氯沙坦和辛伐他汀对糖尿病大鼠BAX／BCL-2 mRNA的影响

目的：探讨氯沙坦和辛伐他汀对单肾切除糖尿病大鼠肾脏凋亡相关基因BAX／BCL-2mRNA的影响。方法：单肾切除SD大鼠分为对照组（C组）、糖尿病模型组（D组）、辛伐他汀治疗组（S组）、氯沙坦治疗组（L组）。采用实时荧光定量PCR法检测各组大鼠治疗2、10周肾皮质中BAX／BCL-2的mRNA表达。结果：比较各组BAX／BCL-2比值，2周S组明显高于其他组，10周D组明显高于其他组，D组10周较2周明显升高，S组10周较2周明显降低。结论：BAX／BCL-2在糖尿病肾病发生发展中起一定的作用。氯沙坦可能部分通过降低BAX／BCL-2比值，抑制糖尿病肾病晚期细胞凋亡，发挥肾脏保护作用。辛伐他汀对BAX／BCL-2比值有双相调节作用，早期可升高，晚期可降低。     

荧光定量PCR法对糖尿病大鼠肾脏BAX基因表达的检测

目的:对单肾切除糖尿病大鼠肾脏中BAX基因mRNA的拷贝数进行精确定量,以探讨糖尿病肾病的发病机制。方法:以SYBRGreenI作为定量检测中荧光染料,采用实时荧光定量PCR法,对单肾切除糖尿病模型组和单肾切除对照组大鼠肾脏中BAX基因的转录水平进行检测。结果:糖尿病模型组中BAX转录拷贝数明显高于对照组。结论:糖尿病大鼠肾脏中存在BAX基因的转录异常,细胞凋亡亢进可能参与糖尿病肾病的发生发展。     

大鼠移植肾组织急性排斥反应中Fas基因的表达与细胞凋亡的关系

目的 :探讨肾移植急性排斥反应大鼠移植肾组织中Fas基因的表达与细胞凋亡的关系。方法 :分别取4 6只SD成年大鼠和 4 6只Wistar成年大鼠 ,将SD大鼠左肾原位移植至Wistar大鼠左肾区 ,建立大鼠同种异体肾移植模型 ,以右侧肾为正常对照 ,应用免疫组织化学方法检测移植肾组织Fas基因的表达 ,应用原位DNA片段未端标记法检测移植肾组织细胞凋亡状态。结果 :正常大鼠肾Fas基因主要呈弱阳性或阴性表达 ,而移植肾Fas基因表达显著增强 ,且与肾曲小管细胞凋亡指数呈显著的正相关 (rs=0 .5 1 2 ,P <0 .0 0 1 )。结论 :大鼠移植肾Fas基因的过量表达可引起肾组织细胞的凋亡 ,导致移植肾结构的破坏和功能的丧失     

辛伐他汀对糖尿病大鼠肾间质结缔组织生长因子和α-平滑肌肌动蛋白表达的影响

目的:探讨非降脂剂量的辛伐他汀对糖尿病大鼠肾间质结缔组织生长因子(CTGF)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响.方法:60只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(C组),糖尿病组(D组),糖尿病辛伐他汀干预组(DS组).模型建立后,第6周及第12周时各组处死大鼠10只,称取体重、肾重,测定血糖(Glu)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)、甘油三酯(TG)、肌酐(SCr),留取尿液测定24 h尿白蛋白排泄量(UAE),并用免疫组化方法检测肾间质结缔组织CTGF、α-SMA.结果:6周及12周时各组间SCr、 LDL、 HDL及 TG相比无显著性差异(P>0.05);6周时DS组的肾间质CTGF、α-SMA表达水平明显少于D组(P<0.05),但与C组相比无显著性差异(P>0.05).12周时DS组的肾间质CTGF、α-SMA表达水平明显少于D组(P<0.05),但高于C组(P<0.05). 结论:非降脂剂量的辛伐他汀可能通过抑制CTGF的表达和减少肾间质肌成纤维细胞的数量延缓肾小管间质纤维化进展.     

