蛭龙活血通瘀胶囊对脑出血大鼠脑组织AQP-4、MMP-9表达的影响

目的:通过观察蛭龙活血通瘀胶囊对大鼠脑出血后AQP-4、MMP-9蛋白及基因表达的影响,探讨蛭龙活血通瘀胶囊对脑组织的保护作用机制。方法:将45只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、蛭龙活血通瘀胶囊高、中、低剂量组,各组又分为12 h、48 h、72 h三个亚组,采用自体尾部血注入法制备脑出血大鼠模型,Western blot法检测AQP-4、MMP-9蛋白,RT-PCR法检测AQP-4、MMP-9 mRNA的表达。结果:与模型组比较,ZL各剂量组AQP-4、MMP-9蛋白及基因表达均有不同程度的降低,具有显著性差异(P0.01);ZL各剂量组之间比较,以高剂量组为对照,低、中剂量组在各时间点脑组织AQP-4、MMP-9表达具有显著性差异(P0.01)。结论:蛭龙活血通瘀胶囊能够明显降低脑出血大鼠脑组织AQP-4、MMP-9蛋白及基因的表达,该作用存在一定的量效关系,ZL高剂量组作用最为明显。     

不同浓度黄芪提取物对高糖损伤HUVECs的保护机制

目的:研究不同浓度的黄芪提取物对HUVECs损伤的保护机制。方法:将HUVECs细胞分为正常组、高糖组、高渗组等12组分别培养12h、24h、48h,考察HUVECs细胞活力;观察不同浓度黄芪提取物干预后,HUVECs细胞中ET-1、eNOS、p-eNOS的活力以及mRNA和蛋白量的表达情况。结果:MTT检测结果显示高糖组会显著影响HUVECs细胞的活力,随着培养时间的延长,黄芪提取物各组对高糖损伤的保护不断增强(P0.05)。PCR、Western blot法检测结果显示,与正常组相比,高糖组的ET-1表达明显升高(P0.05),eNOS表达量显著降低(P0.05);3种不同浓度的黄芪提取物均能抑制ET-1的表达,增加eNOS表达;Western blot法检测eNOS结果显示高糖、黄芪提取物对eNOS蛋白表达无影响(P0.05)。结论:高糖组能显著抑制HUVECs细胞的活性,黄芪提取物组可不同程度地改善高糖抑制作用(P0.05),且黄芪提取物高浓度组保护作用最强,说明不同浓度的黄芪总黄酮提取物能从调节ET-1、eNOS、p-eNOS表达量方面对高糖损伤的HUVECs产生保护作用。     

糖肾1号方含药血清对高糖环境下培养的HK-2细胞中TGF-β1、α-SMA、FNmRNA和蛋白水平的影响

[目的]观察糖肾1号方含药血清干预高糖环境下培养的人肾小管上皮细胞(HK-2)中转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-平滑肌蛋白(α-SMA)、纤维连接蛋白(FN)mRNA和蛋白水平,初步探索糖肾1号方治疗糖尿病肾病可能的作用机制。[方法]选用HK-2细胞,分为空白组、高糖组、空白血清组、糖肾1号方含药血清低剂量组、糖肾1号方含药血清高剂量组。高糖环境下培养24 h后,进行血清干预24 h,培养48 h后收集细胞,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测HK-2细胞中TGF-β1、α-SMA、FN mRNA和蛋白表达水平。[结果]1)与空白组相比,高糖组的TGF-β1、α-SMA、FN mRNA和蛋白表达水平明显增多,差异具有统计学意义(P0.05)。2)与高糖组相比,糖肾1号方低剂量组、糖肾1号方高剂量组TGF-β1、α-SMA、FN mRNA表达水平减少,差异具有统计学意义(P0.05)。3)与高糖组相比,糖肾1号方低剂量组FN蛋白表达水平减少,差异具有统计学意义(P0.05),糖肾1号方高剂量组α-SMA、FN蛋白表达水平减少,差异具有统计学意义(P0.05)。4)与糖肾1号方低剂量组相比,糖肾1号方高剂量组TGF-β1、FN mRNA降低,差异具有统计学意义(P0.05)。[结论]糖肾1号方含药血清可抑制TGF-β1、α-SMA、FN mRNA和α-SMA、FN蛋白表达水平,糖肾1号方高剂量组效果优于糖肾1号方低剂量组。     

