温阳解郁汤对皮质酮诱导的抑郁大鼠海马神经可塑性的影响

目的:通过建立肾阳虚型抑郁症大鼠模型,观察温阳解郁汤对大鼠海马组织结构的干预作用.方法:将105只SD大鼠随机分为正常组,模型组,氟西汀组(4.17 mg·kg-1),逍遥散组(1.88 g·kg-1)及温阳解郁汤低、中、高剂量组(1.25,2.50,5.00 g·kg-1),每组15只,除正常组外其他各组采用皮下注射...     

补阳还五汤对脑缺血再灌注大鼠恢复期突触可塑性的影响

目的:探讨补阳还五汤在脑缺血再灌注大鼠恢复期提高突触可塑性的机制研究。方法:建立大脑中动脉栓塞(MCAO)大鼠模型,随机分为假手术组、模型组、补阳还五汤组、补阳还五汤联合缝隙连接蛋白43(Cx43)抑制剂(Gap26)组,补阳还五汤每天灌胃2次(16 g·kg^-1),Gap26于术后第3天腹腔注射,每天1次(25μg·kg^-1);7 d后取材,采用透射电镜观察缺血侧海马突触和缝隙连接超微结构的改变,运用蛋白免疫印迹法(Western blot)和免疫荧光检测缺血侧海马突触素(SYN),生长相关蛋白-43(GAP-43)的表达。结果:电镜下观察到假手术组突触结构完整、清晰,突触数量多,缝隙连接结构清晰;模型组缺血侧海马突触结构溶解,突触数量减少,缝隙连接消失,存在较大间隙,与假手术组比较,SYN,GAP-43的表达明显增高(P<0.05,P<0.01);补阳还五汤组缺血侧海马突触结构较清晰,突触数量增多,缝隙连接结构较完整,与模型组比较,SYN,GAP-43的表达明显增强(P<0.05,P<0.01);而联合使用Gap26后缺血侧海马突触数量较补阳还五汤组减少,仅可见少量结构完整的缝隙连接,补阳还五汤增强SYN,GAP-43的作用被明显抑制(P<0.05,P<0.01)。结论:补阳还五汤可提高脑缺血再灌注恢复期缺血侧海马突触可塑性,其机制可能与增加Cx43的表达促进对SYN,GAP-43的干预有关。     

基于突触可塑性理论研究电针对抑郁模型大鼠行为学及海马突触相关蛋白mTOR、GSK-3β的影响

目的：通过观察电针“印堂”和“百会”对抑郁模型大鼠大的行为学及海马突触相关蛋白mTOR、GSK-3β(糖原合成酶激酶-3β)的影响,探讨针刺治疗抑郁症的作用机制。方法：正常组15只Wistar大鼠,45只WKY(Wistar-Kyoto)大鼠随机分为电针组、假针组、模型组,治疗前后对所有大鼠进行糖水偏好试验(Sugar Preference Test, SPT)、旷场试验(Open Field Test, OFT)和体重测量。电针组取大鼠“百会穴”“印堂穴”电针治疗,假针组进行假针刺干预,模型组和正常组不进行任何干预。电针组、假针组每天干预1次,干预21天。治疗结束后,用Western Blot法检测大鼠海马mTOR、GSK-3β的表达。结果：和Wistar大鼠相比,干预前WKY大鼠的体重、OFT和SPT评分明显降低(P<0.01)。干预21次后,与模型组及假针组相比,电针组大鼠的体重、OFT和SPT评分明显升高(P<0.01);电针组海马mTOR的表达量要比模型组和假针组更高(P<0.05),且正常组的明显高于模型组(P<0.01);电针组海马GSK-3β的表...     

