葛根素对创伤性脑损伤小鼠运动皮质神经元Bax,Bcl-2及Caspase-3表达水平的影响

目的:探索葛根素对创伤性脑损伤模型小鼠的神经元凋亡的影响,观察不同剂量葛根素注射液对创伤性脑损伤小鼠大脑运动皮质区的Bax,Bcl-2及Caspase-3表达的影响。方法:应用电子脑皮质挫伤撞击仪建立小鼠创伤性脑损伤模型,随机分为6组:假手术组、模型组、葛根素高剂量组、葛根素中剂量组、葛根素低剂量组、神经生长因子对照组。通过运用免疫组织化学方法,检测Bax,Bcl-2及Caspase-3阳性细胞的表达。结果:与模型组相比,高剂量葛根素能有效下调促凋亡基因Bax水平,上调抗凋亡基因Bcl-2水平,并且显著抑制Caspase-3的表达,差异均有统计学意义(P 0.01)。结论:葛根素对创伤性脑损伤模型小鼠的神经细胞具有保护作用,机制可能与其抑制神经元凋亡有关。     

基于Id2基因表达探讨姜黄素抗缺氧损伤神经元凋亡的机制

目的:通过观察姜黄素对Id2基因表达的影响,探讨姜黄素抗缺氧损伤神经元凋亡的机制。方法:以5×105/cm密度接种于6孔板的原代神经元,培养3 d后随机分为正常对照组、模型组和姜黄素组。各组神经元按不同实验条件进行干预,其中,正常对照组:常氧条件培养30 h;模型组:常氧培养24 h后,再缺氧处理6 h;姜黄素组:给予20μM姜黄素常氧培养24 h后,再缺氧处理6 h。各组干预结束后,采用CCK8方法检测各组神经元的活力,计算分析各组的抑制率;通过Annexin V/PI染色后,行流式细胞术检测各组神经元凋亡率;通过Real time RT-PCR检测神经元Bcl-2、Bax、Caspase-3等凋亡相关基因及Id2mRNA的表达。结果:CCK8结果显示,模型组神经元活力明显降低,与正常对照组相比差异有显著性(P0.01),经姜黄素预处理后明显提高神经元活性,与模型组相比差异有显著性(P0.01);流式细胞术结果显示,模型组神经元凋亡率明显升高,与正常对照组相比差异有显著性(P0.01),经姜黄素预处理后神经元凋亡率降低,与模型组相比差异有显著性(P0.05);Real time RT-PCR结果显示,模型组神经元的Bcl-2mRNA下调,Bax、Caspase-3、Id2mRNA上调,与正常对照组相比差异有显著性(P0.01);经姜黄素预处理后,缺氧损伤神经元的Bax、Caspase-3mRNA下调,与模型组相比较差异有显著性(P0.01),Id2mRNA下调,Bcl-2mRNA上调,与模型组相比较差异有显著性(P0.05)。结论:中药单体姜黄素抑制缺氧损伤神经元的凋亡,其机制可能与下调Id2mRNA的表达,进而下调Bax、上调Bcl-2mRNA表达,进一步阻断Caspase-3基因的激活有关。     

三七总皂苷对脊髓损伤大鼠神经元凋亡及Nrf2、caspase-3表达的影响

目的:探究三七总皂苷(TSPN)对脊髓损伤(SCI)大鼠神经元凋亡及Nrf2、Caspase-3表达的影响。方法:采用"自制击打器"建立SCI大鼠模型,将成功构建的100只SCI大鼠随机分为对照组、模型组、阳性对照组及实验组,每组25只。阳性对照组与实验组分别腹腔注射甲基强的松龙[30 mg/(kg·d)]与TSPN[100 mg/(kg·d)],对照组与模型组则腹腔注射等量生理盐水,连续干预14 d。采用HE染色与TUNEL法检测大鼠脊髓组织病理学变化与神经元凋亡;采用免疫组化法及Wb法检测脊髓组织Nrf2、Caspase-3蛋白表达。结果:与对照组比较,模型组大鼠脊髓组织Nrf2蛋白表达显著降低,且阳性对照组与实验组高于模型组,阳性对照组高于实验组;神经元凋亡率及Caspase-3蛋白表达升高,且阳性对照组与实验组低于模型组,阳性对照组低于实验组(均P0.05)。结论:TSPN可减轻SCI大鼠脊髓组织病变程度,保护神经元,其作用机制可能与下调脊髓组织Caspase-3蛋白表达,上调Nrf2蛋白表达有关。     

