肠道白色念珠菌感染对脾虚小鼠小肠黏膜中T细胞亚群和穿孔素-颗粒酶B的影响

目的:通过观察肠道白色念珠菌感染对脾虚小鼠小肠黏膜固有层中T细胞亚群和穿孔素、颗粒酶的影响,探讨机体在脾虚状态下感染白色念珠菌的部分免疫机制。方法:本实验采用饮食失节加劳倦过度的复合因素制备小鼠脾虚模型,经肠道感染白色念珠菌后第14天,应用流式细胞术检测小鼠小肠黏膜固有层中CD_3~+、CD_4~+和CD_8~+T的细胞百分比,采用免疫荧光法检测各组小鼠小肠黏膜中穿孔素、颗粒酶阳性表达细胞数。结果:与正常对照组比较,其他3组小鼠小肠黏膜固有层中CD_4~+T细胞比例均有不同程度下降,CD_8~+T细胞比例均有不同程度上升,有统计学意义(P0.01);正常感染白念组和脾虚感染白念组小鼠小肠黏膜固有层中穿孔素阳性表达细胞均明显增多(P0.05或P0.01),而颗粒酶阳性表达细胞仅脾虚感染白念组明显增多(P0.01)。其中,脾虚感染白念组最显著,与其他3组均具有统计学意义(P0.05或P0.01)。结论:小肠黏膜固有层中穿孔素和颗粒酶的高表达可能是造成小肠局部损伤的免疫机制之一,脾虚小鼠肠道局部免疫功能下降,感染发生后可加重肠道局部损伤程度。     

当归/黄芪多糖对腹腔注射环磷酰胺小鼠骨髓造血影响随机平行对照研究

[目的]观察当归/黄芪多糖对腹腔注射环磷酰胺小鼠骨髓造血影响。[方法]使用随机平行对照方法,将60只清洁级C57BL/6小鼠编号按随机数字表法随机分为6组,空白组、模型组、促红细胞生成素组(EPO组)、当归多糖组(当归组)、黄芪多糖组(黄芪组)、当归加黄芪多糖组(当归+黄芪组),10只/组。实验第1d,各组小鼠称体重,模型组、EPO组、当归组、黄芪组、当归+黄芪组,腹腔注射环磷酰胺380mg/kg·d~(-1),连续3d,空白组注射等量生理盐水。实验第4d(造模第4d),颈椎脱臼处死小鼠,无菌取股骨和胫骨,置入培养基中,调整细胞浓度为1×10~5/m L,然后将混合液加入96孔板(200u L)/孔和24孔板(1L/孔)中,每组设3个复孔,周围孔分别加入相应量的无菌超纯水,将细胞板置于5%CO_2,37℃孵育箱中培养。实验第4d(造模第4d),各组分别干预。观测外周血象、细胞增殖率(MTT法),EPO、IL-3(免疫蛋白法),细胞内转录因子JAK2、STAT5(RT-PCR法)。[结果]细胞培养24h、48h和72h,细胞增殖率EPO组、当归组、黄芪组、当归+黄芪组均高于空白组(P0.05,P0.01),组间无显著差异(P0.05);模型组低于空白组(P0.05,P0.01)。细胞培养7d,IL-3、EPO表达模型组低于空白组(P0.01),各干预组均高于模型组(P0.01),当归+黄芪组高于EPO组(P0.01),EPO组高于当归组(P0.01),当归组高于黄芪组(P0.01)。细胞培养7d,单核细胞STAT5、JAK2m RNA模型组低于空白组(P0.01),各干预组高于模型组(P0.05或P0.01),当归+黄芪组高于EPO组(P0.01),EPO组与当归组无显著差异(P0.05),当归组高于黄芪组(P0.01)。[结论]当归/黄芪多糖、促红细胞生成素干预腹腔注射环磷酰胺小鼠,均可升高骨髓细胞增殖率、IL-3、EPO表达及单核细胞STAT5、JAK2m RNA,当归多糖与黄芪多糖联合应用更明显。     

