纤维素酶提取金钗石斛多糖工艺研究

目的:对纤维素酶用于金钗石斛多糖提取工艺的酶解参数进行优选。方法:通过正交实验,以多糖提取率为指标,采用紫外分光光度法测定多糖含量,以此评价酶解工艺的优劣。结果:最佳酶解条件为:料液比1∶50,pH值5.0,提取时间170min,酶用量4500U/g,酶解温度55℃,此时金钗石斛多糖提取率为7.71%,比常规热回流提取方法高43.84%。结论:本方法装置简单,提取率高,为金钗石斛深入研究奠定基础,在中药有效成分的提取方面具有潜在的工业应用价值。     

金钗石斛多糖提取分离、结构解析及生物活性研究进展

金钗石斛Dendrobium nobile为传统中药材,具有益胃生津、滋阴清热等功效。系统总结了近年来金钗石斛多糖的提取分离、结构解析及生物活性的研究进展,发现其主要活性成分为多糖,提取方法主要有水提取、有机溶剂提取、超声波辅助提取、微波辅助提取和酶提取法等;多糖的单糖组成丰富,主要由阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖和甘露糖组成,还含有鼠李糖、甘露糖、木糖、半乳糖醛酸等;多糖具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤、增强免疫力、保肝等生物活性,在药品、食品和保健品等方面具有极大的开发利用价值,今后应进一步加强其多糖提取、纯化方法优化,多糖高级结构和构效关系解析,以及关联药效作用机制阐释等方面研究,以促进金钗石斛多糖在功能性食品和药品中的开发利用。     

金钗石斛多糖提取工艺的优化及对小鼠脾细胞增殖的影响

目的:优化金钗多糖的提取工艺,并研究其对小鼠脾细胞增殖的影响。方法:采用单因素试验和L9(34)正交试验法考察了提取时间、提取温度和料液比对金钗石斛多糖得率的影响,并用MTS/PMS法测定其对小鼠脾细胞增殖的影响。结果:金钗石斛多糖的最佳提取工艺条件为液料比45∶1,提取温度90℃,提取时间2.5 h;金钗石斛精制多糖、金钗石斛粗制多糖能直接促进脾细胞的增殖,且两者能显著增强刀豆蛋白A(ConA)诱导的T淋巴细胞和脂多糖(LPS)诱导的B淋巴细胞的增殖,在此最佳工艺条件下金钗石斛粗多糖得率为2.80%。结论:金钗石斛多糖能有效的促进脾淋巴细胞的增殖,并与Con A,LPS对T,B淋巴细胞的增殖有协同刺激作用。     

不同产地金钗石斛多糖的含量比较研究

目的:测定不同产地金钗石斛样品中的多糖含量,为金钗石斛的应用提供科学依据.方法:以多糖含量为指标,采用葡萄糖作标准品,应用苯酚-硫酸比色法测定各产地金钗石斛中的多糖含量.结果:不同产地的金钗石斛多糖含量有一定的差异,其中以贵州习水样品的多糖含量最高,海南东方霸王岭样品的多糖含量最低.结论:各地区生长环境对金钗石斛多糖的积累可能有一定影响.苯酚-硫酸比色法可以用来测定金钗石斛中多糖的含量.     

金钗石斛水溶性多糖与碱溶性多糖对Hela细胞增殖的影响

目的比较金钗石斛的水溶性多糖和碱溶性多糖成分对Hela细胞增殖的抑制作用。方法应用总SOD活性检测试剂盒(WST法)对纯化金钗石斛水溶性多糖和碱溶性多糖进行测定。结果金钗石斛水溶性多糖在质量浓度较高(≥0.40mg·mL-1)时,对Hela细胞的生长有抑制作用,此作用随着质量浓度的增高而增强。而碱溶性多糖在质量浓度较低(≤0.70mg·mL-1)时,对Hela细胞的生长有抑制作用,此作用在质量浓度为0.10mg·mL-1时达到最大。结论金钗石斛水溶性多糖和碱溶性多糖在体外对Hela细胞有一定的抑制作用,而两种多糖的最强抑制质量浓度不同。     

