益肾通络方对膜性肾病大鼠肾保护作用的研究

目的:观察益肾通络方对膜性肾病大鼠肾组织中纤溶酶原激活物抑制因子-1(PAI-1)的表达的影响。方法:将40只SD大鼠随机分为正常组、模型组、西药组(贝那普利)、中药组4组,每组各10只,每只大鼠使用阳离子化牛血清白蛋白(C—BSA)1mg,加入0.5mL磷酸盐缓冲夜(PBS)中,与等量的弗氏不完全佐剂混匀成乳白色悬浊液,在双侧腋下、腹股沟作多点皮下注射进行预免疫。预免疫1周后,每只大鼠尾静脉注射C-BSA2.5mg,每周3次,共3周。造模成功后按正常组与模型组每日1次灌服与治疗组给药相当计量的生理盐水,连续4周。模型组:每日1次灌服与治疗组给药相当剂量的生理盐水,贝那普利组:将贝那普利片研磨成粉末,按10mg/kg溶于5mL生理盐水中,每日灌胃1次,连续4周。益肾通络方组:灌服煎制好的益肾通络方汤剂5mL,每日1次,连续4周,于第7周末观察24h尿蛋白定量、血清总蛋白(TP)、白蛋白(Alb),免疫荧光、电镜及免疫组化法检测PAI-1在肾组织表达的影响。结果:与正常组比较,模型组大鼠出现大量蛋白尿,血清TP、ALB均明显降低,血清TC、TG均明显升高,肾脏病理出现损害,肾小球内PAI-1表达显著增强(P<0.05);与模型组相比较,各治疗组24h尿蛋白定量,总胆固醇(TC)及甘油三酯(TG)均明显降低,血清TP、ALB均明显升高,肾脏病理损害较轻,肾小球内纤溶酶原激活物抑制因子-1(PAI-1)表达减少(P<0.05)。中药组与西药组比较无明显差异(P>0.05)。结论:益肾通络方可显著降低膜性肾病大鼠尿蛋白、提高血浆蛋白,改善血脂代谢,能够抑制PAI-1在肾组织中的表达,减轻足细胞融合,促进受损的肾小球基底膜修复,从而减轻肾脏损伤,延缓肾脏慢性病理进展。     

益肾通络方抑制EGFR及下游信号途径对膜性肾病大鼠肾脏保护作用的研究

目的 探究益肾通络方对膜性肾病大鼠肾组织表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)及足细胞和肾小管上皮细胞凋亡的影响.方法 SD大鼠尾iv阳离子牛血清白蛋白(cationic bovine serum albumin,C-BSA)建立膜性肾病大鼠模型,给予益肾通络方和...     