黄芪甲苷对“铁超载”所致小鼠肝损伤的保护作用

目的:研究黄芪甲苷对铁超载造成肝损伤保护的作用机制。方法:小鼠按体质量随机分为空白组,模型组、黄芪甲苷(As)低、中、高剂量组。连续给药45 d,取血清,检测血清Fe,总铁结合力(total iron binding capacity,TIBC),丙氨酸氨基转移酶(glutamic-pyruvic transaminase,ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(glutamic oxalacetic transaminase,AST),总胆红素(total bilirubin,T-BIL),丙二醛(malondialdehyde,MDA),谷胱甘肽(glutathione,GSH)水平;用苏木素-伊红(HE)染色观察肝脏病理组织学变化;用免疫组化法分析肝脏组织蛋白硝化的表达变化;用原位末端转移酶标记技术(TUNEL)染色法观察肝细胞凋亡的变化。结果:与空白组比较,模型组小鼠血清中血清Fe,ALT,AST,MDA,肝中铁和T-BIL含量显著增加(P0.01),而TIBC和GSH含量显著降低(P0.05,P0.01);与模型组比较,黄芪甲苷组小鼠血清中血清Fe,ALT,AST,MDA水平,及肝中Fe和TBIL含量显著降低(P0.05,P0.01),肝中TIBC和GSH含量显著增高(P0.05,P0.01);HE结果显示,与空白组比较,铁超载组可见肝细胞水样变性、肝细胞脂肪变性和炎症细胞浸润等;不同浓度黄芪甲苷组的上述病理改变得以改善;免疫组化结果发现,与空白组比较,铁超载组血管周围细胞浆中3-硝基酪氨酸(3-NT)显著增加,而黄芪甲苷组血管膜周围的3-硝基酪氨酸则显著减少;TUNEL染色发现与空白组比较,模型组肝细胞凋亡显著增多;与模型组比较,黄芪甲苷组肝细胞凋亡显著减少。结论:黄芪甲苷对铁超载造成的肝损伤具有保护作用。     

半夏厚朴汤对顺铂作用后小鼠胃肠排空的影响

目的:探究半夏厚朴汤对使用化疗药物后小鼠胃残留率及小肠推进率的影响。方法:以小鼠为模型,随机分为空白组、半夏厚朴汤组、吗丁啉组、顺铂组、半夏厚朴汤合顺铂组、吗丁啉合顺铂组,每组10只,给药7天后,采用营养性半固体黑色糊同时测定小鼠胃排空及小肠推进。结果:与空白组比较,半夏厚朴汤组和吗丁啉组胃残留率明显降低(P﹤0.05),小肠推进率明显增加(P﹤0.05),而两组间无显著差异(P﹥0.05);与顺铂组比较,半夏厚朴汤合顺铂组及吗丁啉合顺铂组胃残留率显著降低(P﹤0.01),小肠推进率显著增加(P﹤0.01),而两组间无显著差异(P﹥0.05)。结论:半夏厚朴汤能够拮抗顺铂对小鼠胃肠排空的抑制作用,且与吗丁啉作用相当。     

二十味沉香微丸对绝望小鼠行为及海马5-HT系统的影响

目的观察二十味沉香丸及其微丸对行为绝望小鼠行为学及海马5-HT系统的影响。方法雄性昆明小鼠随机分为空白组、氟西汀(0.01 g/kg)组、二十味沉香丸组(1.0 g/kg)及二十味沉香微丸低、中、高剂量组(0.5、1.0、2.0 g/kg),每组12只,连续灌胃给药10 d。记录小鼠悬尾实验(TST)、强迫游泳实验(FST)的累计不动时间,高效液相色谱法测定小鼠海马5-HT及其代谢产物5-羟基吲哚乙酸的含有量,采用荧光定量PCR检测小鼠海马部位5-HT转运体(S1c6a4)和5-HT_(1 A)受体(Htr1a)mRNA表达。结果与空白组比较,二十味沉香丸和二十味沉香微丸中、高剂量能够明显缩短小鼠的悬尾不动和强迫游泳的不动时间(P0.05,P0.01);二十味沉香微丸中、高剂量可显著降低小鼠海马部位5-羟色胺吲哚乙酸含有量,而显著增加5-HT含有量(P0.05),并且显著降低小鼠海马部位S1c6a4和Htr1a mRNA表达(P0.05,P0.01)。结论二十味沉香丸及其微丸在小鼠行为绝望模型中具有一定抗抑郁的作用。其机制可能通过增加小鼠海马5-HT含有量,抑制小鼠海马部位S1c6a4、Htr1a mRNA表达,提高中枢5-HT系统的功能和兴奋性有关。     

