扩张型心肌病心肌组织中肠道病毒感染与趋化因子Mrna表达的关系

目的探讨病毒感染与趋化因子表达的改变在扩张型心肌病发病中的作用.方法利用RT-PCR方法检测12例原位异体心脏移植的扩张型心肌病受体心肌组织以及5例正常对照心肌组织中Evs-RNA的存在以及趋化因子RANTES、MCP-1、FKN及其受体US28的表达水平.结果在病理学证实的12例扩张型心肌病心肌组织中有7例Evs-RNA阳性.25%(3/12)心肌组织中MCP-1mRNA的表达明显增高,经DNA同源序列分析,与人JE MCP-1同源性为97%.而正常对照心肌组织中病毒基因及趋化因子检测均阴性.结论肠道病毒感染可能会改变趋化因子的表达水平,而趋化因子的异常表达在扩张型心肌病发生发展中可能起重要作用.     

趋化因子IL-8和MCP-1在鼻咽癌中表达的初步研究

目的 该研究拟探讨趋化因子IL-8和MCP-1在鼻咽癌病人与正常人血清中表达的情况。方法 采用RT-PCR和Westem Blot检测39例鼻咽癌组织、2株鼻咽癌细胞系和17例正常鼻咽黏膜组织中的IL-8和MCP-1表达状况。ELISA检测趋化因子IL-8、MCP-1在鼻咽癌病人与正常人血清中表达的情况。结果 在mRNA水平，RT-PCR显示IL-8、MCP-1在鼻咽癌组织表达明显高于正常鼻咽黏膜组织（P〈O．05），在蛋白质水平，Western blot分析发现MCP-1表达明显高于正常鼻咽黏膜组织（P〈0．01）；Epstein-Barr（EB）病毒阳性的鼻咽癌组织表达IL-8、MCP-1较EB病毒阴性的鼻咽癌组织表达增高，且差异有显著性（P〈0．05）；ELISA检测鼻咽癌患者血清中IL-8、MCP-1发现，其表达较正常人明显增高（P〈0．05），而EB病毒阳性的鼻咽癌患者血清中的IL-8、MCP-1表达水平与EB病毒阴性的鼻咽癌患者血清中的表达水平差异有显著性（P〈0．05）。结论 趋化因子IL-8、MCP-1在鼻咽癌组织和血清中表达增高，EB病毒感染能促进二者的表达增加。     

热休克蛋白60及其抗体在扩张型心肌病患者中的表达

目的探讨扩张型心肌病（VCM）心肌组织中HSP60以及血清中抗人HSP60抗体在DCM发生、发展中的作用。方法应用免疫组织化学方法检测15例DCM患者及7例正常对照者心肌组织中HSP60的表达和分布；采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测44例DCM患者和42例对照者血清中的抗人HSP60抗体水平。结果DCM患者心肌组织中HSP60的表达明显增加，HSP60几乎全部为胞浆性表达，未见核阳性颗粒。DCM患者血清中的抗人HSP60抗体水平较对照组明显升高（P〈0．05）。结论DCM患者HSP60在心肌组织的过高表达及其血清抗体水平的升高，可能促进DCM的发生、发展，同时又为心肌提供一定的保护作用。     

Cathepsin B与扩张型心肌病发病关系的初步探讨

目的　探讨溶酶体中CathepsinB与扩张型心肌病发病的关系。 方法　收集我院因终末期扩张型心肌病行心脏移植术的受体标本 2 0例为实验组及脑死亡 3h内排除心脏疾患的心脏标本 5例为正常对照组 ,通过免疫组织化学 ,RT -PCR和WesternBlotting等方法自不同水平对CathepsinB进行检测。 结果　发现两组心肌组织中的CathepsinB均有阳性信号 ;RT PCR半定量检测CathepsinBmRNA的表达示扩张型心肌病组CathepsinB与 β actin条带面积积分比值明显高于对照组 ,分别为 0 .92 6± 0 .30、0 .4 4 2± 0 .2 5 ,两组间有显著差异 (P <0 .0 1) ;同时从蛋白水平检测CathepsinB的表达 ,显示扩张型心肌病组CathepsinB与 β actin条带面积积分比值明显高于正常组 ,分别为 0 .4 5 4± 0 .0 8及 0 .131± 0 .0 3,两组间有显著差异 (P <0 .0 1)。结论　与对照组相比 ,扩张型心肌病心肌标本中CathepsinBmRNA与蛋白质的表达量均明显增高 ,提示CathepsinB可能参与了扩张型心肌病的发生、发展过程 ,并推测其在扩张型心肌病心肌凋亡的过程中可能发挥了重要的作用     

