Th22细胞在老年抑郁症患者外周血中的检测及其临床意义

目的 检测老年抑郁症患者外周血中Th22细胞的应答水平、调控机制并分析其临床意义.方法 采集本院精神科门诊和住院的老年抑郁症患者外周血,利用流式细胞术和ELISA分别检测外周血中Th22细胞和IL-22的水平,同时采用患者外周血浆刺激CD4+T细胞并加入抗体阻断,探讨血浆中细胞因子对Th22细胞分化的影响,最后分析其与...     

非小细胞肺癌患者外周血Foxp3+调节性T细胞和Th17的检测与临床意义

目的 通过检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血Foxp3+调节性T细胞(TrFoxp3+)、Th17细胞、TrFoxp3+/Th17及相关细胞因子水平,探讨TrFoxp3+、Th17细胞在肺癌发生发展中的相互作用以及是否存在TrFoxp3+/Th17失衡.方法 采用流式细胞术和酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测18例健康人、26例NSCLC患者外周血中TrFoxp3+、Th17细胞占CD4+T细胞的比例,以及转化生长因子-β(TGF-β)、IL-17、IL-23的表达水平.结果 NSCLC患者外周血中TrFoxp3+、Th17细胞比例、TrFoxp3+/Th17高于健康对照组(P＜0.05).NSCLC患者外周血TrFoxp3+与Th17细胞成正向直线相关的关系(r=0.81,P＜0.05).不同TNM分期肺癌患者外周血TrFoxp3+/Th17:Ⅳ期肺癌患者高于Ⅰ～Ⅱ期、Ⅲ期肺癌患者(P＜0.05).NSCLC患者血清中TGF-β、IL-17、IL-23水平高于健康对照组,TGF-β在晚期组/健康对照组的比值高于早中期组/健康对照组的比值(P＜0.05).结论 NSCLC患者外周血中TrFoxp3+、Th17细胞比例及TrFoxp3+/Th17较健康人升高,且晚期患者TrFoxp3+/Th17明显升高,提示NSCLC患者可能存在TrFoxp3+/Th17比例失衡,导致肿瘤患者免疫抑制,促进肿瘤发生、发展,可能与二者的细胞因子调节有关.     

Th17细胞及其与感染性疾病关系的研究进展

Th17细胞是一种新近发现的不同于Th1、Th2细胞的CD4+效应性T细胞亚群,其分化受到局部微环境中不同细胞因子的调节,如TGF-β、IL-6促进初始CD4+T细胞分化为Th17细胞,而IL-27等则是抑制Th17分化的重要因子.Th17细胞以分泌IL-17、IL-21、IL-22等致炎细胞因子为主要特征,在对抗机体...     

白介素10抑制幼稚T细胞分化为辅助性T细胞17的研究

目的:研究白介素10(interleukin,IL-10)在辅助性T细胞17(helper T cell,Th17)体外诱导分化中的作用。方法:分选小鼠脾脏CD4+幼稚T(nave T)细胞,在经典的Th17诱导条件中加入不同浓度的IL-10中和抗体(0、1、5、10μg/ml NA-IL-10),流式细胞术检测各组CD4+IL-17+细胞的生成比率,ELISA法检测各组培养上清中Th17特异细胞因子IL-17A和IL-17F的浓度,qRT-PCR及Western Blot检测各组细胞中表达转录因子维甲酸相关孤核受体γt(retinoid-related orphan nuclear receptor gamma t,Rorγt)的表达水平。结果:在经典的诱导CD4+nave T细胞分化为Th17的过程中,IL-10的浓度随诱导天数的增加而逐渐上升。加入NA-IL-10后,IL-17+细胞的诱导比例随NA-IL-10浓度的增加而逐渐上升,在10μg/ml的NA-IL-10条件下,诱导生成的IL-17+细胞可达22.1%±4.5%,与无NA-IL-10组8.1%±1.9%相比差异有统计学意义(P0.05)。10μg/ml NA-IL-10组IL-17A和IL-17F的浓度以及Rorγt的表达水平均明显高于无NA-IL-10组(P0.05)。结论:降低培养条件中IL-10的水平能够有效地促进Th17的体外诱导分化,也进一步验证了IL-10对Th17分化的抑制作用。     

