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目的观察大鼠磨牙应用矿物三氧化物凝聚体（MTA）直接盖髓术后牙髓组织中转化生长因子-β1（TGF—β）的表达变化及其在牙髓损伤修复中的作用。方法本研究于2012年10月至2013年3月在中国医科大学口腔医学院中心实验室进行。28只雌性Wistar大鼠第一磨牙机械穿髓后用MTA直接盖髓,并以对侧第一磨牙为对照,分别于术后1、3、5、7、14、21、28d处死动物并取材（每次处死4只）,进行免疫组化染色,观察TGF-β1在牙髓组织的动态表达和定位情况,用图像分析软件测定各组标本中TGF—β1阳性染色的光密度值。结果在正常牙髓组织中TGF—β1基本无表达,MTA直接盖髓后TGF—β1表达强度呈先升高后降低的基本变化,其中盖髓后5d的TGF—β1表达最强,21d时接近正常水平。表达主要位于盖髓剂下方中性粒细胞、成牙本质细胞、成纤维细胞和血管内皮细胞。结论MTA直接盖髓后,TGF—β1可能参与牙髓的损伤修复过程。     

Notch2���˺������輰����ͷ�б���о�

目的比较Notch2在人年轻恒牙和成熟恒牙的牙髓以及年轻恒牙牙乳头组织中的raRNA和蛋白表达情况,探讨Notch2与牙髓牙本质复合体发育之间的关系。方法收集2008年7月至2010年8月中国医科大学口腔医学院口腔颌面外科门诊因正畸需要而拔除的健康前磨牙48颗（年轻恒牙和成熟恒牙各24颗）,拔除后立即分离取出牙髓和年轻恒牙的牙乳头组织。分为3组：第1组为年轻恒牙的牙乳头组织;第2组为年轻恒牙的牙髓组织;第3组为成熟恒牙的牙髓组织。分别用RT-PCR和Westernblot技术检测Notch2的mRNA和蛋白表达,以β-actin为内参照,用图像分析软件（MetaMorph）对阳性条带进行灰度值测定。结果在年轻恒牙的牙乳头和牙髓组织以及成熟恒牙的牙髓组织中均可检测到Notch2的表达;Notch2在年轻恒牙牙髓中的mRNA和蛋白表达强于其在牙乳头以及成熟恒牙牙髓中的表达（P〈0．05）。结论Notch2不仅在年轻恒牙的牙乳头和牙髓组织,而且在成熟恒牙的牙髓组织中均有不同程度的表达,提示Notch2在牙髓牙本质复合体发育过程中可能发挥重要作用。     

体外培养的冠髓和根髓细胞中碱性磷酸酶的活性

目的：比较根部和冠部牙髓培养细胞的碱性磷酸酶活性，探讨牙髓干细胞在牙髓中的定位。方法：用组织块法分别培养根髓、冠髓细胞，用Gomori碱性磷酸酶染色法对根、冠髓培养细胞在加入条件孵育液(20％DMEM 10nmol／L地塞米松 10mmol/L β-甘油酸钠 50mg／L L-抗坏血酸)后的第5、10、15天的碱性磷酸酶活性进行测定，从牙髓干细胞的功能角度，探讨其在牙髓中的定位。结果：根髓、冠髓细胞均出现碱性磷酸酶染色阳性，染色强度在第5天无差别，在第10、15天根髓染色强度大于冠髓。结论：碱性磷酸酶的活性在根髓中大于冠髓。牙髓干细胞可能存在于全部牙髓之中．其密度在根髓中大于冠髓。     

大鼠冠根部牙髓体内成牙能力比较

目的 比较成年大鼠冠、根部牙髓分别接种于肾被膜下的成牙能力.方法 无菌条件下分离8周龄SD大鼠切牙牙髓,将冠部与根部牙髓锐分离,分别植入大鼠肾被膜下,2周后进行组织学观察.结果 冠部牙髓形成了包含釉质样组织和牙本质-牙髓复合体的牙齿样结构,与正常牙齿相似.而根部牙髓则形成了骨样牙本质结构.结论 成年大鼠牙髓依然具有独立的牙齿发育的能力,冠髓和根髓的成牙能力不尽相同.     

