miRNA调控细胞焦亡在2型糖尿病及相关心血管病中的研究进展

<正>2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus,T2DM）本质是一种无菌性炎症,不仅导致糖脂代谢紊乱、胰岛素抵抗等病理改变,还伴随多种心血管损害。大量研究发现,细胞焦亡通路激活推动T2DM及相关心血管疾病的病程演进,是连接T2DM代谢综合征和心肌损害的枢纽。随着多种微小RNA(micro RNA,mi RNA)调控细胞焦亡的作用被发现,miRNA通过调控细胞焦亡信号通路或蛋白表达,影响T2DM及相关心血管疾病的发生发展,成为糖尿病心肌保护策略的研究热点。本文就miRNA调控的细胞焦亡在2型糖尿病及相关心血管疾病中的研究进展进行综述。     

延胡索总生物碱对慢性癫痫大鼠皮层NLRP3/caspase-1/GSDMD介导的细胞焦亡的影响

目的：研究延胡索总生物碱（TAC）对戊四氮（PTZ）所诱导的慢性癫痫大鼠的治疗作用,探讨其对大脑皮层核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)/caspase-1/消皮素D(GSDMD)介导的细胞焦亡的影响及可能机制。方法：清洁级雄性SD大鼠30只,随机抽取6只大鼠作为正常组,其余大鼠采用PTZ(35 mg/kg)腹腔连续注射28 d复制慢性癫痫模型。将造模成功的18只大鼠随机分为模型组、低剂量TAC组和高剂量TAC组,每组6只。低、高剂量TAC组大鼠分别灌胃给予7和14 mg/kg的TAC,连续给药14 d,正常组和模型组大鼠灌胃给予等体积生理盐水。观察记录大鼠全面强直阵挛发作（GTCS）和极小阵挛发作（MCS）的潜伏期;采用HE染色观察颞叶皮层的病理学变化;TUNEL法检测神经细胞凋亡;免疫组化和Western blot法检测皮层组织核因子κB(NF-κB)、NLRP3、caspase-1和GSDMD蛋白表达;免疫组化检测脑组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素18(IL-18)和IL-1β蛋白表达;RT-qPCR检测各组NLRP3、caspase-1和GSDMD的m...     

辛伐他汀对糖尿病脑病大鼠认知功能障碍的影响及其机制研究

目的 探讨辛伐他汀糖尿病脑病大鼠认知功能的改善作用及可能机制。方法 采用高糖高脂饲料喂养联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)的方法建立糖尿病脑病大鼠模型,选取模型制备成功的大鼠随机分为模型组与辛伐他汀组(20 mg/kg),每组8只,另取同龄8只SD大鼠作为对照组,连续灌胃5周。测定大鼠空腹血糖水平;Morris水迷宫测定大鼠认知功能;HE染色观察大鼠脑组织海马病理损伤;Nissl染色观察大鼠海马神经元;ELISA检测大鼠脑组织白介素-1β(IL-1β)、IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;Western blot检测大鼠脑组织中SIRT1、NLRP3、Caspase-1、ASC及IL-18蛋白表达。结果 与模型组相比,辛伐他汀组大鼠空腹血糖水平显著降低,认知功能显著改善,海马区病理性损伤减轻,海马尼氏体数量增加,IL-1β、IL-6和TNF-α水平降低,SIRT1蛋白表达水平升高,而NLRP3、Caspase-1、ASC及IL-18蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论 辛伐他汀可通过调控SIRT1/NLRP3通路改善糖尿病脑病大鼠认知功能。     