远志-厚朴配伍对厚朴酚、和厚朴酚胃肠代谢的影响

目的: 研究远志配厚朴对大鼠在胃液-肠液-血浆中不同时间厚朴酚、和厚朴酚含量的影响。 方法: 利用甲醇沉淀蛋白处理胃、肠液及血浆样品,采用HPLC测定,色谱条件为Synergi Hydro-RP C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),乙腈-水(51:49)为流动相,流速1 mL·min^-1,检测波长294 nm,柱温30 ℃。 结果: 厚朴组及远志配厚朴组大鼠胃肠液中均测得厚朴酚与和厚朴酚,且配伍组各时间点胃液中的酚类物质含量明显高于单味厚朴组;给药150～480 min时段肠液中的含量高于厚朴组;血浆中仅测得和厚朴酚,配伍组于给药60～480 min时段血浆中和厚朴酚含量高于厚朴组,并有推迟吸收趋势。 结论: 远志配伍厚朴后,可能因远志的助溶效应使胃肠液中的厚朴酚与和厚朴酚含量增加,从而发挥缓解远志胃肠动力障碍作用。首次采用此法,对厚朴缓解远志胃肠动力障碍的胃肠吸收机制开展了探索性研究,具有一定新意。     

针刺血清对无镁培养的新生大鼠海马神经元微管相关蛋白2和生长相关蛋白43表达的影响

目的:观察针刺血清对无镁培养的新生大鼠海马神经元微管相关蛋白2(MAP-2)和生长相关蛋白43(GAP-43)表达的影响,探讨针刺血清改善神经元损伤的可能作用机制。方法:SD大鼠腹腔注射戊四唑诱发急性惊厥后分为针刺组及对照组。针刺组取"百会""大椎"针刺,每日1次,共7 d。末次针刺后腹主动脉取血,提取针刺组大鼠血清作为针刺血清,对照组大鼠血清作为非针刺血清。将原代培养新生大鼠海马神经元分为正常组、无镁组、针刺血清组和非针刺血清组。正常组用细胞外液培养3 h后换无血清培养液培养,无镁组用无镁细胞外液培养3 h后换无血清培养液培养,针刺血清组用无镁细胞外液培养3 h后换成无血清培养液和针刺血清混合培养液培养,非针刺血清组用无镁细胞外液培养3 h后换成无血清培养液和非针刺血清混合培养液培养。4组分别于换液培养2、12、48 h 3个时间点用免疫荧光法和Western blot法检测海马神经元MAP-2和GAP-43蛋白表达情况。结果:与正常组比较,无镁组各时点海马神经元MAP-2蛋白的表达均明显降低(P<0.05,P<0.01),GAP-43蛋白的表达在12、48 h明显降低(...     

厚朴酚与和厚朴酚对大鼠回肠短路电流的影响

目的:研究厚朴酚与和厚朴酚对大鼠回肠短路电流的影响。方法:应用体外Ussing chamber系统评价50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L厚朴酚或和厚朴酚对回肠短路电流的作用。结果:厚朴酚与和厚朴酚均能明显抑制大鼠回肠的短路电流,且短路电流呈浓度依赖性降低,同时,其对短路电流的抑制效应显著高于钙通道阻滞剂维拉帕米;不同浓度的厚朴酚与和厚朴酚预处理可以显著降低10μmol/l乙酰胆碱激活的短路电流的增加。结论:厚朴酚与和厚朴酚可抑制大鼠回肠的短路电流,其作用机制可能是作为钙离子拮抗剂,通过调控肠道钙离子通道功能来抑制钙离子或其他离子的转运。     

