杭菊花茎尖组织培养初探

为解决杭菊的品种退化问题,以大白菊,小白菊,黄菊三个品种类型的茎尖为外植体,接种在不同ＰＨ的ＭＳ培养其及不同激素配比的培养基上。结果表明,ＰＨ＝５．８－６．４是外植体诱愈率在８０％以上;外体植接种在不同激素与比的ＭＳ培养基上,ＮＡＡ为０．２ｍｇ／Ｌ时ＫＴ的诱愈率明显高于６－ＢＡ。诱导生根的适宜培养基是１／２ＭＳ＋ＮＡＡ０．２ｍｇ／Ｌ。     

安徽药菊茎尖组织培养技术的研究

目的 :研究安徽药菊茎尖组织培养技术 ,建立最佳培养条件。方法 :取药菊的茎尖 0.5mm左右 ,分别在不同的培养基中培养 ,诱导其为完整植株。结果与结论 :以MS+6-BA 2mg·L^-1+NAA 0.2mg·L^-1为茎尖诱导培养基较好 ,40d后 ,芽诱导率达 80%以上 ;以MS+6BA2mg·L^-1+NAA0.5mg·L^-1为芽增殖培养基 ,25～30d后 ,芽增殖系数达 4～7倍 ;生根培养基以MS +NAA 0.5mg·L^-1为宜 ,生根率 100% ,根系粗壮 ,移栽易于成活。     

蛇足石杉茎尖组织培养研究

目的：研究蛇足石杉茎尖组织培养条件,建立组织快繁体系。方法：通过添加不同浓度的蔗糖及植物激素改良基础培养基,考察其对蛇足石杉茎尖诱导丛生芽和GGB（绿色小体）,GGB的分化以及丛生芽生根的影响。结果：诱导茎尖发生丛生芽和GGB的最适宜培养基分别为MS+2%蔗糖和MS+4%蔗糖;将GGB转接在MS+2%蔗糖培养基中,平均每团GGB可分化出16株丛生芽;在改良MS+10 μmol·L-1IBA生根培养基中,全部丛生芽再生健壮的根系,再生植株的移栽成活率可达80%。HPLC检测表明,组织快繁的蛇足石杉植株具有石杉碱甲合成能力,其含量为60740±3075 μg·g-1,与野生植株相当。结论：初步建立蛇足石杉组织快繁体系,扩大了蛇足石杉种质资源,并为石杉碱甲的合成途径提供了研究基础。     

金银花组织培养外植体灭菌方法的研究

近年来金银花的需求量不断上升,价格呈现攀高的趋势,金银花种苗价格也不断升高。大田生产中大多通过扦插和分根等方式进行繁殖,但品质却不断下降。如何快速得到大批量、高品质和低成本的种苗,组织培养是最好的方式之一。本实验通过使用不同浓度的碱化乙醇和0.1%的氯化汞进行灭菌处理,通过试验发现经质量分数为0.1%氯化汞7 min处理后灭菌效果最佳,成活率能达到88.3%,污染率低至8.3%。同时,经过初步清洗处理后接种于含0.1%纳米银分子的培养基中的外植体更是达到了98.3%的灭菌率,成活率高达96.7%。这种低成本高效的灭菌方式有利于脱毒苗的大批量生产,为大田生产提供了便利条件。     

低能离子束注入芦荟茎尖的组织培养研究

芦荟Alee属百合科芦荟属多年生肉质常绿草本植物，芦荟属植物含有多种药用成分，其中主要是慈酿类物质和多糖。(中国药典》一部2(拟)年版记载，中药芦荟胶具有清肝热、通便之功效川。目前，有关芦荟的繁殖和组织培养等已有许多研究报道，但关于芦荟遗传改良方面的报道较为少见     