竹节参皂苷Ⅳa对高脂饮食小鼠小肠干细胞及其微环境Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的:探讨竹节参皂苷Ⅳa对高脂饮食小鼠小肠干细胞及其微环境Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法:C57BL小鼠雌雄各半随机分成4组,每组10只,即正常对照组、模型组及竹节参皂苷Ⅳa低、高剂量组。HE染色观察小肠形态学变化,免疫组化检测各组小肠干细胞数量、PCNA表达及其微环境Wnt/β-catenin信号通路的变化。结果:与正常对照组比较,模型组小肠绒毛长度、V/C值、PCNA表达量及杯状细胞数量、Bmi1阳性表达的小肠干细胞数量显著升高,小肠干细胞微环境Wnt/β-catenin信号显著上调(P0.05或P0.01)。与模型组比较,竹节参皂苷Ⅳa组绒毛长度、V/C值、PCNA表达量、杯状细胞数量、Bmi1阳性表达的小肠干细胞数量显著降低,小肠干细胞微环境Wnt/β-catenin信号显著下调(P0.05或P0.01)。结论:竹节参皂苷Ⅳa可通过Wnt/β-catenin信号通路调控小肠干细胞微环境,改善其过度增殖分化状态和抑制小肠干细胞增多,调节小肠干细胞功能。     

基于细胞自噬研究补肾活血方抑制帕金森病模型小鼠α-突触核蛋白集聚的作用

目的探讨补肾活血方抑制1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的帕金森病(PD)模型小鼠脑黑质内α-突触核蛋白(α-syn)集聚的作用机制。方法将36只雄性C57/BL小鼠随机分为空白组、模型组及中药组,每组12只。采取腹腔注射MPTP法制备亚急性PD小鼠模型。中药组在造模成功后予补肾活血方连续灌胃14天,空白组和模型组每天仅灌胃等量的生理盐水。免疫组化法检测各组小鼠脑黑质内酪氨酸羟化酶(TH)、α-syn阳性表达,并用Western Blot法检测各组小鼠脑黑质内Lamp2a、Hsc70、α-syn表达。结果与空白组比较,模型组小鼠表现出明显的PD症候群特征,且行为学评分明显升高(P0.01);与模型组比较,中药组小鼠PD症状减轻,行为学评分明显降低(P0.01)。模型组TH和α-syn阳性表达明显低于空白组(P0.01);中药组TH和α-syn阳性表达明显高于模型组(P0.01)。与空白组比较,模型组Lamp2a、Hsc70、α-syn表达水平明显升高(P0.01),TH表达水平明显降低(P0.01)。与模型组比较,中药组Lamp2a、Hsc70、TH表达水平明显升高(P0.01),α-syn表达水平明显降低(P0.01)。结论补肾活血方可能通过上调Lamp2a、Hsc70水平,进而增强分子伴侣介导的自噬来抑制PD小鼠脑黑质内α-syn的集聚,从而抑制多巴胺能神经元的凋亡。     

益气活血法对MNNG诱导萎缩性胃炎癌前病变大鼠hedgehog信号通路的调控作用

目的探讨益气活血法对萎缩性胃炎癌前病变大鼠hedgehog信号通路的调控影响。方法雄性Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、黄芪组、三七组、黄芪三七组、Purmorphamine组、环巴明组及叶酸组,运用MNNG负荷多因素法制备萎缩性胃炎癌前病变模型。应用HE染色评价胃黏膜病理损伤,应用Western Blot、RT-PCR和量子点介导的免疫荧光化学法分别检测各组大鼠胃组织hedgehog信号通路的蛋白和基因表达水平。结果与空白组相比,模型组大鼠血清PGⅠ/PGⅡ和GAS含量显著降低(P0.01),Shh、Ptch基因及蛋白含量均明显下调(P0.05,P0.01),Smo蛋白表达减弱(P0.01)。与模型组相比,三七组、黄芪三七组及Purmorphamine组PGⅠ/PGⅡ明显升高(P0.01),黄芪组、三七组及黄芪三七组GAS含量显著升高(P0.05)。三七组、黄芪三七组及叶酸组Shh蛋白表达明显升高(P0.05),三七组和Purmorphamine组Ptch蛋白表达增多(P0.05),黄芪组、三七组、黄芪三七组和Purmorphamine组Smo蛋白表达显著增强(P0.05,P0.01)。结论益气活血法可激活hedgehog信号通路,对萎缩性胃炎癌前病变大鼠胃黏膜病变起到改善作用。     