环孢素A抑制正常人外周血记忆CD4~＋T细胞产生IL-22的实验研究

目的探讨环孢素A（CsA）是否能够抑制正常人CD4＋T细胞产生白细胞介素22（IL-22）。方法使用密度梯度离心法制备正常人外周血单个核淋巴细胞（PBMCs）,加入PMA＋Inomycin刺激细胞后,做细胞内细胞因子染色,流式细胞仪检测正常人外周血PBMCs中产生IL-22的T细胞亚群,以及IL-17-IFN-γ-IL-22＋CD4＋T细胞亚群（Th22）;PMA＋Inomycin刺激正常人PBMCs,同时加或不加环孢素A（CsA）后,做细胞内细胞因子染色,流式细胞仪检测IL-22＋CD4＋T细胞和IFN-γ＋CD4＋T细胞的比例,以及IL-22＋CD4＋T细胞表达记忆表型分子CD45RO情况。结果正常人外周血中产生IL-22的T细胞以CD4＋T细胞为主,且存在仅分泌IL-22,不分泌IL-17和IFN-γ的Th22亚群;CsA以剂量依赖方式抑制CD4＋T细胞产生IL-22和IFN-γ;CsA抑制外周血PBMCs中记忆CD4＋T细胞产生IL-22。结论 CsA能抑制正常人外周血中记忆CD4＋T细胞产生IL-22。     

TGF-β1调控卵巢癌微环境中CD8~+Treg的表型及功能初探

目的初步探讨TGF-β1在卵巢癌微环境中对CD8+Treg诱导过程的作用。方法建立卵巢癌细胞系SKOV3与健康人外周血CD8+T细胞体外Transwell共培养系统,实验组为SKOV3与健康人外周血CD8+T细胞共培养组,对照组为健康人外周血CD8+T细胞单独培养组,培养5 d后收集2组共培养上清。ELISA法检测2组上清中TGF-β1水平。在上述共培养体系基础上增加anti-TGF-β1中和组,即在SKOV3与健康人外周血CD8+T细胞共培养体系中加入anti-TGF-β1中和抗体,共培养5 d后收集3组CD8+T细胞。流式细胞术检测各组CD8+T细胞中Treg相关标志物(CD25、Foxp3、CD28)的表达率。将3组CD8+T细胞和na?ve CD4+T细胞按照1∶0、1∶1、1∶5、1∶10、0∶1的比例进行共培养,并在体系中加入anti-CD3及辐照的PBMCs,培养56 h后加入3H-Td R,继续培养16 h后收集细胞,液体闪烁仪检测CPM值。结果与CD8+T细胞单独培养组相比,SKOV3/CD8共培养组上清中高表达TGF-β1(P0.01)。在共培养体系中加入anti-TGF-β1中和抗体后,与SKOV3/CD8共培养组相比,anti-TGF-β1中和组CD8+CD28-Treg、CD8+CD25+Treg和CD8+Foxp3+Treg细胞比例显著下降,但相比CD8+T细胞单独培养组仍然升高。功能抑制试验结果显示,共培养组CD8+T细胞能抑制na?ve CD4+T细胞的增殖,anti-TGF-β1中和组仅在CD8+T细胞和na?ve CD4+T细胞比例为1∶1时对na?ve CD4+T细胞增殖呈现抑制作用,而单独培养组CD8+T细胞不能抑制na?ve CD4+T细胞的增殖。结论 anti-TGF-β1可部分中和卵巢癌微环境诱导的CD8+Tregs表型及功能,TGF-β1是卵巢癌细胞生长微环境诱导CD8+Treg分化过程重要的作用因素之一。     

