桔梗边角料中桔梗多糖的分离纯化研究

目的 优选桔梗边角料中桔梗多糖的分离纯化工艺.方法 以多糖损失率、蛋白脱除率为指标,比较Sevag法和三氯乙酸法(TCA)对桔梗多糖脱蛋白的效果;以脱色率、多糖保留率为指标,比较不同质量分数的活性炭对桔梗多糖脱色的效果;采用柱层析分离纯多糖.结果 桔梗多糖的最佳分离纯化工艺为以Sevag法脱蛋白、2％活性炭脱色,依次过DEAE-52纤维素和SephadexG-200分离纯化得PG和PG2两个多糖组分,其中PG相对分子质量为11749,主要由果糖组成.结论 所建立的分离纯化方法可行.     

绞股蓝多糖的分离纯化及初步结构分析

本文从绞股蓝Gynostemma pentaphyllum(Thunb.) Makino中分离纯化得到了两个均一多糖GPS-2和GPS-3,并对GPS-3进行了初步结构分析.结果表明GPS-3的糖含量为78.10%,分子量为9100Dal,单糖组成及摩尔比为,鼠李糖木糖阿拉伯糖半乳糖(果糖)葡萄糖=1.75 1 8.70 3.075.90.     

罗汉果根多糖的分离纯化及免疫活性研究

目的 从罗汉果Siraitia grosuenorii根中分离纯化多糖组分,初步分析其结构特征并研究其免疫调节作用。方法 干燥罗汉果根经95%乙醇脱脂,用70 ℃水提醇沉得到粗多糖,再经Cellulose DE-52纤维素阴离子交换柱、Sephadex LH-20凝胶柱分离纯化,得到均一多糖LGP-A。采用高效凝胶渗透色谱法（high performance gel permeation chromatography,HPGPC）与PMP柱前衍生化法测定其相对分子质量和单糖组成;通过傅里叶红外光谱（FT-IR）、核磁共振波谱（NMR）、刚果红实验、扫描电子显微镜（scanning electron microscope,SEM）等方法对LGP-A的初步结构进行分析。利用CCK法、ELISA试剂盒、中性红实验对RAW264.7细胞的增殖、一氧化氮（NO）、白介素-6（interleukin-6,IL-6）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）及吞噬能力进行检测,评价LGP-A的免疫活性。结果 LGP-A的相对分子质量为1.83×10⁶,主要由半乳糖（Galp,51.23%）和阿拉伯糖（Araf,44.68%）组成。红外光谱及核磁波共振波谱对其结构分析证明,LGP-A可能主要含有T-α-L-Araf（A）、→3)-α-L-Araf-(1→（B）、→5)-α-L-Araf-(1→（C）、→3,5)-α-L-Araf-(1→（D）、→3)-β-D-Galp-(1→（E）、→3,6)-β-D-Galp-(1→（F）、→6)-β-D-Galp-(1→（G）和→3)-α-D-Galp-(1→（H）片段。质量浓度在0.625～5.0 μg/mL时,LGP-A能促进RAW264.7细胞的增殖,并能明显促进细胞分泌NO、IL-6和TNF-α,提高细胞吞噬率,表明LGP-A具有显著的免疫调节活性。结论 LGP-A是从罗汉果根中得到的天然均一多糖,其初步结构和活性的研究为罗汉果根资源的开发提供了一定的依据。     

大枣多糖的分离、纯化及分子量的测定

大枣果肉用乙醇回流脱脂，80～100℃热水浸提，提取液经减压浓缩，乙醇分级沉淀，三氯乙酸脱蛋白，透析，透析内液再经减压浓缩、醇沉得到三个粗多糖ZJ—A’，ZJ—B’，ZJ—C’，ZJ—B’经DEAE—Cellulose柱、Sephacryl S—300柱反复纯化，得大枣多糖ZJ—1、ZJ—2，高效凝胶渗透色谱(HPGPC)和常压凝胶柱色谱分析表明，ZJ—1、ZJ—2为均一多糖，HPGPC法测定分子量(MW)分别为9848、8991，紫外吸收光谱表明，ZJ—1、ZJ—2无核酸和蛋白质的特征吸收峰。     

