金钗石斛中生物碱与多糖含量的测定

目的测定金钗石斛中生物碱与多糖的含有量。方法氨水、乙酸乙酯提取生物碱后,加水提取多糖。HPLC法测定石斛碱含有量,酸性染料比色法测定总生物碱含有量,苯酚-硫酸法测定多糖含有量。结果石斛碱在0.722 8~9.035 0μg范围内线性关系良好(r=1),平均加样回收率98.7%,RSD 0.99%。总生物碱在1.21~6.05μg/mL范围内线性关系良好(r=0.999 5),平均加样回收率99.7%,RSD 1.2%。多糖在21.24~84.96μg/mL范围内线性关系良好(r=0.999 7),平均加样回收率98.9%,RSD 1.7%。结论该方法准确环保,重复性良好,可用于金钗石斛的质量控制。     

金钗石斛生物碱和水溶性多糖的累积规律

目的 探索金钗石斛体内生物碱和水溶性多糖累积规律.方法 生物碱、水溶性多糖分别采用氯仿、乙醇提取并测定其吸光度.结果 生物碱含量以思茅产最高,罗甸产最低,岩生基质高于树生基质,野外栽培和温室载培对金钗石斛生物碱含量无影响;水溶性多糖含量以赤水产最高,合江产最低,树生基质高于岩生基质,野外栽培高于温室栽培.结论 不同产地、不同生长条件下金钗石斛生物碱和水溶性多糖累积规律存在差异.     

金钗石斛多糖含量测定条件和提取工艺的优化

利用正交试验选取金钗石斛多糖含量测定的最优条件及金钗石斛多糖的最佳提取工艺。结果表明,金钗石斛多糖含量测定的最优条件是加入苯酚1.5mL,浓硫酸6mL,反应时间30m in。金钗石斛多糖最佳提取工艺的条件是提取温度为85℃,提取次数为3次,乙醇终浓度为75%。本研究为金钗石斛多糖的提取和含量测定的条件提供了参考,为金钗石斛的进一步研究提供了基础。     

纤维素酶提取金钗石斛多糖工艺研究

目的:对纤维素酶用于金钗石斛多糖提取工艺的酶解参数进行优选。方法:通过正交实验,以多糖提取率为指标,采用紫外分光光度法测定多糖含量,以此评价酶解工艺的优劣。结果:最佳酶解条件为:料液比1∶50,pH值5.0,提取时间170min,酶用量4500U/g,酶解温度55℃,此时金钗石斛多糖提取率为7.71%,比常规热回流提取方法高43.84%。结论:本方法装置简单,提取率高,为金钗石斛深入研究奠定基础,在中药有效成分的提取方面具有潜在的工业应用价值。     

金钗石斛多糖提取工艺的优化及对小鼠脾细胞增殖的影响

目的:优化金钗多糖的提取工艺,并研究其对小鼠脾细胞增殖的影响。方法:采用单因素试验和L9(34)正交试验法考察了提取时间、提取温度和料液比对金钗石斛多糖得率的影响,并用MTS/PMS法测定其对小鼠脾细胞增殖的影响。结果:金钗石斛多糖的最佳提取工艺条件为液料比45∶1,提取温度90℃,提取时间2.5 h;金钗石斛精制多糖、金钗石斛粗制多糖能直接促进脾细胞的增殖,且两者能显著增强刀豆蛋白A(ConA)诱导的T淋巴细胞和脂多糖(LPS)诱导的B淋巴细胞的增殖,在此最佳工艺条件下金钗石斛粗多糖得率为2.80%。结论:金钗石斛多糖能有效的促进脾淋巴细胞的增殖,并与Con A,LPS对T,B淋巴细胞的增殖有协同刺激作用。     

十一种木本植物上栽培的金钗石斛中生物碱部分的气相色谱—质谱研究

本文对载培于十一种木本植物上的和石缝间野生的川石斛茎和叶中所含生物碱进行了-质谱研究,发现载培于杏树和喜树上的川石斛茎中存在多量的其他样品和石缝间野生川石斛中所不含有的成份(1种和3种)。说明载培植物对生于其上的川石斛成份有明显的影响。因此川石斛的载培方法应加以考虑。同时测定了各样品中石斛碱的含量,表明各种植物上载培的石斛中石斛碱的含量比石缝间野生石斛为低,未表明树上载培石斛的优越。并证明了叶片中石斛碱的含量也较高,可利用入药。     