大豆苷元减轻高糖诱导的肾小管上皮细胞焦亡

目的 探讨大豆苷元(daidxein, DAI)调节NOD样受体蛋白3(NOD-like receptor protein 3, NLRP3)/半胱天冬酶-1(caspase-1)信号通路对高糖诱导的肾小管上皮细胞焦亡的影响。方法 将HK-2细胞分为：对照组(NC组)(5.5 mmol/L D-葡萄糖)、HG组(30 mmol/LD-葡萄糖)、DAI-L、DAI-M、DAI-H组(30 mmol/LD-葡萄糖分别和25、50、100μmol/L DAI孵育HK-2细胞)、DAI-H+LPS组(30 mmol/LD-葡萄糖、100μmol/L DAI和1μg/mL LPS共同孵育HK-2细胞)。MTT法检测HK-2细胞增殖;流式细胞术检测HK-2细胞凋亡;ELISA法检测HK-2细胞炎性因子白介素-1β(IL-1β)、白介素18(IL-18)水平;采用扫描电镜观察细胞焦亡形态;免疫荧光染色检测细胞焦亡相关蛋白;Western blot检测NLRP3、cleaved-caspase-1、GSDMD-N蛋白表达。结果 NC组细胞呈圆球形,边界比较规则,而HG组细胞肿胀变大,边界不规则;HG组...     

程序性细胞坏死及细胞焦亡信号通路研究进展概述

细胞死亡是生命活动中一个非常重要的事件,真核生物可因物理损伤刺激导致细胞死亡,因特异信号通路介导的程序性细胞死亡近年来得到越来越多的关注。目前程序性细胞死亡主要存在以下3种方式:凋亡(apoptosis)、程序性坏死(necroptosis)、细胞焦亡(pyroptosis)。程序性坏死和细胞焦亡是近年来才发现的新的细胞程序性死亡方式,在细菌或病毒感染宿主细胞过程中起着关键作用。这两种细胞死亡都是细胞裂解型死亡,但其信号通路存在明显差异。本文就这两种程序性细胞死亡的形态学特征、信号转导通路及其在病原体感染过程中的作用等方面的研究进展作一综述。     

糖尿病与细胞焦亡

细胞焦亡是不同于坏死与凋亡的另一种细胞死亡形式。对于机体而言细胞焦亡有助于维持内环境稳态,但是过度的细胞焦亡会引发机体疾病状态,糖尿病就是其中之一。糖尿病前期、糖尿病的代谢产物和肠道菌群变化会引起细胞焦亡的发生,而细胞焦亡进一步促使胰岛β细胞数量减少和胰岛素靶器官的胰岛素抵抗形成,加重糖尿病病情的发展和并发症的发生。以细胞焦亡为基础的治疗方法虽然越来越被关注,但有待进一步研究。     

利多卡因通过NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路介导的细胞焦亡抑制乳腺癌细胞增殖

目的 研究利多卡因能否通过调控NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路介导的细胞焦亡抑制乳腺癌细胞增殖。方法 将乳腺癌MCF-7细胞随机分为空白对照组（NC组）,利多卡因组低、中、高剂量组（LIDO-L、M、H组）和LIDO-H+MCC950组,CCK-8法检测细胞增殖能力;Transwell小室法检测细胞侵袭能力;流式细胞仪和免疫荧光染色检测细胞焦亡;蛋白质印迹和qRT-PCR法检测细胞中NLRP3、Caspase-1、GSDMD蛋白和mRNA表达。结果 和NC组相比,LIDO-L组、LIDO-M组、LIDO-H组MCF-7细胞存活率、细胞侵袭数目均明显降低,细胞焦亡率、细胞中GSDMD阳性细胞数、细胞中NLRP3、Caspase-1、GSDMD蛋白表达及m RNA表达均明显增加（P<0.05）。和LIDO-H组相比,LIDO-H+MCC950组细胞存活率和侵袭细胞数目明显增加,细胞焦亡率和GSMDM阳性细胞数明显减少,细胞中NLRP3、Caspase-1、GSDMD蛋白和mRNA表达明显降低（P<0.05）。结论 利多卡因可抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖和侵袭,其...     