天师栗茎芽组织培养研究

目的 研究其组培技术,为工厂化育苗提供依据。方法 采用不同浓度的MS无机盐,不同浓度的MS有机成分,对其进行生根和生茎芽、叶的效果研究。结果 1/2改良MS无机盐 肌醇100mg/L 烟酸0.5mg/L 盐酸吡哆醇0.5mg/L 盐酸硫胺素0.1mg/L 6-BA1mg/L 甘氨酸2mg/L IBA0.5mg/L 蔗糖2% 琼脂0.8% VC0.1mg/L对愈伤组织形成及茎芽分化生长效果显著;1/8改良MS无机盐 肌醇100mg/L 烟酸0.5mg/L 盐酸吡哆醇0.5mg/L 盐酸硫胺素0.1mg/L 甘氨酸2mg/L 蔗糖1% 琼糖1% 琼脂0.7% 活性碳600mg/L IBA0.5mg/L VC0.1mg/L 6-BA0.2mg/L对生根效果显著。结论 以上结果分别为天师栗茎芽组培中愈伤组织形成与茎芽生长和生根的适宜培养基配方;愈伤组织形成与茎芽生长和生根的生长素浓度与细胞分裂素浓度比为0.5:1mg/L和0.5:0.2mg/L较合适;高无机盐浓度抑制生根,1/8MS改良无机盐浓度生根最佳。Vc可消除组培中因茎芽分泌的酚类氧化物在培养基中过量积累,而对茎芽和根生长的不良影响。茎芽和根的分化在微酸至中性培养基中效果较好。     

曲茎石斛组织培养研究

目的:提供药用石斛可脱瓶移栽的粗壮试管苗,以提高移栽的成活率。方法:采用种子苗与茎段外植体苗不同培养基的双向培养,并对二者的生长特点进行比较。结果:外植体苗繁殖快,粗壮,但需原植株量大,种子苗生长周期长,细弱,但培养基数高。结论:二者结合培养对快速繁殖,提高成活率有利。     

天麻的组织培养及快速繁殖

目的：利用组织培养方法快速繁殖成米麻作为种麻,为寻找出一简便可行的快繁天麻种麻的新途径提供理论依据。方法：天麻块茎或茎尖无菌离体培养,米麻块茎诱导培养基为1／2MS＋6－BA 1mg/L NAA0.5mg/L＋香蕉50mg/L;箭麻茎尖诱导培养基为1／2MS＋6－BA2mg/L NAAO.2mg/L。结果：小米麻经50d无菌培养后开始生长出新米麻,70d后原小米麻块茎上生长出多个分枝的新米麻;箭麻茎尖超过140d组织培养,茎尖分化、诱导形成原球茎,超过160d培养原球长大并开花。结论：天麻可以用组织培养方法快速繁殖成米麻作为种麻。     

佛手茎尖微嫁接技术研究

目的探讨佛手茎尖微嫁接技术,为佛手无病苗木的培育奠定基础。方法黑暗条件下培养柠檬实生苗用作砧木,以佛手茎尖为接穗,采用倒"T"字形法进行茎尖微嫁接试验,并对影响嫁接成活率的因素进行研究。结果成功获得了佛手茎尖微嫁接苗,并优化了微嫁接的条件:选取苗龄为14d的柠檬实生苗为砧木,嫁接成活率较高;以带4个叶原基的佛手茎尖为接穗,效果较好,嫁接成活率可达65.2%;茎尖微嫁接后,切口外缠parafilm膜,能明显提高成活率。结论建立了佛手茎尖微嫁接的方法,获得了嫁接成活苗。     

喜树茎尖组织培养与植株再生

目的探索喜树的人工快繁。方法以喜树幼苗的茎尖作为外植体，培养在附加不同激素的培养基上。结果以B5培养基附加6～BA 0．2mg／L。，IBA 0．05mg／L和AS(afenine sulfate，10mg／L)对丛生芽的诱导与增值效果最佳，而附加IBA 0．5mg／L，KT 0．1mg／L，和AS 10mg／L的生根效果最佳。试管苗移栽到珍珠岩-土壤(3：7)的基质中生长良好，成活率高达96％。结论为喜树的开发利用提供了一条新途径。     

湖北麦冬茎尖离体培养技术研究

目的探讨湖北麦冬种质改良的途径。方法利用茎尖分生组织离体培养技术再生植株。结果茎尖外植体愈伤组织诱导,不定芽分化与增殖的适宜培养基为MS BA(1.0~2.0)mg/L IBA(0.1~0.3)mg/L;生根适宜培养基为1/2MS NAA0.1或IBA0.1~0.3或IAA0.3。结论初步试验湖北麦冬茎尖再生植株生产性状优于当地品种。     