参附注射液对血管性痴呆模型大鼠学习记忆能力及神经细胞凋亡的影响

目的:探讨参附注射液对血管性痴呆(Va D)模型大鼠学习记忆能力及神经细胞凋亡的影响。方法:采用Pulsinelli四血管阻断法(4-VO)制作Va D大鼠模型,将36只大鼠随机分为假手术组、模型组和参附注射液组。采用Morris水迷宫检测学习记忆能力,采用免疫组化染色检测海马区Bax、Bcl-2、Caspase-3阳性表达。结果:参附注射液组大鼠逃避潜伏期缩短,跨越平台次数增加,与模型组比较差异均具有统计学意义(P0.01)。参附注射液组大鼠海马区Bcl-2阳性细胞表达显著增多,而Bax和Caspase-3阳性细胞表达明显减少,与模型组比较差异均具有统计学意义(P0.01)。结论:参附注射液能够通过下调凋亡相关基因Bax和Caspase-3的表达,上调抗凋亡基因Bcl-2水平,发挥抗海马神经元凋亡作用,改善Va D大鼠学习记忆能力。     

补阳还五汤对阿尔茨海默病小鼠海马凋亡因子及学习记忆能力的影响

目的:探讨补阳还五汤(BYHWT)对阿尔茨海默病小鼠海马组织凋亡因子及学习记忆能力的影响。方法:40只雄性APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组,多奈哌齐组(0.001 g·kg~(-1)),BYHWT高、中、低剂量组(分别为37.06,18.53,9.26 g·kg~(-1))。C57小鼠作为空白组。连续灌胃BYHWT 30 d,进行水迷宫行为学测试后,取材。用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠海马中凋亡因子B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的变化。结果:与空白组比较,模型组小鼠学习记忆能力明显降低,海马组织中凋亡因子Bcl-2明显减少(P0.01),Bax和Caspase-3明显增加(P0.01)。与模型组比较,BYHWT高、中剂量组能明显改善小鼠学习记忆能力,凋亡因子Bcl-2明显增加(P0.01),Bax和Caspase-3明显减少(P0.01)。结论:补阳还五汤能够明显改善阿尔茨海默病小鼠的学习记忆能力,降低海马组织中Bax和Caspase-3的表达,增加Bcl-2的表达。     

黄芪注射液对小鼠胸腺萎缩后的淋巴细胞凋亡及相关基因Caspase-3表达的影响

目的:观察黄芪注射液对小鼠急性胸腺萎缩后的T淋巴细胞凋亡及相关基因Caspase-3表达的影响。方法:昆明小鼠48只,随机等分为对照组、模型组、IL-2组、黄芪注射液治疗组。分别采用TUNEL法及免疫组织化学与医学图像分析系统结合的方法检测各组小鼠胸腺组织T淋巴细胞凋亡及Caspase-3蛋白的表达。结果:与对照组相比,模型组淋巴细胞凋亡数目及Caspase-3蛋白表达均显著增多(P<0.01)。与模型组相比,黄芪注射液组小鼠胸腺组织淋巴细胞凋亡数目及Caspase-3蛋白表达明显减少(P<0.05)。结论:黄芪注射液可通过抑制胸腺T淋巴细胞凋亡来发挥保护胸腺萎缩的作用,其抗凋亡机制可能与下调Caspase-3蛋白表达相关。     