熄风胶囊干预治疗对氯化锂-匹罗卡品癫痫大鼠海马突触损伤的影响

[目的]观察中药熄风胶囊单药和联合用药干预治疗对氯化锂-匹罗卡品癫痫大鼠海马突触损伤的影响。[方法]将SPF级健康雄性Wistar大鼠64只随机分为正常组、模型组、熄风胶囊高剂量干预组(熄高组)、熄风胶囊中剂量干预组(熄中组)、熄风胶囊低剂量干预组(熄低组)、熄风胶囊大剂量+托吡酯联合干预组(联高组)、熄风胶囊大剂量+托吡酯1/2剂量联合干预组(联低组)、托吡酯干预组(TPM组)各8只。运用氯化锂-匹罗卡品化学点燃法,复制癫痫大鼠模型,通过采用SABC免疫组化检测突触索(P38)表达水平来反映突触索的生长情况、原位杂交检测生长相关蛋白-43(GAP-43)mRNA的表达水平来反映GAP-43的水平。[结果]1)所有癫痫大鼠海马CA1、CA3及齿状回分子层及颗粒细胞层均可见深染的颗粒状免疫反应产物,呈点片状分布。所有治疗组海马CA1、CA3起始层及齿状回内分子层P38免疫反应产物总面积显著低于模型组(P0.01)。联高组海马CA1、CA3、齿状回区P38免疫反应产物总面积与正常组无统计学差异(P0.05),熄高组海马CA1及CA3区阳性反应物与正常对照组无统计学差异(P0.05)。在海马CA1区联高组和熄高组优于其余各治疗组(P0.05)。在海马CA3区联高组作用优于熄低组和TPM组(P0.05),与其余各治疗组比较无统计学差异(P0.05)。在海马齿状回区联高组作用与其余各治疗组均有统计学差异(P0.05)。2)各治疗组大鼠海马颗粒细胞GAP-43 mRNA表达显著低于模型组(P0.01)。其中海马CA1区联高组和熄高组两组无统计学差异(P0.05),优于熄中组和熄低组(P0.05)。在海马CA3区,各治疗组之间无统计学差异(P0.05)。在海马齿状回区联高组和熄高组与熄中组,熄低组和TPM组之间有统计学差异(P0.05)。[结论]熄风胶囊单药和联合用药能有效的干预氯化锂-匹罗卡品癫痫大鼠海马颗粒细胞层及内分子层P38和GAP-43的表达,从而起到减轻海马损伤的作用。     

电针对魏一凯二氏大鼠抑郁模型大鼠海马CA1区突触可塑性及5-羟色胺转运体蛋白的影响

目的：观察电针对WKY(Wistar Kyoto)抑郁大鼠行为学、海马CA1区突触可塑性、5-HTT蛋白表达的影响。方法：本实验选取10 只雄性Wistar 大鼠为正常组（Control）,30 只雄性WKY 大鼠随机分成模型组（Model）、电针组（EA）和假针组（Sham EA）。通过糖水偏好实验（SPT）、旷场实验（OFT）和强迫游泳实验（FST）进行行为学测试。采用电生理场电位实验,检测电针对抑郁模型大鼠海马CA1区LTP的作用,即对突触可塑性的影响。并使用Western blot方法检测大鼠海马CA1区5-HTT蛋白表达。结果：Model组糖水偏好比低于正常组（P < 0.01）,EA组糖水偏好比明显高于Sham EA组（P < 0.05）。OFT中,与正常组相比较,Model组中央运动时间,总运动时间,中央运动距离,总运动距离,垂直站立次数均减少,且差异有统计学意义。与Model组相比,电针EA组的中央运动时间和总运动时间明显增加（P < 0.05）。FST中,与正常组相比较,Model组大鼠的不动时间明显增加（P < 0.05）。与Sham EA组和Model组相比较,EA组的不动时间明显缩短（P < 0.05）。Sham EA和Model组LTP均诱导失败,EA治疗后两个脑区均可成功诱导出LTP。Model组兴奋性突触后场电位（Fieldexcitatory postsynaptic potential, fEPSP）斜率明显低于Control组（P < 0.001）,与Sham EA组相比,EA组fEPSP斜率明显升高（P < 0.001）。与Control组相比,Model组5-HTT蛋白的表达显著增高P < 0.001）。与Sham EA相比较,EA组5-HTT的表达降低（P < 0.001）。结论：电针能够改善WKY大鼠的抑郁样行为,下调海马CA1区5-HTT蛋白的过表达,从而修复受损的海马突触可塑性,这可能是电针治疗抑郁症的机制之一。     

厚朴酚对大鼠主动脉收缩的影响

目的:观察厚朴酚对大鼠主动脉收缩的影响.方法:用去内皮大鼠胸主动脉观察厚朴酚对血管环的直接作用及对高钾、苯肾上腺素引起的收缩的对抗作用;观察厚朴酚预孵育后血管环对高钾及苯肾的反应性.结果:直接给药厚朴酚(0～300μM)对胸主动脉基础张力无作用,对高钾、PHE已引起的收缩作用无影响;厚朴酚预孵育5min能剂量依赖性的抑制高钾及PHE引起的收缩作用.结论:厚朴酚预孵育可抑制血管对高钾及PHE的反应性,其机制可能与细胞膜上的电压依赖性钙通道及细胞内钙的释放有关系.     

