静脉应用bFGF对兔缺血心肌血管新生的影响

目的探讨静脉给予碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)对兔缺血心肌血管新生的影响。方法开胸结扎兔的冠状动脉左前降支 (LAD) ,制成急性心肌梗塞模型 ,动物被随机分为两组 :一为bFGF组 ,连续2周静脉内给予bFGF(100ug/kg) ;一为对照组 ,连续2周静脉内给予生理盐水2ml。12周时 ,处死动物 ,通过组织学观察两组兔子缺血心肌的血管新生情况。结果bFGF组缺血心肌处的血管密度与对照组比较差异无显著性 (P>0.05)。结论静脉内连续2周给予bFGF(100ug/kg)无明显促进缺血心肌血管新生的作用。     

NICD/Hes1影响心肌梗死后小鼠缺血心肌的血管新生

背景：心肌缺血是心肌梗死后心功能受损的主要原因之一,Notch通路参与血管新生过程,但其下游分子Notch受体胞内部分(Notch intracellular domain,NICD)/Hes1在心肌梗死后缺血心肌血管新生中发挥何种作用,研究尚少。目的：借助Notch γ分泌酶抑制剂RO4929097,探讨NICD/Hes1对心肌梗死后小鼠心功能及缺血心肌血管新生的影响。方法：按随机数字表法将C57BL/6小鼠分为假手术组、模型组和RO4929097组,每组10只,后2组C57BL/6小鼠通过结扎左前降支冠状动脉建立心肌梗死模型,RO4929097组小鼠术后第2天按10 mg/(kg·d)每天灌胃1次,假手术组和模型组小鼠给予等体积生理盐水,灌胃20 d。第21天超声检测小鼠左室射血分数,马松染色观察心肌梗死面积及病理组织学变化,免疫荧光法检测缺血心肌CD31水平,酶联免疫吸附法检测血清血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子水平,免疫蛋白印迹技术检测心肌组织缺氧诱导因子1α、心肌营养素1及NICD、Hes1蛋白表达量。结果与结论：(1)模型组小鼠左室射血分数较假手术组显著降低(P &...     

黄芪甲苷通过调控PKD1-HDAC5-VEGF通路促进心肌梗死大鼠血管新生

目的:观察黄芪甲苷(AS-IV)通过调控蛋白激酶D1(PKD1)-组蛋白脱乙酰酶5(HDAC5)-血管内皮生长因子(VEGF)信号通路促心肌梗死大鼠血管新生的作用并分析其可能的作用机制。方法:采用经典的左冠状动脉前降支结扎术复制心肌梗死模型后,将大鼠分成模型组、AS-IV治疗组和AS-IV+CID755673(PKD1阻断剂)组,另设假手术对照组和二甲基亚砜(DMSO)对照组,均采用尾静脉注射的给药方式。4周后处死大鼠,应用HE染色和Masson染色分析左心室心肌组织病理学变化;应用RT-PCR分析心肌组织中PKD1、HDAC5和VEGF m RNA的表达;免疫组化及Western blot法分析心肌组织中PKD1、VEGF及HDAC5蛋白的表达。结果:组织病理学分析表明,假手术组和DMSO组大鼠心肌组织形态正常,而模型组大鼠心肌组织形态紊乱,心肌细胞坏死和纤维化明显;AS-IV治疗后,心肌组织形态改善明显,且新生的血管数量明显增多;AS-IV+CID755673处理后大鼠心肌组织形态再次趋向紊乱,坏死细胞增多,部分血管闭合。模型组心肌组织中PKD1、HDAC5和VEGF的m RNA和蛋白表达明显低于假手术组和DMSO组(P0.05),而AS-IV组显著高于模型组(P0.01),AS-IV+CID755673组明显低于AS-IV组(P0.05)。结论:AS-IV可部分通过调控PKD1-HDAC5-VEGF信号通路发挥促大鼠心肌梗死后心肌组织血管新生的作用。     