卵巢癌患者外周血Th17/Treg细胞的检测及其临床意义

目的:检测卵巢癌患者外周血中辅助性T细胞17(T help cell 17,Th17)/调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)的水平并探讨其临床意义。方法:选取55例卵巢癌和60例健康对照者为研究对象,采用细胞内染色流式细胞术(Flow cytometry,FCM)、实时定量PCR(real time PCR)、酶联免疫吸附法(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测外周血Th17/Treg细胞百分率、核转录因子retinoid-related orphan receptor gamma-t(RORγt)/foxhead winged-helix box protein 3(Foxp3)mRNA的表达以及血浆中白细胞介素17(Interleukin-17,IL-17)/转化生长因子-β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)的水平。结果:卵巢癌患者外周血中CD4+IL-17+/CD4+T细胞百分率、RORγt mRNA及IL-17水平与正常对照组相比明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与正常对照组相比,卵巢癌患者外周血中CD4+Foxp3+Treg/CD4+T细胞百分率、Foxp3 mRNA及TGF-β1水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:卵巢癌患者外周血中Th17/Treg细胞失衡,Th17/Treg细胞可能参与卵巢癌的发病过程。     

溃疡性结肠炎患者外周血IL-22及相关CD4+ T细胞亚群的表达

目的 通过检测溃疡性结肠炎(UC)患者外周血中IL-22及相关CD4+T细胞亚群的表达,探讨其在UC发病机制中的可能作用.方法 以我院住院治疗的35例UC患者及35例健康对照者为研究对象,应用ELISA法检测外周血血浆中IL-22的含量,采用流式细胞术检测Th1、Th17、Th22细胞亚群的比例,并分析其与疾病活动度的关系.结果 UC组患者血浆中IL-22的含量为(354.12±104.22) pg/ml,显著高于对照组(P＜0.05),其中重度患者增高明显;UC组患者外周血Th17细胞比例[(2.36±0.94)％]显著高于对照组(P＜0.05),其中,中、重度患者增高明显;UC组患者外周血Th22细胞比例[(2.27±0.87)％]显著高于对照组(P＜0.05),其中,重度患者增高明显;而UC组患者Th1细胞比例与对照组比较尤明显差异.结论 UC患者外周血中IL-22水平、Th17、Th22细胞比例明显升高,且与疾病活动度密切相关.     

Th22及其分泌的细胞因子在变应性鼻炎患者外周血中的表达

目的：检测变应性鼻炎(AR)患者外周血Th22及其分泌的细胞因子的表达情况并分析其相关机制。方法：本研究共纳入30例AR患者和30例健康志愿者(HCs),ELISA检测AR患者及HCs外周静脉血中IL-22含量。流式细胞术检测AR患者及HCs外周血中Th22比例,将AR患者外周血中的PBMC平均分为3组,分别为空白对照组、同型对照组(加入PEMouse IgG2a,k)和实验刺激组(TNF-α处理组),并应用流式细胞术检测TNF-α对AR患者外周血中Th22的影响。结果：与HCs相比,AR患者外周血中CD4~+T细胞、IL-22表达水平显著提高(P<0.05)且AR患者外周血中IL-22表达水平与CD4~+T细胞中Th22呈正相关(r=0.966,P<0.001);HCs外周血IL-22表达水平与CD4~+T细胞中Th22比例呈正相关(r=0.981,P<0.001);AR患者外周血实验刺激组CD4~+T细胞中Th22比例明显高于空白对照组(P<0.05)。结论：AR患者外周血中IL-22表达水平升高,CD4~+T细胞中Th22比例提高,且Th22的比例与IL-...     