基于Pink-1/Parkin信号通路补青颗粒含药血清对高糖诱导人晶状体上皮细胞线粒体自噬的影响

目的:探讨补青颗粒含药血清对高糖诱导的人晶状体上皮(HLE)细胞线粒体自噬的影响。方法:体外培养HLE细胞,空白组将HLE细胞在正常培养液中培养48 h,模型组在空白组培养液中添加30 mmol·L~(-1)葡萄糖,实验组在模型组基础上加入不同含药血清刺激培养48 h。采用CCK-8法检测不同含药血清对高糖诱导的HLE细胞增殖活力的影响;利用免疫荧光技术及蛋白免疫印迹(Western blot)法检测Pink-1,Parkin,p62蛋白表达。结果:CCK-8法结果显示模型组较空白组HLE细胞增殖活力增强(P0.01);与模型组比较,杞菊组与补青颗粒高、中、低剂量组细胞增殖活力均降低(P0.01);与杞菊组比较,补青颗粒中剂量组细胞增殖活力明显降低(P0.01);补青颗粒不同剂量组间比较,补青颗粒中剂量组细胞增殖活力显著降低(P0.01)。细胞免疫荧光结果显示Pink-1,Parkin,p62蛋白主要在细胞胞浆表达,细胞核内亦有少量表达。Western blot结果显示与空白组比较,模型组Pink-1,Parkin表达增加(P0.01),p62表达降低(P0.01);与模型组比较,杞菊组与补青颗粒中剂量组Pink-1,Parkin表达增加(P0.01),p62表达降低(P0.01);与杞菊组比较,补青颗粒中剂量组Pink-1,Parkin表达增加(P0.01,P0.05),p62表达降低(P0.01)。结论:补青颗粒对高糖诱导的HLE细胞线粒体自噬相关蛋白的表达有显著影响,线粒体自噬的改变可能是补青颗粒改善白内障发病的机制之一。     

青娥方提取物对D-半乳糖致衰老小鼠的延缓衰老作用及机制

目的:探讨青娥方提取物对D-半乳糖致衰老模型小鼠的延缓衰老作用。方法:将小鼠随机分为空白组、衰老模型组、阳性药组、青娥方提取物低、中、高剂量组。除空白组颈背部皮下注射生理盐水外,其余各组均颈背部皮下注射D-半乳糖溶液,空白组和模型组均用0.5%羧甲基纤维素钠水溶液灌胃;阳性药组维生素E(0.1 g·kg-1)及青娥方提取物低、中、高剂量组(0.4,0.8,1.6 g·kg-1)剂量的青娥方提取物的羧甲基纤维素钠水溶液灌胃6周后进行转棒仪疲劳实验;同时测定肝脏中谷胱甘肽(GSH),丙二醛(MDA),总抗氧化能力(T-AOC),一氧化氮(NO),一氧化氮合酶(NOS)等抗氧化生化指标;血清中尿素氮(BUN),乳酸脱氢酶(LDH)等抗疲劳生化指标;并采用实时定量PCR检测海马抗氧化基因锰超氧化物歧化酶(Mn SOD),过氧化物酶-3(Prdx-3)mRNA的表达。结果:转棒疲劳仪行为学实验,与空白组比较,模型组小鼠在转棒停留时间明显缩短(P0.01)。青娥方提取物各剂量组与模型组相比,均可以显著延长小鼠在转棒仪上的停留时间(P0.05,P0.01)。生化指标测定模型组血清与空白组相比,BUN,MDA,NO,NOS的含量均升高(P0.05),而LDH含量降低(P0.05);各给药组均能明显改善上述指标(P0.05,P0.01)。肝组织生化指标,与空白组GSH含量及T-AOC比较模型组均显著降低(P0.01),MDA,NO,NOS含量均显著升高(P0.05,P0.01),而给药组较模型组相比,各指标均显著改善(P0.05,P0.01)。实时定量PCR结果显示,模型组海马Mn SOD mRNA表达水平较空白组降低(P0.05),给药组与模型组相比,海马Mn SOD,Prdx-3 mRNA的表达显著提高(P0.05,P0.01)。结论:青娥方提取物能显著提高机体抗氧化能力,发挥延缓衰老和抗疲劳作用。     

