高脂血症大鼠主动脉HSP22、TNF-α和eNOS的表达及阿托伐他汀的影响

 目的:研究高脂血症大鼠主动脉热休克蛋白22（HSP22）、肿瘤坏死因子 α（TNF-α）及内皮型一氧化氮合酶（eNOS）的表达,以及阿托伐他汀对其的影响。方法:复制高脂血症大鼠模型后,实验分为正常对照组、高脂对照组和高脂+阿托伐他汀干预组。免疫组化法检测大鼠主动脉HSP22及TNF-α表达,Western blotting检测eNOS蛋白表达。结果:正常对照组未见HSP22和TNF-α阳性表达;高脂对照组与他汀干预组可见HSP22和TNF-α阳性表达;他汀干预组HSP22和TNF-α平均吸光度值明显低于高脂对照组（0.211±0.014 vs0.345±0.042,0.218±0.090 vs0.377±0.094,均P<0.05）。高脂对照组和他汀干预组eNOS表达均较正常对照组明显降低(P<0.01),高脂对照组和他汀干预组差异无显著。结论: HSP22和TNF-α在高脂血症大鼠主动脉中的表达升高,而eNOS的表达降低,阿托伐他汀的干预可降低HSP22和TNF-α的表达,但未能改变eNOS的表达。     

CXCR7在动脉粥样硬化模型ApoE-/-小鼠的表达及阿托伐他汀的干预作用

 目的: 研究CXC趋化因子受体7(CXC chemokine receptor 7,CXCR7)在动脉粥样硬化模型载脂蛋白E基因敲除(ApoE^-/-)小鼠中的表达并探究阿托伐他汀的干预作用。方法: 8周龄ApoE^-/-雄性小鼠,随机分为正常对照组、高脂组与高脂+阿托伐他汀组,实验干预12周建立动脉粥样硬化模型;油红O及HE染色观察动脉粥样硬化病变,Western blot及免疫组化法检测动脉CXCR7的表达,Western blot检测动脉eNOS和Akt的表达。结果: (1)动脉油红O及HE染色示高脂组可见有明显粥样核心及纤维帽的显著斑块,高脂+阿托伐他汀组也可见斑块,但斑块负荷较模型组减轻,正常对照组未见明显斑块形成;(2)免疫组化示高脂组动脉细胞着色浅,CXCR7表达量少,高脂+阿托伐他汀组与高脂组比较,细胞着色增加,CXCR7表达量增加,正常对照组颗粒呈深棕黄色,示CXCR7大量表达;(3)Western blot结果示高脂组CXCR7、eNOS和Akt的表达较正常对照组降低,给予阿托伐他汀干预后CXCR7、eNOS和Akt的表达较高脂组增加,较正常对照组相比CXCR7、eNOS和Akt的表达下降,但磷酸化eNOS的水平未见差异。结论: 高脂血症可损伤血管内皮,促进动脉粥样硬化的发展,下调动脉CXCR7、eNOS和Akt的表达;阿托伐他汀可改善动脉粥样硬化,缓解ApoE^-/-小鼠动脉CXCR7、eNOS和Akt蛋白表达的下调。     