金钗石斛生物碱药理作用研究进展

综述金钗石斛生物碱药理作用研究进展。金钗石斛生物碱是金钗石斛药用的主要活性成分,具有抗白内障、抗肿瘤、保护神经、降血糖、降血脂、抗氧化等药理作用。     

4种内生真菌对金钗石斛无菌苗生长及其多糖和总生物碱含量的影响

目的 :研究离体培养时 4种菌根真菌对金钗石斛生长及化学成分含量的影响。方法 :利用纯培养的菌根真菌分别与金钗石斛无菌苗共生培养 ,观测它们对金钗石斛生长及其多糖和总生物碱含量的影响。结果 :与对照相比 ,Mycena sp. (MF2 3 )极显著降低了金钗石斛鲜重的 2 4.9% (P<0 .0 1) ;所有实验菌株对金钗石斛干重均无显著性影响 ;Epulorhiza sp. (MF18)和MF2 3显著提高了金钗石斛的折干率 (P<0.0 5) ,Mycena sp. (MF2 4)极显著提高了金钗石斛的折干率 (P<0. 0 1) ,分别最多提高了 51.3 % ,43 8%和 63. 3 % ;Epulorhizasp (MF15)和MF2 4比对照极显著增加了金钗石斛气生根数量的 4.25倍和 4.13倍 (P<0 .0 1) ;MF2 3极显著减少了金钗石斛基生根数量的46.5% (P<0. 0 1) ;MF15,MF18,MF2 3和MF2 4分别可使金钗石斛多糖含量提高 153 .4% ,52. 1% ,18.5% ,76.7% ;MF2 3使金钗石斛总生物碱含量提高 18.3 %。结论 :在离体培养条件下 ,内生真菌与金钗石斛共生培养能影响金钗石斛的生长和总生物碱的含量 ,提高多糖的含量。     

金钗石斛水溶性多糖与碱溶性多糖对Hela细胞增殖的影响

目的比较金钗石斛的水溶性多糖和碱溶性多糖成分对Hela细胞增殖的抑制作用。方法应用总SOD活性检测试剂盒(WST法)对纯化金钗石斛水溶性多糖和碱溶性多糖进行测定。结果金钗石斛水溶性多糖在质量浓度较高(≥0.40mg·mL-1)时,对Hela细胞的生长有抑制作用,此作用随着质量浓度的增高而增强。而碱溶性多糖在质量浓度较低(≤0.70mg·mL-1)时,对Hela细胞的生长有抑制作用,此作用在质量浓度为0.10mg·mL-1时达到最大。结论金钗石斛水溶性多糖和碱溶性多糖在体外对Hela细胞有一定的抑制作用,而两种多糖的最强抑制质量浓度不同。     

金钗石斛总多糖提取工艺研究

目的筛选金钗石斛总多糖的最佳提取工艺。方法以总多糖的含量为考察指标,用苯酚-硫酸法对水溶性多糖进行含量测定,用正交试验法对提取过程中水的用量、煎煮次数、煎煮时间、粉碎程度进行优化。结果最佳提取工艺为用10倍量的水提取3次,每次1.5小时。结论得到的工艺提取率高,并稳定可行。     