不同炮制方法对厚朴中厚朴酚与和厚朴酚含量的影响

目的: 测定不同炮制品及地区厚朴中有效成分(厚朴酚与和厚朴酚)含量,进行考察,为制定厚朴的质量标准提供依据。 方法: 采用HPLC法对不同炮制品及地区厚朴中厚朴酚与和厚朴酚的含量进行测定。色谱柱Phenomsil C₁₈柱(4.6 mm ×250 mm,5μm),流动相甲醇-水(78 ∶22),流速1 mL·min^-1,柱温25 ℃,检测波长294 nm.进样量10 μL。 结果: 不同炮制品及地区的厚朴在有效成分含量上有一定差异。 结论: 该方法简便、准确、分离效果好,可以用来测定厚朴中有效成分的含量。     

Antidepressant-like effect of magnolol on BDNF up-regulation and serotonergic system activity in unpredictable chronic mild stress treated rats

Magnolol is the main constituent identified in the barks of Magnolia officinalis, which has been used for the treatment of mental disorders including depression in China. In this study, we investigated the antidepressant‐like effect of magnolol, and its possible mechanisms in rats subjected to unpredictable chronic mild stress (UCMS). High performance liquid chromatography with electrochemical detection (HPLC‐ECD) and immunohistochemical staining analysis were applied to explore the mechanisms underlying the antidepressant‐like effect of magnolol. Magnolol (20, 40 mg/kg) significantly reversed UCMS‐induced reduction in sucrose consumption and deficiency in locomotor activity. In addition, it was observed that administration of magnolol (20, 40 mg/kg) restored brain‐derived neurotrophic factor (BDNF) expression, and normalized the serotonergic system changes in the UCMS‐treated rats. These results confirmed the antidepressant‐like effect of magnolol, which might be based primarily on its ability to increase the BDNF expression and enhance the activity of the serotonergic system in rat brains. Copyright © 2012 John Wiley & Sons, Ltd.     

电针对慢性应激抑郁模型大鼠海马神经元凋亡与再生的影响

目的:观察电针对慢性应激抑郁模型大鼠海马组织中抗凋亡因子(Bcl-2)和生长相关蛋白-43(GAP-43)表达的影响,探讨电针对慢性应激抑郁大鼠海马神经元凋亡与再生的影响机制。方法:32只SD大鼠,随机分组为空白组、模型组、电针组、氟西汀组。采用旷场实验进行行为学评价;采用免疫组化法检测海马组织中Bcl-2和GAP-43的表达。结果:模型组大鼠旷场试验水平穿越格数竖立次数次均明显低于空白组(P0.05);电针组、氟西汀组均明显高于模型组(P0.05)。模型组与空白组之间海马中Bcl-2表达没有显著性差异;电针组与模型组之间有显著性差异(P0.05)。模型组与空白组比较海马中GAP-43表达显著降低(P0.05);氟西汀组与模型组相比表达均有增高趋势,电针组的表达则显著高于模型组(P0.05)。结论:慢性应激可以引起大鼠的活动量降低和探究行为减少,电针可能通过调节海马神经元凋亡与再生而改善慢性应激抑郁大鼠的行为学症状,可能是电针抗抑郁效应的作用机制之一。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对慢性温和不可预知应激抑郁小鼠的保护作用