蛹虫草多糖的分离纯化及促胆固醇逆向转运研究

对蛹虫草子实体多糖进行分离纯化、相对分子质量测定、单糖组成分析和体内胆固醇逆向转运活性研究。采用阴离子交换色谱、分子排阻色谱分离纯化多糖,高效凝胶渗透色谱法测定相对分子质量,高效液相色谱结合柱前衍生法测定单糖组成,同位素示踪技术评价胆固醇转运活性。最终获得3种纯多糖组分CMBW1,CMBW2和CMYW1,糖含量依次为87%,89%,95%,蛋白含量依次为6.5%,1.3%,2.8%,相对分子质量依次为772.1,20.9,13.2 kDa;CMBW1由Man,GlcN,Rha,GlcUA,Glc,Gal和Ara构成,摩尔比例为7.25:0.17:1.29:0.23:6.30:11.08:0.79;CMBW2由Man,GlcN,Gal和Ara组成,摩尔比例为2.40:0.16:2.92:0.24;CMYW1由Man,GlcN,GlcUA和Glc组成,摩尔比例为0.59:0.57:0.45:25.61;蛹虫草多糖50 mg·kg^-1即可显著促进³H-胆固醇向小鼠血液转运和经由粪便排出。所得3种蛹虫草多糖组分均为杂多糖,所得蛹虫草多糖具有促胆固醇逆向转运功能。     

红花水溶性多糖的分离、纯化及初步研究

 目的从红花中提取水溶性粗多糖,进一步纯化,得到均一的多糖CTP,并研究其组成和性质。方法粗多糖经反复冻融、Sevage法脱蛋白、超滤、柱色谱等方法分离纯化得到CTP。经比旋光度测定、HPLC等方法检验其均一性,结果CTP为均一组分,GC分析其单糖组成为Gle和Cal,摩尔比为6.08:1 结论CTP为中性杂多糖,相对分子质量4000～5000。     

桑枝多糖的分离纯化及结构初步分析

目的:从桑枝中分离纯化出桑枝多糖,并研究其组成及初步结构。方法:桑枝经水提醇沉,脱蛋白、DEAE-纤维素柱和SephadexG-100柱层析,得RMPS1和RMPS2二个多糖组分,采用TLC、GC、HPLC、IR和Smith降解等方法分析其组成和初步结构。结果:RMPS1和RMPS2的平均分子量分别为:5.8×105,6.5×105,RMPS1有鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖组成,其摩尔比为:1.08∶1∶1.40∶1.57;RMPS2有鼠李糖、葡萄糖和半乳糖组成,其摩尔比为:11.38∶1∶1.35;通过高碘酸氧化和Smith降解初步分析,RMPS1、RMPS2中连接方式主要为1→2、1→4糖苷键,此外包括1→3糖苷键,红外光谱显示,均具有糖的特征吸收峰。结论:首次测定桑枝多糖RMPS1和RMPS2的初步结构,为桑枝多糖的进一步研究提供依据。     

大枣多糖的分离、纯化及分子量的测定

大枣果肉用乙醇回流脱脂,80～100℃热水浸提,提取液经减压浓缩,乙醇分级沉淀,三氯乙酸脱蛋白,透析,透析内液再经减压浓缩、醇沉得到三个粗多糖ZJ-A’,ZJ-B’,ZJ-C’,ZJ-B’经DEAE-Cellulose柱、Sephacryl S-300柱反复纯化,得大枣多糖ZJ-1、ZJ-2,高效凝胶渗透色谱(HPGPC)和常压凝胶柱色谱分析表明,ZJ-1、ZJ-2为均一多糖,HPGPC法测定分子量(MW)分别为9848、8991,紫外吸收光谱表明,ZJ-1、ZJ-2无核酸和蛋白质的特征吸收峰。     