辛伐他汀对糖尿病大鼠肾肥大指数的影响

目的　探讨辛伐他汀对糖尿病大鼠肾肥大指数的影响。方法　将实验动物随机分为正常对照组 (A组 )、糖尿病组 (B组 )及辛伐他汀治疗观察组 (C组 )。第二、四、六周分别取各组 5只大鼠收集标本 ,检测血糖、血胆固醇及肾肥大指数的变化。结果　辛伐他汀观察组血胆固醇水平、肾肥大指数均低于糖尿病组。结论　辛伐他汀可以降低糖尿病大鼠肾肥大指数 ,对糖尿病肾脏病变有保护作用。     

氨氯地平对2型糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡及bax和bcl-2表达的影响

目的探讨钙通道阻滞药氨氯地平(amlodipine)对实验性2型糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡及调控基因bax,bcl-2的影响,以及其防治糖尿病肾病的可能机制.方法通过高糖高脂膳食喂养SD雄性大鼠,诱发胰岛素抵抗,再注射小剂量链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱发高血糖,复制实验性2型糖尿病大鼠模型.实验分为 3组,对照组、糖尿病组和氨氯地平治疗组.分别于注射STZ第8和12周后各取6只大鼠,光镜观察肾脏病理改变,免疫组织化学检测大鼠肾组织bcl-2以及bax表达,流式细胞术检测大鼠肾组织细胞凋亡率及bcl-2、 bax表达.结果糖尿病组肾小球系膜基质增生,基底膜增厚及细胞外基质堆积;少部分肾小管轻度萎缩或管腔扩张,上皮细胞肿胀,胞浆内可见小脂肪空泡.流式细胞术结果显示:糖尿病组肾小球及肾小管凋亡率高于其他各组,治疗组肾小球及肾小管凋亡率与糖尿病组比较降低,且有统计学意义(P<0.05).免疫组织化学结果显示:bcl-2与bax在各组均有不同程度表达,糖尿病组bcl-2与bax表达增强,治疗组与糖尿病组比较bcl-2表达增强,bax表达减弱.结论细胞凋亡及相关基因 bcl-2/bax参与了糖尿病肾病的发病;氨氯地平可以通过bax表达下降、bcl-2 表达增加使肾脏细胞凋亡率减少从而达到保护肾脏的作用.     

缺血预处理对抑郁大鼠缺血/再灌注心肌细胞凋亡及Fas、Fas-L表达的影响

目的:探讨缺血预处理(IPC)对抑郁大鼠缺血/再灌注(I/R)心肌细胞凋亡及凋亡基因Fas、Fas-L表达的影响。方法:SD大鼠48只,随机分为非抑郁假手术组(Hsham),抑郁假手术组(Dsham),抑郁缺血/再灌注组(DI/R)和抑郁缺血预处理组(IPC+DI/R);采用原位末端标记法检测心肌细胞凋亡,免疫组化方法和逆转录-聚合酶链反应检测凋亡基因Fas、Fas-L的表达。结果:(1)与Hsham组、Dsham组比较,DI/R组、IPC+DI/R组的心肌细胞凋亡指数显著增加(P<0.001),Hsham与Dsham两组间比较无显著差异;与DI/R组比较,IPC+DI/R组的心肌细胞凋亡指数显著减少(P<0.001);(2)与Hsham组、Dsham组比较,DI/R组、IPC+DI/R组的Fas、Fas-L的mR-NA和蛋白表达均显著增加(P<0.001),Hsham与Dsham两组间比较无显著差异;与DI/R组比较,IPC+DI/R组Fas、Fas-L的mRNA和蛋白表达均显著减少(P<0.001)。结论:IPC能显著减少抑郁大鼠的I/R心肌细胞凋亡,其机制可能与下调Fas、Fas-L基因的表达有关。     

白藜芦醇对糖尿病大鼠肾缺血再灌注损伤的影响

目的:探讨白藜芦醇对糖尿病大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用。方法:取成年雄性SD大鼠,体质量180～250 g,采用高脂高糖膳食加小剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射的方法制备2型糖尿病大鼠模型。取糖尿病模型制备成功的大鼠,通过随机数字表将24只大鼠分为假手术(Sham)组、缺血再灌注(I/R)组和白藜芦醇处理(RSV)组,每组8只。再灌注24 h后,检测各组大鼠血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)水平,苏木素-伊红(HE)染色观察肾脏组织学改变,TUNEL染色检测肾脏细胞凋亡情况,比色法测定血清的脂质过氧化产物丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)表达,Western Blot检测氧化应激指标iNOS和炎症指标TNF-α、IL-6和IL-1β的表达。结果:与Sham组比较,肾缺血再灌注24 h后Cr、BUN和MDA水平均明显增高,而SOD水平表达下降,肾小管损伤明显加重,肾脏细胞凋亡明显增加,iNOS和TNF-α、IL-6、IL-1β的表达均增加。与I/R组比较,经RSV处理后,Cr、BUN和MDA水平均明显降低,SOD水平表达增加,肾小管损伤明显减轻,肾脏细胞凋亡明显减少,iNOS和TNF-α、IL-6、IL-1β的表达均降低,各组间差异有统计学意义(P<0. 05)。结论:白藜芦醇在糖尿病大鼠肾脏缺血再灌注损伤时能有效保护肾功能,其作用可能与调节氧化应激和炎症反应相关。     