目的研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)的抗抑郁作用。方法制备慢性温和不可预知应激(CUMS)刺激小鼠抑郁模型;通过旷场实验、体质量、糖水偏爱率、强迫游泳实验和悬尾实验静止时间等指标考察EGCG的抗抑郁作用;检测血清皮质酮(CORT)、促肾上腺皮质激素(ACTH)水平;检测海马组织丙二醛(MDA)水平及超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;实时定量PCR(RT-PCR)检测海马组织中吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6 m RNA表达。结果 EGCG改善小鼠抑郁状态行为活动;降低血清CORT、ACTH水平;减少海马中MDA的量,提高SOD、GSH-Px活性,下调IDO、IL-6及IL-1βm RNA表达。结论 EGCG可改善小鼠抑郁症状,其机制可能与降低血清中CORT、ACTH水平,抑制海马中MDA的生成,促进SOD、GSH-Px分泌,以及下调IDO、IL-6、IL-1β基因表达有关。     

基于代谢通路调控的沙棘籽油抗抑郁作用机制研究

目的采用1H-NMR代谢组学技术结合KEGG数据库,分析沙棘籽油干预慢性温和不可预知应激(CUMS)抑郁大鼠血清和尿液中代谢物及其代谢通路的变化,探讨沙棘籽油抗抑郁的作用机制。方法复制CUMS模型,同步给予沙棘籽油干预,连续4周。采集大鼠血清和尿液进行1H-NMR检测,利用代谢组学技术分析血清和尿液中代谢物的变化,搜索KEGG数据库分析代谢通路。结果在血清和尿液中共寻找出17个与抑郁症相关的潜在生物标志物,其中血清中有9个,包括与对照组比较升高的脂质、β-羟基丁酸、乳酸、N-乙酰糖蛋白和降低的丙氨酸、甜菜碱、氧化三甲胺、α-葡萄糖、β-葡萄糖;尿液中有8个,包括与对照组比较升高的琥珀酸酯、天冬氨酸盐和降低的醋酸、2-酮戊二酸、柠檬酸、三甲胺、甜菜碱、苯丙氨酸。沙棘籽油干预后上述差异代谢物均出现了不同程度的回调,接近对照组水平。结论沙棘籽油主要是通过调节体内的能量代谢、脂质代谢、氨基酸代谢、甲胺代谢和神经递质的合成等代谢通路发挥抗抑郁作用。     

交泰丸对慢性温和不可预知性应激抑郁模型大鼠炎性细胞因子的影响

目的探讨交泰丸对慢性温和不可预知性应激(CUMS)抑郁模型大鼠致炎、抗炎细胞因子的影响。方法大鼠采用CUMS方法制备抑郁模型,比较体质量变化,进行糖水消耗实验和开场实验;并采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定大鼠血清及海马组织中炎性细胞因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-4、IL-10的水平,尼氏染色法观察大鼠海马神经元形态。结果与对照组比较,模型组大鼠糖水消耗量、穿越横格数和直立次数均明显减少;血清及海马内IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-4明显升高,IL-10明显降低;海马神经元分层不清,排列紊乱,尼氏体浅染或消失。与模型组比较,交泰丸给药组大鼠糖水消耗量、穿越横格数和直立次数均明显增加;血清及海马内IL-1β、IL-6、TNF-α明显降低,IL-4、IL-10明显升高;海马神经元分层较明显,尼氏体浅染。结论交泰丸可明显改善大鼠抑郁样行为及海马神经元损伤,其机制可能与下调血清及海马致炎细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α和上调抗炎细胞因子IL-4、IL-10表达有关。     

