肾母细胞瘤P53基因突变与其组织类型的关系

研究肾母细胞瘤Ｐ５３基因突变与其组织类型的关系。方法：应用银染ＰＣＲ－ＳＳＣＰ分析才ＮＷＴＳ－Ⅱ组织分型标准。对５６例手术切除肿瘤，辅以化疗的肾细胞瘤患者进行试验。结果：１４例间变型肾母细胞瘤中，１０例发生了Ｐ５３基因突变，其中５例位于第５－６外显子，３例位于第７外显子，２例位于第８外显子。     

小儿恶性肿瘤突变型P53蛋白的检测及临床意义

采用免疫组织化学方法检测小儿常见恶性肿瘤突变型Ｐ５３蛋白的表达情况并探讨其临床意义，用ＤＯ－１Ｐ５３单克隆抗体，ＬＳＡＢ法测定４５例小儿恶性肿瘤石蜡切片的Ｐ５３表达，１９例神经母细胞瘤３例阳性，均为ＩＶ期患儿，其中１例阳性为睾丸转移瘤的发瘤阴性，１６例肾母细胞瘤４例阳性，其中３例预后不良型均为阳性，１０例恶性淋巴瘤５例阳性，均为Ⅲ，Ⅳ期患儿，结果表明突变型Ｐ５３蛋白的表达与三种肿瘤的临床分期，组织     

抑瘤基因P53在恶性血液疾患中研究现状

抑瘤基因Ｐ５３在许多恶性肿瘤及恶性血液疾患中的作用已成为当前研究的热点，本文综述了Ｐ５３基因及其蛋白的一般性质，其可能的致癌机制以及在恶性血液疾患中的研究现状。     

P53蛋白在AOH处理的胎儿食管上皮组织中的表达

目的：探讨交链孢酚（ＡＯＨ）诱导食管癌的发生机制。方法用免疫组化ＡＢＣ法分别对ＡＯＨ处理２４ｈ、１周和３周的胎儿食管上皮组织及发性食管癌癌交各阶段组织进行Ｐ５３蛋白表达的检测。结果ＡＯＨ诱导１周的胎儿食管上皮中即有Ｐ５３蛋白过表达,并一直持续到第３周;食管癌变的早期阶段出现Ｐ５３蛋白的聚集,并随病变加重,Ｐ５３阳性率呈逐渐升高趋势。结论ＡＯＨ可使Ｐ５３蛋白表达增强,Ｐ５３蛋白 高表达可出现在食管癌     

小儿肾母细胞瘤,肝母细胞瘤及胚胎性癌P53基因突变的研究

小儿肾母细胞瘤、肝母细胞瘤及胚胎性癌Ｐ５３基因突变的研究冯雪莲蔡玲玲刘荻宋万波朱琪肾母细胞瘤、肝母细胞瘤及胚胎性癌是发生在青少年的恶性肿瘤。我们采用多聚酶链反应－ＤＮＡ单链构象多态性分析法（简称ＰＣＲ－ＳＳＣＰ法）对上述三种肿瘤中Ｐ５３抑癌基因突变进...     

儿童急性白血病Bcl-2、P53蛋白表达与疗效及预后的关系

目的　探讨儿童急性白血病Bcl 2、P5 3蛋白表达与化疗效果及预后的关系。方法　用SP免疫组化法对不同组骨髓细胞进行Bcl 2、P5 3蛋白检测。结果　Bcl 2、P5 3蛋白表达率在初治组与难治复发组均显著大于缓解组与对照组 (P <0 0 5 ,P <0 0 0 1) ;难治复发组Bcl 2、P5 3蛋白表达率显著高于初治组 (P <0 .0 5 ) ;Bcl 2蛋白表达率在初治组中急性非淋巴细胞白血病显著高于急性淋巴细胞白血病 ,而在难治复发组中无差异。在随访中 ,Bcl 2、P5 3蛋白同时阳性者 ,6周内均未缓解 ;两种蛋白均阴性者 ,缓解率达 10 0 % (P <0 .0 5 ) ,随访 3年 ,均持续完全缓解。结论　检测骨髓细胞Bcl 2、P5 3蛋白表达水平 ,可预测儿童急性白血病化疗效果及预后状态     