野菊花提取物对小鼠湿疹模型Th1/Th2免疫功能的影响

目的研究野菊花提取物对湿疹小鼠模型的治疗效果和相关免疫机制。方法将40只昆明小鼠随机分为空白组、模型组、阳性组、野菊花水提物组、野菊花醇提物组,采用2,4-二硝基氯苯致小鼠耳廓肿胀的方法建立湿疹小鼠模型,同时给药外用。观察治疗效果并研究免疫机制。结果野菊花水提物可明显降低湿疹模型小鼠免疫球蛋白E(Ig E)、肿瘤坏死因子(TNF-α)水平(P0.05),显著降低白介素(IL-4)、白三烯B4(LTB4)因子的表达(P0.01),同时能够上调IFN-γ含有量(P0.05)。结论野菊花提取物能调节湿疹小鼠Th1/Th2平衡,同时能有效抑制Ig E、LTB4水平。     

电针命门穴对FMR1基因敲除小鼠自主行为学及海马CREB蛋白表达的影响

目的观察针刺督脉命门穴对FMR1基因敲除(KO)小鼠大脑海马区环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)及其磷酸化CREB(p-CREB)蛋白表达的影响,并探讨其作用机制。方法选取适龄的FMR1基因敲除小鼠,采用聚合酶链式反应(PCR)鉴定小鼠基因表型;采用随机数表法将24只基因型为纯合子的小鼠分为空白组、非经非穴组和命门组,每组各8只。空白组在相同时间、相同条件下仅模拟抓取动作。命门组选取小鼠命门穴,非经非穴组选取小鼠尾根与肛门之间凹陷旁开约1 cm的部位,均于每日固定时间采用由0.5寸毫针自制而成的双极连体针连接电针仪进行干预,电针刺激频率2 Hz,强度2 m A,连续波,每日30 min,连续干预14 d;干预后连续两天于同一时间进行自主活动行为学测试,并采用免疫组化法及Western blot法分析海马CREB及其p-CREB蛋白表达量。结果自主行为学测试结果显示:与空白组比较,命门组活动次数和站立次数显著降低(P0.05);免疫组化结果显示:命门组CREB和p-CREB蛋白的阳性平均光密度表达较空白组显著性升高(P0.01,P0.05),命门组p-CREB蛋白的阳性平均光密度表达较非经非穴组显著性升高(P0.05);Western blot结果显示:各组CREB蛋白表达量比较无统计学意义(P0.05),非经非穴组与命门组较空白组p-CREB蛋白表达量显著升高(P0.05,P0.01)。结论电针命门穴对FMR1基因敲除小鼠自主活动站立行为有影响,且能促进海马CREB、p-CREB蛋白的表达。     

香连丸对化疗相关性腹泻裸鼠模型的作用观察

目的观察香连丸对化疗相关性腹泻(CID)裸鼠腹泻程度、肠道损伤、炎症细胞因子、核因子κB p65(NF-κB p65)蛋白表达的影响,探讨其作用机制。方法腹腔注射法制备CID裸鼠模型,裸鼠随机分成正常组、模型组、香连丸组,香连丸组灌胃给予香连丸,正常组、模型组均灌胃给予生理盐水。给药4 d后,观察裸鼠腹泻情况、小肠病理改变、血清中细胞因子含有量及小肠组织中NF-κB表达情况。结果模型组2~3分腹泻发生率、腹泻评分及小肠病理损伤程度均较正常组明显升高(P0.01),血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)的含有量均显著升高,IL-4含有量显著降低(P0.05,P0.01),小肠组织NF-κB p65表达显著升高(P0.01)。香连丸组上述指标均较模型组明显改善(P0.05,P0.01)。结论香连丸对CID具有一定的治疗作用,其机制可能与抑制NF-κB p65通路活化,进而下调促炎细胞因子TNF-α、IFN-γ,并上调抑炎细胞因子IL-4的表达有关。     