祛风通络方对阿霉素肾病大鼠足细胞Desmin及CD2AP蛋白的影响

目的探讨祛风通络方对阿霉素肾病大鼠足细胞结蛋白（Desmin）和CD2相关蛋白（CD2-asso—ciatedprotein,CD2AP）的作用。方法一次性尾静脉注射阿霉素制备肾病模型。3周后造模成功,随机分为空白对照组（A组,12只）,模型对照组（B组,8只）,祛风通络方小、中、大剂量组（C组、D、E每组8只）和阳性对照组（F组,8中）。从第4周起,A组和B组给生理盐水,C—E组分别给祛风通络方1．O、2．1、4．2g／mL,F组给泼尼松25mg／kg。各组均灌胃给药,10mL／kg,1次／天,连续28天。期间进行24h尿蛋白定量、血清生化指标检测。实验结束时电镜观察超微结构、Real-timePCR法及Westernblot法检测足细胞骨架蛋白DesminmRNA、裂孔隔膜蛋白CD2APmRNA及其蛋白表达。结果（1）与B组比较,C、D、E、F组24h尿蛋白定量明显降低,差异有统计学意义（P〈0．05）。（2）与B组比较,C、D、E组ALB均有所升高,差畀有统计学意义（P〈O．05）;TC含量明显降低,差异均有统计学意义（P〈0．05）;F组TG反而有明显增加,差异有统计学意义（P〈0．05）。（3）电镜观察发现,D、E、F组与B组比较,足细胞形态均有不同程度改善,特别是足突结构、足突数目改善明显,其D、E组改善更明显。（4）阿霉素肾病大鼠中DesminmRNA、CD2APmRNA及蛋白表达均升高,差异有统计学意义（尸〈0．05）。干预后,与B组比较,C、D、E、F组DesminmRNA和CD2APmRNA表达明显降低,差异有统计学意义（P〈O．05）。（5）与A组比较,B组Desmin、CD2AP蛋白表达显著升高,差异有统计学意义（P〈0．05）。与B组比较,C、D、E、F组CD2AP蛋白表达明显降低,D、E、F组Desmin蛋白表达明显降低,差异均有统计学意义（P〈0．05）;各剂量组间比较,C、D、E组Desmin及CD2AP蛋白表达逐渐降低,差异有统计学意义（P〈0．05）;与F组比较,C、D组CD2AP蛋白表达明显高,E组CD2AP蛋白表达明显低,差异有统计学意义（P〈0．05）;C、D、E组Desmin蛋白表达较高,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论祛风通络方对阿霉素肾病大鼠的治疗作用伴随着改变足细胞骨架蛋白Desmin及裂孔隔膜蛋白CD2AP基因表达的改变而实现。     

益肾通络方对膜性肾病大鼠的肾保护作用及对AMPK/mTOR/ULK1信号通路的影响

目的:通过观察益肾通络方对膜性肾病大鼠自噬相关蛋白的影响,探讨其对膜性肾病大鼠肾脏保护作用的可能分子机制.方法:80只SD大鼠随机抽取20只设为正常组,其余大鼠均采用预免疫和尾静脉注射阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)的方法制作膜性肾病大鼠模型.将模型复制成功的SD大鼠随机分为模型组,盐酸贝那普利组(10 mg·kg-...     

芪苓益肾通络方对脾肾气虚型特发性膜性肾病肾功能及血脂水平的影响

目的 观察芪苓益肾通络方在脾肾气虚型特发性膜性肾病(IMN)中的应用效果及对肾功能及血脂水平的影响。方法 收集衡水市中医医院内分泌肾病科门诊及病房就诊的脾肾气虚型IMN患者100例,根据随机数字表法将入组患者分为治疗组与对照组,各50例。其中对照组给予糖皮质激素联合环磷酰胺治疗,治疗组在使用糖皮质激素联合环磷酰胺基础上加用芪苓益肾通络方,治疗周期均为3个月。观察治疗前后肾功能及血脂水平的变化及药物不良反应情况,并对治疗前后中医证候严重程度进行积分,评价其总体疗效。结果 治疗后24h尿总蛋白定量(24 UTP)、尿白蛋白/尿肌酐比值(ACR)、肾小球滤过率(GFR)、血清胱抑素C(CysC)、血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、血浆白蛋白(ALB)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)均有所改善(P<0.05),且治疗组改善程度优于对照组(P<0.05);治疗组不良反应发生率略低于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论 将芪苓益肾通络方用于IMN中,疗效良好,相比于常规治疗来说,其在降低尿蛋白,改善肾功能、血脂,延缓疾病进展等方面的优势更显著。     

健脾益肾活血方对膜性肾病大鼠肾组织Nephrin和Podocin表达的影响

目的 观察健脾益肾活血方对膜性肾病大鼠24 h尿蛋白定量及肾脏组织Nephrin、Podocin蛋白表达的影响.方法 将40只SD大鼠随机分为正常组、模型组、贝那普利组、健脾益肾活血组,每组10只.除正常组外,其余组均采用抗FxlA血清一次性尾静脉注射诱导被动型Hey-mann肾炎模型.造模后第1天开始,贝那普利组给予...     