人外周血和扁桃体中Tfh细胞与其他Th细胞亚群之间的关系

目的比较观察人外周血和扁桃体Tfh细胞的表型以及与Th1、Th17、Th22细胞亚群之间的关系。方法分离正常人PBMC及扁桃体单个核细胞,利用anti-CD3+anti-CD28或PMA+ionomycin刺激后,采用ELISA和流式细胞术(FCM)检测其细胞因子的产生,分析Tfh与Th1、Th17、Th22细胞亚群之间的关系。结果与PBMC中CD4+T细胞不同,扁桃体CD4+T细胞高表达CXCR5和CD45RO,低表达CCR7和CD62L;与PBMC中CD4+T细胞相比,扁桃体CD4+T细胞IL-21和IL-17产生水平较高,IFN-γ产生水平较低,IL-22水平无显著差异;外周血和扁桃体CD4+T细胞中均存在一定比例的IL-21+IL-17+双阳性、IL-21+IL-22+双阳性、IL-21+IFN-γ+双阳性细胞,IL-21单阳性细胞在扁桃体CD4+T细胞中所占比例明显高于外周血;外周血和扁桃体CD4+CXCR5+细胞除表达IL-21外,还表达IL-17、IL-22和IFN-γ。结论扁桃体中存在较多数量的Tfh细胞,大多数Tfh细胞是不同于Th1、Th17和Th22的细胞亚群。     

脂肪源性干细胞对多发性硬化患者Th17的免疫调控作用

 目的: 探讨人脂肪源性干细胞(hASCs)对多发性硬化(MS)患者外周血辅助性T细胞17(Th17)的免疫调控作用机制。方法: 分离、纯化脂肪组织中的hASCs。采用密度梯度离心法分离MS患者外周血单个核细胞(PBMCs),磁珠分选CD4⁺T细胞,体外刺激细胞向Th17极化,并加入不同比例的hASCs(hASCs:CD4⁺T为1:4和1:10)共培养4 d,设立添加anti-LIF抗体组;流式细胞术检测共培养后Th17细胞占CD4⁺T细胞的比例,real-time PCR检测白细胞介素6受体(IL-6R)、白细胞介素23受体(IL-23R)、白血病抑制因子受体(LIFR)、维甲酸相关孤儿受体γt(RORγt)及白血病抑制因子(LIF)的mRNA水平变化;ELISA法检测共培养体系上清液中LIF的水平。结果: 分离的hASCs经流式细胞术鉴定可基本判定为hASCs;PBMCs经磁珠法分选后获得90%以上纯度的CD4⁺T细胞。共培养后,1:4组和1:10组中Th17细胞所占比例下降,且存在高浓度抑制效应;共培养后RORγt、IL-6R和IL-23R的mRNA表达水平下降,LIFR和LIF的mRNA表达水平均升高;加入anti-LIF抗体后,Th17细胞比例回升至对照组水平;RORγt和IL-6R的mRNA表达水平回升;ELISA检测各组LIF的水平,共培养组LIF分泌均较对照组明显增多,加入anti-LIF抗体后明显减少。结论: hASCs可抑制MS患者Th17细胞的分化,其作用可能与其分泌LIF、通过IL-6/LIF轴竞争性抑制有关。     

胚胎骨髓来源间充质干细胞对人Th17细胞的免疫调节

背景：众多研究表明间充质干细胞能发挥免疫调节功能,抑制T细胞增殖。 目的：观察胚胎骨髓来源间充质干细胞对人Th17细胞的调节作用。 方法：将人胚胎骨髓间充质干细胞与正常人外周血单个核细胞或CD4⁺ T细胞以1∶10比例共培养4 d,以单个核细胞或CD4⁺T细胞单独培养为对照。应用实时定量PCR检测细胞白细胞介素17 mRNA表达,酶联免疫吸附试验检测细胞上清中白细胞介素17蛋白水平,流式细胞术检测Th17细胞数量。 结果与结论：胚胎骨髓来源间充质干细胞与单个核细胞共培养组白细胞介素17 mRNA表达水平明显高于单个核细胞组(P < 0.01)。与此一致的是,胚胎骨髓来源间充质干细胞与单个核细胞或CD4⁺T细胞共培养组细胞上清中白细胞介素17蛋白水平明显高于单个核细胞组、CD4⁺ T细胞组(P < 0.05,P < 0.01)。胚胎骨髓来源间充质干细胞与CD4⁺ T细胞共培养组Th17细胞数量明显高于CD4⁺ T细胞组(P < 0.01),但胚胎骨髓来源间充质干细胞本身并不表达白细胞介素17。表明胚胎骨髓来源间充质干细胞可促进人Th17细胞增殖。     