阿托伐他汀对兔动脉粥样硬化斑块的抑制作用

目的探讨阿托伐他汀对兔动脉粥样硬化斑块的抑制作用及其抗动脉粥样硬化(AS)的可能机制。方法24只大耳白兔随机分为常规饲料组、胆固醇饲料组和高脂饲料加阿托伐他汀组,饲养16周。观察实验前后血清胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)和体质量的变化,处死动物后取主动脉进行病理学检查,采用免疫组化方法测定主动脉壁细胞黏附分子-1(VCAM-1)阳性表达百分比。结果16周后阿托伐他汀组血清TC和LDL水平明显低于胆固醇饲料组,分别为(23.51±10.58)mmol/L和(14.27±3.51)mmol/L(P<0.01)、(21.39±10.00)mmol/L和(14.23±4.01)mmol/L(P<0.01)。病理学大体观察,对照组、胆固醇饲料组和阿托伐他汀组斑块/内膜面积比分别为0%、(28.12±3.77)%和(16.09±2.77)%,组间比较有显著性差异(P<0.01);光镜下三组内膜厚度分别为(4.45±0.58)μm、(67.47±7.13)μm和(38.11±6.02)μm、内膜/中膜比分别为0.0537±0.007、0.878±0.370和0.391±0.213,组间比较有显著性差异(P<0.01)。免疫组化检测胆固醇饲料组和阿托伐他汀组AS局部VCAM-1的阳性表达百分比明显高于对照组(P<0.01),但阿托伐他汀组较胆固醇饲料组的表达明显减少(P<0.01)。结论阿托伐他汀具有降脂以外的抗AS的作用,抑制VCAM-1的过度表达可能是其抗AS的机制之一。     

阿托伐他汀对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化病变中TRPC5表达的影响

目的:观察载脂蛋白E基因敲除(Apo E-/-)小鼠动脉粥样硬化斑块形成过程中血管平滑肌细胞瞬时受体电位通道5(TRPC5)蛋白的表达变化,以及阿托伐他汀药物干预对TRPC5的影响并探讨其作用机制。方法:将40只6周龄雄性Apo E-/-小鼠随机分为模型组和他汀干预组,高脂饲料喂养建立动脉粥样硬化模型。他汀干预组给予阿托伐他汀(20 mg·kg-1·d-1)灌胃,模型组给予等量生理盐水灌胃。20只同龄雄性野生型C57BL/6J小鼠给予普通饲料喂养作为正常对照组。各组小鼠分别喂养至20和30周龄,分别取10只取血并处死。取主动脉根部做石蜡切片行HE染色形态学观察,测量并计算斑块相对面积;免疫组织化学染色检测各组小鼠TRPC5蛋白表达变化。取胸腹段主动脉行实时荧光定量PCR,检测主动脉中TRPC5通道蛋白mRNA的表达水平。结果:与模型组相比,阿托伐他汀干预组的血脂明显下降,斑块总面积明显减小,TRPC5蛋白水平及mRNA含量明显下降;30周龄模型组的TRPC5蛋白表达稍高于20周龄模型组,但差异无统计学意义;30周干预组较20周干预组相比,TRPC5水平有降低趋势且差异有统计学意义。结论:阿托伐他汀可能通过下调TRPC5蛋白表达从而延缓动脉粥样硬化进程。     

高脂饮食及阿托伐他汀干预对主动脉瓣膜内皮细胞表面超微结构的影响

目的利用原子力显微镜观察高脂饮食及阿托伐他汀干预对主动脉瓣膜内皮细胞表面形态结构的影响。方法新西兰纯种雄性白兔60只,随机分为对照组、高脂饮食组、高脂饮食＋阿托伐他汀干预组,每组各20只。分别于实验开始及第2、4、6、8周末5个时间点,将上述3组动物各随机处死4只,取其心脏主动脉瓣膜,标本经处理后,置于原子力显微镜下扫描观察。结果随着高脂饮食时间的延长,高脂饮食组瓣膜表面内皮细胞的排列从规则的栅栏状密集的排列,逐渐过渡到无序紊乱的疏松排列。细胞形态从长梭形逐渐过渡为短圆形,细胞之间的间隙逐渐扩大。当AFM在内皮细胞表面的扫描范围进一步缩小时,随着高脂饮食时间的延长,内皮细胞表面大小一致,均匀排列的球形隆起结构逐渐变得低平、融合、减少;高脂饮食及阿托伐他汀干预组内皮细胞的改变介于对照组和高脂饮食组两组之间。结论利用AFM能够在瓣膜组织原位清晰显示损伤保护作用后,内皮细胞膜表面三维超微结构的变化;高脂饮食可以使主动脉瓣膜内皮细胞的排列、分布、形态发生明显改变,为后期与高脂血症有关的瓣膜疾病,例如钙化性主动脉瓣膜狭窄的发生提供条件。阿托伐他汀能够缓解高脂饮食所致的主动脉瓣膜内皮细胞形态结构的改变。     

