CD45在克罗恩病患者血清中的表达

目的 应用蛋白质组学方法在患者血清中寻找与克罗恩病相关的蛋白质.方法 采取克罗恩病患者以及正常成人血清蛋白样本各4例,用不同的CyDye荧光染料标记后进行胶内差异双向凝胶电泳(2-D DIGE),并对获得的图谱进行分析及对差异蛋白质进行基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱鉴定.结果 通过2-D DIGE分析,发现克罗恩病患者中存在29个表达异常蛋白质点,其中胶号为973的蛋白质点,在克罗恩病患者患者血清中比正常成人组表达升高2.55倍(P<0.05),该蛋白点经质谱鉴定为CD45.结论 CD45在克罗恩病患者血清的高表达提示在克罗恩病的病程中免疫系统失衡可能起着一定作用.     

新生儿神经管畸形的血清蛋白组学研究

目的 寻找神经管畸形新生儿血清中异常表达的蛋白质。 方法 通过二维凝胶电泳分离神经管畸形新生儿及正常新生儿血清,用PDQuest图像软件比较电泳图谱中的异常蛋白质点,用MALDI TOF/ TOF串联质谱仪分析蛋白质,所得的质谱图通过GPS软件在Mascot数据库中检索并鉴定蛋白质。结果 筛选出35个表达差异的蛋白质点,其中有8个蛋白质点表达上调,27个蛋白质点表达下调。选取四个蛋白质点进行鉴定,其中结合珠蛋白前体表达升高, HP protein, 血清载脂蛋白A-1前体及immunoglobulin heavy constant gamma 1三种蛋白表达均降低。 结论 神经管畸形可以导致血清中多种蛋白的的异常表达。     

老年克罗恩病患者血清微小RNA-215、微小RNA-335表达及与肠道菌群的相关性

目的探究老年克罗恩病患者血清微小RNA-215(miR-215)、微小RNA-335(miR-335)表达及与肠道菌群的相关性。方法选择2019年4月至2021年4月佳木斯市中心医院收治的126例克罗恩病患者为观察组,同期体检健康者100例为对照组,比较两组血清miR-215、miR-335相对表达量及肠道菌群数量,比较缓解期和活动期患者血清miR-215、miR-335相对表达量,采用Spearman检验分析miR-215、miR-335与克罗恩病疾病活动度的相关性,采用Pearson检验分析miR-215、miR-335与克罗恩病患者肠道菌群的相关性。结果血清miR-215、miR-335在观察组中的相对表达量较对照组均显著降低(P<0.05);观察组乳酸杆菌数量和双歧杆菌数量显著少于对照组(P<0.05),观察组肠球菌数量和大肠杆菌数量显著多于对照组(P<0.05);活动期患者血清miR-215相对表达量显著低于缓解期患者(P<0.05),活动期患者血清miR-335相对表达量显著低于缓解期患者(P<0.05);miR-215、miR-335与克罗恩病疾病活动度均呈负相关(P<0.05);miR-215、miR-335与克罗恩病患者乳酸杆菌数量和双歧杆菌数量均呈正相关(P<0.05),miR-215、miR-335与克罗恩病患者肠球菌数量和大肠杆菌数量均呈负相关(P<0.05)。结论老年克罗恩病患者血清miR-215、miR-335呈低表达水平,其水平与疾病活动度及肠道菌群具有一定相关性,这两项指标有望成为克罗恩病诊治的相关指标之一。     

联用2-DE和MALDI-TOF-MS技术筛查胃癌组织和血清中的差异蛋白质

目的 分别建立肠型、弥漫型胃癌组织和血清双向凝胶电泳图谱,鉴定差异表达蛋白,从中发现有意义的胃癌肿瘤相关标志物.方法 采用双向凝胶电泳（two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis,2-DE）分离组织和血清总蛋白,经硝酸银染色,分析选取有表达差异的蛋白质点,通过基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（matrix-assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS）鉴定差异蛋白.结果 获得重复性和分辨率较好的胃癌组织和血清双向凝胶电泳图谱,经MALDI-TOF-MS鉴定得到20种蛋白,在7例（58.3%）肠型胃癌组织中均有硒结合蛋白1（SBP1）表达,KIAA基因家族蛋白在弥漫型胃癌组织和血清中均有表达.结论 建立了弥漫型肠型胃癌组织和血清双向凝胶电泳图谱,获得了差异蛋白质点,为寻找胃癌的特异蛋白质作为胃癌肿瘤标志物奠定了基础.     

免疫共沉淀联合质谱分析筛选克罗恩病中Intelectin-1相互作用蛋白的初步研究

目的 对比克罗恩病患者的病变与正常肠黏膜,筛选与肠凝集素-1(Intelectin-1)相互作用的差异蛋白,探讨Intelectin-1及其相互作用蛋白在克罗恩病发展中的作用.方法 利用免疫共沉淀技术筛选克罗恩病患者病变及正常组织中与Intelectin-1相互作用的蛋白;利用MALDI-TOF/TOF-MS质谱分析技术鉴定与Intelectin-1相互作用蛋白;并使用免疫共沉淀和Western blot分析技术验证所鉴定的Intelectin-1相互作用蛋白.结果 利用免疫共沉淀联合质谱分析技术成功筛选出4个与Intelectin-1相互作用差异蛋白,包括:肿瘤坏死因子受体相关因子3(TRAF3)、腺苷酸三磷酸酶(ATPase)、热休克蛋白90(HSP90)、锌指蛋白(ZNF).结论 Intelectin-1可能通过与TRAF3、ATPase、HSP90、ZNF蛋白相互作用,而影响克罗恩病的发展.     