降脂通络软胶囊对膜性肾病大鼠肾保护作用及对肾组织Bcl-2和Bad表达的影响

目的观察降脂通络软胶囊对膜性肾病大鼠模型血液生化指标及对肾组织Bcl-2、Bad表达的影响,探讨降脂通络软胶囊对膜性肾病大鼠的肾保护作用和可能机制。方法将60只SD大鼠随机选取10只为对照组,其余50只进行造模,造模成功后将大鼠随机分为模型组、贝那普利组和降脂通络软胶囊(25、50、100 mg/kg)组,每组各10只,各组按相应剂量给药,在给药的第4周末检测大鼠24 h尿蛋白定量(UTP)及血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)水平;采用电镜、免疫荧光观察肾脏病理形态学变化,免疫组化及Real-time PCR法检测各组大鼠肾组织Bcl-2、Bad的表达情况。结果与模型组比较,各给药组UTP、TC、TG均有所降低(P0.05),各给药组TP、ALB均有所升高(P0.05)。降脂通络软胶囊50、100 mg/kg组与贝那普利组UTP、TC、TG、TP、ALB比较差异不显著(P0.05),效果优于降脂通络软胶囊25 mg/kg组(P0.05)。与对照组比较,各给药组及模型组BUN、Scr均未见明显变化,差异不显著(P0.05)。与模型组相比,各给药组大鼠肾组织中Bcl-2 mRNA的表达较模型组明显上调,Bad mRNA表达下调,差异显著(P0.05);降脂通络软胶囊50、100 mg/kg组与贝那普利组Bcl-2、Bad比较差异不显著(P0.05),效果优于降脂通络软胶囊25 mg/kg组(P0.05)。结论降脂通络软胶囊对膜性肾病大鼠的肾保护作用可能与其上调肾组织中Bcl-2 mRNA表达,下调Bad mRNA表达,抑制足细胞凋亡、修复受损足细胞有关。     

活血通络方对膜性肾病大鼠肾功能的影响及对肾组织IFN-γ、VEGF干预机制的研究

目的:探讨活血通络方治疗膜性肾病的疗效,为临床治疗膜性肾病提出新的方法和途径。方法:将90只SD雄性大鼠,适应性喂养7天后随机选取15只为空白对照组,其余75只参照改良Border法进行造模,造模成功后将大鼠随机分为模型对照组、贝那普利组、活血通络方5.04、10.08、20.16g/kg组。空白对照组与模型对照组大鼠给予蒸馏水,贝那普利组给予盐酸贝那普利片(10mg/kg/d),治疗组给予活血通络方。在给药的第4周末检测大鼠血总蛋白(TP)、血白蛋白(ALB)、24小时尿蛋白定量(24hUTP)、γ干扰素(IFN-γ)、血管内皮生长因子(VEGF)及IFN-γmRNA、VEGFmRNA表达。总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、血尿酸(UA)的水平;观察大鼠肾脏病理形态学变化;免疫组化及Real-time PCR检测肾组织细胞因子的表达。结果:大鼠造模期间,共有3只死亡。造模4周后,造模组大鼠24h尿蛋白定量较空白对照组明显升高;治疗结束后,与空白对照组相比,模型对照组TP、ALB显著下降,24h-UTP、TC及TG显著升高,与模型对照组相比,活血通络方治疗各组与贝那普利组TP、ALB均不同程度升高,TC、TG均明显下降,活血通络方5.04、10.08、20.16g/kg/d组与贝那普利组相比,差异不明显,各组BUN、Scr水平无明显差异;治疗结束后与模型对照组比较,贝那普利组及活血通络方5.04、10.08、20.16g/kg/d组IFN-γmRNA表达下降,VEGF mRNA表达显著上升。结论:活血通络方可明显升高膜性肾病大鼠血总蛋白、血白蛋白水平,显著降低膜性肾病大鼠24小时尿蛋白定量,降低血TC、TG水平,下调膜性肾病大鼠肾组织IFN-γmRNA,上调VEGF mRNA,具有保护肾功能的作用。     