姜黄素对2 型糖尿病肾病大鼠保护作用及机制研究

目的:探讨姜黄素对2 型糖尿病肾病(DN)大鼠保护作用及可能的作用机制。方法:30 只Wistar 大鼠随机分为对照组、DN 组和姜黄素组,每组10 只。DN 组和姜黄素组采用高脂饲料喂养后注射链脲佐菌素建立DN 模型,造模成功后姜黄素组以200 mg/ kg 姜黄素灌胃,每天1 次,对照组和DN 组给予等量羧甲基纤维素钠灌胃,连续给药12 周。末次给药后收集24 h 尿量,称重,腹腔麻醉后心脏取血,检测血糖(Blood glucose,BG)、总胆固醇(Total cholesterol,TC)、甘油三酯(Triacylglyceride,TG)、血尿素氮(Blood urea nitrogen,BUN)、血肌酐(Serum creatinine,Scr)、尿微量白蛋白(Vrine microalbumin,mAlb),计算尿蛋白排泄率(Urinary protein excretion rate,UAER);处死大鼠,摘取双肾除去包膜后称重(KM),计算肾重指数(KI);多聚甲酚固定肾皮质用于苏木素-伊红(HE)染色,肾皮质制成匀浆检测MDA 和SOD 活性,Western blot 检测肾组织中核因子相关因子2(Nrf2)和血红素加氧酶1(HO鄄1)蛋白表达。结果:DN 组和姜黄素组BG、TC、TG、KI、BUN、Scr、UAER、MDA显著高于对照组,BM、KM、SOD 显著低于对照组,且姜黄素组上述指标升高或降低幅度小于DN 组,差异均有统计学意义(P<0.05);HE 染色结果显示,与DN 组比较,姜黄素组肾小管变性明显减轻,炎性细胞浸润明显减少;Western blot 结果显示对照组Nrf2 和HO-1 蛋白表达显著低于DN 组和姜黄素组,而姜黄素组显著高于DN 组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:姜黄素可能通过激活Nrf2/ ARE 信号通路,降低糖尿病肾病大鼠氧化应激、发挥肾脏保护作用。     

细胞焦亡在肾脏炎性损伤中的作用研究进展

细胞焦亡(pyroptoysis)是由活化的caspase-1触发的一种特殊的细胞程序性死亡。肾脏细胞焦亡在肾损伤中发挥着重要的作用。GSDMD切割焦亡关键蛋白caspase-1引起下游炎性反应因子IL-18,IL-1β的成熟和释放引起肾脏炎性反应和细胞焦亡发生。本文从NLRP3激活导致肾脏炎性反应、GSDMD裂解引发细胞焦亡等角度,阐释NLRP3-caspase-1-GSDMD介导的细胞焦亡在肾脏炎性反应中的作用。     

二十碳五烯酸对HER2阳性乳腺癌细胞焦亡的影响

目的:探讨二十碳五烯酸（EPA）对HER2阳性乳腺癌细胞焦亡的影响。方法:用EPA处理HER2阳性乳腺癌细胞,检测EPA对HER2阳性乳腺癌细胞的细胞毒性作用。Annexin V/PI分析EPA诱导的细胞存活率下降是否因细胞死亡增加而发生。EPA处理后检测细胞焦亡通路中关键分子标志物的表达状态。结果:EPA处理HER2...     

川芎嗪通过抗炎作用减轻2型糖尿病大鼠心肌病变

目的:观察川芎嗪对抗糖尿病引起的大鼠心肌细胞损伤的作用。方法:雄性Wistar大鼠高糖高脂饲料喂养4周后空腹自尾静脉注射STZ制造2型糖尿病模型,观察不同给药剂量川芎嗪对糖尿病大鼠体重、血糖、心脏组织形态以及心肌组织中IL-1β、IL-6、TNF-α、IKKβ和NF-κB蛋白水平的影响。结果:高剂量川芎嗪可缓解糖尿病大鼠的体重减轻和血糖升高,并且可以减少促炎因子IL-1β、IL-6和TNF-α的表达,降低IKKβ和NF-κB的蛋白水平。结论:川芎嗪通过拮抗炎症通路能减轻糖尿病引起的大鼠心肌细胞损伤。     