银杏叶提取物对大鼠脊髓损伤神经保护作用的实验研究

目的探讨银杏叶提取物对脊髓损伤后神经细胞的保护作用。方法 90只SD大鼠随机分为正常对照组(N组)、银杏叶提取物组(EGb组)和损伤组(T组),采用改良Allen打击法建立脊髓中度急性损伤模型。N组仅暴露大鼠脊髓,T组打击术后不予药物,EGb组术后予EGb 17.5 mg/(kg.d)腹腔注射。结果大鼠脊髓损伤后,光镜下可见EGb组脊髓组织损伤程度较T组轻;伤段脊髓内Caspase-3表达上调,在3 d达到高峰,但EGb组Caspase-3表达低于T组(P<0.01);流式细胞仪检测显示,大鼠脊髓损伤后,N组和T组均发现凋亡细胞,均在3 d达到高峰,但EGb组凋亡细胞比率显著低于T组(P<0.01)。结论银杏叶提取物在脊髓损伤早期可以明显抑制Caspase-3的高表达,并且减少神经细胞的凋亡。     

黄芪联合丹参注射液对大鼠脑出血半暗带区神经元凋亡抑制作用的研究

目的 探讨黄芪联合丹参注射液对大鼠脑出血半暗带区神经元凋亡的抑制作用.方法 应用脑立体定位仪于大鼠尾壳核注入肝素化Ⅶ型胶原酶建立脑出血模型.将大鼠随机分为正常组、出血对照组和治疗组.分别对各组大鼠进行神经行为学、吉姆萨(Giemsa)染色、免疫组化染色及细胞超微结构等实验观察.结果 各治疗组大鼠神经行为学评分较出血对照组明显减小(P＜0.05).各治疗组脑出血灶周围细胞凋亡数量及程度较出血对照组明显降低.与相应出血对照组比较,各治疗组Bcl-2阳性表达均明显升高(P＜0.05),Bax及Caspase-3阳性表达均明显降低(P＜0.05);与相应术后24 h给药治疗组比较,各术后6h给药治疗组Bcl-2阳性表达均明显升高(P＜0.05),Bax及Caspase-3阳性表达均明显降低(P＜0.05);与相应3d各时间给药治疗组相比,7d给药治疗组Bcl-2阳性表达均明显升高(P＜0.05),Bax及Caspase-3阳性表达均明显降低(P＜0.05).各治疗组与出血对照组比较,神经元细胞线粒体、核膜、内质网等结构相对完整.结论 黄芪联合丹参注射液对大鼠脑出血半暗带区神经元凋亡具有较好的抑制作用.     

参芪扶正注射液对心衰大鼠心肌Bcl-2、Caspase-8mRNA表达的影响

目的研究心衰大鼠心肌Bcl-2、Caspase-8表达的变化及参芪扶正注射液的干预作用。方法利用阿霉素的心脏毒性,诱导心力衰竭大鼠模型。雄性SD大鼠60只,随机分成6组:正常组、阿霉素模型组、卡托普利组、参芪扶正注射液(以下简称参芪)小剂量组、参芪扶正注射液中剂量组、参芪扶正注射液大剂量组。治疗8周后用RT-PCR法对心肌Caspase-8mRNA、Bcl-2mRNA进行半定量分析。结果与正常组相比,模型组Caspase-8mRNA显著增高(P0.01),Bcl-2mRNA显著降低(P0.01);参芪小剂量、中剂量及卡托普利组Caspase-8mRNA表达显著低于模型组(P0.01,P0.05);Bcl-2mRNA显著高于模型组(P0.01,P0.05);参芪大剂量组Caspase-8mRNA、Bcl-2mRNA表达与模型组没有显著性差异(P0.05)。结论参芪扶正注射液可能通过改变Caspase-8,Bcl-2在心肌细胞中的表达,减轻凋亡达到改善心功能。     