Netrin-1通过DCC/ERK信号通路减缓心肌梗死大鼠心室重构

目的 探讨netrin-1对心肌梗死大鼠心室重构的影响及其作用机制。方法 32只SD大鼠随机分为假手术组、心肌梗死模型组、心肌梗死+netrin-1低剂量组(低剂量组),心肌梗死+netrin-1高剂量组(高剂量组),每组8只。成功建立急性心肌梗死大鼠模型后,腹腔注射netrin-1干预4周,小动物超声系统检测大鼠心脏功能指标变化;HE染色观察大鼠心肌组织病理学变化;Masson染色检测大鼠心肌纤维化情况;TUNEL染色检测心肌细胞凋亡情况;Western blot检测心肌组织DCC、ERK1/2及p-ERK1/2蛋白表达。结果 与模型组相比,netrin-1低、高剂量组大鼠左心室收缩压(LVSP)和左心室内压力的最大上升和下降速率(±dp/dtmax)值明显升高,左心室舒张末期压(LVEDP)值显著降低;大鼠心质量/体质量(HW/BW)、(左心室+室间隔)质量/体质量[(LV+S)/BW]和(左心室+室间隔)质量/心质量[(LV+S)/HW]均显著降低。心肌细胞坏死明显减少,炎症细胞浸润减轻,胶原沉积减少;凋亡心肌细胞数量明显减少;DCC与p-ERK1/2蛋白表达水平显著升高。结论 ...     

高压氧预处理通过HIF-1α/VEGF通路减轻大脑缺血再灌注损伤

目的:探讨缺氧诱导因子1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)通路在高压氧(HO)预处理减轻缺血再灌注(IR)模型大鼠大脑损伤过程中的作用。方法:选择SPF级健康雄性成年SD大鼠32只,使用随机数字软件将其分为对照组(control组)、IR组、HO-IR组和HO-IR-HIF-1α抑制剂组(HO-IR-I组)。IR模型通过大脑中动脉栓塞法制作,对照组仅分离暴露相应血管。HO-IR组和HO-IR-I组大鼠均在制模前在动物高压舱内进行HO治疗4周(每天1次);HO-IR-I组每天在HO预处理前,经腹腔注射4 mg/kg的HIF-1α抑制剂YC-1[3-(5’-hydroxymethyl-2’-furyl)-1-benzylindazol]。在制作模型第1天和第7天行神经行为学评估,第7天观察结束后麻醉处死大鼠,取脑组织测量梗死体积,Western blot检测HIF-1α/VEGF通路相关蛋白及凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的水平,TUNEL法检测凋亡细胞数。结果:与control组比较,IR组、HO-IR组和HO-IR-I组大鼠的神经功能评分降低,脑梗死体积比例及HIF-1α、VEGF、Bax和Bcl-2的蛋白表达均增加,凋亡细胞数量亦增加(P0.05);与IR组比较;HO-IR组和HO-IR-I组的神经功能评分升高,HIF-1α、VEGF和抑凋亡蛋白Bcl-2表达上调,脑梗死体积比例降低,促凋亡蛋白Bax表达下调,凋亡细胞数量减少(P0.05);与HO-IR组比较,HO-IR-I组的神经功能评分降低,HIF-1α、VEGF和抑凋亡蛋白Bcl-2表达下调,脑梗死体积比例升高,促凋亡蛋白Bax表达上调,凋亡细胞数量增加(P0.05)。结论:HO预处理减轻大脑IR损伤的机制可能与通过诱导HIF-1α/VEGF通路调节凋亡进程有关。     

bFGF促进内皮细胞β_1整合素表达及其意义探讨

目的 :观察碱性成纤维细胞生长因子对血管内皮细胞 β1整合素表达的影响。方法 :采用WesternBlot法结合图像处理分析 ,检测bFGF作用前后培养血管内皮细胞 β1整合素的表达。结果 :bFGF处理组和对照组平均灰度值分别为 16 6 11± 9 86和 175 32± 5 12 ,两组免疫酶显色有显著差异。结论 :bFGF能够诱导内皮细胞膜表面β1整合素合成增加。推测bFGF通过上调内皮细胞 β1整合素表达 ,可能在促进血管生成方面有重要作用。     