扩张型心肌病移植心脏的病毒基因检测及其随访观察

目的　对扩张型心肌病移植心脏受体心肌组织进行多种病毒基因检测 ,并对所有心脏移植后的病人跟踪随访 ,了解病毒感染与移植后心脏的冠脉血管病变间的关系 ,初步判断预后。方法　利用RT PCR及PCR技术检测 12例扩张型心肌病移植受体心脏心肌组织中的多种病毒基因片段。结果　 12例心脏组织中有 7例肠道病毒阳性 ,4例腺病毒阳性 ,1例HCMV阳性 ,2例EBV阳性。而且 ,有的病例在同一组织中可检测到几种病毒 ,且在不同部位。经过 1年多随访 ,初步发现有病毒感染者 ,移植后的心脏冠脉血管发生狭窄的概率高于病毒基因阴性者 ,而且多种病毒混合感染的血管病变较单种病毒更容易发生。结论　病毒感染导致的扩张型心肌病可能是多因素的 ,同时它对移植后心脏的结构、功能改变似乎有一定的影响。     

病毒性心肌炎小鼠心肌组织中趋化因子表达谱的改变及其意义

目的 研究病毒性心肌炎(VMC)小鼠心肌组织趋化因子(ChKs)表达谱表化,探讨ChKs在VMC发病中的可能作用及意义。方法 B3型柯萨奇病毒(CVB3)腹腔注射雄性BALB/c小鼠;RT-PCR定性和实时定量分析心肌组织MCP-1、IP-10.Ltn和FKN第12种ChKs表达。病理切片和血清CK-MB分析判定病变和病损程度。结果 (1)在所检测的12种ChKs中,VMC组呈阳性表达的有9种,显著多于正常组心肌组织的6种,有3种ChKs(BLC.Eot和LARC)两组均未检出;(2)VMC组9种阳性表达的ChKs中CVB3诱导性表达的为MIP-2、MIG和IP-10.6种组成性表达的ChKs在VMC时上调表达的有MIP-1β、MCP-1、MCP-2.Ltn等4种,下调表达的有RANTES,与正常对照相比未呈现明显差异的为FKN。(3)ChKs的表达消长存在一定的差异,感染4 d后MIP-2等达高峰,随后下降;9 d后出现MCP-1和RANTES表达上升峰;FKN在感染9 d内表达较稳定。(4)亚急性早期、中期、中后期和晚期心肌组织ChKs表达谱有明显区别,各期ChKs表达谱中优势表达的ChKs分别为IP-10、IP-10、MPC-1、MCP-1。结论 VMC心肌组织ChKs呈成簇性方式改变,表达谱改变的复杂性可能与发病机制的复杂性有关,优势表达的ChKs可能在病毒性心肌炎发病中扮演着更重要的角色。     

扩张型心肌病心肌组织灰阶定量的临床应用价值

目的：探讨声学组织灰阶定量新技术对扩张型心肌病心肌病患 者的临床应用价值。方法：彩色多普勒超声显像仪结合计算机软件对24例正常人、12例临床确诊的扩张型心肌病患者的心肌组织进行图像采样、分段检测。结果：被检测的病例组室间隔和左室侧壁、前壁及后壁与正常对照组其心肌灰阶值的差别有显著意义（P＜0．01）。结论：心肌组织灰阶定量新技术是综合评价扩张型心肌病心肌细胞变性的简便、实用、可信的心血管超声检测技术，有较高临床应用价值。     