虎杖对急性肺损伤大鼠肺组织AQP-1和AQP-5mRNA表达及免疫组化积分的影响

目的:探讨中药虎杖对急性肺损伤大鼠肺组织AQP-1和AQP-5 mRNA表达及免疫组化积分的影响。方法:将60只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组,模型组,虎杖低、中、高剂量组、强的松对照组,每组10只。造模并以虎杖煎剂治疗后,使用荧光定量RT-PCR、免疫组化方法分别测定大鼠肺组织AQP-1和AQP-5mRNA的表达以及积分情况。结果:AQP-1和AQP-5 mRNA表达显示虎杖中、高剂量组与模型组相比均明显增高,差异均有显著性(P0.05)。虎杖低剂量组与模型组相比无显著性差异(P0.05)。免疫组化积分结果AQP-1虎杖中剂量组最高,AQP-5高剂量组最高,低剂量组最低。3组间两两比较,差异均有统计学意义(P0.01)。结论:虎杖可能是通过促进肺组织AQP-1和AQP-5的表达,从而起到对急性肺损伤大鼠的治疗作用。     

蛭龙活血通瘀胶囊对脑出血大鼠脑组织AQP-4、MMP-9及TIMP-1蛋白表达的影响

目的:观察蛭龙活血通瘀胶囊对脑出血大鼠脑组织AQP-4、MMP-9、TIMP-1蛋白表达的影响,探讨蛭龙活血通瘀胶囊对脑组织的保护作用机制。方法:将45只SD大鼠随机分为5组:假手术组,模型组,蛭龙活血通瘀胶囊高、中、低剂量组,各组又分为12 h、48 h、72 h 3个亚组。采用自体尾部血注入法制备脑出血大鼠模型,Western blot法检测AQP-4、MMP-9、TIMP-1蛋白的表达。结果:与模型组比较,蛭龙活血通瘀胶囊各剂量组AQP-4、MMP-9蛋白表达均有不同程度的降低,TIMP-1蛋白表达均有不同程度的升高,具有显著性差异(P0.01);蛭龙活血通瘀胶囊各剂量组之间比较,低、中剂量组在各时间点脑组织AQP-4、MMP-9、TIMP-1蛋白表达与高剂量组差异有显著性意义(P0.01)。结论:蛭龙活血通瘀胶囊能够明显降低脑出血大鼠脑组织AQP-4、MMP-9蛋白的表达,并升高TIMP-1蛋白的表达,该作用存在一定的量效关系,蛭龙活血通瘀胶囊高剂量组作用最为明显。     

黄芪注射液对含糖乳酸盐腹膜透析液所致水孔蛋白1表达异常的影响

目的观察黄芪注射液对含糖乳酸盐腹膜透析液所致水孔蛋白1(AQP-1)表达异常的影响。方法腹腔注射不同含糖浓度透析液和黄芪注射液,8周后观察大鼠腹膜透析超滤量、腹膜清除率、腹膜结构、AQP-1及其基因的表达。结果含糖组和黄芪组腹膜透析超滤量与对照组比较明显减少(P<0.05);高糖组尿素氮清除率明显低于对照组(P<0.05);腹膜透析后大鼠腹膜组织出现不同程度损伤,高糖组损伤尤为严重;高糖高黄芪组AQP-1表达较对照组明显减少(P<0.05)。结论一定浓度的黄芪注射液可保护腹膜,但对AQP-1的表达尚无明确作用。     