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目的探讨Daxx在儿童急性白血病(AL)骨髓细胞中的表达及其与NF-κB的相关性,同时观察其与AL临床分型和预后的关系。方法骨髓涂片取自华中科技大学同济医学院附属同济医院2005—2006年收治的AL患儿和骨髓正常的非恶性血液病患儿,应用免疫组织化学链霉素亲和素-生物素-过氧化酶复合物(SABC)方法检测50例儿童AL骨髓细胞Daxx和NF-κB的表达,对照组为20例非恶性血液病且骨髓正常患儿。结果在50例AL患儿中,Daxx和NF-κB蛋白阳性表达率分别为38.0%和56.0%,显著高于正常骨髓组织中的表达(P<0.05);Daxx与NF-κB表达呈强相关(P<0.05);急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿高危组Daxx和NF-κB的表达率分别为55.6%和77.8%,标危组分别为0和16.7%,两组之间差异均有显著性(P<0.05)。结论Daxx、NF-κB在儿童AL中过度表达,在白血病细胞凋亡和增殖的调控过程中可能起协同作用,且与AL的某些临床特征、疗效和预后密切相关。     

儿童急性白血病Bcl-2、P53蛋白表达与化疗效果的关系

为探讨儿童急性白血病时Bcl_2、P53蛋白表达与化疗效果及预后之间的关系 ,用SP免疫组化法对不同组骨髓细胞进行Bcl_2、P53蛋白检测。结果显示 ,Bcl_2、P53蛋白表达率在初治组与难治复发组均显著大于缓解组与对照组 (P<0.05,P<0.001);难治复发组Bcl_2、P53蛋白表达率显著高于初治组(P<0.05) ;Bcl_2蛋白表达率在初治组中ANLL显著高于ALL ,而在难治复发组中无差异。随访20例中 ,Bcl_2、P53蛋白同时阳性者2例 ,6周内均未缓解 ;2种蛋白均阴性者6例 ,缓解率达100 %(P<0.05) ,随访3年均持续完全缓解。提示检测骨髓细胞Bcl_2、P53蛋白表达水平 ,可预测儿童急性白血病化疗效果及预后状态     

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目的探讨儿童急性白血病SODD和P65蛋白的表达及其临床意义。方法2004年3～11月采用免疫组化SABC法,检测华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科住院急性白血病(AL)患儿骨髓涂片中SODD、P65蛋白表达。结果33例AL中,SODD和P65表达阳性率分别为54.5%(18/33)和45.5%(15/33),与正常对照组相比差异有显著性(P<0.05);25例急性淋巴细胞白血病(ALL)中,SODD和P65表达的阳性率分别为56.0%(14/25)和48.0%(12/25),与正常对照组相比差异有显著性(P<0.05)。ALL高危病例组中SODD阳性表达率为75.0%(12/16),较标危病例组阳性率高,差异有显著性(P<0.05)。33例AL患儿中SODD和P65均为阳性12例,均阴性16例,表达一致符合率为84.8%(28/33),两者的表达呈正相关(P<0.01,r=0.69)。结论SODD和P65均参与了AL的发生发展;SODD过表达与儿童ALL的发生、临床分型以及预后均有密切关系。     

Survivin在儿童急性白血病中的定位表达及意义

目的探讨Survivin在儿童急性白血病中的表达、细胞中的定位及与临床疗效的关系。方法应用免疫组织化学链霉亲和素生物素过氧化物酶复合物(SABC)方法,检测62例急性白血病患儿骨髓细胞Survivin的表达,Survivin在细胞中的定位,对照组为40例同期住院发热患儿骨髓(排除恶性血液病)。结果在62例急性白血病患儿中,Survivin蛋白表达阳性率为41.94%(26/62),明显高于对照组骨髓5%(2/40)(P<0.01)。Survivin在胞浆中的表达为46.15%(12/26),在胞核中的表达为53.85%(14/26),差异无统计学意义(P>0.05),但二者4周末完全缓解率差异有统计学意义(P<0.05),Survivin胞核表达阳性者完全缓解率高于胞浆阳性表达者。Survivin在高危、中危和低危急性淋巴细胞白血病中的表达分别为66.67%、50%、22.22%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论(1)Survivin在儿童急性白血病中表达率为41.94%,提示其在儿童急性白血病发生、发展和预后中的意义。(2)Survivin在胞浆和胞核的不同表达,与临床化疗疗效有关,可能作为判断预后的一个指标。     

miR-22在儿童急性B淋巴细胞白血病中的表达及临床意义

目的探讨miR-22在儿童急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)中的表达及临床意义。方法收集B-ALL患儿30例,以非恶性疾病或非血液病患儿10例为对照组。采集骨髓标本,提取RNA,实时荧光定量PCR方法检测miR-22的表达,并计算miR-22相对表达量。结果 miR-22相对表达量B-ALL患儿组显著低于对照组(P=0.001);治疗前显著低于治疗第33天及治疗第12周(P值分别为0.005和0.001);治疗第33天显著低于治疗第12周(P=0.012);10岁以上组显著低于10岁以下组(P=0.001);低危组显著高于中危组(P=0.007)及高危组(P=0.001);中危组与高危组比较差异无显著性(P=0.589)。结论 miR-22在儿童B-ALL中很可能存在抑癌作用。     