固本抗敏方对荨麻疹小鼠皮肤肥大细胞脱颗粒的影响

目的探讨固本抗敏方治疗荨麻疹的作用机制。方法将40只BALB/c小鼠根据体重随机数字表法分为空白组(6只)、模型组(7只)、固本抗敏方低、中、高剂量组(各7只)和氯雷他定组(6只)。采用皮下注射卵清蛋白和氢氧化铝混悬液构建荨麻疹模型,观察固本抗敏方对模型小鼠皮肤肥大细胞脱颗粒影响,测定脾指数、胸腺指数及血清免疫球蛋白E(IgE)、干扰素-γ(INF-γ)、IL-4及IL-10表达量。结果模型组肥大细胞脱颗粒明显,各给药组肥大细胞脱颗粒数显著降低,脾指数、胸腺指数和血清中IgE水平显著降低(P0.01),固本抗敏方不同剂量组血清中IL-4表达量显著降低、INF-γ表达量显著升高(P0.01)。结论固本抗敏方可通过下调血清中IgE表达量,升高INF-γ表达量,减少IL-4分泌,进而抑制皮肤肥大细胞脱颗粒,稳定肥大细胞,以达到防治荨麻疹的作用。     

砂仁复方对5-FU所致大鼠肠道损伤的影响

目的探讨砂仁复方对5-FU所致大鼠肠道损伤的影响。方法将SD大鼠随机分为空白组、阳性组、模型组及砂仁复方高、中、低剂量组。观察大鼠状态、体质量情况,HE染色观察小肠形态结构、绒毛高度和隐窝深度,Western blot检测小肠组织中occludin、Claudin-1蛋白表达。结果与空白组比较,模型组体质量增量降低(P0.05),绒毛高度及隐窝深度降低(P0.05,P0.01),Claudin-1、occludin蛋白表达降低(P0.01);与模型组比较,砂仁复方高、中、低剂量组绒毛高度、隐窝深度升高(P0.05,P0.01),occludin蛋白表达升高(P0.01),砂仁复方高、中剂量组Claudin-1蛋白表达升高(P0.05,P0.01)。结论砂仁复方能保护5-FU所致大鼠肠道功能损伤。     

代平颗粒对2型糖尿病大鼠血糖、血脂水平及骨骼肌Glut4 mRNA,IRS-1 mRNA表达的影响

目的:观察中药代平颗粒对2型糖尿病大鼠骨骼肌葡萄糖转运蛋白4( Glut4)、胰岛素受体底物1(IRS-1)基因表达的影响,初步探讨其降低血糖的分子机制.方法:雄性SD大鼠分为正常对照组(8只,普通饲料),其余大鼠采用高脂饲料喂养联合链脲佐菌素(STZ)尾静脉注射的方法造成2型糖尿病成膜大鼠(32只),分为模型组(M)、二甲双胍组(Met)、代平颗粒低剂量组(DL),代平颗粒高剂量组(DH),每组8只.经药物干预4周后检测各组大鼠空腹血糖( FBG)、血脂、空腹胰岛素(FINS)并计算胰岛素敏感指数(ISI),采用实时荧光定量PCR技术检测大鼠骨骼肌Glut4 mRNA,IRS-1 mRNA表达水平.结果:给药后4周,与M组FBG:( 20.55±5.50) mmol·L -1,ISI:(-6.05±0.29)比较,Met组FBG(14.75±3.90)mmol·L-1和DH组FBG(11.21±2.95) mmol·L-1均显著下降(P＜0.01),Met组ISI(-5.37±0.38)和DH组ISI(-5.38±0.37)均显著升高(P＜0.01);M组Glut4 mRNA(0.63±0.13)和IRS-1 mRNA (0.68±0.17)表达量分别为N组的63.3％,67.8％(P＜0.01);与M组比较,Met组Glut4 mRNA(0.95±0.19)表达量升高了31％ (P ＜0.01),IRS-1 mRNA (0.88±0.24)表达量无显著升高,DH组Glut4 mRNA(1.19±0.15)和IRS-1 mRNA(1.24±0.22)表达量,分别升高了88.9％,82.4％(P＜0.01).结论:代平颗粒具有降低2型糖尿病大鼠FBG效果,其作用机制之一与增加组织胰岛素敏感性,上调2型糖尿病大鼠骨骼肌中Glut4 mRNA和IRS-1 mRNA的表达,促进骨骼肌对葡萄糖的摄取和利用有关.     