百事乐胶囊对慢性应激抑郁大鼠海马MAP-2表达的影响

目的：探讨百事乐胶囊对慢性应激抑郁大鼠海马神经元形态结构和功能的影响。方法：在48只sD大鼠中随机选择12只（雌雄各半）为正常组,不进行任何刺激,正常饲养。对其余大鼠给予21d慢性不可预见性应激造模,造模完成后将其随机分为模型组、百事乐组和氟西汀组,每组12只,雌雄各半。对各组大鼠予相应药物进行灌胃给药治疗。模型组大鼠灌胃蒸馏水,每天1次,灌胃给药1h后,再随机给予1种刺激,持续21d。分别于造模后及给药结束后测定各组大鼠糖水偏好度。尼氏染色观察大鼠海马神经元尼氏体,免疫组化检测大鼠海马MAP-2的表达。结果：与模型组相比,百事乐组和氯西汀组大鼠的糖水偏好度明显提高（p〈0．01）;模型组大鼠海马尼氏体减少,颜色变浅,而百事乐组大鼠尼氏体丰富,胞质色深;免疫组化显示百事乐胶囊可提高抑郁大鼠海马MAP-2的平均光密度值,与模型组比较,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：百事乐胶囊可通过增加尼氏小体的数量,调节海马MAP-2的表达以促进抑郁大鼠海马神经功能恢复。     

舒郁抑斑方对慢性心理应激促发动脉粥样硬化大鼠的保护作用

舒郁抑斑方(SYYB)对伴有慢性心理应激的冠心病患者有较好的治疗作用。为观察SYYB对慢性心理应激促发大鼠动脉粥样硬化(athero-sclerosis,As)早期病变形成及其炎症反应的影响,采用高脂饵食+维生素D3(VD3)腹腔注射建立大鼠As早期病变模型(As),在此基础上采用不可预知慢性应激刺激法(As+CUMS),观察慢性心理应激是否加重大鼠病变及SYYB(6.6,13.2,26.4 mg·kg~(-1))的干预作用。采用悬尾实验和新奇实验法观察大鼠行为学改变,检测血清应激激素促肾上腺素(adrenocortico-tropic hormone,ACTH)、皮质醇(cortisol,Cor)、去甲肾上腺素(noradrenaline,NE)的含量,称量胸腺、肾上腺的质量,综合评价SYYB对模型大鼠心理应激的影响。取主动脉弓HE染色观察血管组织病理改变,测定血清甘油三酯(triglycerides,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、高密度脂蛋白(HDL-C),评价SYYB对大鼠As病变的影响。检测血清高敏C反应蛋白(high-sensitivity C-reactive protein,hs CRP)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6),评价SYYB对As大鼠炎症反应的影响。实验结果显示,与空白组相比,As组TC,TG含量增高,HDL-C明显降低,HE染色可见主动脉壁增厚。As+CUMS组TC,TG含量显著增高,HDL-C明显降低,HE染色可见主动脉弓内膜增厚,泡沫细胞形成,行为学评价及血清应激激素检测结果显示动物存在慢性应激反应,该实验As+CUMS模型复制成功。SYYB可降低血清中TC,TG含量,减轻主动脉泡沫细胞、钙化灶及炎性细胞浸润,对血清中ACTH和Cor,NE有明显的降低作用,同时有效降低了血清中动脉粥样硬化相关的炎性标志物hs-CRP,IL-1和IL-6。提示SYYB对心理应激促发As大鼠的保护作用,其作用与改善神经-内分泌网络平衡及调节相关炎症反应有关。     

加味四逆散对慢性轻度不可预计性心理应激模型大鼠神经内分泌免疫网络调控作用的研究

目的:观察慢性心理应激对模型大鼠神经内分泌免疫(NIM)网络的影响以及加味四逆散的调治作用。方法:大鼠随机分为6组:雌性正常组,雌性模型组,雌性加味四逆散组,雄性正常组,雄性模型组,雄性加味四逆散组。建立慢性轻度不可预计性心理应激模型,采用放射免疫方法检测大鼠下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、血清肾上腺酮(CORT)和促肾上腺皮质激素(ACTH)含量,观察肾上腺/胸腺器官形态学改变,流式细胞仪计数外周血T淋巴细胞CD3+、CD4+、CD8+。结果:慢性心理应激大鼠下丘脑—垂体—肾上腺皮质(HPA)轴功能亢进,免疫功能受到抑制。加味四逆散可调节慢性心理应激大鼠HPA轴的兴奋性,改善慢性心理应激大鼠免疫功能改变。结论:慢性轻度不可预计性心理应激模型大鼠NIM网络功能发生异常改变,而加味四逆散对其具有一定的调治作用。