心肌钻孔结合肝素化bFGF缓释支架植入促进猪急性心肌梗死后心肌干细胞再生

目的 观察心肌钻孔结合肝素化bFGF缓释支架植入在急性心肌梗死后心肌细胞再生中的作用。方法 结扎冠脉前降支制作猪急性心梗模型,然后随机分为对照组和治疗组（均6只）。治疗组,于心梗区用自制高速钻孔器由心外膜打2个直径为3.5mm透壁孔道,每孔内植入一枚肝素化bFGF缓释支架。术后每周2次静脉注射5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU) 250mg,用以标记DNA复制。用RT-PCR观察基质细胞衍生因子-1(SDF-1) mRNA表达,心肌灌注核素显像评价心肌灌注、心功能变化,免疫组化检测新生心肌。结果 治疗后6周,治疗组SDF-1 mRNA表达为4.02±0.31,显著高于对照组的1.63±0.21（P<0.001）;治疗前后灌注质量缺损百分率的差值为-3.22%±0.46%,明显低于对照组的2.83%±0.31%（P<0.001）;BrdU 的A值为1639±105 pixels/hpf,显著高于对照组的240±53 pixels/hpf（P<0.001）;存活心肌面积的A值为94118±4476 pixels/hpf,显著高于对照组的36345±3714 pixels/hpf（P<0.001）;左室射血分数为61%±4%,显著高于对照组的49%±3%（P<0.001）。结论 心肌钻孔结合肝素化bFGF缓释支架植入可能成为心肌梗死后心肌再生治疗的有效方法。     

褐藻糖胶对RPMI8226细胞血管生成的影响

 目的: 探讨褐藻糖胶对多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞血管生成的影响及可能的作用机制。方法: 体外培养多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞及人血管内皮细胞EA.hy 926细胞,采用MTT法检测褐藻糖胶对RPMI 8226细胞活力的影响;流式细胞术检测细胞周期及凋亡率;ELISA法检测褐藻糖胶处理RPMI 8226细胞后的培养液上清中VEGF的含量;小管形成实验观察褐藻糖胶处理RPMI 8226细胞后的培养液上清对EA.hy 926细胞诱导小管形成能力的影响;Western blot检测HIF-1α、VEGF、p-AKT和p-ERK1/2的蛋白水平。结果: 褐藻糖胶对RPMI 8226细胞活力的抑制作用呈浓度及时间依赖性;褐藻糖胶作用RPMI 8226细胞72 h后,细胞周期被阻滞于G₁期,细胞凋亡率呈浓度依赖性明显增高,各组均高于对照组(P<0.05);ELISA法结果显示褐藻糖胶处理72 h后的细胞培养液上清中VEGF的含量明显减少,与对照组相比,处理组上清中VEGF的含量下降(P<0.05);内皮细胞形成小管数目与面积随着褐藻糖胶的浓度升高而减小,100 mg/L 组差异显著(P<0.05);Western blot结果显示HIF-1α、VEGF、p-AKT和p-ERK1/2的蛋白水平与褐藻糖胶浓度呈负相关(P<0.05)。结论: 褐藻糖胶减少骨髓瘤细胞自分泌VEGF,减弱血管内皮细胞形成小管的能力,降低HIF-1α和VEGF的蛋白水平,这可能与抑制AKT和ERK1/2的磷酸化有关。     

辛伐他汀促进模型大鼠心肌梗死后局部血管新生

目的 研究辛伐他汀对急性心肌梗死（AMI）后血管生成素-1（Ang-1）及内皮型一氧化氮合酶（eNOS）的表达调控与其促血管新生作用的关系。方法 健康成年SD大鼠60只,随机分为假手术组、对照组、辛伐他汀组、辛伐他汀+ L-NAME(NOS抑制剂)组、辛伐他汀+ AMG386 (Ang-1抑制剂)组;结扎大鼠冠状动脉左前降支建立急性心肌梗死动物模型。术后2 d分别给予辛伐他汀(1 mg/(kg·d) ),辛伐他汀+L-NAME(40 mg/(kg·d) ),辛伐他汀+AMG386（10 mg/(kg·wk）),均为2 周,以CD31染色新生血管并检测新生血管密度;以Western blot及RT-PCR检测缺血区心肌Ang-1、eNOS、丝氨酸1177磷酸化内皮型一氧化氮合酶(p-eNOS)的表达。结果（1）辛伐他汀使AMI后缺血区心肌新生血管密度显著增加（P<0.05 ）,而L-NAME 、AMG386则显著抑制了辛伐他汀的促心肌血管新生作用（P<0.05）。（2）辛伐他汀使AMI后缺血区心肌Ang-1、eNOS、p-eNOS表达均显著增强（P<0.05）,而AMG386使辛伐他汀上调p-eNOS表达的作用被显著抑制（P<0.05）。结论 辛伐他汀促心肌血管新生作用可能与其上调Ang-1、eNOS的表达及促进eNOS磷酸化有关,其中eNOS磷酸化可能是介导Ang-1促血管新生作用的下游机制。     

bFGF促进内皮细胞β1整合素表达及其意义探讨

目的:观察碱性成纤维细胞生长因子对血管内皮细胞β₁整合素表达的影响。方法:采用WesternBlot法结合图像处理分析,检测bFGF作用前后培养血管内皮细胞β₁整合素的表达。结果:bFGF处理组和对照组平均灰度值分别为166.11±9.86和175.32±5.12,两组免疫酶显色有显著差异。结论:bFGF能够诱导内皮细胞膜表面β₁整合素合成增加。推测bFGF通过上调内皮细胞β₁整合素表达,可能在促进血管生成方面有重要作用。     