再生复血汤对再生障碍性贫血小鼠外周血CD4+CD25+CD127-调节性T细胞及Foxp3 mRNA的影响

目的探讨再生复血汤对再生障碍性贫血(AA)小鼠外周血CD4~+CD25~+CD127~-调节性T细胞(Treg)及核转录因子Foxp3 mRNA的影响。方法将72只小鼠随机分成空白组,模型组,阳性对照组,再生复血汤高、中、低剂量组,每组12只。除空白组外,其余各组小鼠予~(60)Co-γ联合腹腔注射环磷酰胺和氯霉素建立AA小鼠模型。造模第7天再生复血汤高、中、低剂量组分别给予再生复血汤10、5、2.5 g/(kg·d)灌胃,模型组和空白组予等体积的生理盐水灌胃,阳性对照组予环孢素3 mg/(kg·d)灌胃,各组均干预30天。检测小鼠外周血白细胞数(WBC)、网织红细胞数(Ret)、血红蛋白数(Hb)及血小板数(PLT)、骨髓有核细胞数(粒系比例、红系比例、巨核细胞数,淋巴细胞比例)、Treg比例和单个核细胞Foxp3mRNA表达量。结果与空白组比较,模型组外周血WBC、Ret、Hb、PLT、骨髓粒系比例、红系比例、巨核细胞数、Treg比例、Foxp3 mRNA表达量降低,淋巴细胞比例升高(均P0.05)。与模型组比较,各干预组小鼠外周血WBC、Ret、Hb、PLT、骨髓粒系比例、红系比例、巨核细胞数、Treg比例、Foxp3 mRNA表达量升高,淋巴细胞比例下降(均P0.05)。与再生复血汤低剂量组比较,再生复血汤中、高剂量组和阳性对照组外周血WBC、Ret、Hb、PLT、骨髓粒系比例、红系比例、巨核细胞数、Treg比例、Foxp3 mRNA表达量升高,淋巴细胞比例下降(均P0.0 5),且再生复血汤高剂量组优于再生复血汤中剂量组和阳性对照组(均P0.05)。结论再生复血汤能通过促使AA小鼠外周血单个核细胞Foxp3 mRNA表达,使得Treg比例升高,诱导AA小鼠恢复自身免疫耐受,并且呈现剂量依赖性。     

心痛泰颗粒抑制ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化细胞增殖的作用机理研究

目的:探讨心痛泰颗粒影响高脂诱导载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠动脉粥样硬化模型斑块内细胞增殖的作用机制。方法:选取42只4周龄雄性ApoE-/-小鼠,给予高脂饮食喂养,另选取12只C57BL/6J野生型小鼠作为空白组,予普通饲料喂养。8周高脂喂食造模成功后,遵循完全随机设计方法,ApoE-/-小鼠按随机数字表法分4组,模型组、心痛泰颗粒低剂量组、心痛泰高剂量组及阿托伐他汀钙组,空白组为C57BL/6J野生型小鼠。连续6周灌胃给药,在无菌条件下处理动物,采集血清及分离主动脉,高倍显微镜下观察主动脉组织病理变化(斑块面积/动脉壁横切面积),采用罗氏全自动生化分析仪检测血脂指标及IHC法检测PCNA的表达水平。结果:主动脉组织病理变化与模型组比较,治疗组比值均显著降低,差异有统计学意义(P0.01),其中心痛泰颗粒高剂量组和阿托伐他汀钙组明显优于心痛泰颗粒低剂量组(P0.01),而心痛泰颗粒高剂量组与他汀组组间差异无统计学意义(P0.05)。血脂相关指标检测中,心痛泰颗粒低、高剂量组及阿托伐他汀钙组均能显著降低TC、TG、LDL-C,且心痛泰颗粒高剂量组优于低剂量组(P0.01);但心痛泰颗粒高剂量组与他汀组组间差异无统计学意义(P0.05)。与模型组比较,心痛泰颗粒低、高剂量组及他汀组均能升高HDL-C,但是这3组间差异无统计学意义(P0.05)。与模型组比较,心痛泰颗粒能明显下调PCNA阳性表达(P0.01);且心痛泰颗粒高剂量组优于低剂量组(P0.05)。结论:心痛泰颗粒能有效干预动脉粥样硬化的形成,缓解斑块内细胞的增殖,可能与心痛泰颗粒可以调节血脂及调控PCNA阳性表达有关。     

