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分泌抗人角蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及鉴定 总被引:4,自引:1,他引:3
角蛋白(keratin)作为一组相对分子质量(M)为40000-70000不溶于水的细胞结构蛋白,在上皮细胞的发生、分化成熟过程中逐渐形成,是所有哺乳动物细胞骨架的中间丝之一,其组成因不同上皮而异。近年来,随着分子生物学技术的推广和应用,角蛋白的基础研究得到了不断深化;同时采用多种特异性抗角蛋白的mAb进行皮肤病的临床研究,也取得很大的进展。本实验选用从剥脱性皮炎型药疹患者皮屑中提取的角蛋白免疫动物,制备出3株抗人角蛋白的mAb,并对其进行了鉴定。l材料和方法1.l角蛋自的提取取剥脱性皮炎型药疹患者的皮屑,按常规方法提取… 相似文献
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分泌抗MCG单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立周昌奎蓝兰张云峰**(福建省计划生育科学技术研究所,福州350011*福建省立医院生物治疗中心**福建省福港生物工程研究中心)谢弘王放(中国科学院上海细胞生物学研究所,上海200031)以苯甲酸-丙酮一步法,从... 相似文献
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本研究以人角蛋白免疫的BALB/C小鼠脾细胞与NS_1骨髓瘤细胞经聚乙二醇融合、HAT选择性培养、ELISA筛选及反复克隆化,成功地获得了两株稳定分泌抗人角蛋白单克隆抗体(MCAb)的杂交瘤细胞株——AF_2和AF_6,其染色体众数分别为97和96,所产生抗体经免疫双扩散试验属小鼠IgG_1亚类。通过亲和素一生物素一过氧化物酶(ABC)免疫组 相似文献
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我们用正常人B型红细胞为抗原,免疫BALB/c,取其脾脏与小鼠骨髓瘤Sp2/0进行杂交,建立了抗人B型红细胞单克隆抗体85/1-15细胞株,此株经3次克隆化培养和体外103d的传代培养和反复冻存复苏,至今数年,生长良好,继续分泌抗B型红细胞单克隆抗体。此株经特异性测定,只与人B型红细胞抗原反应,而与A至O型红细胞 相似文献
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用脲酶(Urease)免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与NS-1骨髓瘤细胞用PEG融合。ELISA法筛选分泌抗脲酶单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞,建立起6株杂交瘤细胞。细胞分泌抗体滴度高、亲和力强、特异性好,长期传代稳定。 相似文献
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应用血清纯化的HBeAg免疫BALB/c小鼠,其脾细胞与Sp 2/0骨髓瘤细胞融合,获得两株分泌抗HBe的杂交瘤细胞株(HE_(20)IB_8、HE_(21)IIG_(11))。接种同系小鼠腹腔诱生的腹水中用ELISA测定抗HBe效价达3.2~6.4×10~6。因相捕捉HBeAg、HBsAg和HBcAg特异性试验以及中和试验证明是针对HBeAg的特异性抗体。临床应用作为ELISA检测HBeAg和抗HBe试剂中的包被抗体配合人抗HBe-HRP与Abbott试剂结果非常一致。 相似文献
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为了进行肝癌的病因学研究,我们研制了抗HBs单克隆抗体。用HBsAg免疫BALB/c小鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤NS-1细胞在PEG作用下融合,经7次克隆化培养,获得三株能分泌抗-HBsMcAb的杂交瘤3G8、3H_9和2C_2。三个瘤株分泌的McAb在培养上清及腹水 相似文献
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目的 制备具有广谱种属反应性的PrP单克隆抗体(McAb),用于可传播性海绵样脑病(TSE)的诊断及致病机制研究。方法 分别将对应于牛PrP29-48(BoP1)、PrP89-108(BoP2)的两种多肽与匙孔碱血蓝蛋白(KLH)偶联,免疫BALB/c小鼠,经细胞融合后获得分泌针对上述两种多肽的杂交瘤细胞株,用Western-blot方法检测这些细胞株分泌的McAb与牛(Bo)、人(Hu)和仓鼠(Ha)PrP蛋白的反应性。结果 通过细胞融合和2-3轮克隆化,用ELISA筛选出分泌抗BoPl和BoP2抗体的杂交瘤细胞株D11和D8。Western blot显示,获得的McAb均能分别与重组BoPrP(25-242)、重组HuPrP(23-231)和HaPrP(23-231)反应。结论 获得了可与牛、人和仓鼠PrP反应的两种McAb,可用于哺乳类PrP检测及TSE致病机制研究。 相似文献
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本文报道用人IgG免疫BALB/c 小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞系SP2/O融合,获得 3株分泌抗人 IgG单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为 SIBPH1、SIBPH2和 SIBPH3。现重点报道SIBPH1株。用琼脂双扩散和免疫电泳等方法,证实该株杂交瘤细胞所分泌的单克隆抗体,对IgG具有良好的专一性,注入同系小鼠腹腔可诱生含较高效价抗IgG的腹水(双扩散1:256~512),单克隆抗体属小鼠IgG_1亚类,该杂交瘤细胞株经组织培养传代逾半年,冻存12个月,复苏良好,分泌抗IgG性能稳定。本文还对杂交瘤细胞建株的若干问题进行了讨论。 相似文献
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本文报道应用杂交瘤技术,获得5株能持续分泌抗hCG单克隆抗体(MAb)的细胞株。这5株细胞经4~5次克隆化后,分别接种于BALB/c鼠腹腔。腹水MAb效价有的高达4×10~5,培养上清液MAb效价高达4×10~2,抗体能特异地被hCG中和吸收。我们发现每株细胞所分泌抗体的能力,性质及效价是有较大差异的。5株杂交瘤细胞中只有HB_9、HD_(12)株分泌的MAb能单一地与胶乳滴配作为妊娠诊断试剂。 用此MAb作胶乳凝集抑制试验,检测了262例疑为早孕尿液标本和173例临床尿液标本,并与市售“妊娠试剂”对照,结果优于对照试剂。特别是我们用杂交瘤细胞培养上清液即可直接用作妊娠诊断试剂,且敏感性和特异性均很好,这在国内尚未见报道。 相似文献
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<正> 取纯化HBsAg免疫的BALB/c小鼠脾细胞,与SP2/0小鼠骨髓瘤细胞融合,选原始抗体阳性孔细胞进行多次克隆化。两次融合试验共得32株分泌抗HBsAg-McAb的杂交瘤细胞株。其培液上清的PHA效价为1:32~1:1,024,对流(CEP)效价为1:2~1:16。诱生小鼠腹水的PHA效价,25/32株为10~(-4) ~10~(-5),7/32株>10~(-6),其中8/32株ELISA法效价可达10~(-7)。CEP和AGD效价最高分别达1:6,400和1:3,200。 选出21株分泌抗体能力较强者进行冻存,并对其纯度和特异性进行鉴定。结果证明,21株杂交瘤分泌的McAb均属小鼠IgG_1亚类,能较好地中和乙肝患者血清中的HBsAg。与人白蛋白或正常人血清进行CEP或AGD试验,均无沉淀线出现。说明这些McAb具有良好的纯度和专一性。 相似文献
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《细胞与分子免疫学杂志》1987,(2)
中国人民解放军白求恩国际和平医院冯金辉等4人在《免疫学快报》1987年7(1)10~11发表本文,报道已建立抗人喉单克隆抗体杂交瘤细胞系三株,经4次克隆化,体外传代培养167天,经液氮冻存复苏,以间接荧光法和ELISA测抗体,均能稳定地分泌抗体。经染色体 相似文献