金钗石斛多糖含量测定条件和提取工艺的优化

利用正交试验选取金钗石斛多糖含量测定的最优条件及金钗石斛多糖的最佳提取工艺。结果表明,金钗石斛多糖含量测定的最优条件是加入苯酚1.5mL,浓硫酸6mL,反应时间30m in。金钗石斛多糖最佳提取工艺的条件是提取温度为85℃,提取次数为3次,乙醇终浓度为75%。本研究为金钗石斛多糖的提取和含量测定的条件提供了参考,为金钗石斛的进一步研究提供了基础。     

金钗石斛多糖对大鼠高脂血症和肝脏脂肪变性的影响

 目的 观察金钗石斛多糖对Wistar大鼠高脂血症和肝脏脂肪变性的影响。方法 建立Wistar大鼠高脂血症动物模型,采用灌胃给药,观察金钗石斛多糖对其血脂和肝脏脂肪变性的影响。结果 金钗石斛多糖80,160 mg·kg^-1能明显降低高脂血症Wistar大鼠血清中总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白含量(P＜0.05),使高密度脂蛋白水平明显升高(P＜0.05),并具有改善高脂血症Wistar大鼠肝脏脂肪变性的作用。结论 金钗石斛多糖对高脂血症大鼠血脂代谢异常具有调节作用,能够有效减轻高脂血症大鼠肝脏组织的脂肪变性。     

金钗石斛多糖的组织化学定位研究

目的优化金钗石斛多糖组织化学定位方法,明确金钗石斛多糖的分布和积累特征。方法采用徒手切片和冰冻切片方法制作金钗石斛根、茎和叶片横切片,利用组织化学定位方法对金钗石斛多糖进行定位分析。结果徒手切片法比冰冻切片法更适用于金钗石斛多糖的组织化学定位研究,金钗石斛多糖主要分布在根的皮层薄壁细胞、茎的维管束周围薄壁细胞核叶片薄壁细胞内。多糖在茎内分布最多,其次是叶片,根中分布较少。结论组织化学定位方法是一种研究和分析金钗石斛多糖的快速简便的技术和方法,金钗石斛叶片的开发多糖潜力较大,应充分利用。     

金钗石斛鲜品闪式提取方法的工艺研究

目的研究闪式提取法中金钗石斛鲜品的最佳提取条件.方法采用L9(34)正交试验法优选金钗石斛的最佳提取条件.考察提取次数、溶剂浓度和溶剂倍数3个因素,每个因素选取3个水平进行实验.结果最佳工艺为A2B2C3,,即用8倍量75%乙醇破碎提取3次,时间为30s/次.结论采用本工艺金钗石斛的活性成分石斛碱含量较高,工艺可行.     

星点设计-响应曲面法优化金钗石斛多糖提取工艺

目的:利用星点设计-响应曲面法对金钗石斛多糖提取工艺进行优化研究。方法:在单因素试验的基础上,自变量为金钗石斛的提取温度、提取时间、料液比,因变量为多糖得率,通过对自变量各水平的多元化线性回归及二项式拟合,采用星点设计-响应面法选取金钗石斛多糖提取最佳工艺,并进行预测分析。结果:金钗石斛多糖最优提取工艺条件为:提取温度为65℃,料液比为1∶45,提取时间为72 min,提取次数为2次。提取率预测值为7.49%,实际平均提取率为7.57%,相对误差为0.8%。结论:星点设计-响应曲面法优化金钗石斛多糖提取工艺简便合理,稳定性高,精确度高,可预测性较优。     

金钗石斛洋参胶囊提取工艺研究

目的:优选金钗石斛洋参胶囊的最佳提取工艺。方法:以紫外分光光度法测定粗多糖和总皂苷的含量为考察指标,以加水量、提取次数、提取时间为考察因素,采用L_9(3~4)正交实验法优选最佳提取工艺。结果:确定最佳提取工艺为A_1B_2C_2,即6倍量水提取2次,每次1h。结论:金钗石斛洋参胶囊的提取工艺条件稳定,方法简便、实用可行,适用于工业大生产,为金钗石斛洋参胶囊的制备奠定了理论基础。     