血管紧张素原基因M235T分子变异与2型糖尿病肾病的关系

目的　探讨血管紧张素原（ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎｏｇｅｎ , Ａ Ｇ Ｔ） 基因 Ｍ２３５ Ｔ 分子变异与中国人无肾病并发症的２ 型糖尿病（ｄｉａｂｅｔｅｓ ｍ ｅｌｌｉｔｕｓ , Ｄ Ｍ） 、２ 型糖尿病肾病（ｄｉａｂｅｔｉｃ ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ , Ｄ Ｎ） 的关系。方法　用 Ｐ Ｃ Ｒ及 Ｒ Ｆ Ｌ Ｐ 方法对８４ 例 Ｄ Ｍ、９６ 例 Ｄ Ｎ 及９８ 名正常对照进行了 Ａ Ｇ Ｔ 基因 Ｍ２３５ Ｔ 多态性的检测。结果　 Ｄ Ｎ 组 Ｔ 等位基因频率０８２ , Ｔ Ｔ 基因型频率０７０ ,与对照组（０６３ ,０４３） 比较有显著差异（ Ｐ＝ ０００３ , Ｐ＝００００４） ;校正了 Ｄ Ｎ 的几种危险因素后, Ｔ Ｔ 基因型对 Ｄ Ｎ 的 Ｏ Ｒ 为３４７（９５ ％ Ｃ Ｉ 为１５１ ～７９４ , Ｐ＝０００３３） 。 Ｄ Ｍ 组基因型频率分布与对照组比较无显著差异（ Ｐ＞ ００５） 。结论　 Ａ Ｇ Ｔ 基因 Ｔ Ｔ 型可能是中国人群２ 型糖尿病肾病的独立危险因素之一。     

2型糖尿病患者血IL-6与循环内皮细胞的关系及意义

目的探讨2型糖尿病(DM)患者血管内皮细胞损伤与血白介素6(IL-6)的关系及其意义。方法检测45例2型DM患者及20例正常人外周血IL-6和循环内皮细胞(CEC)水平并进行比较。结果①2型DM患者血IL-6和CEC水平高于正常人(P<0.05);②早期糖尿病肾病患者血CEC水平明显高于单纯糖尿病患者(P<0.01);③多元逐步回归分析显示CEC与血IL-6水平和尿蛋白排泄率(UAER)显著相关,标准偏回归系数β分别为0.264(P=0.033)和0.545(P=0.000)。结论2型糖尿病血管内皮细胞损伤与体内IL-6升高有密切关系,并在糖尿病肾病的发病过程中起一定作用。     

NAT2基因多态性与2型糖尿病的关系

目的探讨NAT2基因多态性与2型糖尿病易感性的关系,为糖尿病的有效防治提供科学依据。方法采用PCR及测序技术对174例2型糖尿病患者和174例健康者的NAT2基因4个常见突变位点进行检测。结果糖尿病组中NAT2等位基因频率分别为：Wt（69.54%）,M2（16.37%）,M3（10.63%）,M1（3.44%）。与正常对照组比较差异无显著性。NAT2基因型（WT/WT,WT/Mx,Mx/Mx）在糖尿病组中分布频率分别为44.82%,49.42%,5.74%,两组间比较差异显著。糖尿病组中快乙酰化者164例（占94.25%）,慢乙酰化者10例（占5.75%）,两组间比较有差异。携带NAT2快乙酰化基因型者患2型糖尿病的风险是携带NAT2慢乙酰化基因型者的3.98倍。结论本研究提示快乙酰化代谢表型可能是糖尿病的一个遗传易感因素,而慢乙酰化代谢表型可能对糖尿病的发生具有一定保护作用。     