玉竹中酸性多糖的分离纯化及单糖组成分析

目的:对玉竹粗多糖进行分离纯化,并对所得均一多糖进行定性分析.方法:采用热水提取玉竹粗多糖,乙醇分级沉淀,收集乙醇体积分数为80％条件下析出的多糖沉淀物.再经DEAE-52纤维素离子交换层析和Sephadex G-100分子筛色谱得到玉竹酸性多糖(POAPS0).应用紫外光谱、凝胶柱色谱、纸色谱分析POAP80的纯度,红外光谱和PMP柱前衍生化高效液相色谱分析其结构和单糖组成.结果:从玉竹粗多糖中分离纯化了1种酸性多糖POAP80,主要含有甘露糖、葡萄糖、半乳糖醛酸、半乳糖4种单糖,其摩尔比为0.93∶2.65∶ 29.38∶3.47.结论:POAP80为玉竹中新发现的均一组分多糖,上述方法提供了玉竹POAP80的一些结构信息,为进一步研究其结构和功能提供参考.     

枇杷叶多糖分离纯化及其单糖组成研究

目的从枇杷Eriobotrya japonica叶中分离纯化得到枇杷叶多糖,并对其进行相对分子质量和单糖组成分析以及结构的初步鉴定。方法枇杷叶经水提、醇沉、冷冻干燥得到枇杷叶多糖(PEL)组分,经DEAE-Sepharose Fast Flow离子柱和Sephacryl S 500 High-Resolution凝胶柱色谱进行分离纯化得均一组分(PEL60-A)。采用高效液相色谱、气质联用确定其纯度、相对分子质量和单糖组成。结果枇杷叶多糖PEL60-A相对分子质量为2.69×10~5;单糖组成主要是L-鼠李糖、L-岩藻糖,并含有少量D-木糖、D-甘露糖、D-葡萄糖和D-半乳糖,其物质的量比为0.78∶1.00∶0.15∶0.09∶0.11∶0.19。结论研究枇杷叶多糖分离纯化及其单糖组成,对其结构进行了初步鉴定,为枇杷叶精细加工提供重要的科学理论依据。     

山麦冬多糖的分离纯化及单糖组成研究

山麦冬为百合科植物湖北麦冬Liriope spicata(Thunb.)Lour.var.prolifera Y.T.Ma的干燥块根,是湖北大宗道地药材。现代研究表明,其主要活性成分山麦冬多糖有降血糖、延缓衰老、抗疲劳、辅助抑制肿瘤、抗辐射等作用[1,2]。而目前对于山麦冬多糖的分离纯化及单糖组成分析尚未见报     

板蓝根多糖的系统分离纯化与组成分析

目的建立板蓝根多糖的系统分离纯化方法,并对分离得到的均一多糖进行组成测定。方法以抗病毒活性较好的80%醇沉板蓝根粗多糖为研究对象,对其进行DEAE-Sepharose Fast Flow柱色谱、Sephacryl-200葡聚糖凝胶柱色谱以及高效凝胶色谱系统分离纯化。分别采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)和邻苯二甲醛(OPA)衍生化HPLC法对分离得到的板蓝根均一多糖进行单糖组成和氨基酸组成测定。结果利用系统分离纯化策略,从80%醇沉板蓝根粗多糖中分离得到2种均一板蓝根多糖(IRPS1A和IRPS1B)和2种均一板蓝根糖蛋白(IRPS2A和IRPS3A)。其中,IRPS1A与IRPS1B的单糖组成均为甘露糖、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖;IRPS2A的单糖组成为半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖;IRPS3A的单糖组成为甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖。糖蛋白IRPS2A与IRPS3A均含有天门冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、组氨酸、甘氨酸、苏氨酸、精氨酸、丙氨酸、胱氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸,共14种氨基酸残基。同时,IRPS2A还含有酪氨酸残基。结论该系统分离纯化的策略可应用于板蓝根均一多糖(糖蛋白)的获取,为板蓝根多糖的结构分析及药理活性研究奠定基础。     