金钗石斛生物碱和水溶性多糖的累积规律

目的 探索金钗石斛体内生物碱和水溶性多糖累积规律.方法 生物碱、水溶性多糖分别采用氯仿、乙醇提取并测定其吸光度.结果 生物碱含量以思茅产最高,罗甸产最低,岩生基质高于树生基质,野外栽培和温室载培对金钗石斛生物碱含量无影响;水溶性多糖含量以赤水产最高,合江产最低,树生基质高于岩生基质,野外栽培高于温室栽培.结论 不同产地、不同生长条件下金钗石斛生物碱和水溶性多糖累积规律存在差异.     

金钗石斛总多糖提取工艺研究

目的筛选金钗石斛总多糖的最佳提取工艺。方法以总多糖的含量为考察指标,用苯酚-硫酸法对水溶性多糖进行含量测定,用正交试验法对提取过程中水的用量、煎煮次数、煎煮时间、粉碎程度进行优化。结果最佳提取工艺为用10倍量的水提取3次,每次1.5小时。结论得到的工艺提取率高,并稳定可行。     

不同提取方法对太子参多糖含量的影响

目的:考察不同提取方式对太子参粗多糖的得率、总多糖含量的影响。方法:采用热水提取法、超声提取法和酶提取法分别提取太子参多糖,苯酚硫酸法测定总多糖含量。结果:热水提取法、超声提取法和酶提取法对太子参粗多糖得率分别为14.54%、11.12%和17.81%,太子参总多糖含量依次为10.18%、8.68%和10.69%。结论:综合考虑提取效率、多糖纯度和工艺成本,热水提取法较为适用于太子参多糖的生产。     

金钗石斛对温度的生理反应

 目的研究金钗石斛对温度的生理反应,确定其生长的适宜温度范围。方法利用人工气候箱,于同一光强下设置不同的温度梯度对金钗石斛进行处理;采用754GW紫外．可见分光光度计测定石斛叶中MDA,可溶性蛋白质、可溶性总糖及叶绿素含量;POD,CAT活性及其同工酶电泳。结果石斛的生理活性随温度由低到高,表现出弱,强,弱的变化规律;25℃处理石斛的可溶性蛋白质含量、总糖含量、叶绿素含量及CAT活性均显著高于其它处理,MDA含量及POD活性,则显著低于其它处理;CAT活性与MDA含量呈显著负相关,而POD活性与之呈显著正相关;CAT,POD同工酶分析表明,温度引起石斛同工酶谱带数目的增减或强弱的改变,其变化与相应酶活性基本一致。结论25℃的平均温度(23～28℃)有利于促进金钗石斛的生长与代谢,是其生长的适宜温度。     

金钗、金钗石斛的名实考证

该文考证中药材"金钗"、"金钗石斛"的植物基原,以正本清源。结合本草描述,查阅湖北、四川、重庆、河南和陕西等5省市部分地方志及文史资料,对老河口、利川、房县、西峡、内乡、安康、万源等20余个县市的老药工和老中医进行走访调查,并采集调查区域的少量金钗植株进行活体保存和鉴定。"金钗"和"金钗石斛"之名在川东北、渝东、鄂西、鄂北、陕东南、豫西的民间应用广泛,地方志及文史资料多有记载,在民间歌谣和故事传说中亦有体现;调查和鉴定结果表明,历史上中药材名称"金钗"和"金钗石斛"为中国特有种曲茎石斛Dendrobium flexicaule,并有龙头金、人字金、环字金、龙头凤尾金等别名,所加工的干燥金钗药材称金耳环。中药材"金钗"、"金钗石斛"的植物来源为曲茎石斛D. flexicaule,而不是《中国植物志》(19卷)和《中国植物志》(英文版)(25卷),以及自1977年以来历版《中国药典》中所使用的名称石斛(D. nobile,别名金钗石斛)。尽管植物的中文名称不受植物分类学者对植物命名所必须遵循的规章《国际藻类、菌物和植物命名法规》的制约,但为避免中文名称使用混乱,特别是中药材行业药材名称的混乱,建议将石斛D. nobile的中文别名更改为扁草石斛,而D. flexicaule的中文名改为金钗石斛,别名中增加金钗、曲茎石斛。     