2型糖尿病大鼠心脏组织MCP-1表达及替米沙坦对其影响

目的研究2型糖尿病大鼠心脏组织中MCP-1的表达及血管紧张素II受体桔抗剂替米沙坦对其表达的影响。方法免疫组织化学法检查心脏组织MCP-1的表达情况。结果正常组心肌细胞胞浆内MCP-1无阳性表达，与正常组相比糖尿病组MCP-1表达增高，与糖尿病组相比替米沙坦能使MCP-1表达量减少。结论糖尿病大鼠心脏组织MCP-1活性增加，替米沙坦能抑制MCP-1的过度表达，从而延缓糖尿病心肌病的进展，可能是其心脏保护作用机制之一。     

原发性肾病综合症患者肾组织及尿液MCP-1的表达及意义

【目的】：探讨原发性肾病综合症患者(PNS)肾组织及尿液单核细胞趋化因子(MCP-1)表达水平及其在肾小管间质损伤中的意义。【方法】用免疫组化法检测56例PNS患者肾组织MCP-1的蛋白表达，ELISA法检测治疗前及治疗后3个月时尿液MCP-1质量浓度。【结果】正常肾组织无MCP-1表达，肾病患者均有不同程度表达，表达部位主要在肾小管上皮细胞与肾间质，肾组织及尿液MCP-1表达水平均显著高于对照组。强的松或强的松 环磷酰胺治疗3个月后尿液MCP-1表达水平显著降低。微小病变患者肾组织及尿液MCP-1表达水平显著低于其它病理类型患者，膜增殖性性肾炎患者显著高于其它类型患者。治疗后未完全缓解患者尿液与肾小管间质MCP-1表达水平显著高于完全缓解患者。肾组织及尿液MCP-1表达水平与肾脏病理类型、肾小管间质病变程度及血清肌酐水平、肌酐清除率显著相关。【结论】MCP-1在PNS患者肾小管间质病变发生机制中起重要作用，检测肾组织及尿液MCP-1表达水平对PNS患者病情、治疗反应、预后判断及病理诊断有一定价值。     

肺癌和结核性胸腔积液/血清MCP-1及其受体CCR2的测定及临床意义

目的:探讨肺结核,肺癌患者的胸水,外周血中MCP-1及其特异性受体CCR2的表达及其临床意义。方法:用ELISA测定28例肺结核,25例肺癌患者以及正常对照20例血清和胸水MCP-1的表达水平,以免疫组织化学的方法检测肺癌患者肺组织中CCR2的表达。结果:肺癌患者血清及胸水中MCP-1水平升高较肺结核患者升高明显,而且肺癌组织中CCR2的表达强度与肿瘤的分化密切相关。结论:肺癌患者MCP-1以及CCR2高表达可以作为一种肿瘤标志,而且其表达可能与肺癌的恶性程度有关。     

阿霉素致扩张型心肌病心肌损伤中各项相关指标变化

目的:探讨阿霉素致扩张型心肌病中心肌损伤中相关指标的变化。方法:通过腹腔注射阿霉素诱导SD大鼠扩张型心肌病模型;通过ELISA方法检测血浆脑利钠肽(BNP)水平,超声心动图测定左室射血分数(LVEF)及观察心脏大体形态以及光学显微镜下病理形态来评估是否造模成功;通过Western blot技术检测造模前后SD大鼠心肌组织凋亡指标P53蛋白表达量。结果:扩张型心肌病造模后SD大鼠较造模前BNP明显升高,LVEF明显下降,P53蛋白表达增多。结论:阿霉素致扩张型心肌病过程中,大鼠心功能明显下降,p53表达增多对阿霉素致心肌损伤有重要作用。     