芪苓益肾通络方联合西药治疗老年膜性肾病40例

目的 观察芪苓益肾通络方联合西药治疗老年膜性肾病的疗效。方法 选取2019年6月到2022年6月安徽省濉溪县医院收治的老年膜性肾病患者80例作为研究对象,按随机数字表法分为对照组和观察组,每组40例。对照组采取西药治疗,观察组在对照组基础上加用芪苓益肾通络方治疗。治疗12周后,对比两组临床治疗疗效、不良反应,治疗前后中医症状积分、肌酐、24小时尿蛋白定量、尿素氮、CD₃⁺、CD₄⁺、CD₈⁺水平。结果 观察组患者总有效率为95.00%,对照组的总有效率为77.50%,观察组总有效率明显高于对照组(P<0.05);治疗后观察组腰膝酸软、肢体水肿、倦怠乏力各项评分均低于治疗前及对照组治疗后(P<0.05);治疗后观察组患者CD₃⁺、CD₄⁺水平明显高于治疗前及对照组治疗后,CD₈⁺水平明显低于治疗前及对照组治疗后(P&...     

益肾通络方下调ADAM17介导的EGFR表达干预膜性肾病肾小管上皮细胞凋亡研究

目的 探讨解整合素金属蛋白酶17（a disintegrin and metalloproteinase 17,ADAM17）介导的表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）激活与膜性肾病（membranous nephropathy,MN）肾小管上皮细胞凋亡的关系及益肾通络方的干预作用。方法 尾iv阳离子牛血清白蛋白（cationic bovine serum albumin,C-BSA）构建MN大鼠模型,给予益肾通络方干预4周。实验结束后观察大鼠肾脏病理变化和肾小管上皮细胞凋亡情况;采用Western blotting和qRT-PCR法检测肾组织ADAM17、肝素结合性表皮生长因子（heparin-binding epidermal growth factor,HB-EGF）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）以及磷酸化表皮生长因子受体（phosphorylated epidermal growth factor receptor,p-EGFR）蛋白及mRNA表达情况。结果 与对照组比较,模型组大鼠肾脏病理改变严重,肾小管上皮细胞凋亡增多（P<0.01）,肾组织ADAM17、p-EGFR、HB-EGF、TNF-α蛋白及mRNA表达显著升高（P<0.01）。与模型组相比,益肾通络方组大鼠肾脏病理有所改善,肾小管细胞凋亡减少（P<0.01）,肾组织ADAM17、EGFR、HB-EGF、TNF-α蛋白及mRNA表达显著降低（P<0.01）。结论 MN大鼠肾组织ADAM17表达增多,释放活化HB-EGFR、TNF-α增多,进而激活相应受体EGFR,EGFR活化进一步诱导肾小管上皮细胞凋亡及肾脏纤维化。益肾通络方可以通过降低MN大鼠肾组织剪切酶ADAM17表达,减少HB-EGFR、TNF-α的脱落活化,从而减少EGFR激活,以达到减少肾小管上皮细胞凋亡、延缓肾脏纤维化的作用。     