安体舒通对2型糖尿病大鼠肾脏的保护作用及对肾组织mcp-1表达的影响

目的:观察安体舒通对糖尿病大鼠肾脏组织的保护作用及其对尿单核细胞趋化蛋白-1(UMCP-1)排泄和肾组织mcp-1表达的影响。方法:将30只SD大鼠随机分为模型组(20只)和对照组(10只),再将模型组随机分为糖尿病和治疗组,于给药后第8周检测2型糖尿病大鼠及安体舒通治疗大鼠正常对照大鼠的尾外周血糖和糖化血红蛋白(HbA1C),第8周时测12h尿白蛋白排泄率(UAER)、尿视黄醇结合蛋白(URBP)和UMCP-1排泄率,处死大鼠后留取肾脏标本用于逆转录聚合酶链反应半定量测定MCP-lmRNA的含量。结果:1与正常对照组(C组)比较,糖尿病组(D组)、安体舒通治疗组(S组)第8周血糖及HbAlc水平均明显升高,而两组间无显著性差异;2第8周,D、S组UAER及URBP、UMCP-1排泄率和肾脏肥大指数均高于C组,S组4项指标较D组明显降低,且UMCP-1排泄率与UAER、URBP排泄率及肾脏肥大指数呈正相关;3与C组相比,D组大鼠肾脏MCP-1mRNA表达明显上调,S组MCP-1mRNA表达也增加,但明显低于D组。结论:安体舒通对2型糖尿病大鼠肾脏有明显的保护作用,且这种保护作用是独立于降糖作用之外的。其机制可能与抑制肾组织mcp-1表达及其排泄有关。     

APP17肽对卵巢去势大鼠海马神经元凋亡相关因子表达的影响

为研究卵巢去势大鼠海马神经元内凋亡相关因子Fas、Fas-L、NFκB、c-fos、c-Jun的表达及APP17肽对这些因子表达的影响,将健康雌性Wistar大鼠行双侧卵巢切除手术造模,并用APP17肽治疗,分别用免疫组化方法观察Fas、Fas-L、NFκB、c-fos 、c-Jun的表达, 用TUNEL方法检测神经元的凋亡.结果发现卵巢去势大鼠海马神经元Fas、Fas-L、c-fos、c-Jun的表达增高,而NFκB的表达则减少;使用APP17 肽治疗后,上述蛋白质的表达恢复到正常水平,TUNEL检测未发现凋亡神经元. 提示卵巢去势大鼠发生了海马神经元的凋亡相关蛋白的改变,可能是神经元处于凋亡前状态;APP17肽可改善卵巢去势大鼠海马神经元内凋亡相关蛋白的表达,维持神经元的正常功能.     

几种ACEI对实验性糖尿病大鼠心肌细胞凋亡和Caspase-3及Fas、FasL基因表达影响的类效应

目的:探讨几种血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)卡托普利、培哚普利、咪达普利、贝那普利、福辛普利对糖尿病大鼠左室心功能及心肌细胞凋亡和凋亡相关蛋白影响的类效应。方法:将48只SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱发糖尿病模型,随机分为5个给药组和1个糖尿病组(每组8只),另选8只做正常对照组。给药组每日分别灌胃给予卡托普利(50 mg/kg),培哚普利(雅施达4 mg/kg),咪达普利(达爽10 mg/kg),贝那普利(洛汀新10 mg/kg),福辛普利(蒙诺10 mg/kg),糖尿病组给予生理盐水灌胃,共8周。对照观察心肌细胞凋亡、心肌组织Fas、FasL蛋白、Caspase-3及其Fas mRNA表达的变化。结果:与正常对照组相比,糖尿病给药组及未给药组的心肌细胞凋亡指数明显增高(均为P<0.05);Caspase-3阳性蛋白表达率明显增高(均为P<0.05);Fas蛋白阳性染色指数增高(均为P<0.05);Fas的mRNA表达明显增高(均为P<0.05)。但糖尿病给药组的较未给药组低(均为P<0.05)。所有各组的FasL蛋白阳性染色指数差异不明显(均为P>0.05)。各种ACEI治疗组之间差异无显著性(均为P>0.05)。结论:糖尿病心肌病的发生、发展过程中有心肌细胞凋亡的变化和Caspase家族及Fas、FasL系统的参与;糖尿病大鼠心肌细胞凋亡指数、心肌组织Fas蛋白以及Fas的mRNA表达水平、Caspase-3蛋白表达水平增高。ACEI干预糖尿病心肌病,能够降低细胞凋亡及Fas基因的表达及Caspase-3蛋白表达水平,且几种ACEI具有类效应。     