阿托伐他汀对实验性大鼠心肌纤维化的干预作用及可能机制

目的:探讨阿托伐他汀对醛固酮诱导大鼠心肌纤维化的干预作用及相关机制。方法:40只雄性SD大鼠实验初始阶段行右肾切除,术后给予1%氯化钠饮水4周并随机将大鼠分为4组:对照组(CON组);醛固酮组(ALD组);安体舒通+醛固酮组(SPI+ALD组);阿托伐他汀+醛固酮组(ATO+ALD组)。颈动脉插管测大鼠血压,大鼠心脏组织经苦味酸-天狼猩红染色观察心肌间质胶原容积分数(CVF)和心肌血管周围胶原面积比(PVCA),免疫组化法观察血小板衍生生长因子(PDGF-A,PDGF-B)、血小板衍生生长因子受体(PDGFR-α,PDGFR-β)及单核巨噬细胞抗原(ED-1)的表达,免疫印迹(Western blotting)检测骨桥蛋白(OPN)表达。结果:ALD组、SPI+ALD组和ATO+ALD组大鼠平均动脉压(MABP)均显著高于对照组(P0.01或P0.05);ALD组出现明显纤维化,ALD组的CVF和PVCA指标显著高于其它各组(P0.01或P0.05),SPI+ALD组与ATO+ALD组的CVF和PVCA指标无明显差异(P0.05);ALD组PDGF-A、PDGF-B、PDGFR-α、ED-1及OPN的表达显著高于其它各组(P0.01或P0.05),SPI+ALD组与ATO+ALD组的PDGF-A、PDGF-B、PDGFR-α及OPN指标的表达无明显差异(P0.05),但ATO+ALD组的ED-1指标表达明显低于SPI+ALD组(P0.05),各组PDGFR-β均无显著差异(P0.05)。结论:阿托伐他汀具有抗醛固酮诱导大鼠心肌纤维化作用,其机制可能与减少巨噬细胞浸润及炎症因子OPN表达、部分抑制血小板衍生生长因子及其受体表达有关。     

阿托伐他汀通过RXRα介导的抗氧化应激效应抑制高脂喂养糖尿病ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化的形成

目的:观察阿托伐他汀(Atorv)对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病高脂喂养载脂蛋白E敲除(apolipoprotein E knockout,ApoE-/-)小鼠动脉粥样硬化的影响,探讨阿托伐他汀在糖尿病合并高脂饮食条件下对抗动脉粥样硬化的机制。方法:C57小鼠8只作为对照,34只高脂喂养的ApoE-/-小鼠随机分为3组:ApoE-/-组、STZ-ApoE-/-组和STZ-ApoE-/-+Atorv组。STZ腹腔注射建立糖尿病动物模型,测定小鼠空腹血糖、血脂水平,HE染色图像分析测定胸主动脉斑块面积;免疫杂交检测主动脉及细胞内NADPH氧化酶亚基gp91phox蛋白水平;Fenton反应Griess显色法测定血清及胸主动脉匀浆上清液活性氧(ROS)水平。I型胶原酶消化法培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),流式细胞术检测内皮细胞内ROS的水平,光泽精分析法测定NADPH氧化酶活性。采用干扰RNA和质粒转染的方法评价类视黄醇X受体α(RXRα)在Atorv抑制氧化应激中的作用。结果:(1)与C57组相比,ApoE-/-组小鼠胸主动脉斑块面积显著增加[(215.88±34.19)μm2vs 0μm2,P0.01],2组间空腹血糖水平无显著差异,血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、血清及胸主动脉ROS、胸主动脉gp91phox表达水平显著缩小(P0.05);(2)与ApoE-/-组相比,STZ-ApoE-/-组胸主动脉斑块面积进一步增加[(314.13±35.72)μm2vs(215.88±34.19)μm2,P0.05],血糖水平升高,血清TC、LDL-C、血清及胸主动脉ROS、胸主动脉gp91phox水平进一步增加(P0.05);(3)与STZ-ApoE-/-组相比,STZ-ApoE-/-+Atorv组胸主动脉粥样斑块面积显著降低[(217.47±24.56)μm2vs(314.13±35.72)μm2,P0.05],血糖、血清TG、HDL、TC、和LDL-C无显著变化,血清及胸主动脉ROS、胸主动脉gp91phox水平亦显著降低(P0.05);(4)高糖(25 mmol/L)干预后,HUVECs内ROS含量、gp91phox蛋白水平及NADPH氧化酶活性明显增加(P0.05),阿托伐他汀(10-8~10-6mol/L)显著降低高糖环境下HUVECs胞内ROS含量、gp91phox表达及NADPH氧化酶活性,且具有浓度依赖性;(5)将RXRαsiRNA转染至HUVECs之后,阿托伐他汀(10-6mol/L)对高糖环境下ROS生成及NADPH氧化酶活性的抑制效应显著减弱,RXRα质粒转染使RXRα过表达后,阿托伐他汀(10-6mol/L)抑制ROS生成及NADPH氧化酶活性的作用明显增强(P0.05)。结论:阿托伐他汀通过抑制高糖环境下机体的氧化应激反应对抗动脉粥样硬化;核受体RXRα介导阿托伐他汀的抗氧化应激效应。     