西格列汀对Ⅱ型糖尿病大鼠骨髓内皮祖细胞衰老的影响及可能机制

目的:探讨西格列汀对Ⅱ型糖尿病大鼠骨髓内皮祖细胞(EPCs)衰老的影响及可能机制。方法:建立SD大鼠Ⅱ型糖尿病模型,成模大鼠随机分为模型组,西格列汀低、中、高剂量组(西格列汀组),西格列汀与烟酰胺联合用药组(西格列汀+烟酰胺组);正常大鼠随机分为正常对照组及烟酰胺组。每周测体质量及随机亦糖,ELISA检测血清中胰高血糖素样肽-1(GLP-1)和二肽基肽酶4(DPP-4)水平,β-半乳糖苷酶染色法检测EPCs的衰老阳性率,RT-qPCR检测EPCs中沉默信息调节因子1(SIRT1)的mRNA表达水平。结果:烟酰胺组与对照组相比,EPCs衰老阳性率明显降低;DM组与NC组比较显示成模后大鼠血清DPP-4水平升高、GLP-1水平下降,EPCs中SIRT1 mRNA相对表达量下调,EPCs衰老阳性率上升,差异均有统计学意义;成模大鼠在西格列汀干预后,随着药物剂量增加,与模型组比较,大鼠血清中DPP-4水平下降、GLP-1水平升高,EPCs中SIRT1 mRNA相对表达量上调,EPCs衰老阳性率呈现下降趋势,差异均有统计学意义;与高剂量西格列汀组相比,西格列汀+烟酰胺组大鼠EPCs衰老阳性率升高,差异有统计学意义。结论:西格列汀能缓解Ⅱ型糖尿病大鼠EPCs衰老,其作用机制可能涉及SIRT1介导的DPP-4/GLP-1通路。     

Usability testing of existing type 2 diabetes mellitus websites

BackgroundGiven the significant increase in the use of the internet as an educational tool for diabetes, very little research has been published on the usability of healthcare websites, even though it is a determining factor for user satisfaction.ObjectiveThe aim of this study is to evaluate and critique the interfaces of existing diabetes websites for usability concerns and provide design solutions for improvement. Emphasis is placed on Type 2 Diabetes Mellitus since it is the most common and life threatening form of diabetes.MethodA usability test was performed on the interfaces of three existing diabetes websites, American Diabetes Association (www.diabetes.org), WebMD (www.webmd.com) and the National Diabetes Education Program (ndep.nih.gov). The goal was to collect qualitative and quantitative data to determine: (1) if participants are able to complete specified tasks successfully; (2) the length of time it takes participants to complete the specified tasks and; (3) participants’ satisfaction with the three websites. Twenty adults, 18 years of age and older participated in the study.ResultsThe results from the MANOVA test revealed a significant difference between the three websites for number of clicks, number of errors and completion time when analyzed simultaneously. The ANOVA tests revealed a significant difference for all three variables. The Student-Newman-Keuls (SNK) test shows a significant difference for completion time between American Diabetes Association and WebMD. A significant difference was found for the number of clicks for the National Diabetes Education Program compared to the American Diabetes Association and WebMD. However, no significant difference was found for the number of clicks between American Diabetes Association and WebMD. Lastly, a significant difference was found between each interface for number of errors.DiscussionAlthough, the American Diabetes Association web-interface was most favorable, there were many positive design elements for each interface. On the other hand, the significant amount of information overload experienced for each website left participants feeling perplexed. Thus, innovative solutions are needed to reduce information overload and ensure users are engaged and empowered to make informed decisions about their healthcare.     