蛭龙活血通瘀胶囊对脑出血SD大鼠AQP-4、MMP-9、TIMP-1 mRNA表达影响随机平行对照研究

[目的]观测蛭龙活血通瘀胶囊对脑出血大鼠AQP-4、MMP-9、TIMP-1 mRNA表达影响。[方法]使用随机平行对照方法,45只SD大鼠常规饲料喂养3d,称重后随机数字表法分为5组,假手术组、模型组、蛭龙活血通瘀低、中、高剂量组(简称"ZL低、中、高剂量组"),9只/组。按指标检测时间分为12h、48h、72h三个亚组,3只/组。自体尾部血注入法复制脑出血大鼠模型。灌胃干预:蛭龙活血通瘀胶囊按人体用量(3.6g/d)5倍、10倍、20倍定为低、中、高剂量。RT-PCR法检测AQP-4、MMP-9、TIMP-1 mRNA表达。[结果]AQP-4 mRNA:假手术组有微量表达,12h、48h及72h表达无明显差异(P0.05);模型组及ZL低、中、高剂量组各时点均明显高于假手术组(P0.01);模型组呈进行性升高,72h最为显著;ZL各剂量组表达均低于模型组(P0.01);各时间点低、中剂量组均高于ZL高剂量组(P0.01)。MP-9 mRNA:假手术组有少量表达,术后12h、48h及72h表达无明显差异(P0.05);模型组及ZL低、中、高剂量组各时点均明显高于假手术组(P0.01);模型组术后48h上升明显并达到高峰,72h略有下降,ZL各剂量组均低于模型组(P0.01);ZL低、中剂量组在各时点均明显高于高剂量组(P0.01)。TIMP-1 mRNA:假手术组仅有微量表达,术后12h、48h及72h无明显差异(P0.05);模型组及ZL低、中、高剂量组各时点均明显高于假手术组(P0.01);模型组48h上升明显并达到高峰,72h略有下降;ZL各剂量组各时点均高于模型组(P0.01);ZL低、中剂量组各时点均明显高于高剂量组(P0.01)。[结论]蛭龙活血通瘀胶囊可明显降低脑出血大鼠脑组织AQP-4、MMP-9 mRNA,升高TIMP-1 mRNA,呈量效关系,ZL高剂量组作用最为明显。     

高糖环境下不同浓度黄芪注射液对肾小管上皮细胞凋亡及NF-κB表达的影响

目的观察不同浓度黄芪注射液对高糖环境下肾小管上皮细胞(HK-2)凋亡和核转录因子κB (NF-κB)蛋白表达的影响,探讨黄芪注射液浓度与细胞凋亡率、NF-κB蛋白表达间的关系。方法肾小管上皮细胞用无血清培养基同步化24 h后随机分为低糖组、高糖组、高糖+2μg/m L黄芪注射液组、高糖+20μg/m L黄芪注射液组、高糖+200μg/m L黄芪注射液组,每组设3个复孔。细胞培养48 h和72 h后收集细胞及细胞上清液,用流式细胞仪测定各组细胞凋亡率,Western blot方法测定各组NF-κB蛋白表达量,分析黄芪注射液浓度、细胞凋亡率、NF-κB蛋白表达之间的相关性。结果细胞培养48 h和72 h,低糖组和黄芪注射液各干预组细胞凋亡率及NF-κB蛋白表达量均明显低于高糖组(P均0. 05)。黄芪注射液各干预组间细胞凋亡率及NF-κB蛋白表达量比较差异均有统计学意义(P均0. 05),高糖+200μg/m L黄芪注射液组最低。黄芪注射液浓度与细胞凋亡率、NF-κB蛋白表达量呈负相关,NF-κB蛋白表达量与细胞凋亡率呈正相关。结论黄芪注射液能抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞凋亡和NF-κB蛋白表达,黄芪注射液浓度、细胞凋亡率、NF-κB蛋白表达之间有显著相关性。     

肾衰Ⅲ号方对阿霉素诱导损伤足细胞nephrin、desmin表达的影响

目的:探讨肾衰Ⅲ号方对阿霉素诱导的足细胞损伤的保护作用。方法:分离大鼠肾组织足细胞以阿霉素0.5 mg/L培养24 h复制足细胞损伤模型,再分别以低、中、高剂量肾衰Ⅲ号含药血清(3.8%、7.5%、15%)干预24 h后,MTT检测细胞增殖活性,分别检测各组细胞nephrin、desmin mRNA(RT-PCR法)和蛋白(Western Blot法)表达。结果:MTT结果显示7.5%肾衰Ⅲ号含药血清干预24 h为效果最佳。RT-PCR结果显示,与正常对照组比较,模型组nephrin mRNA表达显著降低(P0.01)、desmin mRNA表达显著增高(P0.01);与模型组比较,高剂量组nephrin mRNA表达显著增高(P0.05)、desmin mRNA表达显著降低(P0.05)。Western Blot结果显示,与正常对照组比较,模型组nephrin蛋白表达显著降低(P0.01),desmin蛋白表达显著增高(P0.01);与模型组比较,中、高剂量组nephrin蛋白表达显著增高(P0.01)、desmin蛋白表达显著降低(P0.01)。结论:肾衰Ⅲ号含药血清能减轻阿霉素引起的原代培养的足细胞损伤。     

