例肝血管瘤、10例肝癌、6例肺结核、4例肺癌病人）全血血样无交叉反应。经检验,全血DIGFA与血清DIGFA、ELISA法检测效果无统计学差异（P＞0．05）。包虫病全血快速诊断试剂盒具有高灵敏度和特异度以及操作简便和快速的优点。     

检测鼠疫抗原金标层析试剂盒的研制及应用

目的建立一种敏感、快速、简便的检测鼠疫抗原的诊断方法。方法以胶体金标记纯化的鼠疫单克隆抗体(M cAb),在硝酸纤维素膜上检测线处包被M cAb,组装成检测鼠疫抗原层析试纸条(盒)(G ICA)。在试剂盒的样品孔内滴加被检材料100μL,观察金标抗体释放后NC膜上检测线和质控线的反应情况,检测线和对照线同时出现红色条带判为阳性,仅对照线出现红色条带判为阴性,对照线未出现条带为无效试验。结果G ICA可检出鼠疫活菌10万菌体/mL,检出F1抗原1ng/mL,鼠疫实验动物脏器悬液检测阳性,鼠疫患者(死者)及自毙动物在收到检材后半小时内出现阳性定性结果。结论金标层析诊断试剂条达到检测鼠疫抗原敏感特异、使用简便、诊断快速的效果。     

特异,快速,简便,经济的淋病检测试剂盒的研制

本研究成功地制备了多株淋球菌主要外膜蛋白的单抗,并以胶体金标记,制备兔抗外膜蛋白多抗。在硝酸纤维素膜条上下打点包被多抗,加经处理的被检样品和胶体金标记的单抗,直接显色,与细菌培养法一同检测标本３１２例,两法检测结果符合率为９９．３６％。结果表明两者特异性,灵敏度基本一致,本试剂稳定性,重复性好,且操作简便,不用仪器,１５分钟内即可得到结果。     

快速诊断鼠疫菌方法的研究

本方法用ＮＳ裂解液，通过琼脂糖凝胶电泳快速检测鼠疫菌和异性质粒ＤＮＡ，用于对鼠疫的诊断，该方法简便，快速，特异性强，诊断阳性率１００％，对非典型鼠疫菌尤为适用。     

胶体金免疫层析法检测鼠疫腐败材料

目的评价胶体金免疫层析法(G ICA)对鼠疫腐败材料检测效果。方法将感染的动物脏器,分别置于室温(25℃)和37℃下,在保存的不同时期,用胶体金试纸条进行检测,细菌培养和反向血凝(R IHA)同步检测。结果感染材料,保存300d后,G ICA、R IHA检测均为阳性,20天后细菌培养为阴性;正常材料,保存300d后R IHA检测为阳性,而G ICA检测为阴性。结论对鼠疫腐败材料的检测G ICA优于R IHA和细菌培养,可广泛应用于现场材料的检测。