槐果碱对CCI致神经病理性疼痛小鼠氧化应激水平及Caspase-3/Bax/Bcl-2信号通路的影响

目的:探讨槐果碱缓解坐骨神经慢性缩窄性损伤(Chronic constriction injury,CCI)致神经病理性疼痛的抗氧化应激和抗凋亡机制。方法:将BALB/c小鼠随机分为:假手术组(sham)、神经病理性疼痛模型组(CCI)、普瑞巴林阳性药对照组(CCI+Pre10 mg/kg)及槐果碱组(CCI+SC 40、20、10 mg/kg),共6组,每组10只小鼠。采用CCI法建立小鼠神经病理性疼痛动物模型,于术前d1、术后d7(给药前d1)及给药后1、3、5、7 d测定小鼠热刺激缩足反应潜伏期及冷缩足反射次数;采用生化法测定槐果碱对CCI小鼠脊髓组织SOD、GSH-Px、T-AOC及MDA水平的影响;采用RT-PCR和Western blot法检测槐果碱对CCI小鼠脊髓组织Caspase-3、Bax和Bcl-2 mRNA及蛋白表达的影响。结果:与假手术组比较,CCI模型组小鼠术后PWTL显著缩短,CWT明显增多;小鼠脊髓组织SOD、GSH-Px、T-AOC水平降低、MDA含量增多、Caspase-3、Bax mRNA及蛋白表达上调、Bcl-2 mRNA及蛋白表达下调;与CCI模型组比较,槐果碱40 mg/kg组小鼠PWTL延长,CWT减少;小鼠脊髓组织SOD、GSH-Px、T-AOC水平升高、MDA含量减少、Caspase-3、Bax mRNA及蛋白表达下调、Bcl-2 mRNA及蛋白表达上调。结论:槐果碱对CCI致小鼠神经病理性疼痛具有较好的缓解作用,其机制可能与其抗过氧化应激和抗神经元凋亡有关。     

抗柯萨奇B病毒性心肌炎胶囊提取物总皂苷抑制心肌细胞凋亡的实验研究

目的观察抗柯萨奇B病毒性心肌炎胶囊提取物总皂苷抑制急性心肌损伤小鼠心肌细胞凋亡的作用及机制。方法选用BALB/c小鼠60只,雌雄各半,随机分为6组,即正常对照组,模型组,复方丹参滴丸组,抗柯高、中、低剂量组,每组10只,正常对照组、模型组给予蒸馏水灌胃,给药组灌胃给药,均每日1次,连续7 d。从实验的第6 d开始,除正常对照组外,其它组小鼠腹腔注射盐酸异丙肾上腺素3 mg/(kg·d),连续2 d,建立急性心肌损伤模型,检测各组小鼠心肌损伤标志物肌钙蛋白T(cTnT)、肌钙蛋白I(cTnⅠ)含量以及细胞凋亡基因Bcl-2和Bax的蛋白表达。结果模型组小鼠cTnⅠ和cTnT均降低,与正常对照组比较差异有统计学意义(P0.01);各给药组cTnⅠ和cTnT均高于模型组,复方丹参滴丸组、抗柯高、中剂量组与模型组比较差异尤为显著(P0.01)。抗柯高、中、低剂量组心肌细胞凋亡率明显低于模型组,复方丹参滴丸组和抗柯高、中剂量组Bcl-2的表达与模型组比较显著升高(P0.01);各给药组Bax的表达与模型组比较明显降低(P0.01)。结论抗柯萨奇B病毒性心肌炎胶囊提取物总皂苷有抑制急性心肌损伤小鼠心肌细胞凋亡的作用,通过上调心肌组织中Bcl-2的表达、下调Bax的表达,减轻心肌损伤标志物的释放来抑制心肌细胞的凋亡。     

左归降糖解郁方对模拟糖尿病并发抑郁症环境下模型大鼠海马神经元凋亡相关蛋白的影响

目的探讨左归降糖解郁方对模拟糖尿病并发抑郁症(DD)环境下海马神经元凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及Caspase-8的调控作用。方法采用受孕18 d SD大鼠胎鼠进行海马神经元原代培养,葡萄糖联合皮质酮干预构建DD模拟环境。将培养的海马神经元随机分为正常组、空白血清组、模型组、阳性药(二甲双胍+氟西汀)药物血清组和待测药(左归降糖解郁方)药物血清组,正常组和模型组给予等量培养液,其余组给予相应体积分数10%药物血清或空白血清,造模干预18 h后,Hoechst荧光染色检测海马神经元凋亡;高内涵分析技术检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和Caspase-8的表达。结果与正常组比较,模型组大鼠海马神经元树突断裂或减少,神经网络连接降低,细胞存在明显的浓染、破碎、光点分布不均现象,Bcl-2蛋白表达显著下降(P0.05),Bax和Caspase-8蛋白表达明显升高(P0.05,P0.01);与模型组比较,阳性药药物血清组和待测药药物血清组大鼠海马神经元网络连接显著恢复,Hoechst荧光染色可见细胞核明显均匀化,局部亮点明显减少,Bcl-2蛋白表达水平显著上调(P0.05,P0.01),Bax和Caspase-8蛋白表达水平显著下调(P0.05,P0.01)。结论左归降糖解郁方对模型大鼠海马神经元凋亡的保护作用可能与调控海马神经元Bcl-2,Bax和Caspase-8的表达有关。     

