金铁锁种质资源的遗传多样性分析

目的研究中国西南特有濒危药用植物金铁锁的遗传多样性。方法应用AFLP分子标记技术对具有代表性的7个金铁锁居群,共137个个体进行分析。结果在金铁锁的物种水平上,Nei’s基因多样性指数(He)、Shan-non’s信息指数(I)、多态位点百分率(PPB)分别为0.2434±0.1791、0.3735±0.2485、82.30%;在其居群水平上分别为0.0918±0.1610、0.1402±0.2362、30.48%。居群间Nei遗传分化指数(Gst):0.6244;Shannon’s多样性基因遗传分化系数(Ist):0.6246。聚类表明:地理距离相对远的丽江居群与个旧居群遗传距离最近;昆明居群与其他居群遗传距离较远。统计获得9条可区分各地方居群的特征指纹带。结论金铁锁种内的遗传多样性水平丰富,而居群内遗传多样性水平较低,居群间遗传分化显著;各居群间亲缘关系与地理距离无明显相关性;其种内特征带与各居群特征带结合,可以为AFLP分子标记技术用于其种质资源的鉴定、遗传育种提供重要的依据。     

苦玄参转录组EST-SSR引物开发及群体遗传多样性分析

目的研究18个苦玄参种群的遗传多样性及亲缘关系,为苦玄参的资源评价及开发利用提供依据。方法采用EST-SSR引物开发技术,利用SSR分子标记,分析18个种群的遗传多样性,并基于遗传距离对其进行聚类分析,明确各种群间的亲缘关系。结果从100对EST-SSR标记中,筛选出具有多态性的引物48对。随机抽取20对具有多态性的引物对18个种群进行扩增,共扩增出71个等位基因,平均每对引物3.55个。各引物间多态位点百分数(P)为0～40.7%,平均19.9%;多态信息含量(PIC)为0～0.794 1,平均0.397 7;Shannon信息指数(I)为0～1.814 3,平均0.808 4。观测杂合度(Obs_Het)为0～0.442 3,平均值0.212 7;预期杂合度(Exp_Het)变化范围0～0.826 9,平均值0.455 8。18个种群群内近交系数(Fis)值为-0.095 3～0.663 9,平均0.159 2;总群体内亚群间近交系数(Fit)值为0.062 6～0.858 7,平均0.537 2;遗传分化系数(Fst)为0～0.686,平均0.449 6。基因流(Nm)在0.114 4～0.759 4,平均值为0.306 1。各种群基因多样性指数(Nei)为0～0.401 6、I为0～0.620 9,广西梧州最高,云南普洱龙潭乡最低。云南景洪勐龙镇和云南景洪景哈乡遗传距离最近,仅0.031 9;广西龙州和云南勐海县打洛镇遗传距离最大,为0.963 8。在遗传距离0.321 3处,可将18个种群分成4个群体,其中广西3个种群归入同一群体,云南勐满镇、勐伦镇及勐遮镇归为同一个群体,第3个群体为云南勐海县勐宋乡,其余种群归入第4个群体。结论 18个种群遗传分化水平不一致,各种群杂合度差异较大。种群间Nm较小,群体基因交换不大;群体内存在一定的近交率,种群亲缘关系受地理隔离影响较大。     

金铁锁根的化学成分研究

目的：研究金铁锁根的化学成分。方法：采用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱分离纯化,利用ESI-MS,EI-MS,NMR技术确定化合物的结构。结果：分离并鉴定了7个化合物,分别为goyaprosaponin(1),大豆脑苷Ⅰ(soya-cerebrosideⅠ,2),鸢尾苷(tectoridin,3),α-菠甾醇(α-spinasterol,4),正二十五烷酸(5),β-谷甾醇(6),胡萝卜苷(7)。结论：化合物2～7均为首次从该属植物中分离得到。     

金铁锁种子萌发试验

目的:了解金铁锁种子萌发特性.方法:将新采的金铁锁种子,当天用培养皿和花盆播种.结果:培养皿开始发芽时间为播后的第7天,发芽高峰为播后的第17天,发芽结束时间为播后的第22天,发芽率46.7%,盆播开始出苗时间为播后的第15天,出苗高峰为播后的第21天,出苗结束时间为播后的第45天,出苗率为58.1%.结论:金铁锁种子在人工环境下容易萌发,无休眠现象,但出苗时间持续较长.     