早期阿托伐他汀治疗对颅内动脉支架术前后患者C-反应蛋白的影响

目的测定颅内支架术治疗前后患者C-反应蛋白（CRP）的水平,探讨阿托伐他汀对预防患者颅内支架再狭窄的可能性。方法将42例颅内支架患者随机分为对照组和治疗组（n=21）。对照组口服玻立维75mg＋拜阿司匹林100mg,1次／d;治疗组口服阿托伐他汀40mg（术前7d开始）＋玻立维75mg＋拜阿司匹林100mg,1次／d。术前7d及1d,术后7d、3个月、6个月采用免疫透射比浊法分别测血清CRP水平。结果与对照组术前1d（7．44±0．73）mg／L、术后7d（27．61±1．81）mg／L、术后3个月（36．46±1．67）mg／L、术后6个月（26．84±0．76）mg／L比较,治疗组同期的CRP明显下降（P〈0．05）;与术后7d（12．05±0．55mg／L）比较,治疗组术前1d（6．22±0．57）mg／L、术后3个月（6．03±0．46）mg／L、6个月（6．12±0．77）mg／L下降明显（P〈0．01）;术前1d、术后3个月、6个月之间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论阿托伐他汀可有效抑制炎症因子,是预防支架内再狭窄的有效治疗方法之一。     

阿托伐他汀对TNF-α和IL-1β诱导的大鼠主动脉内皮细胞PAPP-A表达的影响

目的: 研究阿托伐他汀对炎症因子肿瘤坏死因子 α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)诱导大鼠主动脉内皮细胞表达妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)的影响。方法: 原代培养大鼠主动脉内皮细胞,选择生长良好的第3-4代细胞用于实验。实验分组:(1)空白对照组 :不加干预措施原培养液继续培养;(2)阿托伐他汀浓度组:加入浓度分别为 0.1、1、10 μmol/L的阿托伐他汀作用24 h;(3)阿托伐他汀时间组:加入浓度为10 μmol/L的阿托伐他汀分别作用6、12、24 h;(4)阿托伐他汀干预组:加入TNF-α(60 μg/L)或者IL-1β(20 μg/L)作用1 h后,再加入不同浓度的阿托伐他汀(0.1、1、10 μmol/L)进行培养,分别于作用6、12、24 h终止实验。MTT法观察药物对细胞增殖的影响, RT-PCR技术测定细胞中PAPP-A mRNA的表达, ELISA方法检测上清液中PAPP-A蛋白水平。结果: (1) 外源性加入阿托伐他汀及TNF-α或者IL-1β后,分别作用3、6、12、24、48 h,同对照组相比,细胞增殖能力无明显变化(P<0.05),说明干预药物本身对细胞没有毒性作用。(2)单独加入阿托伐他汀,细胞PAPP-A表达水平与空白对照组比较没有明显差异(P<0.05)。(3)炎症因子作用一段时间后再加入阿托伐他汀,PAPP-A mRNA和蛋白表达水平随着阿托伐他汀浓度和作用时间的增加而逐渐降低,有一定的浓度-时间依赖关系,与 TNF-α组和IL-1β组比较明显下降(P<0.05)。结论: 阿托伐他汀本身对细胞表达PAPP-A没有影响,但在一定程度上抑制TNF-α和IL-1β诱导的内皮细胞PAPP-A的表达,并有浓度-时间依赖关系。     