益气养阴方对白血病细胞Caspase-3及Bcl-2表达的影响

目的研究益气养阴方对白血病细胞Caspase-3及Bcl-2蛋白表达的影响,探讨复方中药诱导白血病细胞凋亡的机制.方法给EL9611红白血病小鼠灌服益气养阴方水煎剂13 d后处死,取股骨骨髓细胞,用免疫组化法测细胞Ca spase-3及Bcl-2蛋白表达.结果益气养阴方组与对照组比较,Caspase-3表达阳性率增加(P＜0.01);Bc1-2表达积分下降(P＜0.01).结论益气养阴方上调白血病细胞Caspase-3表达、下调Bcl-2表达是其诱导白血病细胞凋亡的重要途径.     

左归饮对D-半乳糖致衰大鼠肝肾组织形态及其细胞凋亡相关蛋白表达的影响

目的研究左归饮对D-半乳糖致亚急性衰老模型大鼠肝、肾组织形态及其细胞凋亡相关蛋白表达的影响,初步探讨其延缓衰老作用机制。方法取健康SD大鼠72只,雌雄各半,随机分为6组,即对照组、模型组、给药组(维生素E组,左归饮高、低剂量组和六味地黄丸组)。除对照组颈背部皮下注射0.9%Na Cl溶液外,其余各组颈背部皮下分别连续注射D-半乳糖建立亚急性衰老模型。建模同时,各给药组大鼠分别灌胃给予维生素E、高剂量左归饮、低剂量左归饮及六味地黄丸药液进行干预,对照组与模型组分别给予等体积的蒸馏水。连续给药8周后,取大鼠肝、肾组织固定,利用HE染色法制作病理切片,进行显微观察;同时,采用免疫组化方法检测肝、肾组织中细胞凋亡相关蛋白(Bax、Bcl-2、Caspase-3)阳性表达水平,统计比较IOD值。结果 (1)与对照组比较,模型组大鼠肝、肾组织病理性损伤明显;与模型组比较,左归饮能够减轻D-半乳糖致大鼠衰老过程中出现的肝、肾组织病理性损伤。(2)与对照组比较,模型组大鼠肝组织中Bax和Caspase-3的IOD值均显著升高(P0.01),Bcl-2的IOD值显著降低(P0.01);与模型组比较,左归饮高剂量组大鼠肝组织中Bax、Caspase-3的IOD值均显著降低(P0.01),Bcl-2的IOD值显著升高(P0.01)。左归饮低剂量组大鼠肝组织中Bax和Caspase-3的IOD值明显降低(P0.05),Bcl-2的IOD值略有升高,但差异无统计学意义(P0.05)。(3)与对照组比较,模型组的肾组织中Bax和Caspase-3的IOD值均显著升高(P0.01),Bcl-2的IOD值显著降低(P0.01);与模型组比较,左归饮高剂量组大鼠肾组织中Bax、Caspase-3的IOD值均明显降低(P0.01),Bcl-2的IOD值明显升高(P0.01)。左归饮低剂量组大鼠肾组织中Bax的IOD值明显降低(P0.05),但Bcl-2及Caspase-3的IOD值差异无统计学意义(P0.05)。结论左归饮对肝、肾组织具有一定的保护作用,其作用机制可能是通过与影响肝、肾组织中细胞凋亡相关蛋白表达有关。     