辛伐他汀对糖尿病大鼠肾脏TGF-β系统的影响

目的：探讨辛伐他汀对糖尿病大鼠肾脏转化生长因子β1（TGF-β1）和转化生长因子βⅡ型受体（TβⅡR）表达的影响及其肾脏的保护机制。方法：SD大鼠单次腹腔注射55mg/kg链脲佐菌素(STZ )制备糖尿病大鼠模型。糖尿病大鼠随机分成糖尿病组、辛伐他汀治疗组［4mg/(kg·d)］和正常对照组。用免疫组织化学，RT-PCR和Western印迹法检测16周大鼠肾脏TGF-β1和TβⅡR表达的变化。结果：与正常对照组比较，糖尿病组和辛伐他汀治疗组TGF-β1和TβⅡR表达均增加（P<0.05）。治疗组TGF-β1和TβⅡR表达显著低于糖尿病组（P<0.05）。结论：辛伐他汀可以通过下调TGF-β1和TβⅡR的表达，抑制TGF-β系统信号通路的过度激活，减少糖尿病大鼠尿蛋白，延缓肾脏病变的进展。     

含HOE642的新型器官保存液对离体兔肺移植供肺细胞凋亡的影响

目的 探索含Ⅰ型钠氢通道拮抗剂HOE642的新型器官保存液对离体兔肺移植供肺细胞凋亡的影响.方法 24只雄性成年新西兰大白兔分2组[低钾葡聚糖(LPD)组和HOE组],分别用LPD液及新型器官保存液灌洗供肺,建立兔改良离体单肺移植模型并再灌注2h.测定供肺细胞凋亡指数、caspase-3、Fas/Fas-L及Bax/Bcl-2表达水平.结果 与LPD组比较,HOE组供肺细胞凋亡指数和caspase-3的阳性细胞计数明显下降(P＜0.05),Fas、Fas-L、Bax表达水平明显降低,Bcl-2表达升高(P＜0.05).结论 含HOE642的新型器官保存液可通过抑制细胞内外源性凋亡途径抑制细胞凋亡.     

脑挫伤早期细胞凋亡相关基因表达的实验性研究

目的 探讨脑挫伤早期细胞凋亡相关基因：Bcl-2、Fas/Fas—L的表达变化规律及神经细胞凋亡的调控机制。方法 用光镜观察脑挫伤后脑组织的形态学变化，同时应用免疫组织化学SABC法结合图像分析检测脑挫伤早期不同时程Bcl-2、Fas/Fas—L的表达变化规律。结果 伤后8h在脑挫伤周围可见典型的凋亡神经细胞；伤后30min损伤灶周围神经细胞出现Bcl-2、Fas/Fas—L阳性表达，以后呈逐渐上升趋势且表达范围亦逐渐扩大，其中Bcl-2蛋白表达在伤后4h达高峰，随后呈下降的趋势，至伤后10—12h其表达程度与伤后1h相比无明显差异。结论 神经细胞凋亡参与脑挫伤后病理形态学改变，神经细胞凋亡的形成可能与促凋亡调控基因和抑凋亡调控基因的表达不平衡有关。     

细胞凋亡及Fas和FasL在高脂肾损害中的作用

目的 :探讨细胞凋亡及凋亡相关蛋白 Fas和 Fas L在高脂饮食肾损害中的表达。方法 :将 2 4只 Wistar大鼠随机分为对照组、肾病组及高脂饮食组 ,饲养 1 2周 ,观察血脂、尿蛋白、肾脏病理积分、肾脏细胞凋亡及 Fas和 Fas L的表达。结果 :高脂饮食组血胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、尿蛋白、肾脏病理积分高于肾病组及对照组 ,肾脏免疫组化也显示高脂饮食组细胞凋亡及 Fas和 Fas L表达增强。结论 :高脂血症可加剧肾小球损伤 ,肾脏细胞凋亡及 Fas和 Fas L参与其发病过程     