皖贝母茎尖玻璃化法超低温保存研究

目的:建立皖贝母茎尖超低温保存体系.方法:采用玻璃化法超低温保存技术,4℃低温预处理1周,2～3mm的茎尖经0.4 mol·L-1蔗糖MS液体培养液预处理3d,60％ PVS2装载20 min,100％ PVS2冰浴脱水60 min,换入新鲜的0℃PVS2溶液后迅速投入液氮保存,40C水浴解冻1 min后用1.2 mol·L-1蔗糖培养液洗涤2次,每次10 min,接种在恢复培养基上,20℃暗培养2周,转入正常光下培养,1个月后统计再生率.利用PCR技术检测再生植株的遗传稳定性.结果与结论:TTC法检测茎尖冻存后存活率为79.9％,在恢复培养基上茎尖再生率为52.3％.从基因组DNA检测结果表明,再生植株其遗传稳定性未发生改变.     

黄独的茎尖培养和病毒检测

目的 以黄独为试材,研究不同因素对黄独茎尖培养的影响,以期找到适合黄独茎尖分化成苗的培养基和脱毒检测方法 .方法 采用植物组织培养的方法 进行茎尖培养,采用症状学法、指示植物法和RT-PCR法对茎尖脱毒植株进行病毒检测.结果 黄独茎尖的最佳消毒方式是先用70%酒精消毒30 s,再用0.1%HgCl_2消毒12 min;在37℃中热处理7 d后再切离0.5 mm茎尖效果较佳.茎尖再生芽增殖的最佳培养基是MS+KT 2 mg/L+NAA 0.5mg/L;黄独茎尖再生芽的最适生根培养基为1/2MS+NAA 0.5 mg/L;黄独脱毒苗最好的移栽基质为珍珠岩-蛭石(2∶1);RT-PCR法是检测黄独马铃薯Y病毒(PVY)感染的主要方法 ,通过病毒学检测,其平均脱毒率为86.5%.结论 首次建立了黄独茎尖脱毒培养的体系,为黄独脱毒苗的快速繁殖及工厂化生产奠定了技术基础.     

茎尖微嫁接技术脱除佛手病原体的研究

目的采用茎尖微嫁接技术脱除佛手病原体,为无病苗木的培育奠定基础。方法采用茎尖微嫁接技术获得了佛手微嫁接成活苗,应用PCR技术对其进行黄龙病病原进行检测,同时考察了茎尖大小对嫁接成活率和脱病原体率的影响。结果经PCR检测,微嫁接苗脱除了黄龙病病原;茎尖大小对嫁接成活率和脱病原体率的影响较大,带4个叶原基的茎尖嫁接成活率最高,达60.00%,脱病原体率为85.71%,带2个叶原基的茎尖,脱病原体率达100%,但嫁接成活率低。结论茎尖微嫁接技术可以脱除佛手病原体,综合考虑嫁接成活率和脱病原体的效果,宜选用带3～4个叶原基的茎尖进行脱病原体苗的生产。     

茎尖浸渍法诱导多倍体的实验探索

目的 建立茎尖浸渍法诱导多倍体的实验方法,探寻幼苗能够倒置的载体,自制满足实验条件的诱导器.方法 以西林瓶为种植诱导对象载体,待幼苗长出瓶口1～2 cm时,倒置于培养皿和透明胶带制成的诱导器内.诱导.结果 西林瓶作为诱导对象载体,能满足倒置而不会使土壤溢出,保证茎尖完全浸渍于诱导液内,自制诱导器能满足诱导液浓度稳定、透...     

金钗石斛的茎段组织培养与植株再生

目的：为了有效加速贵重药用植物金钗石斛的人工繁殖。方法：以带侧芽的金钗石斛茎段作外殖体；不同种类的培养基、同种培养基用于不同配比的激素进行培养，结果：以MS培养基附加6－BA（0.5mg/L）、NAA（0.2mg/L）诱导分化最佳，附加6－BA（3．0mg/L）、NAA（0．5mg/L），增殖最适，附加IBA（0．3mg/L）、NAA（0．1mg/L）对生根最适（生根率95％）。生根小苗在以椰渣，碎火山石块，碎砖块（1：1：1）的基质中覆以蕨长势良好，结论：为确保金钗石斛资源的保持和可持续利用提供有效途径。     