血管内皮生长因子在儿童急性白血病的表达及与预后的关系

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)在儿童急性白血病(AL)患者的表达状况及其与长期预后的关系。方法采用S-P免疫组织化学方法,检测41例自愿受试的急性白血病患者治疗前后、缓解前后骨髓细胞VEGF的表达状况并随访预后。选择同期住院的非白血病患者15例正常骨髓作为对照组。结果VEGF在急性白血病患者中表达明显高于对照组(t=8.780、P<0.01),在急性白血病患者中阳性表达状况与骨髓中原始细胞数呈显著正相关(r=0.536);一个标准化疗后ALL组、ANLL组VEGF表达水平明显下降(t分别为6.7733、6.6294;p均<0.01),仍高于正常对照组(t分别为2.7829、3.8985;p均<0.01);未缓解组患者化疗前表达显著高于缓解组及对照组(t分别为2.0580、5.1890、p均<0.05),未缓解组患者化疗后VEGF表达下降,但较化疗前无显著性差异(t=1.3158、p>0.05),显著高于化疗后缓解组患者及对照组病例(t分别为4.1191、4.7760、p均<0.01)。随访3年VEGF高表达组死亡及复发等不良预后率显著高于低表达组(χ2=2.7619、p<0.05)。结论VEGF在儿童急性白血病患者中存在高表达,一定程度上可能反映体内白血病细胞的总负荷量、疾病状态和预后;化疗未缓解组持续高表达,化疗缓解患者表达明显下降,血清VEGF水平可以作为诊断和预测白血病发生、是否难治的有效指标。     

P16基因甲基化在儿童急性白血病中的临床意义

目的　探讨P16基因甲基化与儿童急性白血病 (AL)发生、发展及预后的关系。方法　用甲基化敏感性限制性内切酶SacⅡ酶切加PCR技术研究 33例初治儿童AL、15例复发儿童AL及 30例对照组儿童P16基因甲基化情况 ,并观察P16基因甲基化与化疗结果的关系。结果　 33例初治AL中有 3例、15例复发AL中有 6例P16基因甲基化 ,对照组 30例均无P16基因甲基化。P16基因甲基化率初治组与对照组比较差异无显著意义 ;复发组高于初治组及对照组。可评价疗效的 31例初治AL中 ,3例甲基化患儿均未缓解 ;2 8例非甲基化患儿中2 3例获完全缓解、3例部分缓解、2例未缓解 ;31例中 ,甲基化阳性者与甲基化阴性者在完全缓解率及总有效率上 ,差别均有显著意义。但多因素分析提示只有初诊时高白细胞计数 (≥ 2 5× 10 9/L)对化疗结果有影响。结论　在儿童AL中 ,P16基因甲基化少见。P16基因甲基化可能成为预测儿童AL复发的指标之一。P16基因甲基化在判断儿童AL化疗疗效上有一定价值 ,但不能作为独立的判断标准。     

同源盒基因HOXA9在儿童急性白血病中的表达及其临床意义

目的：研究同源盒基因HOXA9在儿童急性白血病（AL）患儿骨髓单个核细胞中的表达,并探讨其临床意义。方法：采用RT-PCR方法检测46例不同时期AL患儿HOXA9 mRNA的表达水平,以15例特发性血小板减少性紫癜（ITP）患儿作为对照。结果：46例AL患儿（52份骨髓标本）HOXA9基因阳性表达率为63%,其中急性髓细胞白血病(AML)组阳性表达率（86%）明显高于急性淋巴细胞白血病（ALL）组（35%）及对照组（13%）（P<0.05）; AML组HOXA9 mRNA表达水平明显高于ALL组及对照组（P<0.05）。HOXA9在各型儿童AML中表达不同,mRNA相对表达水平依次为：M5型＞M4型＞M1和（或）M2型,而在M3型中未检测到表达。HOXA9在AML患儿高危组中的阳性表达水平较高。AML患儿初治组HOXA9基因阳性表达率及mRNA水平明显高于缓解组和对照组（P<0.05）,而缓解组与对照组比较差异无统计学意义;未缓解组HOXA9基因表达显著高于缓解组和对照组（P<0.05）。结论：HOXA9基因高表达与AL的发生相关;AML患儿HOXA9基因表达水平明显高于ALL患儿。HOXA9基因高表达者与白血病危险程度有关,且提示预后不良。因此,HOXA9基因有望成为儿童AL诊断、治疗及判断预后的一个靶点。     