虎杖多糖的分离纯化及结构研究

目的分离纯化虎杖总多糖,并对其结构进行分析。方法采用水提醇沉法提取虎杖总多糖,联合DEAE-纤维素、Sephadex G-100柱色谱对虎杖总多糖进行分离纯化;采用高效凝胶渗透色谱法对均一多糖进行纯度鉴定和分子量测定;PMP柱前衍生-高效液相色谱法(HPLC)测定单糖组成;甲基化、气质联用(GC-MS)、红外光谱和核磁共振波谱对其结构进行分析。结果经分离纯化得到2个均一多糖PPⅠ、PPⅡ,其相对分子量分别为7780 Da、5720 Da。单糖组成实验表明PPⅠ、PPⅡ主要由葡萄糖构成。甲基化实验表明PPⅠ、PPⅡ均以1→4、1→3,4、1→4,6葡萄糖苷键存在,摩尔比分别为17∶1∶4、21∶1∶3。红外光谱及核磁波共振波谱对其结构分析证明PPⅠ、PPⅡ由α-型吡喃糖连接而成。结论 PPⅠ、PPⅡ是由α-(1,4)、α-(1→3,4)α-(1→4,6)吡喃葡萄糖苷键连接而成的不同结构、不同分子量的均一多糖。为进一步研究虎杖均一多糖的结构及活性提供依据。     

悬钩子木多糖的分离纯化及免疫调节活性研究

目的 从悬钩子木中分离纯化多糖,初步分析其结构特征并进行免疫调节活性研究。方法 采用热水浸提法提取悬钩子木粗多糖（Rubus sachalinensis polysaccharides,RSP）,再经Cellulose DE-52纤维素离子交换柱、Sephadex G-100凝胶柱色谱进行分离纯化;利用高效凝胶渗透色谱法（HPGPC）鉴定纯度并测定相对分子质量;采用气相色谱分析其单糖组成;采用红外光谱和核磁共振波谱对其结构进行初步分析;采用CCK-8法检测其对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响;利用ELISA试剂盒测定其对白细胞介素-2（IL-2）、γ-干扰素（IFN-γ）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）释放能力的影响。结果 从悬钩子木中分离纯化得到RSP1-1和RSP1-2 2种多糖,相对分子质量分别为13 227（多分散指数1.15）和9 343（多分散指数1.08）;2种多糖均主要含阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖,其物质的量比分别是RSP1-1（9.5：7.0：10.3：18.6）和RSP1-2（5.7：11.1：10.3：14.2）;红外光谱及核磁波共振波谱对其结构分析证明RSP1-1可能主要含有α-1,3-Ara、β-1,4-Gal、β-1,3-Glc、β-1,3-Man片段,RSP1-2可能主要含有β-1,4-Gal、β-1,3-Glc、β-1,3-Man片段。质量浓度在5~200 μg/mL时,RSP1-1、RSP1-2和RSP2均可刺激小鼠脾淋巴细胞的增殖（P<0.05）,并且明显促进淋巴细胞分泌IFN-γ和TNF-α（P<0.05）,质量浓度为5 μg/mL时能促进淋巴细胞分泌IL-2（P<0.05）。结论 RSP1-1和RSP1-2均为首次从悬钩子木中分离得到的天然来源的均一多糖。红外光谱及核磁共振波谱进一步表征了其纯度和结构特征。RSP1-1、RSP1-2和RSP2均能不同程度促进脾淋巴细胞的增殖,促进淋巴细胞分泌IL-2、IFN-γ和TNF-α,呈现一定的免疫调节活性。     

五味子多糖的分离、纯化及结构表征

[目的]通过对五味子多糖的分离纯化、结构表征,以期为五味子的进一步开发利用提供科学研究数据.[方法]采用水提醇沉法得五味子粗多糖,通过分级醇沉及葡聚糖凝胶G-150进一步分离纯化得五味子多糖组分.采用苯酚-硫酸法测定多糖的含量,高效分子排阻色谱联用多角度激光光散射检测器和示差检测器(HPSEC-MALLS-RID)的方...     