正常人牙髓中血红素氧合酶-1的免疫组化研究

研究血红素氧合酶-1(HO-1)在正常人牙髓组织中的表达,探讨其分布与功能的关系。方法临床因阻生或正畸拔除的健康第三磨牙或前磨牙的牙髓,用免疫组织化学SABC法进行染色,检测HO-1在牙髓组织中的表达情况。结果 HO-1在牙髓血管内皮细胞和成牙本质细胞呈现阳性表达,在部分牙髓成纤维细胞和幼稚牙髓细胞中呈阳性或弱阳性表达。结论提示HO-1在牙髓血流调控、牙本质形成及牙髓细胞代谢和分化中可能起一定的作用。     

Runx2/Cbfa1在出生后小鼠牙髓牙本质复合体形成中的作用研究

目的　探讨Runx2/Cbfa1在出生后小鼠成牙本质细胞分化及牙本质形成中时间和空间的分布特点及意 义。方法　采用免疫组化SABC法检测Runx2/Cbfa1在出生后BALB/c小鼠牙本质、成牙本质细胞及牙髓细胞中不 同发育时期的表达及特点。结果　Runx2/Cbfa1在成牙本质细胞的发育成熟过程中具有时空特异性,在牙根尚未发 育之前的牙胚钟状晚期,Runx2/Cbfa1只在前期牙本质中有表达,在牙髓细胞及成牙本质细胞中皆为阴性;约从第11 天开始,随着牙根的发育,Runx2/Cbfa1在根部成牙本质细胞、牙髓细胞中表达为阳性,在冠部成牙本质细胞中表达 为阴性。结论　Runx2/Cbfa1参与牙本质的形成和矿化及成牙本质细胞和牙髓细胞的发育,可能对它们起重要作 用。     

SHIP�ڿ�ǻ�۰��б���о�

目的：探讨含SH2结构域的肌醇磷酸酶（SHIP）在口腔鳞癌中的表达。方法选择中国医科大学附属口腔医院口腔颌面外科2008-2011年间收治的36例口腔鳞癌患者,术后应用免疫组化方法对其癌旁正常组织、原发灶及转移淋巴结中SHIP、基质金属蛋白酶（MMP）-2及MMP-9的表达情况进行检测。结果癌旁正常组织中SHIP呈中高强度阳性表达,明显高于原发灶及转移淋巴结（P〈0.05）;而原发灶及转移淋巴结中MMP-2和MMP-9表达强度显著高于癌旁正常组织（P〈0.01）。结论 SHIP基因可能通过负反馈作用来调节肿瘤的侵袭和转移。     

Smad1,4,5在人牙髓组织中的表达分析

目的：观察骨形态发生蛋白（BMP）下游信号转导分子Smad1,4,5在正常、龋坏和炎症人牙髓组织中的表达及表达差异,探讨Smad1,4,5在牙髓损伤修复过程中的作用。方法：制备正常、龋坏和炎症人牙髓组织标本,采用免疫组化方法检测Smad1,4,5在各类牙髓组织中的表达。结果：Smad1,4,5在正常和龋坏牙髓的成牙本质细胞层呈强阳性表达,在下方的富细胞区及牙髓中心部位为阳性或弱阳性表达,炎症牙髓浸润的炎细胞中Smad1,4,5呈强阳性表达。其中Smad4在各类牙髓中表达最强,Smad1次之,Smad5最弱。结论：观察到Smad1,4,5在正常、龋坏和炎症人牙髓组织中的表达及其差异,提示Smad1,4,5作为BMP的胞内信号转导分子,可能参与牙髓组织的自身修复过程。     