基于EST-SSR分子标记的栀子野生群体遗传多样性研究

目的研究栀子Gardenia jasminoides野生群体遗传多样性,为栀子野生植物资源的保护和合理利用提供科学依据。方法利用14对EST-SSR引物对栀子19个野生群体573个个体进行研究,计算遗传参数,分析遗传多样性,进行聚类分析。结果检测到75个等位基因,发现栀子野生群体有较高的遗传多样性水平(He=0.703),栀子野生群体的基因多样度(Nei)平均为0.603,Shannon多样性指数(I)平均为1.10;群体间表现为中等程度的遗传分化(Fst=0.141)和较高水平的基因流(Nm=1.523),AMOVA方差分析结果(0.124)显示群体变异主要以群体内变异为主,Mantle检验分析结果显示地理距离与遗传距离相关程度较低,TPM检验结果显示栀子73.7%的群体在历史近期经历过瓶颈效应。结论栀子野生群体目前保持有较高的遗传多样性水平。     

金铁锁化学成分研究

采用硅胶、凝胶柱色谱等多种分离手段从金铁锁Psammosilene tunicoides中分离得到3个化合物。根据化合物的理化性质和光谱数据鉴定其结构分别为 3,3'-(4,5-dimethoxynaphthalene-2,7-diyl) bis(1-nitropropan-1-one)(1),α-菠甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷(2) 和α-菠甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷-6'-O-棕榈酸酯(3)。1为含硝基的新化合物,2和3为从本属植物中首次分离得到。     

苗族药物金铁锁研究进展

苗药金铁锁(苗语:Jenb tieeg sox)系苗族习用药材[1],首载于<滇南本草>,为石竹科植物金铁锁 Psammosilene tunicoides.W.C.Wu et C.Y.Wu的干燥根.别名独定子、昆明沙参、蜈蚣七、对叶七、白马分鬃等,分为布于贵州、四川及云南、西藏等地,具有散瘀定痛、止血、消痈排脓之功,用于跌打损伤、风湿痛、胃痛、创伤出血等的治疗[2].目前金铁锁作为一种民间药物被日益重视,正在进行广泛深入的研究和开发.为了系统整理和进一步研究,现就金铁锁的研究状况做一综述.     

珍稀濒危药用植物金铁锁研究进展

金铁锁属石竹科金铁锁属,为单属单种多年生草本植物。由于其根部具有较高的药用价值,遭到制药企业大规模采挖,目前野生居群呈间断分布,居群大小和数量逐年减少,濒危程度日趋严重。文章总结综述近年来金铁锁在分类与系统学地位、生态地理分布与生活史、化学成分与药理作用、胚胎与繁殖生物学、遗传多样性与遗传结构方面的最新研究进展,为更全面地探讨金铁锁的濒危机制、制定合理的保护措施、以及规模化的GAP种植提供参考。     

金铁锁有效部位的化学成分

目的:研究金铁锁有效部位的化学成分.方法:采用柱色谱法从金铁锁的正丁醇部位分离得到7个化合物,通过波谱技术鉴定了5个化合物.结果:5个化合物分别是16-异皂树酸(16-isoquillaic acid,1)、丝石竹苷元(gypsogenin,2)、α-菠甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷(α-spinasterol-3-O-β-D-glucoside,3)、α-菠甾醇(α-spinasterol,4)、胡萝卜苷(daucosterol,5).结论:化合物1～3为首次从金铁锁中分离得到的天然化合物.     

金铁锁提取工艺的研究

目的:优选金铁锁的提取工艺。方法:采用正交试验法,以金铁锁提取物提取率为主要考察指标,结合生产成本,对影响金铁锁提取工艺的因素进行了研究。结果:试验设计三因素中提取方式有显著影响。结论:金铁锁的最佳提取工艺为:金铁锁根粉用80%乙醇浸渍3次,48 h/次,过滤,滤液减压浓缩成浸膏,加水溶解,水溶液经DM-101型大孔吸附树脂柱层析,分别用10%、20%及80%的乙醇洗脱,收集80%乙醇洗脱液,减压浓缩经喷雾干燥得金铁锁提取物。     

金铁锁叶绿体基因组序列及其系统发育分析

目的解析金铁锁叶绿体基因组结构和确定其在石竹科的系统位置。方法基于二代测序技术IlluminaHiseq平台,对金铁锁叶绿体基因组进行测序,使用生物信息学分析软件进行组装和注释,并以苋科植物千穗谷为外类群,通过RAxM L 8.2.11软件构建ML系统发育树,分析石竹科属间的亲缘关系。结果金铁锁叶绿体基因组总长为153977bp。LSC和SSC区被2个反向重复区域IRs隔开,其大小分别为84 385、17 526、26 033 bp。除去重复后,共编码109个基因,包含75个PCGs,30个tR NA和4个rR NA基因。总的CG含量为36.5%,IR区(42.4%)GC含量明显高于LSC(34.2%)和SSC(30.1%)区。在系统进化树中,金铁锁与长萼瞿麦互为姊妹类群,且各节点的支持率较高,能够清晰反映属间的亲缘关系。结论本研究对金铁锁叶绿体基因组结构进行了解析,并探讨了石竹科属间系统发育关系,为金铁锁种质资源综合评价、系统进化等研究提供有效的科学数据。     