HSP在抗原加工和CTL激发中的作用

热休克蛋白是一组具有重要生理功能的蛋白质分子家族。近年来，发现热休克蛋白参与多种免疫反应，特别是在自身免疫诱发过程中起重要作用，本文综述了热休克蛋白在抗原加工和ＣＴＬ激发中的作用，从而对ＭＨＣ－Ｉ类分子介导的抗原加工过程有更深的了解，更新了对ＣＴＬ激发机制的认识，对肿瘤免疫治疗有重要的指导意义。     

热休克蛋白70对HBV复制的影响

目的:探讨过表达热休克蛋白70(HSP70)对乙型肝炎病毒(HBV)复制的影响。方法:运用RTq PCR检测HBV复制对HSP70表达的影响及过表达HSP70对HBV 3.5 kb m RNA的影响;运用Western blot法验证HSP70过表达效果及过表达HSP70对HBV核心蛋白的影响;RT-q PCR和Southern blot法分析过表达HSP70对HBV复制中间体的影响;运用双萤光素酶报告系统检测过表达HSP70对HBV启动子活性的影响。结果:HBV复制显著抑制HSP70的m RNA水平。过表达HSP70抑制HBV复制中间体、3.5 kb m RNA以及核心蛋白的表达,同时抑制HBV核心启动子的活性。结论:HBV复制抑制HSP70的表达。过表达HSP70抑制HBV的复制。本研究结果表明,HSP70通过抑制核心启动子的活性抑制HBV的复制。     

高盐高脂摄入致大鼠主动脉重构及辛伐他汀的阻断作用

目的: 探讨高钠盐与高脂肪喂养后大鼠血压、血脂变化、主动脉构型改变和辛伐他汀的干预作用及机制。方法: 60只成年雄性SD大鼠,随机分为5组(n=12):对照组(N组)、高盐组(S组)、高脂组(F组)、高盐高脂组(SF组)和高盐高脂加辛伐他汀组(T组)。喂养16周后,测量大鼠动脉压、血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)及可溶性CD40L(sCD40L)浓度;免疫组化法检测升主动脉根部血管壁组织CD40/CD40L表达;HE染色测量升主动脉起始段中膜层厚度和动脉内腔面积与血管腔横断面积比值。结果: (1) S组、F组和SF组收缩压与N组相比均明显增高(P<0.01),而T组与N组比增高但程度较SF组明显降低(P<0.05) ;(2)F组和SF组血清TG和TC明显升高,与N组和T组比较明显升高(P<0.001),而S组、N组和T组之间无明显差异;(3)S组、F组和SF组血清sCD40L浓度均高于N组和T组(P<0.05),SF组高于S组和F组(P<0.05),S组与F组、N组与T组间无明显差异;(4)S组、F组和SF组动脉组织CD40/CD40L表达强度高于N组和T组(P<0.05),且SF组高于S组和F组(P<0.05),S组与F组、N组、T组间无明显差异;(5)S组、F组与SF组动脉中膜厚度与N组比较明显增厚(P<0.01);T组与N组比无显著差异;S组、F组和SF组血管内腔面积/血管横断面积比(LA/TVA)与N组比较明显变小(P<0.05);T组与N组比较无显著差别。结论: 高盐高脂喂养可导致大鼠血压升高和诱发动脉粥样硬化,以及血清sCD40L浓度升高、动脉组织CD40/CD40L表达强度增高;复合刺激改变明显强于单一因素作用。他汀类药物可通过抑制血清sCD40L及动脉组织CD40/CD40L表达途径保护血管。     