三焦祛湿方对膜性肾病小鼠肾组织ZO-1和synaptopodin蛋白表达的影响

[目的] 探讨三焦祛湿方对膜性肾病小鼠肾组织的保护作用以及对紧密连接蛋白ZO-1和骨架蛋白synaptopodin表达的影响。[方法] 将60只雌性Balb/c小鼠随机分为对照组10只和造模组50只。造模组预免疫2周后,开始正式免疫。给予尾静脉注射阳离子化牛血清白蛋白（C-BSA）（6.5 mg/kg）,隔日1次,持续6周,复制膜性肾病小鼠模型。6周后,测造模组所有小鼠24 h尿蛋白定量（24 h-UTP）显示均为阳性,提示造模成功;并随机选取4只作肾脏病理,观察到基底膜增厚并伴有免疫复合物的沉积,证实膜性肾病小鼠模型建模成功。将造模组随机分为模型组10只、中药低剂量组10只、中药高剂量组10只和盐酸贝那普利组10只,开始灌胃。空白组和模型组给予0.2 mL生理盐水灌胃,三焦祛湿方高低剂量组以及盐酸贝那普利组分别给予相应药物治疗（中药低剂量组3.71 g/kg、中药高剂量组7.42 g/kg、盐酸贝那普利组1.3 mg/kg）,每日1次,持续4周。实验结束后,麻醉小鼠,腹主动脉取血,收集血液标本检测总胆固醇（TC）、血清白蛋白（Alb）、血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）;光镜下观察肾组织病理形态;免疫荧光检测肾组织免疫球蛋白G（IgG）沉积情况;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肾组织中ZO-1和synaptopodin的表达水平。[结果] 与空白组相比,模型组小鼠24 h-UTP、TC显著升高（P<0.05）,Alb显著降低（P<0.05）;与模型组相比,各治疗组小鼠24 h-UTP、TC显著降低（P<0.05）,Alb显著升高（P<0.05）;各治疗组组间比较,24 h-UTP、TC、Alb无显著性差异（P>0.05）。各组小鼠Scr、BUN相比无显著性差异（P>0.05）。与空白组相比,模型组小鼠肾组织ZO-1、synaptopodin的表达显著减少（P<0.05）;与模型组相比,各治疗组小鼠肾组织ZO-1、synaptopodin的表达显著升高（P<0.05）,各治疗组间ZO-1、synaptopodin的表达无显著性差异（P>0.05）。[结论] 三焦祛湿方对膜性肾病小鼠的肾脏具有保护作用,其机制可能与上调ZO-1和synaptopodin蛋白的表达量有关。     

益肾通络方对MN大鼠miR-514a-5p/TNFSF15信号通路的影响及机制

目的:基于miR-514a-5p/肿瘤坏死因子超家族成员15(TNFSF15)信号通路探讨益肾通络方抑制膜性肾病(MN)大鼠肾小球足细胞凋亡的分子机制.方法:80只SD大鼠采用预免疫和尾静脉注射阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)的方法建立MN大鼠模型,并使造模成功的MN大鼠随机分为模型组,益肾通络方高、中、低剂量组(2...     

扶正祛风方治疗原发性肾小球病蛋白尿疗效观察

目的观察扶正祛风方治疗原发性肾小球病中特发性膜性肾病和非特发性膜性肾病蛋白尿疗效。方法对19例符合纳入标准的原发性肾小球病患者给予扶正祛风方治疗3个月,统计IMN组与非IMN组治疗结果。结果治疗后IMN组和非IMN组24h-UPr均下降,差异均有统计学意义（P〈0.05）,但2组间差异无统计学意义（P〉0.05）;IMN组蛋白尿临床总有效率90.0%,非IMN组为88.9%,2组间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论扶正祛风方可降低原发性肾小球病患者蛋白尿,对于IMN和非IMN患者的疗效相当,扶正祛风法可有效降低IMN患者蛋白尿。     