卵巢上皮性肿瘤MCP-1基因表达的研究

目的 研究趋化因子MCP-1在卵巢上皮性肿瘤中的表达,探讨MCP-1在卵巢肿瘤发生、发展中的作用及临床意义.方法 采用半定量RT-PCR方法检测12例良性肿瘤、6例交界性卵巢肿瘤、22例卵巢癌原发病灶组织、8例卵巢癌转移病灶组织及10例正常卵巢组织中MCP-1 mRNA的表达情况.结果 正常卵巢组织、卵巢良性、交界性、恶性原发病灶组织及转移病灶组织中MCP-1表达的阳性率依次为25.0%、25.0%、50.0%、95.5%、87.5%.相对表达强度依次为0.11±0.01、0.18±0.03、0.51±0.05、0.73±0.08、0.45±0.08.MCP-1的阳性表达率和相对表达强度在卵巢交界性肿瘤中明显高于良性肿瘤,在卵巢恶性肿瘤中又明显高于交界性肿瘤,差异有统计学意义.MCP-1的表达与卵巢上皮癌组织学类型、组织分化及淋巴结转移情况无关,临床分期为Ⅲ～Ⅳ期的病例MCP-1的阳性表达率和相对表达强度与Ⅰ～Ⅱ期者相比,虽无显著性差异,但呈下降趋势.卵巢癌原发病灶组织中MCP-1的表达强度明显高于卵巢癌转移病灶组织,差异有统计学意义.MCP-1表达水平与肿瘤组织巨噬细胞浸润程度成正相关.结论 MCP-1基因在卵巢肿瘤发生、发展过程中起重要作用.MCP-1可趋化和激活巨噬细胞而发挥抗肿瘤效应,因此MCP-1极可能成为卵巢恶性肿瘤治疗的效应分子.     

MCP-1/CCR2通路参与骨髓基质细胞向脊髓全横断损伤区迁移的实验研究

 【目的】 探讨单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）及其受体CCR2在骨髓基质细胞（MSC）体内、外迁移中的作用。【方法】体外培养、纯化大鼠MSC，取第五代MSC行免疫荧光鉴定；免疫组化、RT-PCR检测纯化MSC表达CCR2情况；Boyden 小室法检测趋化因子MCP-1（5～500 ng/mL）对MSC的趋化迁移作用及其特异性。42只成年大鼠用于体内研究（脊髓全横断组24只，假手术组9只，正常大鼠9只），分别于术后1，3，7，14d取材，行免疫组化检测MCP-1表达，或行MCP-1的Real-time PCR定量分析，或颈内静脉注射荧光标记的MSC，观察MSC向脊髓迁移情况。【结果】第五代MSC都表达间充质干细胞标记物Vimentin、Laminin及Fibronectin；细胞免疫荧光、RT-PCR证实MSC表达趋化因子受体CCR2；MCP-1（5～50 ng/mL）体外可趋化MSC迁移（P﹤0.05），抗MCP-1抗体可对抗其趋化迁移作用（P﹤0.05）。脊髓全横断组、对照组脊髓均表达MCP-1，但细胞分布、染色存在差异，影响MCP-1定量。脊髓损伤后趋化因子MCP-1RNA在1d、3d及7d较对正常对照组差异有统计学意义（P <0.05），术后14d时MCP-1RNA与正常对照相比差异无统计学意义（P ＞0.05），伴随其变化，脊髓损伤区迁移MSC较对照差异有统计学意义（P﹤0.05）。【结论】 MCP-1体内、外可趋化MSC迁移，MCP-1/CCR2通路参与MSC向脊髓全横断损伤区的迁移。     

原位逆转录PCR法检测心肌组织中的柯萨奇B3病毒RNA

目的　探讨柯萨奇Ｂ3 病毒感染与心肌炎及扩型心肌病的病原学关系。方法　应用生物素标记的核苷酸直接掺入法 ,建立了原位逆转录ＰＣＲ反应技术 ,检测心肌炎、扩张型心肌病患者的心肌活检标本及正常心肌的尸检标本中的柯萨奇Ｂ3 病毒。结果　 16例病理学及临床诊断为心肌炎患者的心肌组织中 ,7例检测到柯萨Ｂ3 病毒ＲＮＡ ;16例正常心肌标本中检测结果均为阴性。结论　部分心肌炎及扩张型心肌病患者心肌组织中存在柯萨奇Ｂ3 病毒ＲＮＡ ,提示柯萨奇Ｂ3 病毒感染与部分心肌炎及扩张型心肌病的发病有关原位逆转录PCR法检测心肌组织中的柯萨…     