黄芪及丹参对肥大心肌细胞肌浆网钙转运干预作用研究

目的:研究黄芪注射液、丹参注射液对体外培养肥大心肌细胞钙瞬变的影响及其作用机制。方法:实验对象分为5组:对照组、模型组、黄芪组、丹参组、联合用药组,给予相应药物后于24、48、72h,用激光共聚焦显微镜测钙瞬变波荧光强度峰值及半高宽度。采用RT-PCR法及Western blot法测定钙离子转运关键蛋白肌浆网钙泵(SERCA2a)及受磷蛋白(PLB)mRNA转录水平及其蛋白表达。结果:各时点模型组钙瞬变荧光强度净变化降低,半高宽度增加,SERCA2a mRNA及蛋白含量减低,PLB mRNA含量降低,蛋白含量增加。黄芪注射液、丹参注射液及其联合应用可于不同时间点,不同程度改善钙瞬变荧光强度净变化、半高宽度、SERCA2a mRNA及蛋白含量。结论:黄芪注射液,丹参注射液可以改善肥大心肌细胞钙瞬变功能,其机制可能与改善SERCA2a及PLB基因及蛋白含量有关。     

不同剂量黄芪多糖对糖尿病大鼠胰腺Kir6.2表达的影响

目的观察不同剂量的黄芪多糖（APS）对糖尿病大鼠胰腺Kir6.2表达的干预作用。方法建立Wistar大鼠糖尿病模型,随机分为模型组、对照组、APS低剂量干预组和APS高剂量干预组,进行糖耐量实验（OGTT）,检测胰腺Kir6.2mRNA和蛋白表达变化。结果模型组OGTT30min、60min、120min和180min血糖值显著高于对照组（P〈0.05）,而APS高剂量干预组的60min和120min血糖值较模型组显著降低（P〈0.05）;与对照组比较,模型组胰腺Kir6.2mRNA和蛋白表达水平显著下降（P〈0.05）,APS低剂量干预组和APS高剂量干预组Kir6.2的mRNA和蛋白表达水平较模型组有不同程度上调（P〈0.05）。结论黄芪多糖对糖尿病大鼠胰腺Kir6.2表达有一定的上调作用,可能是其发挥降糖作用的机制之一。     

大黄改善急性脑出血大鼠血脑屏障损伤的水通道蛋白-4机理研究

目的探讨大黄改善急性脑出血血脑屏障损伤的水通道蛋白-4（aquaporin-4,AQP-4）机理。方法采用立体定向注射自体无肝素动脉血制作大鼠脑出血模型,对神经功能缺损、脑含水量进行观察,伊文思蓝染色观察血脑屏障紧密连接（blood-brain barrier tight junction,BBBTJ）的损害,电镜观察不同时间点BBB和神经星形胶质细胞足突改变,用RT-PCR和Western blot检测AQP-4InRNA和蛋白表达。结果脑出血后,与模型组比较,大黄可明显减轻脑水肿;伊文思蓝染色结果显示血脑屏障从12h开始明显损害;电镜结果提示出血后12h血脑屏障紧密连接被破坏,而且神经星形胶质细胞足突肿胀;大黄可有效使血脑屏障紧密连接的破坏减少、神经星形胶质细胞足突肿胀减轻。脑出血模型组大鼠AQP-4表达出现增高（P〈0．05）;脑出血后1天AQP-4mRNA和AQP-4蛋白表达增强,第3天达峰值,其后逐渐有所下降。大黄可抑制AQP-4基因特录和翻译。结论大黄可通过改善血脑屏障损伤减轻脑水肿;大黄改善血脑屏障破坏的作用可能是通过抑制AQP-4基因转录和翻译实现的。     

凉膈散对内毒素致急性肺损伤大鼠肺水肿的保护作用

目的 :探讨凉膈散对脂多糖诱导大鼠急性肺损伤肺水肿及肺水通道蛋白(aquaporin,AQP)1、5表达的影响。方法:大鼠随机分成LPS组、LPS+三个不同剂量凉膈散组、LPS+地塞米松组、对照组,LPS造模动物,又分为注射LPS后1、2、4、8、16 h不同时相处死组。各组大鼠在相应时间点处死后取肺组织测定大鼠肺水含量、肺系数以及观察肺组织形态学的改变,采用蛋白免疫印迹分析(Western blot)法和免疫组化法(SP)检测大鼠肺组织中AQP-1、AQP-5蛋白表达和分布情况。结果 :与对照组相比,LPS组大鼠致损伤后2 h,肺水含量、肺系数持续增高,肺组织内AQP-1、AQP-5表达开始下降,损伤4 h后,AQP-1表达略有回升,而AQP-5表达随着损伤时间的延长持续降低;病理形态学显示肺泡隔增厚、肺间质及肺泡水肿,并有大量炎性细胞的浸润。与LPS组比较,凉膈散各剂量及地塞米松干预组大鼠病理损伤明显减轻,肺水含量、肺系数值显著降低(P<0.05,P<0.01),肺组织内AQP-1、AQP-5表达显著增加(P<0.05,P<0.01)。结论:凉膈散对内毒素诱导的大鼠急性肺损伤肺水肿有保护作用,其机制可能与上调急性肺损伤时肺组织内AQP-1、AQP-5蛋白的表达有关。     