IL-24对非小细胞肺癌患者CD8+T细胞体外功能的影响

目的观察IL-24在体外对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者CD8⁺T细胞功能的影响。方法本研究入组28例NSCLC患者和17例健康对照者,收集外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)和支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF),分选CD8⁺T细胞,反转录实时定量PCR检测CD8⁺T细胞中IL-24受体(IL-20R1、IL-20R2和IL-22R1)mRNA的相对表达量。不同浓度重组人IL-24(10 ng/ml和100 ng/ml)刺激纯化CD8⁺T细胞后,流式细胞术检测穿孔素和颗粒酶B的表达变化。建立CD8⁺T细胞和NSCLC细胞系NCI-H1882细胞的直接接触和间接接触体外共培养系统,观察IL-24刺激后CD8⁺T细胞诱导靶细胞死亡比例,以及IFN-γ和TNF-α的表达变化。组间比较采用t检验或LSD-t检验。结果CD8⁺T细胞中未检测到IL-22R1 mRNA表达,CD8⁺T细胞中IL-20R1和IL-20R2 mRNA相对表达量在健康对照者和NSCLC患者之间以及在非肿瘤部位和肿瘤部位之间的差异均无统计学意义(P>0.05)。NSCLC患者外周血和肿瘤部位CD8⁺T细胞中穿孔素和颗粒酶B水平显著低于健康对照者和非肿瘤部位(P<0.05),低浓度IL-24(10 ng/ml)刺激不影响CD8⁺T细胞中穿孔素和颗粒酶B水平(P>0.05),而高浓度IL-24(100 ng/ml)则显著提升NSCLC患者CD8⁺T细胞中穿孔素和颗粒酶B水平(P<0.05)。直接接触共培养系统中,高浓度IL-24(100 ng/ml)刺激NSCLC患者肿瘤部位CD8⁺T细胞后可诱导靶细胞死亡比例升高,以及IFN-γ和TNF-α表达升高,而低浓度IL-24(10 ng/ml)刺激对CD8⁺T细胞诱导的靶细胞死亡和细胞因子分泌无显著影响。间接接触共培养系统中,IL-24刺激对CD8⁺T细胞诱导的靶细胞死亡和细胞因子分泌均无显著影响。结论高浓度IL-24在体外可增强NSCLC患者CD8⁺T细胞的直接细胞杀伤功能,但在体内IL-24可能并不影响CD8⁺T细胞的功能。     

Migration and differentiation of CD8+ T cells

Summary: Antigen-specific responses by CD8⁺ T cells require direct cell–cell interactions between T cells and antigen-presenting cells (APC). Initially, naïve T cells must communicate with APC in lymphoid organs. Once stimulated, the resulting effector cells interact with APC in peripheral tissues. To this end, T cells must migrate to discrete sites throughout the body where antigen may be found. Recent progress in the field has revealed that the migratory abilities of T cells are critically dependent on their differentiation state, which is shaped by a multitude of factors. Thus, naïve T cells are normally restricted to recirculate between the blood and secondary lymphoid tissues, although in some autoimmune diseases they may also accumulate in chronically inflamed tissues. When CD8⁺ T cells encounter antigen and differentiate into short-lived effector CTL, they lose the ability to home to lymph nodes but gain access to peripheral tissues and sites of inflammation. Long-lived memory cells exist in (at least) two flavors: central memory cells that migrate to both lymphoid organs and peripheral sites of inflammation, and effector memory cells that are preferentially localized in non-lymphoid tissues. Our current understanding of the interplay of T cell differentiation and migration has been boosted by the development of T-GFP mice, in which transgenic green fluorescent protein is expressed selectively in naïve and central memory T cells, but not in effector cytotoxic T cells (CTL). This review will focus on recent studies in which T-GFP mice were used to dissect the traffic signals for naïve T cell homing to secondary lymphoid organs, the factors that influence the differentiation of naïve CD8⁺ T cells into cytotoxic and memory cells, as well as the in vivo trafficking routes of antigen-experienced subsets.     