丹参注射液对实验性大鼠脑出血灶周围神经元凋亡的影响

目的 探讨丹参注射液对实验性大鼠脑出血灶周围神经元凋亡的影响.方法 应用脑立体定位仪将肝素化Ⅶ型胶原酶注人大鼠尾壳核建立脑出血模型.大鼠随机分为正常对照组、出血对照组和治疗组.分别在不同时间段观察大鼠神经行为学、凋亡蛋白Caspase-3的表达及神经元的超微结构变化等指标.结果 治疗组大鼠神经行为学评分较出血对照组明显减少(P＜0.05);治疗组Caspase-3阳性细胞数较出血对照组明显降低(P＜0.05);7 d治疗组Caspase-3阳性细胞数较3d治疗组降低(P＜0.05);电镜结果显示,治疗组与出血对照组比较,神经元细胞各结构形态相对完整.结论 丹参注射液对抑制大鼠脑出血灶周围神经元的凋亡具有较好的作用.     

甘草苷对中波紫外线诱导人皮肤角质形成细胞凋亡的影响

目的:研究甘草苷对中波紫外线(UVB)诱导人皮肤角质形成细胞(Ha Ca T)凋亡的影响。方法:以不同浓度的甘草苷作用于Ha Ca T细胞,噻唑蓝(MTT)比色法筛选甘草苷的有效安全浓度;用30 m J·cm-2的UVB作用于Ha Ca T细胞,建立光老化模型,MTT比色法检测光老化Ha Ca T细胞增殖率;流式细胞术检测各组细胞中活性氧自由基(ROS)含量和总凋亡率;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测光老化Ha Ca T细胞中半胱氨酸天冬氨酸-3(Caspase-3),半胱氨酸天冬氨酸-9(Caspase-9)mRNA表达水平;蛋白免疫印记法(Western blot)检测光老化Ha Ca T细胞中B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),Caspase-3,Caspase-9蛋白表达量。结果:筛选出甘草苷的最佳有效安全浓度为1×10-7,1×10-6,1×10-5mol·L-1。与空白组比较,UVB组细胞增殖率显著降低(P0.01),细胞中ROS含量和总凋亡率显著升高(P0.01),Caspase-3,Caspase-9 mRNA表达水平显著升高(P0.01);Bcl-2蛋白表达量显著降低(P0.01),Caspase-3,Caspase-9蛋白表达量显著升高(P0.01)。与UVB组比较,1×10-7,1×10-6,1×10-5mol·L-1甘草苷+UVB组细胞增殖率显著升高(P0.01);细胞中ROS含量和总凋亡率显著降低(P0.05,P0.01),Caspase-3,Caspase-9 mRNA表达水平显著降低(P0.05,P0.01);Bcl-2蛋白表达量显著升高(P0.05,P0.01),Caspase-3,Caspase-9蛋白表达量显著降低(P0.05,P0.01)。结论:甘草苷能通过促进抗凋亡因子Bcl-2蛋白的表达,减少促凋亡相关细胞因子Caspase-3,Caspase-9 mRNA和蛋白的表达,从而抑制UVB诱导的Ha Ca T细胞凋亡。     

夹脊电针对ALS-SOD1G93A小鼠腰髓运动神经元细胞凋亡及Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达的影响

目的:通过观察夹脊电针对肌萎缩侧索硬化症转基因小鼠(ALS-SOD1~(G93A))腰髓运动神经元细胞凋亡及Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达的影响,探讨夹脊电针防治ALS的作用机制。方法:将36只雄性ALS-SOD1~(G93A)小鼠随机分为模型组、手针组和电针组,每组12只,同窝12只雄性野生型小鼠作为野生组。手针组针刺腰部夹脊穴,每周2次,每次20min,连续治疗4周;电针组采用电针腰部夹脊穴治疗,电针刺激量为1mA,2Hz,疗程同手针组。转棒实验检测各组小鼠运动功能,TUNEL染色观察各组小鼠腰髓前角运动神经元细胞凋亡情况,免疫组织化学及Western Blot法检测小鼠腰髓Bax、Bcl-2、Caspase-3表达水平。结果:与野生组比较,模型组转棒时间下降(P0.05),腰髓前角凋亡细胞增加,Bax、Caspase-3阳性细胞增加,Bcl-2阳性细胞减少,腰髓组织Bax、Caspase-3表达水平升高,Bcl-2表达水平降低(P0.01);与模型组比较,手针组、电针组转棒时间显著延长(P0.05),腰髓前角凋亡细胞减少,Bax、Caspase-3阳性细减少,Bcl-2阳性细胞增加,腰髓组织Bax、Caspase-3表达水平明显降低,Bcl-2表达水平明显升高,且电针组改善程度更为显著(P0.01)。结论:夹脊电针可能通过调节ALS-SOD1~(G93A)小鼠腰髓组织Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达,影响运动神经元细胞凋亡,从而延缓ALS的进展。     