金匮肾气丸对糖尿病大鼠骨骼肌胰岛素受体表达的影响

目的:探讨金匮肾气丸(Jinkui Shenqi Wan,JKSQ)对糖尿病大鼠骨骼肌胰岛素受体(insulin receptor,InsR)基因表达的影响,阐明其降低血糖的分子机制。方法:6周龄的SPF级雄性SD大鼠高脂高糖饲料喂养4周后,腹腔注射链脲佐菌素制备糖尿病模型。4 d后模型大鼠随机分成模型组、二甲双胍组、JKSQ低、高剂量组。正常组与模型组给予生理盐水,二甲双胍组给予二甲双胍(100 mg·kg-1),JKSQ低、高剂量组分别给予JKSQ(10,20 g·kg-1)灌胃4周。以酶学方法检测各组大鼠骨骼肌的己糖激酶(hexokinase,HK),6-磷酸果糖激酶-1(6-phosphofructokinase-1,PFK)活性,逆转录实时荧光定量PCR及蛋白印迹法检测骨骼肌InsR mRNA及蛋白表达水平变化。结果:与正常组比较,模型组出现了HK,PFK活性下降(P<0.01),InsR mRNA及蛋白质表达下降(P<0.01);给药治疗4周后,与模型组相比较,二甲双胍组、JKSQ低、高剂量组HK,PFK活性明显上升(P<0.05);同时各组InsR mRNA及蛋白质表达量明显提高(P<0.05)。结论:JKSQ能上调2型糖尿病大鼠骨骼肌InsR基因在mRNA及蛋白质的表达,增加HK与PFK活性,促进葡萄糖的氧化利用。     

肾安提取液对糖尿病小鼠肾脏TGF-β1表达的影响

目的:探讨肾安提取液对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病小鼠肾脏转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法:STZ诱导的糖尿病小鼠模型,随机分为模型组、厄贝沙坦组(厄贝沙坦10mg.kg-1.d-1)、肾安低、中、高剂量组(肾安提取液2.272、4.544、9.088mg.kg-1.d-1),另设正常对照组,疗程4周。检测TGF-β1 mRNA(实时荧光定量PCR法)及蛋白(Western blot分析法)、纤连蛋白(FN)及Smad7蛋白(免疫化学法)表达;透射电镜观察超微结构;并检测血糖、24h尿蛋白定量、肾质量指数、肾小球硬化指数。结果:肾安各组及厄贝沙坦组TGF-β1 mRNA及蛋白表达较模型组明显降低(P<0.01),肾脏FN及Smad7的表达较模型组明显减少(P<0.05,P<0.01);肾脏超微结构改善,肾小球基底膜增厚被明显抑制(P<0.05,P<0.01);24h尿蛋白定量、肾质量指数、肾小球硬化指数均较模型组明显改善(P<0.01);肾安高剂量组及厄贝沙坦组间上述指标无统计学意义;模型组及各药物干预组间血糖差异无统计学意义。结论:肾安提取液可能通过抑制TGF-β1的表达,减轻ECM积聚;并抑制TGF-β1/Smad7信号转导,减少足细胞凋亡,从而对DM肾损害起保护作用。     