不同致敏模式支气管哮喘患儿外周血T淋巴细胞亚群比较及临床意义

目的：分析比较不同过敏原致敏模式下支气管哮喘患儿外周血T淋巴细胞亚群,为进一步明确不同变应原致敏哮喘患儿机体的免疫功能状态差异提供更多依据。方法：入组374例在北京儿童医院过敏反应科确诊的哮喘患儿,行过敏原皮肤点刺试验确定患儿致敏模式,流式细胞术测定外周血T细胞（CD3⁺CD19⁺）、CD4⁺T细胞（CD3⁺CD4⁺）、CD8⁺T细胞（CD3⁺CD8⁺）、Tregs（CD4⁺CD25⁺FOXP3⁺）、Th1（CD4⁺IFN-γ⁺T）、Th2（CD4⁺IL-4⁺T）以及Th17细胞亚群（CD4⁺IL-17A⁺T）,横断面比较上述免疫学指标在不同致敏模式哮喘患儿组间是否存在差异。结果：根据SPT检出阳性过敏原数量,将哮喘患儿分为未致敏哮喘组、单一致敏哮喘组及多重致敏哮喘三组。与健康对照组儿童相比,未致敏哮喘组、单一致敏哮喘组以及多重致敏哮喘三组哮喘患儿的外周血T细胞、CD4⁺T细胞、CD8⁺T细胞、CD4/CD8比值、Th1细胞、Th2细胞、Th1/Th2比值、Tregs、Th17细胞、Tregs/Th17比值等指标的组间差异均具有统计学意义。进一步对三组患儿进行两两比较发现,Tregs、Th17细胞以及Tregs/Th17比值在三组间差异具有统计学意义（均P<0.05）。根据SPT阳性检出过敏原种类,将入组哮喘患儿致敏谱主要分为尘螨组、霉菌组、动物皮屑组、花粉组及其他组。与健康对照组儿童相比,尘螨组、霉菌组、动物皮屑组、花粉组以及其他组过敏原致敏患儿的外周血T细胞、CD4⁺T细胞、CD8⁺T细胞、CD4/CD8比值、Th1细胞、Th2细胞、Th1/Th2比值、Tregs、Th17细胞、Tregs/Th17比值等指标的组间差异均具有统计学意义（均P<0.05）。同样地,行两两比较发现,五组患儿的外周血Th1细胞、Th2细胞、Th1/Th2比值、Tregs、Th17细胞以及Tregs/Th17比值在三组间差异具有统计学意义（均P<0.05）。结论：不同致敏模式的哮喘患儿外周血T淋巴细胞亚群分布状态存在差异,因此应注意不同致敏模式的哮喘患儿免疫应答状态差异。     

三种不同方法体外诱导CD4+T细胞向Th17细胞分化与增殖的效率

背景：研究认为Th17细胞参与了许多炎症性疾病的发生,但其体外诱导分化效率尚不明确。 目的：比较采用3种不同方法在体外诱导CD4⁺T细胞向Th17细胞分化与增殖的效率。 方法：分别采取以下3种方法体外诱导Th17细胞：①给予CD3及CD28抗体刺激,并在培养体系中加入白细胞介素6及转化生长因子β,培养3 d。②在方法①的基础上加入白细胞介素1β及肿瘤坏死因子α,培养3 d。③在方法②的基础上第3天洗去细胞因子,培养2 d;再次给予CD3及CD28抗体刺激,并在培养体系中加入白细胞介素23,培养3 d。 结果与结论：3种方法培养后CD4⁺T细胞中Th17细胞的比例分别为(8.5±2.8)%,(26.9±4.3)%,(44.3±5.5)%,三组之间差异有显著性意义(P < 0.01)。提示在培养体系中加入白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α及白细胞介素23,更有利于增加CD4⁺T细胞向Th17细胞分化的比例。     

Human purified CD8+ T cells: Ex vivo expansion model to generate a maximum yield of functional cytotoxic cells