藏药巴桑母酥油丸对放射线-化学复合损伤小鼠红系造血功能的影响及机制

目的:探讨藏药巴桑母酥油丸对放射线--化学复合损伤小鼠红系造血功能的影响及可能机制.方法:采用外周血红细胞计数、造血祖细胞集落分析、实时荧光定量多聚酶链反应等方法,检测灌胃巴桑母酥油丸(0.75,1.5,3.0 g·kg-1)后放射线-化学复合损伤小鼠外周血红细胞(RBC)数及血红蛋白(Hb)量、骨髓红系造血祖细胞集落产率、肾脏红细胞生成素(Epo)和脾脏红细胞生成素受体(EpoR) mRNA表达量.结果:灌胃14,20 d后,巴桑母酥油丸中、高剂量组外周血RBC数显著高于空白组、模型组和低剂量组(P＜0.05);灌胃20 d后,巴桑母酥油丸中剂量Hb含量显著高于空白组和模型组(P＜0.05).灌胃14 d后,巴桑母酥油丸中剂量组骨髓细胞的早期、晚期红系祖细胞(CFU-E,BFU-E)集落产率均显著高于空白组和模型组(P＜0.01);中剂量组肾脏Epo mRNA相对表达量显著高于空白组和模型组(P＜0.05).结论:巴桑母酥油丸可以通过刺激肾脏Epo分泌、促进骨髓造血祖细胞增殖分化,进而促进放射线-化学复合损伤小鼠外周血RBC数及Hb含量的恢复.     

益气逐瘀解毒颗粒调控 MMPs/TIMPs 平衡抗大鼠肝纤维化作用研究

目的:探讨益气逐瘀解毒颗粒对四氯化碳(CCl4)诱导的大鼠肝纤维化的治疗作用及机制。方法:将SD雄性大鼠给予CCl4橄榄油混合液进行皮下注射7周,制备肝纤维化大鼠模型,随机分为益气逐瘀解毒颗粒高、中、低剂量组、阳性对照组、模型组、空白组,给予相应治疗,5周后处死大鼠,检测外周血生化指标,逆转录-定量PCR法和蛋白印迹法分别检测大鼠肝组织中基质蛋白酶1 (Matrix metalloproteinase1, MMP-1)、MMP-2、MMP-9、MMP-13及基质蛋白酶抑制因子1 (tissue Inhibitor of metalloproteinases1,TIMP-1)表达水平,肝组织苏木精-伊红(Hematoxylin-Eosin staining, HE染色)、MASSON染色检测肝纤维化程度。结果:治疗后与空白组比较,模型组的ALT、AST无显著性差异(P 0.05),MMP-1、MMP-2、MMP-9、MMP-13基因表达显著降低(P 0.05),TIMP-1基因表达显著升高(P 0.05),肝纤维化半定量计分(SSS)评分显著升高(P 0.01);与模型组比较,益气逐瘀解毒颗粒各剂量组ALT、AST无显著性差异(P 0.05),益气逐瘀解毒颗粒高剂量组MMP-1、MMP-2、MMP-9、MMP-13基因表达明显升高(P 0.05),中剂量组MMP-9、MMP-13基因表达明显增高(P 0.05),低剂量组MMP-13基因表达明显增高(P 0.05),高、中剂量组TIMP-1基因表达明显降低(P 0.05),益气逐瘀解毒颗粒各剂量组MMP-2、MMP-9蛋白表达量无显著性差异(P 0.05),高、中剂量组MMP-13蛋白表达量显著升高(P 0.05),各剂量组TIMP-1蛋白表达量均显著下降(P 0.05),以低剂量组下降尤为显著,优于高、中剂量组(P 0.05),各药物干预组SSS评分显著降低(P 0.01);与阳性对照组比较,益气逐瘀解毒颗粒各剂量组ALT、AST无显著性差异(P 0.05),益气逐瘀解毒颗粒高剂量组MMP-2基因表达明显升高(P 0.05),高、中剂量组TIMP-1基因表达明显降低(P 0.05),益气逐瘀解毒颗粒高、中剂量组MMP-13蛋白表达显著升高(P 0.05),益气逐瘀解毒颗粒各剂量组TIMP-1蛋白表达显著降低(P 0.05),低剂量组下降尤为显著,优于高、中剂量组(P 0.05),益气逐瘀解毒颗粒高、中、低剂量组SSS评分显著降低(P 0.01)。结论:调控MMPs/TIMPs平衡可能是益气逐瘀解毒颗粒抗肝维化的作用机制之一,其通过升高MMP-13、降低TIMP-1表达水平,调控MMPs/TIMPs平衡,促进过度沉积的细胞外基质(Extracelluar matrix,ECM)降解,改善CCl4诱导肝纤维化大鼠模型的肝脏功能,从而改善其肝纤维化程度。