黄芪对压力过载性左室肥厚大鼠心肌ETA,ETB表达的影响

 目的观察黄芪对大鼠压力过载性心肌肥厚的逆转作用,并探讨不同剂量黄芪对肥厚心肌中内皮素受体(ETA、ETB)表达的影响。方法采用狭窄腹主动脉法制备压力过载性心肌肥厚模型。90只大鼠随机分为假手术组,模型组,低、中、高剂量黄芪组和卡托普利组,造模后第13周开始灌胃给药,连续12周。测定各组大鼠心重指数(heart weight index,HWI)及左室重量指数(lef tventricular weight index,LVWI),并采用RT-PCR、Westernblot方法检测心肌肥厚大鼠左室组织ET_A、ET_B的表达。结果黄芪呈剂量依赖性抑制模型大鼠左室重量指数的增加(P<0.01,P<0.001);各组间ET_A、ET_B mRNA表达无明显差异;与假手术组相比,模型组大鼠左心室ET_A、ET_B蛋白表达明显增加(P<0.05),高剂量黄芪抑制模型大鼠左室组织中ET_A,ET_B蛋白的表达(P<0.05,P<0.01)。结论黄芪抑制压力过载性大鼠左室肥厚,且能下调心肌组织ET_A,ET_B表达。     

黄芪桂枝五物汤对神经病理性疼痛大鼠脊髓CX3CR1表达的影响

目的研究黄芪桂枝五物汤对神经病理性疼痛大鼠的镇痛作用及对脊髓背角和背根节中脊髓小胶质细胞趋化因子受体1(CX3CR1)表达的影响。方法将50只SD大鼠随机分为模型组、黄芪桂枝五物汤高剂量组、黄芪桂枝五物汤中剂量组、黄芪桂枝五物汤低剂量组、塞来昔布组,每组10只。所有大鼠均建立坐骨神经慢性缩窄性损伤神经病理性疼痛模型,术后模型组给予生理盐水10 mL/kg灌胃,黄芪桂枝五物汤高、中、低剂量组分别给予黄芪桂枝五物汤0.2 mL/kg、0.1 mL/kg、0.05 mL/kg灌胃,塞来昔布组给予塞来昔布30 mg/kg灌胃,均1次/d,连续14 d。分别在造模前及术后3,5,7,14 d采用热刺痛仪测定各组大鼠的热缩足反射潜伏期,用免疫组化法检测各组大鼠脊髓背角和背根节中CX3CR1表达情况,用荧光定量PCR法和Western blot法分别检测脊髓背角和背根节中CX3CR1 mRNA和蛋白的相对表达量。结果术后3 d各组大鼠热缩足反射潜伏期均较术前1 d明显缩短(P均<0.05),但模型组和塞来昔布组术后各时间段比较差异无统计学意义(P均>0.05);黄芪桂枝五物汤低、中剂量组从术后7 d开始、黄芪桂枝五物汤高剂量组从术后3 d开始热缩足反射潜伏期均明显长于模型组(P均<0.05)。免疫组化显示黄芪桂枝五物汤各剂量组脊髓背角和背根节中CX3CR1阳性细胞均显著少于模型组和塞来昔布组(P均<0.05),且黄芪桂枝五物汤高剂量组均明显少于黄芪桂枝五物汤低、中剂量组(P均<0.05),黄芪桂枝五物汤低、中剂量组间比较差异无统计学意义(P均>0.05)。模型组和塞来昔布组脊髓背角和背根节中CX3CR1 mRNA和蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P均>0.05);黄芪桂枝五物汤各剂量组脊髓背角和背根节中CX3CR1 mRNA和蛋白相对表达量均显著低于模型组和塞来昔布组(P均<0.05),且黄芪桂枝五物汤高剂量组均明显低于黄芪桂枝五物汤低、中剂量组(P均<0.05),黄芪桂枝五物汤低、中剂量组间比较差异无统计学意义(P均>0.05)。结论黄芪桂枝五物汤对神经病理性疼痛模型大鼠具有显著镇痛作用,其可能通过调控脊髓背角和背根节CX3CR1的表达发挥作用,且呈一定剂量依赖性。     

黄芪及其有效部位对糖尿病模型大鼠AdipoR1、AMPK mRNA表达的影响

目的:通过检测大鼠肝、骨骼肌AdipoR1及AMPK mRNA表达,探讨黄芪有效部位(黄酮、多糖、皂苷)调节糖尿病模型大鼠血糖的可能机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、黄芪组、黄酮组、多糖组、皂苷组,观测30d,检测血糖、血清胰岛素(ELISA),肝、骨骼肌AdipoR1、AMPK mRNA表达(real-time PCR)。结果:模型组血糖水平升高,血清胰岛素水平及肝、骨骼肌组织中AdipoR1、AMPK mRNA表达显著下降(P<0.01);黄芪各有效部位均可降低血糖、升高血清胰岛素水平,以黄芪组、黄酮组作用显著(P<0.05);黄芪各有效部位可上调肝和骨骼肌组织中AdipoR1、AMPK mRNA表达,其中在肝组织中以黄芪组、黄酮组升高明显,在骨骼肌组织中以皂苷组升高明显(P<0.05)。结论:黄芪有效部位可降低糖尿病模型大鼠血糖、升高血清胰岛素水平,以黄芪黄酮效果显著;其调节血糖的机制可能与肝、骨骼肌AdipoR1、AMPK mRNA表达水平变化有关。     