金钗石斛多糖减轻大鼠脑缺血再灌注损伤

目的探讨金钗石斛Dendrobium nobile Lindl.多糖减轻大鼠脑缺血再灌注引起氧化应激和炎症反应的损伤和可能的保护机制。方法 105只SD大鼠随机分为假手术组,模型组,尼莫地平组(10 mg/kg),金钗石斛多糖低、中、高剂量组(50、100、200 mg/kg)。采用线栓法栓塞大鼠右侧大脑中动脉建立大鼠脑缺血再灌注损伤模型。术前7 d开始灌胃,每天1次。缺血2 h再灌注24 h进行神经功能评分,测定大鼠脑梗死面积、脑指数以及脑含水量;用化学比色法分别测定超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、髓过氧化物酶(MPO)活性及丙二醛(MDA)水平;用免疫荧光染色法检测缺血区中性粒细胞的浸润情况。结果假手术组无神经功能缺损,模型组大鼠神经功能缺失症状明显,大脑指数及脑含水量升高,模型组大鼠脑组织及血清SOD、GSH-Px活性明显降低,MPO活性及MDA含有量显著升高;与模型组比较,金钗石斛多糖各剂量组大鼠神经功能缺失症状改善,大脑指数及脑含水量明显下降,脑组织及血清SOD、GSH-Px活性明显升高,MPO活性及MDA含有量显著下降;与模型组比较,金钗石斛多糖高剂量组大鼠右侧缺血区中性粒细胞浸润减少。结论金钗石斛多糖对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤有一定保护作用,其作用机制可能与抑制氧化应激和减轻炎症反应有关。     

金钗石斛中的酚性成分

目的对金钗石斛茎的化学成分进行研究。方法运用多种色谱学技术对金钗石斛的化学成分进行分离,并根据光谱数据鉴定化合物的结构。结果从该植物中分离得到12个酚性化合物,其结构分别为二氢松柏醇二氢对羟基桂皮酸酯(Ⅰ),香草醛(Ⅱ),罗布麻宁(Ⅲ),对羟基苯甲醛(Ⅳ),丁香醛(Ⅴ),丁香酸(Ⅵ),丁香乙酮(Ⅶ),α-羟基丁香丙酮(Ⅷ),松柏醛(Ⅸ),二氢松柏醇(Ⅹ),2-羟基苯丙醇(Ⅺ)和3-羟基-4-甲氧基苯乙醇(Ⅻ)。结论上述化合物均为首次报道从金钗石斛中分离得到,化合物Ⅰ,Ⅲ~Ⅻ为首次报道从石斛属植物中分离得到。     

自动电位滴定法测定金钗石斛药材中总生物碱的含量

目的:测定金钗石斛药材中总生物碱的含量。方法:药材以90%乙醇回流提取3次,醇提液浓缩至无醇味后以3%盐酸溶解,酸水溶液经强酸型阳离子交换树脂柱吸附,以去离子水洗脱至中性后,收集5%氨水-50%乙醇液洗脱流份(以生物碱的检识反应判定终点)并浓缩至干,即得含量测定用供试品。供试品在冰醋酸中以高氯酸滴定液(0.1mol/L)自动滴定,由此以石斛碱(C16H25NO2)为基准物计算金钗石斛中生物碱的含量(每1mL高氯酸滴定液相当于石斛碱26.3mg)。结果:三个批次金钗石斛药材的总生物碱含量测定结果分别为0.85%、0.63%、1.03%。结论:经方法学考察,该含量测定方法具有良好的专属性和灵敏度,检测结果稳定可靠,可用于金钗石斛药材中总生物碱的定量分析。     

Bioactive bibenzyl derivatives and fluorenones from Dendrobium nobile

Bioassay-guided fractionation of the 60% ethanol extract of the stems of Dendrobium nobile using the DPPH assay led to the isolation of two new bibenzyl derivatives, nobilin D (1) and nobilin E (2), and a new fluorenone, nobilone (3), together with seven known compounds (4-10). Their structures were determined on the basis of spectroscopic analyses. Compounds 1, 2, 4, 7, 8, and 10 exhibited significant antioxidant activity higher than or equivalent to vitamin C in the DPPH assay, and compounds 1, 3, 4, and 7-10 displayed higher antioxidant activity than vitamin C in the ORAC assay. Compounds 1, 2, and 10 also exhibited stronger inhibitory effects on NO production than resveratrol.     