炎症反应在细胞焦亡和动脉粥样硬化之间的作用

心血管疾病是全球慢性非传染性疾病中死亡率最高的一类疾病,而动脉粥样硬化（AS）在心血管疾病的发生发展中扮演了重要的角色。炎症反应与动脉粥样硬化形成密切相关,而其又广泛参与细胞焦亡过程。核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（NLRP3）、适配器凋亡相关微粒蛋白（apoptosis-associated speck-like protein containing CARD,ASC）以及Caspase-1等细胞焦亡的重要功能分子均参与AS形成,细胞焦亡的过程中伴随白细胞介素等炎症介质的产生及释放,而炎症反应又可反过来促进细胞焦亡的发生发展。我们分别从炎症反应在动脉粥样硬化、细胞焦亡形成中的作用,炎症反应在这两者之间的桥梁作用等3个方面进行综述。     

热休克蛋白70在诱导肿瘤免疫中的效应

目的：研究不同剂量的热休克蛋白70（HSP70）对诱导小鼠抗肿瘤免疫效应及耐受的机理。方法：不同剂量的纯化HSP70免疫小鼠后2周再接种HcaF肿瘤细胞，观察实验组与对照组肿瘤形成的情况，结果：10μgHSP70免疫后的小鼠100％获长期生存，肿瘤全部消退；5μgHSP70免疫组可见部分抗肿瘤效应，而20μg、40μg及60μgHSP70不能抑制肿瘤形成，这3组小鼠肿瘤形成的指标与对照组无差别，结论：HSP70作为肿瘤抗原在诱导抗肿瘤免疫中具有双重性，可能与其活化T细胞的方式有关，该发现对于研究应用HSP70治疗人类恶性肿瘤时注意使用注意防止不适宜的剂量引起负效应有参考意义。     

改进SP法检测热休克蛋白

目的 :探索避免常规SP法检测热休克蛋白 (HSP)时出现假阳性和消除非特异性反应的方法。方法 :心肌组织石蜡切片 ,采用改进的SP法染色 ,即在常规SP法基础上“一抗”倍比稀释 ,双蒸水稀释H2 O2阻断内源性过氧化物酶等染色操作。结果 :改进的SP法染HSP阳性产物呈棕黄色细颗粒状 ,在细胞浆中弥漫分布 ,背景十分清亮。结论 :改进后的SP法更适用于HSP的检测     

Innate and adaptive immunity in atherosclerosis

Atherosclerosis, a chronic inflammatory disorder, involves both the innate and adaptive arms of the immune response that mediate the initiation, progression, and ultimate thrombotic complications of atherosclerosis. Most fatal thromboses, which may manifest as acute myocardial infarction or ischemic stroke, result from frank rupture or superficial erosion of the fibrous cap overlying the atheroma, processes that occur in inflammatorily active, rupture-prone plaques. Appreciation of the inflammatory character of atherosclerosis has led to the application of C-reactive protein as a biomarker of cardiovascular risk and the characterization of the anti-inflammatory and immunomodulatory actions of the statin class of drugs. An improved understanding of the pathobiology of atherosclerosis and further studies of its immune mechanisms provide avenues for the development of future strategies directed toward better risk stratification of patients as well as the identification of novel anti-inflammatory therapies. This review retraces leukocyte subsets involved in innate and adaptive immunity and their contributions to atherogenesis. This work was supported by the Fondation Leducq, Paris, France (Dr. Libby) and by NIH HL087282 (Dr. Lichtman) and HL36436 (Dr. Libby).     