基于Pink-1/Parkin信号通路补青颗粒含药血清对高糖诱导人晶状体上皮细胞线粒体自噬的影响

目的:探讨补青颗粒含药血清对高糖诱导的人晶状体上皮(HLE)细胞线粒体自噬的影响。方法:体外培养HLE细胞,空白组将HLE细胞在正常培养液中培养48 h,模型组在空白组培养液中添加30 mmol·L~(-1)葡萄糖,实验组在模型组基础上加入不同含药血清刺激培养48 h。采用CCK-8法检测不同含药血清对高糖诱导的HLE细胞增殖活力的影响;利用免疫荧光技术及蛋白免疫印迹(Western blot)法检测Pink-1,Parkin,p62蛋白表达。结果:CCK-8法结果显示模型组较空白组HLE细胞增殖活力增强(P0.01);与模型组比较,杞菊组与补青颗粒高、中、低剂量组细胞增殖活力均降低(P0.01);与杞菊组比较,补青颗粒中剂量组细胞增殖活力明显降低(P0.01);补青颗粒不同剂量组间比较,补青颗粒中剂量组细胞增殖活力显著降低(P0.01)。细胞免疫荧光结果显示Pink-1,Parkin,p62蛋白主要在细胞胞浆表达,细胞核内亦有少量表达。Western blot结果显示与空白组比较,模型组Pink-1,Parkin表达增加(P0.01),p62表达降低(P0.01);与模型组比较,杞菊组与补青颗粒中剂量组Pink-1,Parkin表达增加(P0.01),p62表达降低(P0.01);与杞菊组比较,补青颗粒中剂量组Pink-1,Parkin表达增加(P0.01,P0.05),p62表达降低(P0.01)。结论:补青颗粒对高糖诱导的HLE细胞线粒体自噬相关蛋白的表达有显著影响,线粒体自噬的改变可能是补青颗粒改善白内障发病的机制之一。     

补肾化痰方对多囊卵巢综合征胰岛素抵抗Akt通路调控的实验研究

目的探讨补肾化痰方对多囊卵巢综合征（polycysticovariansyndrome,PCOS）模型大鼠卵巢内胰岛素信号传导分子的调控。方法Wistar雌鼠50只,随机分为溶媒对照组、模型组、中药低剂量组（5．406g／kg）、中药中剂量组（10．812g／kg）、中药高剂量组（21．624g／kg）,每组10只。测定大鼠空腹血糖及胰岛素水平,计算稳态模型胰岛素抵抗指数（HOMA．IR）;RT—PCR技术检测糖原合成酶激酶－3β（GSK-3β）、葡萄糖转运蛋白4（GLUT-4）、胰岛素受体底物-1（IRS-1）以及过氧化物酶增殖体激活受体γ（PPAR-1）表达,Westernblot法检测卵巢内胰岛素信号传导分子蛋白激酶B（Akt）表达。结果与溶媒对照组比较,模型组HOMA-lR及PPAR-1mRNA表达明显升高,卵巢GSK-3β、GLUT-4、IRS-1mRNA表达及Akt、p-Akt蛋白表达均明显降低,差异均有统计学意义（P〈0．05）。与模型组比较,中药高剂量组HOMA-IR明显降低,GSK－3β、GLUT-4、IRS-1 mRNA表达及Akt蛋白表达均显著升高,p-Akt蛋白表达尤为显著,差异均有统计学意义（P〈0．05,P〈0．01）;中药低、中剂量组GSK-3β、GLUT-4mRNA显著升高,PPAR-1mRNA明显降低,差异有统计学意义（P〈0．05）;中药低剂量组p-Akt蛋白表达明显升高,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论PCOS模型鼠存在胰岛素抵抗,并存在卵巢组织信号通路传导异常。补肾化痰方能够改善PCOS大鼠胰岛素抵抗,与胰岛素信号传导分子蛋白表达的调控有关。