儿童急性淋巴细胞白血病免疫分型特征及其临床意义

目的：探讨急性淋巴细胞白血病（ALL）患儿的免疫分型及其与临床特征的关系。方法：139例ALL患儿为研究对象,取肝素抗凝的骨髓或静脉血2~3 mL,利用流式细胞仪进行免疫分型分析。结果：139例ALL患儿中,B-ALL 103例（74.1 %）,T-ALL 24例（17.3 %）,T/B双表型ALL 12例（8.6 %）。B-ALL主要表达的抗原有CD19（90.3%）、CD10（83.5%）、CD20（27.2%)。T-ALL主要表达的抗原有CD3（79.2%）、CD7（66.7%）、CD5（33.3%）。B/T-ALL主要表达的T系抗原有CD7（50.0%）、CD5（41.7%）;B系抗原有CD19（50.0%）、CD10（33.3%）。139例ALL患儿中,32例伴髓系抗原表达（My+）,主要表达的抗原有CD13、CD33、CD14、MPO等。139例ALL患儿中,31例表达CD34;而My+ ALL中CD34阳性表达（15.6%）明显低于My- ALL（24.3%）。139例ALL患儿中,82例表达HLA-DR。CD10、CD34、HLA-DR在标危、中危、高危型ALL中的表达差异有统计学意义。My+ ALL组性别、出血发生率与My- ALL组比较差异有统计学意义（P<0.05）。结论：免疫分型可正确区分儿童ALL的来源。CD10、CD34、HLA-DR抗原表达与ALL的临床分型有关。     

HA117编码蛋白、P-gp和bcl-2在儿童急性白血病中的表达及意义

目的 探讨HA117编码蛋白、B细胞白血病/淋巴瘤-2（bcl-2）和P-糖蛋白（P-gp）在急性白血病（AL）患儿骨髓单个核细胞中的表达及临床意义.方法 通过免疫组织化学（SP）方法检测37例AL患儿中HA117编码蛋白、bcl-2、P-gp的表达情况,以15例非恶性血液病患儿为对照.结果 （1）AL组患儿HAll7编码蛋白、bcl-2及P-gp的阳性表达率分别为64.86％、62.16％和37.84％;AL组HA117编码蛋白表达阳性率明显高于对照组（P =0.033）;三种蛋白在急性髓细胞白血病组和急性淋巴细胞白血病组表达阳性率差异无显著性.（2）HA117编码蛋白在初诊组表达阳性率明显高于对照组（P =0.021）,而完全缓解组与对照组比较差异无显著性（P =0.098）.（3）AL患儿HAll7编码蛋白与bcl-2的表达水平呈正相关性（P=0.0001,r=0.593）.结论 新基因HA117可能参与了儿童AL的耐药机制,对儿童AL的预后有一定的预示作用,并在肿瘤的发生、发展和耐药中可能与抗凋亡基因bcl-2存在协同作用.     

儿童急性白血病淋巴细胞变化与化疗和感染相关性探讨

目的 分析儿童急性白血病化疗后外周血中淋巴细胞的变化,探讨淋巴细胞值异常与患儿继发免疫紊乱,导致感染及重症感染发生之间的关系。方法 急性淋巴细胞白血病(ALL)27例,急性髓性白血病(AML)9例,经化疗骨髓持续缓解(CCR)9-12个月和21-24个月,外周血白细胞≥4.0×109／L时,用流式细胞仪、单克隆抗体(美国BD公司)分别检测患儿外周血中CD3+、CD4+、CD8+、CD19+、CD16／56+细胞的百分数,进行统计分析。结果 1.随着化疗次数的增加,机体的免疫活性细胞会受到不同程度损害,T细胞亚群的比例明显失调,CD4+细胞百分数下降(P<0.01),CD8+细胞百分数上升(P<0.05),CD4+／CD8+细胞比值严重倒置(P<0.01),CD19+细胞百分数下降(P<0.05),临床上常见白血病患儿易感染和多发严重感染亦与此有关。2.CD16／56+标记的自然杀伤细胞并不随化疗次数增加而有变化(P>0.05),在白血病的治疗中有重要意义。3.AML外周血中CD3+、CD4+、CD8+、CD4+／CD8+、CD19+、CD16+／56+细胞百分数无改变(P>0.05)。结论 ALL患儿免疫活性细胞随着化疗次数的增加受到明显影响,有必要尽早进行免疫干预治疗,以提高患儿机体的免疫功能,以增强抗感染能力,恢复机体的免疫监督能力。对CD19+细胞减少,在感染发生时,给与丙种球蛋白,可减轻感染程度。