������β1��ʵ���Ը�������֢��֯�б���о�

目的 通过免疫组化法检测正常和实验性根尖周炎进展过程中根尖周组织整合素β1表达的分布情况及规律,探讨其在根尖周组织炎症进展中的作用。方法 取磨牙牙髓暴露不同时间(0、7、14、21、28 d)的大鼠上颌骨行整合素β1免疫组化染色,观察根尖周组织中整合素β1表达部位与表达程度。结果 整合素β1广泛表达于正常大鼠根尖周组织;牙髓暴露7~21 d,根尖周结缔组织中整合素β1呈阳性至强阳性表达,炎细胞密集区可见深棕色颗粒集聚;牙髓暴露28 d,根尖周结缔组织中整合素β1表达较弱。牙槽骨内的骨细胞、陷窝内血管、成骨细胞、破骨细胞及牙骨质细胞中整合素β1在牙髓暴露0~14 d呈强阳性表达,21 d后表达减弱。结论 整合素β1参与根尖周炎症的进展与根尖周肉芽组织形成炎症早期的骨吸收。     

�������ϸ�����������ϸ����΢СRNA����ױȽ��о�

目的 比较微小RNA（miRNAs）在人牙髓干细胞（dental pulp stem cells, DPSCs）及非DPSCs中的表达差异,探讨其在维持DPSCs干性状态中的作用。方法 本研究于2013年1—10月在福建医科大学附属口腔医院完成。 原代培养人牙髓细胞,利用结合了STRO-1特异性抗体的免疫磁珠分选获得DPSCs,并进行成牙本质样细胞的诱导分化,检测碱性磷酸酶（ALP）、骨钙素（OC）值以及进行von Kossa染色,鉴定其分化能力。采用miRNA基因芯片技术,检测DPSCs和非DPSCs中miRNAs的表达,筛选出差异表达的miRNAs。结果 与非DPSCs相比,DPSCs中表达上调超过2倍的miRNAs有11个,表达下调超过2倍的miRNAs有3个。结论 miRNAs表达谱的变化可能与DPSCs干性状态的维持相关。     

Expression of Metabotropic Glutamate Receptor mGluR5 in Human Dental Pulp

Accumulating evidence indicates that the metabotropic glutamate receptor mGluR5 is involved in the peripheral mechanisms of inflammatory nociception. To investigate whether mGluR5 may mediate the inflammatory pain and thermal hyperalgesia in the dental pulp, we examined the expression of mGluR5 and transient receptor potential vanilloid 1 (TRPV1) in human dental pulp by immunohistochemistry and electron microscopy; mGluR5-immunopositive (+) axons were observed in nerve bundles and branched extensively within the peripheral coronal pulp. Most of the mGluR5+ axons were unmyelinated. A large fraction of these axons (36.5%) were immunostained for TRPV1. Immunoreactivity for mGluR5 and TRPV1 was also observed in odontoblasts. These results support the possibility that the nerve fibers in the dental pulp mediate inflammatory pain and thermal hyperalgesia through coactivation of mGluR5 and TRPV1 and also suggest a possible role for odontoblasts in the transduction of nociceptive signals via mGluR5-mediated mechanism.     

组蛋白去甲基化酶KDM5A在人牙髓细胞及成牙本质细胞分化中的表达

目的探讨组蛋白赖氨酸去甲基化酶KDM5A在人牙髓细胞（hDPC）中的表达模式及成牙本质分化诱导对其表达量的影响。方法体外培养hDPC,实时荧光定量聚合酶链反应和Western blot检测第1代至第8代（P1-P8代）hDPC中KDM5A mRNA和蛋白的表达量;免疫荧光检测KDM5A在hDPC中的分布;对P3代细胞进行成牙本质分化诱导,于第7天和第14天分别检测KDM5A mRNA和蛋白的表达水平。结果体外传代培养hDPC中可检测到KDM5A的表达,KDM5A mRNA和蛋白量均呈先增加后减少的趋势;hDPC细胞质及细胞核中均表达KDM5A;成牙本质向分化诱导7和14 d,KDM5A mRNA和蛋白量高于未诱导组细胞,诱导14 d表达量高于诱导7 d（P〈0.05）。结论 hDPC表达KDM5A,矿化诱导可提高KDM5A的表达。     