白术多糖的分离纯化和化学结构研究

采用柱层析进行分离纯化,并用HPLC和13CNMR等方法分别阐明中药白术中多糖PSAM-1和PSAM-2的化学结构.结果表明多糖PSAM-1和PSAM-2均为杂多糖,平均分子量分别为1.36×105、1.04×105,PSAM-1由半乳糖、鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖组成,PSAM-2由木糖、阿拉伯糖、半乳糖组成.     

多糖的提取分离及纯化研究

对多糖的认识备受关注,常用的提取方法有:溶剂提取法、酸提取法、碱提取法、酶解法、超滤、超声波、微波、超临界流体萃取;分离纯化技术有:沉淀法、柱层析.本文对以上种实验方法做一简单介绍.     

朱砂根多糖的分离纯化和结构初步分析

目的对朱砂根多糖进行分离、纯化和结构初步分析。方法采用DEAE-cellulose-52纤维素层析对其进行分离纯化,并通过GPC、GC-MS、1H NMR和13C NMR等方法对其结构进行初步分析。结果得到两个主要多糖组分Z-C1和Z-C2,均由葡萄糖、鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、核糖和半乳糖等单糖组成,并都含有糖醛酸。Z-C1的数均相对分子量和重均相对分子量分别为5.46×103和9.47×103;Z-C2的数均和重均相对分子量分别为2.52×104和3.37×104。结论朱砂根多糖组分Z-C1和Z-C2都是由葡萄糖、鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、核糖和半乳糖等单糖和糖醛酸组成的酸性杂多糖,但单糖的摩尔比不同。     

仙茅多糖的分离纯化及结构分析

目的:对仙茅多糖进行分离纯化,并对其结构进行分析,为仙茅多糖的进一步应用提供理论基础。方法:仙茅根茎经水提、醇沉、冷冻干燥得仙茅粗多糖(XMP),经DEAE-纤维素柱和Sepharose CL-6B凝胶柱色谱纯化得纯多糖XMP-1,采用凝胶渗透色谱、紫外光谱、红外光谱、气质联用等技术对XMP-1的结构进行分析。结果:仙茅多糖由甘露糖、葡萄糖、半乳糖3种单糖组成,其摩尔比为81.2∶5.7∶1,多糖质量分数为91.8%,相对分子质量为3 031 Da,不含核酸、蛋白质和色素。具有吡喃特征吸收峰,在水溶液分子中的分子构象可能为自然卷曲结构。结论:仙茅纯多糖是一种分子量较小的中性杂多糖。     

玉郎伞多糖的分离纯化和组成性质研究

目的 从玉郎伞(YLS)中分离出玉郎伞多糖,并对其化学组成进行研究.方法 YLS经醇提后的药渣用热水提取,乙醇沉淀,Sevag试剂脱蛋白,采用DEAE纤维素(DEAE-52)柱层析分离纯化,气相色谱和薄层色谱分析其组成.结果 分离得到的YLS多糖经Sephadex-75凝胶柱层析,硫酸-苯酚法以及高效凝胶渗透色谱法(HPGPC) 证实为单一多糖,紫外扫描显示无核酸和蛋白特征吸收峰,薄层色谱和气相色谱表明由葡萄糖和阿拉伯糖组成.结论 YLS多糖首次从YLS中提取获得,为YLS主要成分之一.