丹参多酚酸盐对阳离子化牛血清白蛋白致膜性肾病大鼠的影响

目的观察丹参多酚酸盐对阳离子化牛血清白蛋白致膜性肾病大鼠血液生化指标、肾组织病理形态及足细胞裂孔隔膜蛋白CD2相关蛋白(CD2AP)、结蛋白(Desmin)表达的影响,探讨丹参多酚酸盐对膜性肾病大鼠的肾保护作用及其可能机制。方法健康雄性SD大鼠随机分为对照组和造模组,采用尾iv阳离子化牛血清白蛋白的方法复制膜性肾病大鼠模型。造模成功的大鼠随机分为模型组、盐酸贝那普利组和丹参多酚酸盐低、中、高剂量(16.7、33.3、66.7 mg/kg)组。每组按相应剂量给药,给药结束后检测大鼠24 h尿蛋白定量(UTP)和血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)水平;免疫荧光、光镜、电镜下观察大鼠肾脏病理形态;免疫组化及实时荧光定量PCR(q RT-PCR)法检测各组大鼠肾组织CD2AP、Desmin m RNA的表达情况。结果与对照组比较,模型组大鼠UTP显著增加(P0.01),血清TC、TG水平显著升高(P0.01),血清TP、ALB水平显著降低(P0.01)。与模型组比较,各治疗组大鼠UTP、TC、TG水平均显著降低(P0.05、0.01),TP、ALB水平均显著升高(P0.01);丹参多酚酸盐各剂量组与盐酸贝那普利组大鼠UTP、TC、TG、TP、ALB比较无显著差异;丹参多酚酸盐各剂量组组内比较亦无明显差异。各组大鼠BUN、Scr相比无明显差异。与对照组比较,模型组大鼠肾组织CD2AP蛋白及m RNA表达量均显著减少,Desmin蛋白及m RNA表达量显著增多(P0.01);与模型组比较,各治疗组大鼠CD2AP蛋白及m RNA表达量显著增多,Desmin蛋白及m RNA表达量显著减少(P0.01);各治疗组之间相比无显著差异。结论丹参多酚酸盐对膜性肾病大鼠的肾保护作用可能与上调CD2AP表达、下调Desmin表达,抑制足细胞损伤,保护肾小球滤过屏障的完整性有关。     

降压通络方对高血压肾损害大鼠肾脏血管紧张素Ⅱ及肾功能的影响

目的观察降压通络方对自发性高血压肾损害大鼠肾脏血管紧张素II(angiotensin II,Ang II)及肾功能的影响,探讨该方对高血压肾损害大鼠肾脏的保护机制。方法采用16周龄自发性高血压大鼠(Spontaneously Hypertension Rat,SHR)为研究对象,将其随机分为模型组、缬沙坦组、降压通络方高、中、低剂量组、并设正常血压大鼠(Wistar Kyoto,WKY)为空白对照,分别灌胃给药。于给药后4周和8周分别测定大鼠尾动脉压力、血肌酐、尿素氮及肾脏Ang II蛋白含量,并进行大鼠肾脏病理组织学检查。结果给药4、8周后,与模型组比较,各治疗组大鼠血压、肾脏Ang II含量明显降低(P0.01,P0.05),但给药4周各组之间比较无统计学意义,给药8周缬沙坦及降压通络方高、中剂量组均明显低于低剂量组(P0.05);缬沙坦及降压通络方能显著降低模型组大鼠血肌酐、尿素氮(P0.01,P0.05),改善肾小动脉及肾小球硬化,促进肾组织结构的恢复。结论降压通络方能降低高血压肾损伤大鼠肾脏Ang II含量,从而有效降低大鼠血压,改善肾脏病理损害,保护肾功能。     

健脾益肾化瘀通络方治疗移植肾功能延迟的疗效观察

目的:探讨健脾益肾化瘀通络方治疗移植肾功能延迟的效果及对TNF-α、IL-6、hs-CRP等炎性反应因子的影响。方法:选取2013年4月至2018年3月武汉科技大学附属普仁医院收治的移植肾功能延迟恢复的患者60例作为研究对象。按照随机数字表法随机分组法分为对照组和观察组,每组30例。对照组给予血液透析联合免疫抑制方案辅助治疗,观察组在对照组基础上给予健脾益肾化瘀通络方治疗。比较2组肾功能指标(Scr、BUN、Ccr)、炎性反应因子(TNF-α、IL-6、hs-CRP)、肾功能恢复时间及临床疗效。结果:治疗后,2组Scr、BUN、TNF-α、IL-6、hs-CRP水平均降低,Ccr水平均升高(P<0.05);观察组治疗后Scr、BUN、TNF-α、IL-6、hs-CRP水平均降低幅度及Ccr升高幅度均高于对照组(P<0.05);观察组治疗后肾功能恢复时间早于对照组(P<0.05);2组患者总有效率比较(观察组96.67%:对照组90.00%)(P>0.05)。结论:健脾益肾化瘀通络方可显著改善移植肾功能水平,缩短移植肾功能延迟恢复的时间,降低血清TNF-α、IL-6、hs-CRP等炎性反应因子水平,临床治疗效果显著,可进一步推广。