鼠肝癌细胞的热休克蛋白诱导及其抗瘤机理研究

摸索鼠肝癌Ｈ２２细胞膜热休克蛋白７０最适的话导条件，并明确其体内外的抗瘤机理。方法用免疫荧光及ＦＣＭ光检测热休克Ｈ２２细胞膜ＨＳＰ７０蛋白的动态表达。并用ＭＭＣ灭活，热休克后的Ｈ２２细胞作抗原进行体内肿瘤免疫保护试验及体外肿瘤杀伤试验。     

The role of oxidative stress and inflammatory response in high-fat diet induced peripheral neuropathy

ObjectiveEarlier studies suggest that high-calorie diet is an important risk factor for neuronal damage resulting from oxidative stress of lipid metabolism. In our experimental study of rats under high-fat diet, oxidative stress markers and axonal degeneration parameters were used to observe the sciatic nerve neuropathy. The aim of this study is to evaluate the pathophysiology of neuropathy induced by high-fat diet.MethodsA total of 14 male rats (Wistar albino) were randomly divided into two experimental groups as follows; control group (n = 7) and the model group (n = 7); while control group was fed with standard diet; where the model group was fed with a high-fat diet for 12 weeks. At the end of 12 weeks, the lipid profile and blood glucose levels, interleukin-1β (IL-1), interleukin-6 (IL-6), tumor necrosis factor-α (TNF-α), and transforming growth factor-β (TGF-β) levels were studied. Tissue malondialdehyde (MDA), nitric oxide (NO) levels and super-oxide dismutase (SOD), paraoxonase-1 (PON-1) and glutathione peroxidase (GPx) activities were studied. The distal blocks of the left sciatic nerves were evaluated for histomorphological analysis (including mean axon area, axon numbers, nerve fiber diameters, axon diameters, and thickness of myelin sheets).ResultsBody weights, serum glucose and high-density lipoprotein (HDL) levels of rats were found not statistically significantly different compared between the model and the control groups (p > 0.05). Serum cholesterol, triglyceride, TGF-β and TNF-α levels were significantly higher in the model group when compared with the control group (p < 0.05). IL-1 and IL-6 levels were not statistically significantly different compared between the model group and the control group (p > 0.05). The MDA and NO levels and the SOD and GPx activities of the sciatic nerves in model group were statistically significantly higher than the control group (p < 0.05). In addition, the activities of PON-1 were statistically significantly lower in the model group when compared with the control group (p < 0.05). The difference in the total number of myelinated axons between the control group and the model group was not statistically significant (p > 0.05). The nerve fiber diameter and the thickness of the myelin sheet were statistically significantly lower in the model group when compared with the control group (p < 0.05). The axon diameter and area were significantly decreased in the model group when compared with the control group (p < 0.05).ConclusionOur results support that dyslipidemia is an independent risk factor for the development of neuropathy. In addition, we postulated that oxidative stress and inflammatory response may play an important role in the pathogenesis of high-fat diet induced neuropathy.     

热休克蛋白40和热休克蛋白70抑制N2a细胞内突变亨廷顿蛋白聚积和毒性

目的 研究热休克蛋白40(HSP40)和热休克蛋白70(HSP70)对N2a细胞内突变亨廷顿蛋白(htt) 聚集物形成和毒性的影响. 方法 应用荧光显微镜术和免疫印迹技术检测单独或共同过表达HSP40和HSP70对N2a细胞内转染的突变htt(含有150个谷氨酰胺重复数,150Q)聚集物形成的影响;应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法分析细胞活力和比色法检测细胞内活性氧(ROS)含量. 结果 单独过表达HSP40或HSP70,尤其是共同过表达HSP40和HSP70显著减少150Q htt在N2a细胞内的聚积,各组含有聚集物的细胞为(n=1 000):仅表达150Q htt 组约50%,过表达HSP40组约12%,过表达HSP70组约15%,共同过表达HSP40和HSP70组约5%.MTT分析结果显示,单独尤其是共同过表达HSP40和HSP70能显著增加150Q细胞的活力( P<0.01, n =3),同时减少ROS产生( P<0.01, n =3). 结论 HSP40和HSP70通过抑制细胞内突变htt聚积以及减少氧化应激而增加150Q N2a细胞活力.