中药金铁锁中一个新的环七肽

目的: 研究中药金铁锁中的化学成分。 方法: 利用葡聚糖凝胶Sephadex LH-20、硅胶、RP-18反相柱、中压等色谱方法进行化合物的分离纯化,根据化合物的理化性质、光谱数据进行结构鉴定。 结果: 从中药金铁锁中分离得到两个环七肽成分,tunicyclin C (1)和tunicyclin K (2)。 结论: Tunicyclin K 为一个新的天然产物。     

金铁锁根中2个新的麦芽酚苷类化合物

目的研究金铁锁Psammosilene tunicoides根的化学成分。方法经硅胶、Sephadex LH-20凝胶、ODS反相硅胶等柱色谱方法进行分离,并运用NMR、HR-ESI-MS等波谱学方法进行化合物的结构鉴定。结果从金铁锁根80%乙醇水提取物中分离得到2个麦芽酚苷类化合物,分别鉴定为麦芽酚-3-O-[6-O-(4-O-α-L-吡喃鼠李糖基)-Z-p-香豆酰基]-β-D-吡喃葡萄糖苷(1)和麦芽酚-3-O-[6-O-(4-O-α-L-吡喃鼠李糖基)-E-p-香豆酰基]-β-D-吡喃葡萄糖苷(2)。结论化合物1和2为新的麦芽酚苷类化合物,分别命名为金铁锁酚苷A和B。     

野生和栽培金铁锁镇痛功效及有效部位的比较

目的:比较野生和栽培金铁锁的镇痛效果及其具镇痛活性的有效部位.方法:提取分离获得野生和栽培金铁锁根部不同极性的化合物,运用醋酸扭体法和热板法研究其对小鼠疼痛的抑制效果.结果:无论是野生还是栽培的金铁锁,其浸膏的镇痛效果相似,均含有高活性的镇痛成分.从化学刺激致痛的抑制效果来看,栽培与野生金铁锁活性成分均存在于正丁醇(扭体抑制率分别为99.1％ ±3.0％和100.0％±0.0％)、乙酸乙酯(97.9％±6.3％和81.9％±11.7％)和石油醚部分(78.8％±17.7％和70.9％±10.3％),但栽培金铁锁乙酸乙酯部分的镇痛效果(97.9％±6.3％)明显优于野生金铁锁(81.9％±11.7％,P＜0.05).从热刺激致痛模型的镇痛作用来看,野生金铁锁的活性部位为正丁醇部分(30 min痛阈提高率为166.5％ ±71.6％,60min为186.9％±79.0％),栽培金铁锁的活性部位为正丁醇部分(30 min痛阈提高率为128.3％±53.1％,60 min为136.5±65.2％)和乙酸乙酯部分(30 min为53.7％±24.4％,60 min为186.9％±79.0％).结论:虽然人工栽培金铁锁的镇痛活性成分与野生药材有所不同,但其镇痛功效与野生药材无明显区别,可作为镇痛药物等效替代野生药材.     

金铁锁中的四个环二肽

从石竹科植物金铁锁Ｐｓａｍｍｏｓｉｌｅｎｅ ｔｕｍｉｃｏｉｄｅｓ中分离得到２个环二肽及由２个环二肽组成的混合物。它们的结构经光谱鉴定为环（丙－丙）（Ⅰ）、环（丙－缬）（Ⅱ）、环（丙－亮）（Ⅲ）和环（丙－异亮（Ⅳ）,它们均为新的天然产物。     

珠子参种质资源遗传多样性的ISSR分析

目的研究珠子参Panax japonicus种质资源的遗传多样性。方法采用ISSR分子标记技术,通过聚类分析和主坐标分析,研究3个主要产地珠子参的19个样本的遗传多样性和亲缘关系。结果 13条ISSR引物扩增出181条带,其中有166条呈现多态性,占91.71%,遗传相似系数变化范围0.60~0.83。聚类分析和主坐标分析结果一致,将源于同一地区的珠子参样本聚在一起,呈现出一定的地域性分布规律。结论珠子参样本之间的遗传多样性水平较高,种质间的亲缘关系和地理位置有一定关系。