Fas／FasL、Bax及Bcl-2在1型糖尿病大鼠中的表达及其与凋亡的关系

目的探讨Fas／FasL、Bax及Bcl-2在1型糖尿病大鼠中的表达及其与凋亡的关系。方法链脲佐菌素诱导1型糖尿病大鼠模型,TUNEL法检测1型糖尿病大鼠（模型组）及其正常大鼠（正常组）胰腺组织的细胞凋亡,应用RT-PCR法及其免疫组化法检测Fas／FasLmRNA、Bcl-2／BaxmRNA及蛋白的表达情况。结果模型组胰腺组织中细胞的凋亡比正常组的大鼠多,Fas／FasLmRNA及BaxmRNA的表达水平在模型组的表达均比正常组显著提高,而Bcl-2mRNA的表达水平显著下降,两者相比差异均有统计学意义（均P〈0．05）。随血糖的升高,凋亡指数亦增加,Fas／FasLmRNA及BaxmRNA的表达升高,但Bcl-2mRNA的表达下降。结论Fas／FasL的表达及其细胞凋亡在大鼠l型糖尿病的形成中起着重要作用,Bax对凋亡起促进作用,Bcl-2对凋亡起抑制作用。     

p53基因与糖尿病肾病大鼠肾组织细胞凋亡相关性研究

目的：研究糖尿病肾病（Diabetes nephropathy,DN）大鼠p53基因与肾组织细胞凋亡的关系。方法：Wistar大鼠随机分为正常对照组、DN模型组。采用RT-PCR检测肾组织p53基因mRNA表达,琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡。结果：DN模型组大鼠肾脏p53基因表达明显上调,且肾组织凋亡细胞明显增加。结论：DN模型组大鼠肾组织细胞凋亡增加,与p53基因mRNA呈正相关。     

延肾胶囊对残肾系膜细胞凋亡及其细胞外基质代谢的影响

目的探讨"延肾胶囊"对残肾肾小球系膜细胞凋亡及其细胞外基质代谢的影响.方法Wistar大鼠120只,随机分为6组,A组为假手术对照组,B组为5/6肾切除;C,D和E组分别为肾切除 低、中、高剂量延肾胶囊;F组为5/6肾切除 肾衰宁.术后A,B两组给予等容积生理盐水灌胃.定量喂养,自由饮水.于术后15,90天测定各指标,每组每时相点观察10只大鼠.结果术后B组血浆血管紧张素Ⅱ浓度、肾小球系膜细胞增殖指数和凋亡指数、肾组织TGF-β1,CoⅣ,Fas,FasL积分光密度等指标显著高于A组.C,D和E组血浆血管紧张素Ⅱ浓度、肾小球系膜细胞增殖指数、肾组织TGF-β1和CoⅣ积分光密度高于A组,但显著低于B组,随着延肾胶囊剂量增加,上述指标有逐渐降低的趋势;肾小球系膜细胞凋亡指数、Fas和FasL积分光密度等指标显著高于A,B两组,随着延肾胶囊剂量增加,上述指标有逐渐升高趋势.F组血浆血管紧张素Ⅱ浓度、肾小球系膜细胞增殖指数、肾组织TGF-β1和CoⅣ积分光密度,低于B组,但高于D,E两组;肾组织Fas和FasL积分光密度等指标显著高于A和B组,稍低于D、E两组,肾小球系膜细胞凋亡指数与B组无显著差异,显著低于C,D和E3组.结论"延肾胶囊"能显著抑制5/6肾切除大鼠残肾血管紧张素Ⅱ和TGF-β1的高表达,增加Fas和FasL的表达,抑制肾小球系膜细胞过度增生,促进增生的系膜细胞凋亡,稳定残肾小球系细胞数量,减轻细胞外基质的堆积,呈剂量依赖性;"肾衰宁"能抑制系膜细胞增生,但不能促使增生的系膜细胞凋亡.     

老年慢性特发性血小板减少性紫癜患者淋巴细胞凋亡蛋白的表达

目的 从细胞凋亡的角度探讨老年慢性特发性血小板减少性紫癜(ITP)的发病机制。方法 用流式细胞仪检测了8例老年人慢性ITP患者治疗前后T淋巴细胞(CD3 )、B淋巴细胞(CD19 )Fas蛋白和Fas-L蛋白的表达。结果 治疗前T淋巴细胞的Fas蛋白表达明显低于正常(P<0.01),Fas-L蛋白表达明显高于正常(P<0.01);B淋巴细胞的Fas和Fas-L蛋白表达与正常对照相比差异无显著性意义。经治疗血小板恢复正常的患者T淋巴细胞的Fas蛋白表达上调和Fas-L蛋白表达下调,与治疗前相比差异有极显著性意义,与正常对照相比差异无显著性意义。结论 治疗前老年慢性ITP患者体内Fas/Fas-L途径介导的T淋巴细胞凋亡异常,经治疗后T淋巴细胞的Fas蛋白表达上调,有助于抗原活化的B淋巴细胞的凋亡。