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??OBJECTIVE To study the antitumor phenanthrene constituents in Dendrobium nobile. METHODS A variety of chromatographic techniques were applied to extract, isolate and purify natural products from extract of Dendrobium nobile, their structures were identified on the basis of spectral data. The antitumor activity of these monomers in MCF-7 breast cancer cells was studied by MTT assay in vitro. RESULTS Nine compounds were isolated from ethyl acetate part in Dendrobium nobile, there were four phenanthrene compounds, which were densiflorol B(1), cypripedin(2), moscatin(3) and 2,4,8-trimethoxy phenanthrene-3,7-diol(4); three coumarin compounds: coumarin(5), moellendorffiline(6) and isopimpinellin(7); one flavanoid: naringenin(8); one phenol: (E)-4-(2-methoxyvinyl) benzene-1,2-diol(9). Compounds 1-3 had good antitumor activities, their IC₅₀ values were 2.99, 5.01 and 72.68 μmol·L^-1 respectively. CONCLUSION The compounds 6, 7, 9 are isolated from the Orchidaceae family for the first time, compounds 1, 2, 4, 5, 8 are isolated from this plant for the first time. Compounds 1-3 can be used as candidates for anti-tumor drugs.     

金钗石斛化学成分的研究

目的 研究金钗石斛的化学成分,为阐明其活性成分提供依据.方法 利用乙醇进行提取,硅胶柱层析、制备薄层层析和Sephadex LH-20柱层析进行分离纯化,波谱分析(核磁共振氢谱、碳谱和质谱)确定结构.结果 分离并鉴定了4 个化合物,分别为: moscatin (Ⅰ),gigantol (II),batatasin III (III),stigmasterol (IV).结论 化合物Ⅰ为首次从该植物中得到.     

金钗石斛多糖的组织化学定位研究

目的优化金钗石斛多糖组织化学定位方法,明确金钗石斛多糖的分布和积累特征。方法采用徒手切片和冰冻切片方法制作金钗石斛根、茎和叶片横切片,利用组织化学定位方法对金钗石斛多糖进行定位分析。结果徒手切片法比冰冻切片法更适用于金钗石斛多糖的组织化学定位研究,金钗石斛多糖主要分布在根的皮层薄壁细胞、茎的维管束周围薄壁细胞核叶片薄壁细胞内。多糖在茎内分布最多,其次是叶片,根中分布较少。结论组织化学定位方法是一种研究和分析金钗石斛多糖的快速简便的技术和方法,金钗石斛叶片的开发多糖潜力较大,应充分利用。     

Antifibrotic phenanthrenes of Dendrobium nobile stems

Two new phenanthrenes ( 1 and 6) and four new dihydrophenanthrenes ( 2- 5) were isolated from a methanolic extract of Dendrobium nobile stems, along with 13 known phenanthrenes and dihydrophenanthrenes ( 7- 19). By spectroscopic analysis, the structures of compounds 1- 6 were determined as 2,8-dihydroxy-3,4,7-trimethoxyphenanthrene ( 1), 3-hydroxy-2,4,7-trimethoxy-9,10-dihydrophenanthrene ( 2), 2,8-dihydroxy-3,4,7-trimethoxy-9,10-dihydrophenanthrene ( 3), 2-hydroxy-4,7-dimethoxy-9,10-dihydrophenanthrene ( 4), 2,2'-dihydroxy-3,3',4,4',7,7'-hexamethoxy-9,9',10,10'-tetrahydro-1,1'-biphenanthrene ( 5), and 2,3,5-trihydroxy-4,9-dimethoxyphenanthrene ( 6), respectively. Antifibrotic activity of compounds 1- 19 was evaluated employing HSC-T6, an immortalized rat hepatic stellate cell line, as an in vitro assay system by assessing cell proliferation.     

金钗石斛对温度的生理反应

 目的研究金钗石斛对温度的生理反应,确定其生长的适宜温度范围。方法利用人工气候箱,于同一光强下设置不同的温度梯度对金钗石斛进行处理;采用754GW紫外．可见分光光度计测定石斛叶中MDA,可溶性蛋白质、可溶性总糖及叶绿素含量;POD,CAT活性及其同工酶电泳。结果石斛的生理活性随温度由低到高,表现出弱,强,弱的变化规律;25℃处理石斛的可溶性蛋白质含量、总糖含量、叶绿素含量及CAT活性均显著高于其它处理,MDA含量及POD活性,则显著低于其它处理;CAT活性与MDA含量呈显著负相关,而POD活性与之呈显著正相关;CAT,POD同工酶分析表明,温度引起石斛同工酶谱带数目的增减或强弱的改变,其变化与相应酶活性基本一致。结论25℃的平均温度(23～28℃)有利于促进金钗石斛的生长与代谢,是其生长的适宜温度。