鲍温样丘疹病皮损中朗格汉斯细胞与MCP-1的表达及意义研究

目的检测鲍温样丘疹病（BP）皮损中朗格汉斯细胞（LC）的分布与数量变化及单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）的表达,探讨它们在BP发病机制中的作用。方法采用免疫组化SP法检测36例BP患者皮损组织中CD1a+LC及MCP-1的表达情况,以皮损旁正常皮肤组织作为对照;并对CD1a+LC密度与MCP-1表达强度进行相关性分析。结果CD1a+LC主要见于表皮棘层的树突状细胞,MCP-1蛋白主要表达于表皮角质形成细胞。与皮损旁正常皮肤组织相比,BP皮损组织中CD1a+LC密度降低,分布不规则,胞体树突减少;MCP-1染色变弱,表达强度降低。BP皮损组织及皮损旁正常皮肤组织中CD1a+LC密度与MCP-1表达强度均呈正相关（r=0.372、0.384,均P＜0.05）。结论BP皮损表皮组织中LC密度下降,形态呈现变性改变,推测可能与皮损局部趋化LC并促进其分化成熟的趋化因子MCP-1表达降低有关,进而影响皮损局部LC的抗原递呈功能。     

MCP-1／CCR2通路参与骨髓基质细胞向脊髓全横断损伤区迁移的实验研究

【目的】探讨单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）及其受体CCR2在骨髓基质细胞（MSC）体内、外迁移中的作用。【方法】体外培养、纯化大鼠MSC，取第五代MSC行免疫荧光鉴定；免疫组化、RT-PCR检测纯化MSC表达CCR2情况；Boyden小室法检测趋化因子MCP-1（5～500ng／mL）对MSC的趋化迁移作用及其特异性。42只成年大鼠用于体内研究（脊髓全横断组24只，假手术组9只，正常大鼠9只），分别于术后1，3，7.14d取材，行免疫组化检测MCP-1表达，或行MCP-1的Real-timePCR定量分析，或颈内静脉注射荧光标记的MSC，观察MSC向脊髓迁移情况。【结果】第5代MSC都表达间充质干细胞标记物Vimentin、Laminin及Fibronectin；细胞免疫荧光、RT-PCR证实MSC表达趋化因子受体CCR2；MCP-1（5～500ng／mL）体外可趋化MSC迁移（P〈0．05），抗MCP-1抗体可对抗其趋化迁移作用（P〈0．05）。脊髓全横断组、对照组脊髓均表达MCP-1，但细胞分布、染色存在差异。影响MCP-1定量。脊髓损伤后趋化因子MCP-1RNA在1d、3d及7d较对正常对照组差异有统计学意义（P〈0．05）。术后14d时MCP-1 RNA与正常对照相比差异无统计学意义（P〉0．05），伴随其变化，脊髓损伤区迁移MSC较对照差异有统计学意义（P〈0．05）。【结论】MCP-1体内、外可趋化MSC迁移．MCP-1／CCR2通路参与MSC向脊髓全横断损伤区的迁移。     