CD8⁺ T cells are a critical component of the cellular immune response. They play an important role in the control of viral infection and eliminating cells with malignant potential. However, attempts to generate and expand human CD8⁺ T cells in vitro for an adoptive immunotherapy have been conducted with limitation of the very low frequency of CD8⁺ T cells in blood. Therefore, several expansion protocols have been developed to obtain large and efficient numbers of human CD8⁺ T cells for use in adoptive immunotherapies. In this study various common culture conditions using different cytokines IL-2, IL-4, IL-7, IL-10, IL-12 and IL-15 and autologous feeders and sera were investigated to expand human purified CD8⁺ T cells. The importance and the influence of these factors on the growth and phenotype of CD8⁺ T cell were assessed by serially sampling cultures using flow cytometry. We demonstrated that combination of IL-2 (50U/ml) and autologous feeders induced maximal CD8⁺ T cell proliferation (40-50 folds) compared to other cytokines. Immunophenotypic analysis of cultured cells showed that expanded CD8⁺ T cells were activated and differentiated. Furthermore our expansion model also demonstrated that expanded CD8⁺ T cells are functionally cytotoxic active by killing Allogeneic LCLs cells. In conclusion, we have developed a reliable, simple method that uses minimal cell numbers to generate a high yield of functional cytotoxic CD8⁺ T cells, which can be used for the development of cellular immunotherapies.     

Induction of anergic and regulatory T cells by plasmacytoid dendritic cells and other dendritic cell subsets

The induction of antigen-specific tolerance is critical for maintaining immune homeostasis and preventing autoimmunity. Because the central tolerance that eliminates potentially harmful autoreactive T cells is incomplete, peripheral mechanisms for suppressing self-reactive T cells play an important role. Dendritic cells (DCs) are professional antigen-presenting cells, which have an extraordinary capacity to stimulate naïve T cells and initiate primary immune responses. Recent accumulating evidence indicates that several subsets of human DCs also play a critical role in the induction of peripheral tolerance by anergizing effector CD4⁺ and CD8⁺ T cells or by inducing the differentiation of naïve T cells into T-regulatory cells, which produce interleukin (IL)-10. Human DC subsets with the property of suppressing an antigen-specific T-cell response include plasmacytoid DCs, which are either in an immature state or in a mature state induced by CD40 ligand stimulation, and monocyte-derived DCs, which are either in an immature state or have had their state modulated by treatment with IL-10 or CD8⁺CD28⁻ T cells. These “tolerogenic” DCs may be relevant to therapeutic applications for autoimmune and allergic diseases as well as organ transplant rejection.     

茯苓多糖对系统性红斑狼疮患者Th17/Treg平衡的影响

目的:研究茯苓多糖对系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡的免疫调节作用。方法:选取45例SLE患者和35例健康对照者,应用磁珠分选法分离外周血CD4~+ T细胞,流式细胞术检测CD4~+ T细胞中Th17和Treg细胞的比例。用茯苓多糖分别处理健康对照者及患者的CD4~+ T细胞,MTT法检测细胞活力以测定茯苓多糖毒性,ELISA检测细胞中白细胞介素17(IL-17)、IL-6、IL-10及转化生长因子β(TGF-β)的含量,RT-q PCR和Western blot法分别测定维甲酸相关孤儿受体γt(RORγt)与叉头框蛋白P3(Foxp3)的mRNA和蛋白表达水平。结果:与健康对照组相比,SLE患者的Th17细胞比例显著升高,Treg细胞比例明显降低(P0.05)。用100μg/L的茯苓多糖处理SLE患者CD4~+ T细胞,与空白对照组相比,IL-17和IL-6的含量显著降低,IL-10和TGF-β的含量明显上升(P0.05);RORγt的mRNA和蛋白表达显著下降,同时Foxp3的表达在mRNA和蛋白水平上明显增加(P0.05);并且Th17/Treg的比值降低(P0.05)。结论:茯苓多糖可以通过升高Treg并降低Th17细胞的比例,对SLE起到一定的治疗作用。