从线粒体凋亡通路探讨参附注射液对脓毒症小鼠心肌损害的影响

目的观察参附注射液对脂多糖(Lipopolysaccharides, LPS)所致脓毒症小鼠心肌线粒体凋亡及Caspase-9蛋白表达的影响,从线粒体凋亡通路探讨参附注射液对脓毒症心肌细胞的保护机制。方法选用56只6周龄SPF级雄性B6小鼠,随机分为正常对照组(NC)、假脓毒症组(Sham)、脓毒症模型组(LPS)、参附注射液组(SFI)4组。采用腹腔注射LPS法构建脓毒症小鼠模型,分别于造模后6小时、12小时、24小时取小鼠心肌组织,电镜观察小鼠心肌超微结构变化,苏木精-伊红染色(HE)及心肌细胞凋亡TUNEL检测,Western-blot法测定心肌组织B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(B-cell lymPhoma-2,Bcl-2)、BH3介导的死亡域激动剂(BH3 interacting-domain death agonist, Bid)、截短型Bid(truncated Bid, tBid)、半胱胺酸-天门冬胺酸酶(cysteine-dePendent asPartate-sPecifc Proteases-9,Caspase-9)蛋白表达。结果电镜可见脓毒症小鼠心肌线粒体肿胀明显,部分出现"空泡样变"。造模后12小时LPS模型组小鼠心肌线粒体改变最严重,经过参附注射液处理后小鼠心肌空泡样变以及线粒体肿胀均有明显缓解。HE染色可见LPS组心肌结构破坏、局部坏死、间质水肿、炎性细胞浸润以及空泡样变;而SFI组心肌结构基本完整,间质水肿以及炎性细胞浸润明显改善;TUNEL染色可见参附组凋亡水平有明显改善(P0.05);Western-blot检测造模后LPS组小鼠心肌Bcl-2表达较Sham组明显降低,SFI组与LPS组相较表达明显增强,差异具有统计学意义(P0.01),同时SFI组Bid、tBid、Caspase-9表达较LPS组明显降低,差异有统计学意义(P0.01)。结论参附注射液可通过下调脓毒症小鼠心肌Bid、tBid、Caspase-9表达,上调Bcl-2表达,保护心肌线粒体结构和功能,抑制心肌线粒体凋亡,对脓毒症小鼠心肌损伤起保护性作用。     

夹脊电针对脊髓损伤小鼠运动功能及凋亡蛋白的影响

目的观察夹脊电针对脊髓损伤小鼠模型运动功能及凋亡蛋白的影响。方法 96只C57BL/6雌性小鼠随机分为假手术组、模型组、针刺组和电针组[疏密波(2/100Hz),0.2mA,15min],每组24只,采用腹腔注射麻醉剂制备T10SCI模型。选择T8和T12两对夹脊穴进行针刺治疗,每天1次,干预28d。观察CatWalk步态分析,采用Western Blot测定脊髓P53、Bax、Bcl-2蛋白表达。结果与模型组同期比较,电针组14、28d小鼠爪印面积、支撑时相比增加,P53表达降低,28d下肢摆动速度加快(P<0.05);针刺组28d小鼠下肢摆动速度、支撑时相比增加,7、14、28dP53表达降低(P<0.05);电针组和针刺组3~28dBax表达降低,7~28dBcl-2表达升高(P<0.01,P<0.05)。与针刺组同期比较,电针组28d爪印面积变大、支撑时相比增加,P53表达降低,7、14dBax表达降低,7、28dBcl-2表达升高(P<0.05)。结论夹脊电针可促进脊髓损伤小鼠运动功能恢复,抑制P53、Bax和促进Bcl-2表达。