老鸦瓣芽茎组织培养初步研究

目的 建立老鸦瓣芽茎愈伤组织诱导及丛生芽增殖体系。方法 以老鸦瓣冷藏芯芽产生的芽茎为外植体,MS为基本培养基,考察不同质量浓度6-BA、NAA对愈伤诱导、分化及丛生芽增殖的影响。结果 芽茎诱导愈伤的最佳培养基为MS＋6-BA 0.5 mg/L＋NAA 2.0 mg/L,愈伤诱导率78.54%,诱导出的愈伤组织在原培养基上继代培养增殖后即可进行芽分化;愈伤分化不定芽最佳培养基为MS＋6-BA 2.0 mg/L＋NAA 0.2 mg/L,芽诱导率为66.21%;丛生芽增殖培养基为MS＋6-BA 0.5 mg/L＋NAA 0.2 mg/L,增殖系数2.48。结论 筛选出芽茎诱导愈伤、分化不定芽及丛生芽增殖的培养基,初步建立了老鸦瓣芽茎组织培养体系。     

佛手茎尖玻璃化超低温保存和植株再生

目的 为佛手种质资源的保存提供一条新途径.方法 对佛手茎尖进行了玻璃化超低温保存,并对保存后的茎尖进行微嫁接试验,获得再生植株.结果 佛手茎尖在含5%DMSO和5%蔗糖的MS培养基上预培养48h后,切取3～4 mm的茎尖,室温(25℃)下装载液(60%PVS_2)预处理30 min,0℃下玻璃化液PVS_2处理80 min,投入液氮保存24 h后取出,在40℃水浴快速化冻,室温下分别用1.2 mol/L蔗糖和MT基本培养基洗涤2次,每次10 min.保存后的茎尖经TTC法检测,成活率达81.25%;将茎尖嫁接到黑暗培养基的砧木上,再生率可达52.94%,且再生植株生长和分化正常,经PCR检测不含黄龙病病原.结论 玻璃化超低温保存方法可用于佛手种质资源保存.     

山茱萸组织培养技术的研究

目的:研究山茱萸茎段组织培养技术,为山茱萸优良株系的快繁建立最佳条件。方法:选择山茱萸优良母株的茎段为外植体,分别在不同的培养基中培养,形成大量丛芽,再诱导单株苗生根成为完整植株。结果与结论:茎段在WPM+6-BA2.0mg·L^-1+ZT0.1mg·L^-1+NAA0.1mg·L^-1培养基上,能形成大量丛芽;在WPM+6-BA1.0mg·L^-1+ZT0.1mg·L^-1+GA30.5mg·L^-1+NAA0.1mg·L^-1中继代培养,可获大量壮苗;切取单株苗在1/2 MS+6-BA0.1mg·L^-1+IBA1.0 mg·L^-1培养基中能生根,移栽并成活。     

罗汉果试管苗茎尖玻璃化法超低温保存及植株再生

目的 为罗汉果Siraitia grosvenorii种质资源的保存提供一条新途径.方法 以继代15d生长健壮的罗汉果试管苗0.8～1cm长嫩梢进行预培养,剥取2～3 mm茎尖,25℃下60%PVS_2装载,再用100%PVS_2在0℃脱水处理,更换新鲜100%PVS_2后投入液氮保存24 h,化冻,用MS+1.2 mol/L蔗糖的液体培养基洗涤,滤纸吸干后接种于MS+1.0 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA+0.1mg/L GA_3+0.8%琼脂粉+45 g/L蔗糖的恢复培养基上,25℃暗培养7 d,转入正常光下培养.再生苗生根培养基为1/2 MS+0.2 mg/L NAA+30 g/L蔗糖.结果 嫩梢于MS+0.7 mol/L蔗糖的培养基上预培养3 d,茎尖装载40 min,脱水50 min,液氮保存后于40℃水浴中快速化冻,洗涤40 min,恢复培养1周时存活率最高可达100%,30 d时再生率最高可达78.33%.再生苗转入生根培养基可形成完整植株.结论 罗汉果种质资源的玻璃化法超低温保存操作简单、成活率高、再生植株正常.