2型糖尿病患者抑郁患病情况与危险因素调查

目的:调查2型糖尿病患者抑郁的患病情况及评价2型糖尿病合并抑郁与无抑郁两组患者相关因素的差异。方法:T2DM患者151例采用汉密顿抑郁量表(17项)测评。根据评分临床诊断:合并有抑郁的患者59例为抑郁组,无抑郁的糖尿病患者92例为对照组。调查两组患者年龄、性别、身高、体重、收入情况、糖尿病病程、并发症、饮食习惯、生活习惯、糖尿病治疗情况、血糖、糖化血红蛋白(HBA1C)、血脂等。结果:调查的151例2型糖尿病患者中抑郁患病率为39.1%。抑郁组(病例组)女性(44.3%VS27.8%,P=0.035,病例组和对照组比较),独居或丧偶(35.6%VS 8.7%,P<0.001),低收入(81.4%VS 40.2%,P<0.001),有并发症的患者(98.3%VS 88.0%,P=0.023)的比率都显著高于非抑郁组。抑郁组HBA1C(98.3%VS 22.8%,P<0.001)显著高于对照组。注射胰岛素者(45.8%VS 28.3%,P=0.028)均显著多于非抑郁组;而缺少锻炼的人的比率显著超过无抑郁组(55.9%VS20.7%,P<0.001)。结论:2型糖尿病患者中抑郁的患病率较高,女性、丧偶或独居、低收入、血糖控制不良、并发症、和注射胰岛素、及缺少锻炼和抑郁关系密切。     

NLRP3炎症小体介导的炎症反应参与糖尿病导致的肾损伤和脂代谢异常

目的:观察NLRP3在糖尿病肾组织炎症及胆固醇代谢中的作用及机制。方法:实验小鼠分为4组:对照(WT)组、糖尿病(WT+STZ)组、NLRP3基因敲除(NKO)组和NLRP3基因敲除+糖尿病(NKO+STZ)组。腹腔注射STZ构建糖尿病小鼠模型。观察小鼠血尿生化指标及肾组织形态学;电镜及油红O染色观察肾组织脂滴形成情况;Western blot方法检测NLRP3、ASC、caspase-1、IL-1β、IL-18及胆固醇代谢指标SCAP、SREBP-2、HMGCR、LDLR、LXRα和ABCA1的蛋白表达情况及p38 MAPK的磷酸化情况。结果:与WT组小鼠相比,糖尿病小鼠肾组织的NLRP3表达和p38 MAPK的磷酸化水平显著升高;肾组织内炎症明显,胆固醇含量增加伴肾功能受损;敲除NLRP3显著减轻糖尿病小鼠肾组织炎症反应及胆固醇沉积,同时抑制p38 MAPK的磷酸化。结论:NLRP3介导的炎症反应在糖尿病肾损伤及脂代谢异常中发挥重要作用,这种作用可能与p38 MAPK信号通路的活化密切相关。     

Ⅱ型糖尿病患者血、尿白介素-6变化的意义

目的 :探讨II型糖尿病 (DM)患者血、尿白介素 6 (interleukin 6 ,IL 6 )水平的变化 ,了解IL 6在糖尿病肾病中的发病学意义。方法 :用放射免疫法检测 4 5例II型糖尿病患者及 2 0例正常人血、尿IL 6水平并进行比较。结果 :(1)II型糖尿病患者血、尿IL 6水平明显高于正常人 (P <0 0 5或P <0 0 1)。 (2 )早期糖尿病肾病患者尿IL 6水平明显高于单纯糖尿病患者(P<0 0 5 )。 (3)患者血IL 6水平分别与病程和空腹胰岛素 (fastinginsulin ,FINS)水平呈正相关 (r=0 30 5和 0 32 9,P 均 <0 0 5 ) ,与胰岛素敏感指数 (insulinsensitiveindex ,ISI)呈负相关 (r =- 0 35 2 ,P <0 0 2 ) ,尿IL 6水平分别与病程和尿白蛋白排泄率 (urinealbuminexcretionrate ,UAER)呈正相关 (r =0 32 6 ,P <0 0 5 ;r =0 4 6 6 ,P <0 0 1)。结论 :患者体内高水平的血清IL 6可能是II型糖尿病胰岛素抵抗病理生理改变的一种表现 ,IL 6可能参与糖尿病肾病的发生发展 ,尿IL 6水平对糖尿病肾病的病情分析有重要临床意义。