不同方法提取海螵蛸多糖及结构表征

目的 采用水提法和碱提法提取江苏连云港产海螵蛸中多糖.方法 海螵蛸粉末先以乙醇浸提、盐酸脱钙后,残渣以热水浸提得到水提多糖,水提后残渣以碱提法即氢氧化钠溶液再次提取获得海螵蛸碱提多糖.结果 确定了水提多糖较佳工艺条件为提取温度80℃,液固比4∶1,提取时间6h,多糖量约为1‰.碱提多糖的较佳工艺条件为:提取温度80℃,氢氧化钠溶液质量浓度1.5 mol/L,提取时间6h,多糖提取率为7.008‰.以IR数据对多糖结构进行了表征.海螵蛸水提粗多糖和碱提粗多糖均具有多糖红外光谱特征峰.结论 以水提法和碱提法从传统中药海螵蛸中获得了多糖,确定了较佳工艺条件,对传统中药的深入研究有一定的应用价值.     

金钗石斛多糖减轻大鼠脑缺血再灌注损伤

目的探讨金钗石斛Dendrobium nobile Lindl.多糖减轻大鼠脑缺血再灌注引起氧化应激和炎症反应的损伤和可能的保护机制。方法 105只SD大鼠随机分为假手术组,模型组,尼莫地平组(10 mg/kg),金钗石斛多糖低、中、高剂量组(50、100、200 mg/kg)。采用线栓法栓塞大鼠右侧大脑中动脉建立大鼠脑缺血再灌注损伤模型。术前7 d开始灌胃,每天1次。缺血2 h再灌注24 h进行神经功能评分,测定大鼠脑梗死面积、脑指数以及脑含水量;用化学比色法分别测定超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、髓过氧化物酶(MPO)活性及丙二醛(MDA)水平;用免疫荧光染色法检测缺血区中性粒细胞的浸润情况。结果假手术组无神经功能缺损,模型组大鼠神经功能缺失症状明显,大脑指数及脑含水量升高,模型组大鼠脑组织及血清SOD、GSH-Px活性明显降低,MPO活性及MDA含有量显著升高;与模型组比较,金钗石斛多糖各剂量组大鼠神经功能缺失症状改善,大脑指数及脑含水量明显下降,脑组织及血清SOD、GSH-Px活性明显升高,MPO活性及MDA含有量显著下降;与模型组比较,金钗石斛多糖高剂量组大鼠右侧缺血区中性粒细胞浸润减少。结论金钗石斛多糖对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤有一定保护作用,其作用机制可能与抑制氧化应激和减轻炎症反应有关。     

植物生长调节剂对金钗石斛药用化学成分的影响

目的 研究植物生长调节剂对金钗石斛药用化学成分的影响。方法 用6-BA、GA3两种植物生长调节剂浸根处理金钗石斛。结果与结论 表明两种植物生长调节剂在一定浓度下可使石斛可溶性总糖含量增加,而对金钗石斛碱的含量无影响。GA3能显著提高石斛总生物碱的含量。     

不同地区金钗石斛的石斛碱含量测定及分析

目的测定不同地区的金钗石斛有效成分石斛碱的含量,对其质量作出初步评估。方法气相色谱法测定石斛碱的含量,DB-1毛细管柱(0.25μm×0.25mm×30m),以FID为检测器。结果所收集的材料中,除了三个地区的金钗石斛样本的石斛碱含量没有达到药典的标准(0.4%),其余地区的均达到了标准,其中含量最高的为桂-JX,达到1.73%,而含量较低的为琼-BS、川-SC、藏-MT,分别为0.39%、0.32%和0.33%,各样本间含量差距较大。结论实验对较大范围内的金钗石斛野生资源进行了收集和有效成分的含量测定,筛选出石斛碱含量较高的样本,在一定程度上为金钗石斛遗传新育种提供了支持,也为进一步对不同地区金钗石斛的质量评价奠定一定的基础。