凝血酶受体在人牙髓组织和细胞中表达的免疫组化研究

目的：探讨凝血酶受体在人正常、炎症牙髓组织及体外培养的牙髓成纤维细胞中的表达及其意义。方法：体外培养人牙贿成纤维细胞,收集正常和炎症牙髓组织,采用免疫组织化学方法观察凝血酶受体在牙髓组织和细胞中的表达和分布。结果：体外培养的牙髓成纤维细胞可见受体强阳性表达,正常及炎症牙髓组织中成牙本质细胞层、牙髓细胞、血管内皮细胞均呈广泛的阳性表达,炎症区淋巴细胞、单核细胞、中性粒细胞染色为强阳性。结论：人牙髓组     

Smad2、3在人牙髓组织中的表达及意义

目的：观察转化生长因子β特异的细胞内信号转导分子Smad2、3在牙髓组织中的表达及其变化,探讨Smad2、3在牙髓损伤修复中的作用。方法：用免疫组化方法检测Smad2、3在正常、龋坏及炎症牙髓组织中的表达。结果：Smad2,3在正常和龋环牙髓的成本本质细胞层呈强阳性表达,在下方的多细胞区及中心部牙髓有阳性或弱阳性表达,炎症牙随浸润的炎细胞中Smad2、3呈强阳性表达,各类牙髓中Smad2的表达较Smad3略强。结论：Smad2、3在正常、龋坏及炎症牙髓组织中有表达,提示Smad2、3可能在TGF－β调节牙髓细胞增殖、分化的信号转导途径中发挥一定的作用。     

神经生长因子在恒前牙龋源性牙髓炎早期牙痛中的作用

目的：观察神经生长因子（nerve growth facter，NGF）在正常及炎症组织中的表达和表达差异，探讨其在牙髓炎症和炎性牙痛中的作用。方法：应用免疫组织化学方法和显微图像分析系统，比较NGF在正常和龋源性牙髓炎早期的表达变化，以及观察其与临床牙痛的变化关系，并设一组晚期牙髓炎的牙髓组织作为晚期炎症对照。结果：在正常牙髓中NGF染色呈弱阳性，龋源性牙髓炎早期即呈强阳性表达，晚期牙髓炎亦呈强阳性表达。炎症的发展与伴随此过程的牙齿疼痛症状相符合。结论：NGF伴随着牙髓的炎症变化。由此认为NGF在牙髓炎症及炎性牙痛中发挥重要的作用。     

血管内皮生长因子在人牙髓中的表达

目的：研究血管内皮生长因子（ vascular endothelial growth factor VEGF） 在正常、深龋或炎症牙髓中的表达及其意义。方法：采用免疫组化SABC法，对牙髓中的VEGF的表达进行组织学定位，并通过Image pro-plus 5.1图像分析软件对成牙本质细胞和牙髓成纤维细胞中VEGF染色进行平均光密度值（optical density OD）测定。利用SPSS13．0统计软件对各组数据进行单因素方差分析或秩和检验。结果：人牙髓中，VEGF主要表达在血管内皮细胞、成牙本质样细胞和牙髓成纤维细胞的胞浆中。正常组成牙本质细胞的VEGF表达较其它两组弱（P〈0.01）。与正常组相比，牙髓成纤维细胞中VEGF的表达在深龋组明显增强（P〈0．05），而在炎症组明显减弱（P〈0．05）。此外，VEGF在炎症组的某些炎细胞如中性粒细胞、浆细胞的胞浆中也有表达。结论：VEGF在龋病、牙髓炎中的变化可能与牙髓炎的发生、炎症发展有关，并且可能参与了成牙本质样细胞对牙髓损伤的修复过程。