人巨细胞病毒感染对单核细胞和内皮细胞株ECV-304间趋化和黏附的增强作用

目的 研究人巨细胞病毒(HCMV)感染对单核细胞及内皮细胞株表达趋化因子的影响,以及对两者之间趋化和黏附的影响。方法 通过ELISA法和半定量RT-PCR的方法,检测CMV感染对单核细胞株(THP-1)及内皮细胞株(ECV-304)几种趋化因子及其受体表达的改变,同时通过趋化实验和黏附实验研究内皮细胞对单核细胞的趋化和黏附的改变。结果 HCMV感染可刺激ECV-304分泌MCP-1、GROα,在mRNA水平可改变内皮细胞MCP-1、CRO-α和IL-8表达,先下调后上调(IL-8除外);而对单核细胞趋化因子受体CCR2、CXCR2的表达在mRNA水平却有明显的下调作用(P<0.05)。HCMV感染可显著增强内皮细胞对单核细胞的趋化和黏附。结论 HCMV感染可增强内皮细胞对单核细胞的趋化和黏附,参与炎症反应,这可能与CMV上调内皮细胞趋化因子表达有关。     

原发性肾病综合症患者肾组织及尿液MCP-1的表达及意义

[目的]探讨原发性肾病综合症患者(PNS)肾组织及尿液单核细胞趋化因子(MCP-1)表达水平及其在肾小管间质损伤中的意义.[方法]用免疫组化法检测56例PNS患者肾组织MCP-1的蛋白表达,ELISA法检测治疗前及治疗后3个月时尿液MCP-1质量浓度.[结果]正常肾组织无MCP-1表达,肾病患者均有不同程度表达,表达部位主要在肾小管上皮细胞与肾间质,肾组织及尿液MCP-1表达水平均显著高于对照组.强的松或强的松+环磷酰胺治疗3个月后尿液MCP-1表达水平显著降低.微小病变患者肾组织及尿液MCP-1表达水平显著低于其它病理类型患者,膜增殖性性肾炎患者显著高于其它类型患者.治疗后未完全缓解患者尿液与肾小管间质MCP-1表达水平显著高于完全缓解患者.肾组织及尿液MCP-1表达水平与肾脏病理类型、肾小管间质病变程度及血清肌酐水平、肌酐清除率显著相关.[结论]MCP-1在PNS患者肾小管间质病变发生机制中起重要作用,检测肾组织及尿液MCP-1表达水平对PNS患者病情、治疗反应、预后判断及病理诊断有一定价值.     

扩张型心肌病的心肌损伤与细胞凋亡

目的:探讨扩张型心肌病的心肌损伤与细胞凋亡的关系.方法:采用宝灵曼公司的细胞凋亡原位检测试剂盒(Tunel)对14例扩张型心肌病心肌组织进行检测.结果:14例扩张型心肌病心肌组织中11例检测出有凋亡细胞,凋亡细胞阳性指数(AI)范围在33.14±12.56～26.51±11.21之间.结论:在扩张型心肌病的发生发展中有细胞凋亡机制参与.     

姜黄素调控p38MAPK通路改善糖尿病心肌病的机制研究

目的 探讨姜黄素(Cur)通过调控p38MAPK通路抑制炎症反应改善糖尿病心肌病的作用机制。方法 50只雄性SPF级C57BL/6小鼠,随机选取20只作为正常组,剩余30只小鼠给予高糖、高脂饲料喂养4周后,连续5d腹腔注射50mg/(kg·d)链脲佐菌素,以空腹血糖≥11.1mol/L作为糖尿病造模成功标准。正常组小鼠随机分为正常对照组(Con组)和姜黄素对照组(Cur组),糖尿病小鼠随机分为糖尿病组(DM组)和姜黄素给药组(DM+Cur组)。实验结束后,ELISA法检测各组小鼠心肌组织匀浆液中炎症因子TNF-α和IL-6含量;免疫荧光法检测各组小鼠心肌组织中TNF-α水平;Western blot法检测各组小鼠心肌组织中p-p38、p38和MCP-1蛋白表达。结果 Cur可明显逆转糖尿病所致小鼠心肌组织匀浆液中TNF-α和IL-6的变化,减少心肌组织中TNF-α的表达,下调糖尿病小鼠心肌组织中p38MAPK磷酸化水平和MCP-1蛋白的表达。结论 姜黄素通过抑制炎症反应改善小鼠糖尿病心肌病,其作用机制可能与抑制p38MAPK信号转导通路有关。