血清TNF-a在克罗恩病中早期诊断的意义

目的:观察克罗恩病患者中血清中TNF-a的含量,探讨这种炎性因子在该病诊断中所起的作用。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA法)检测28例已明确诊断为克罗恩病患者和36例体检健康者的血清标本,分析炎性因子TNF-a的含量变化,比较这种炎性因子在克罗恩病患者和健康者的差异。结果:与正常组相比,TNF-a的含量明显升高(P0.001)。结论:克罗恩病患者存在严重的细胞免疫功能紊乱;TNF-a的含量明显升高,测定炎症因子的变化可以为克罗恩病的诊断提供一定的依据。     

细粒棘球蚴病患者血清蛋白质差异表达分析

目的 筛选细粒棘球蚴病患者血清蛋白质组学标记物,探索其用于细粒棘球蚴病诊断的价值.方法 细粒棘球蚴病患者35例,非棘球蚴病其他肝病对照组17例,健康对照组20例,用弱阳离子交换芯片(CM10芯片)结合表面增强激光解析离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测血清蛋白质谱,用ZUCI-蛋白芯片数据分析系统软件包进行分析.通过支持向量机运算筛选病例组和对照组血清差异表达蛋白峰,建立细粒棘球蚴病蛋白质指纹图诊断模型并用留一法验证其诊断价值.结果 细粒棘球蚴病患者和健康对照组之间共筛选出8个差异表达蛋白峰,质荷比分别为1044、1046、1055、1075、6452、6649、8714的几个蛋白峰在病例组中下调,质荷比为5651的蛋白峰在病例组中上调(P<0.05);细粒棘球蚴病组和其他肝病对照组之间筛选出1个差异蛋白峰(质荷比为5951,P<0.05);其他肝病组和健康组合并后的对照组和细粒棘球蚴病组之间共筛选出8个差异蛋白峰,留一法验证表明以此差异蛋白峰建立的诊断模型灵敏度为62.86%,特异度为67.57%.结论 SELDI-TOF-MS蛋白质芯片技术能筛选出细粒棘球蚴病患者血清中的差异表达蛋白质,有望能成为细粒棘球蚴病的诊断和研究方法.     

燃煤污染型砷中毒患者血清差异蛋白的筛选

目的 应用血清蛋白组学技术,对比分析燃煤污染型砷中毒患者与正常人血清中差异蛋白的表达,筛选与燃煤污染型砷中毒发生发展密切相关的蛋白质.方法 2008年收集经临床诊断的贵州燃煤污染型砷中毒患者和健康人空腹血清标本各6例,用双向凝胶电泳(2-DE)分离砷中毒患者血清和健康人血清的总蛋白质,银染显色后经图像分析识别差异表达的蛋白质,再应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定差异表达的蛋白质点.结果 两组血清2-DE图谱平均点数分别为779±35和865±30,匹配率为90.1%.筛选出两组间的差异蛋白点60个,砷中毒组表达上调25个,表达下调35个.对其中表达量差异3倍以上的35个蛋白点进行MALDI-TOF-MS分析,鉴定出包括角蛋白10、载脂蛋白A-V、转铁蛋白、α1抗胰蛋白酶、锌α2糖蛋白、细胞外信号调节激酶3、空泡分选蛋白33、O-GlcNAc糖基转移酶等13个蛋白质,其中5个蛋白质在砷中毒组表达上调,8个蛋白质在砷中毒组表达下调.结论 本研究建立了分辨率高、重复性较好的燃煤污染型砷中毒患者血清双向凝胶电泳图谱,识别并鉴定了一些与健康人血清差异表达的蛋白质,为进一步探讨地方性砷中毒发病机制,筛选燃煤污染型砷中毒早期特异性血清分子标志物奠定了初步基础.     

血清TNF—α在克罗恩病中早期诊断的意义

目的：观察克罗恩病患者中血清中TNF—a的含量,探讨这种炎性因子在该病诊断中所起的作用。方法：采用酶联免疫吸附试验（ELISA法）检测28例已明确诊断为克罗恩病患者和36例体检健康者的血清标本,分析炎性因子TNF—a的含量变化,比较这种炎性因子在克罗恩病患者和健康者的差异。结果：与正常纽相比,TNF—a的含量明显升高（P〈0．001）。结论：克罗恩病患者存在严重的细胞免疫功能紊乱;TNF—a的含量明显升高,测定炎症因子的变化可以为克罗恩病的诊断提供一定的依据。     

蛋白质组学在姑息期血瘀证大肠癌中的表达研究

目的探讨姑息期血瘀证大肠癌血清差异表达的蛋白质及意义.方法选取姑息期血瘀证、气血亏虚证大肠癌患者各6例(血瘀证组、亏虚证组),另择同期健康平衡体质者6例(对照组),通过双向凝胶电泳以及质谱鉴定和生物信息学分析,寻找血瘀证组患者血清中特异表达的蛋白质.结果血瘀证组出现7种差异表达的蛋白质:在血瘀证及气血亏虚证中均升高的蛋白质为触珠蛋白、IL-8、转移相关蛋白、血管生长因子受体-1,均降低的为血清淀粉样蛋白A;在血瘀证中高表达而在气血亏虚证中低表达的是载脂蛋白A-I前体;而在血瘀证中低表达且在气血亏虚证中高表达的是纤维结合蛋白.结论7种差异表达蛋白质的组合性变化可能是姑息期血瘀证大肠癌的物质基础,具有潜在的诊断、评估预后或指导治疗的价值.