急性心肌梗死后早期血浆心肌纤维化相关指标的变化

目的:观察急性心肌梗死早期内源性松弛素(H2RLX)和Ⅰ型前胶原C端末端肽（PICP）、 转化生长因子（TGF-β1）的的表达。方法:入选41名急性心肌梗死患者和冠脉血管正常的对照组10名。心肌梗死后 3 d、7 d分别抽静脉血,用ELISA方法检测H2RLX和PICP、 TGF-β1,对照组在入选后抽静脉血检测H2RLX和PICP、 TGF-β1。结果:(1)心肌梗死后3 d H2RLX与对照组比较,没有显著差异。梗死后3 d和7 d的H2RLX水平没有明显变化。(2) 梗死后3 d PICP 水平显著高于对照组, PICP在梗死后7 d的水平显著低于梗死后3 d的水平。(3) 梗死后3 d TGF-β1与梗死后7 d TGF-β1保持在较高水平,两个时点的TGF-β1水平均明显高于对照组。(4) 梗死后7 d松弛素水平和心肌梗死组的空腹血糖呈正相关。结论:在心肌梗死早期血浆中没有内源性松弛素表达的增加,但心肌胶原形成及前纤维化因子表达增加。     

当归对大鼠心肌梗死后心肌纤维化的影响及机制

目的： 观察转化生长因子-β1(TGF-β₁)、巨噬细胞在心肌梗死后心肌纤维化发生发展过程中的变化及当归的治疗作用，探讨心肌梗死后心肌纤维化的发生及当归的干预机制。 方法： 结扎SD大鼠冠脉前降支复制心肌梗死模型，随机分为假手术（sham）组、心肌梗死（MI）组和心肌梗死当归（MI+angelica）组。术后24 h开始给药，MI+angelica组腹腔注射当归（20 mL·kg^-1·d^-1，相当于生药10 g·kg^-1·d^-1），sham组和MI组腹腔注射等量生理盐水。于术后1、2、4周记录左室血流动力学改变，检测非梗死区心肌胶原含量、TGF-β₁及巨噬细胞的变化。 结果： ① MI组和MI+angelica组非梗死区心肌TGF-β₁及巨噬细胞阳性表达显著高于sham组（P<0.01），以1周的阳性表达为最高，但MI+angelica组低于MI组（P<0.01）；② 术后各时点MI组心功能受损，于术后2周和4周心肌胶原含量明显高于sham组（P<0.01）；术后4周MI+angelica组心功能损害轻于MI组，心肌胶原含量低于MI组（P< 0.01）。 结论： 当归通过抑制巨噬细胞在非梗死区的浸润、下调TGF-β₁的表达，阻断促纤维化发生的环节，减轻心肌梗死后非梗死区反应性胶原的过度沉积，防治心肌梗死后心肌纤维化，改善心脏功能。     

大鼠脂肪干细胞联合碱性成纤维生长因子治疗大鼠心肌梗死

目的 探讨脂肪干细胞（ADSC）联合碱性成纤维生长因子（bFGF）提高心肌梗死大鼠心脏功能的可能机制.方法 SD大鼠50只,先行脂肪干细胞提取手术,分离、培养、鉴定脂肪干细胞,行干细胞成脂、成骨诱导分化,建立大鼠心肌梗死模型,选择缩短分数（FS）＜40％的SD大鼠（36只）,完全随机分4组：单纯注射PBS组（n=9）、单纯注射bFGF组（n=9）、PBS＋ADSC组（n=9）以及ADSC＋bFGF组（n=9）,以bFGF胶为可注射性载体,ADSC为种子细胞,1周后进行大鼠心梗部位移植.移植4周后对心梗面积、左心室室壁厚度、心梗部位微血管密度、ADSC在心梗部位分化情况等指标进行检测,并利用心脏超声对心梗大鼠的心脏功能进行测定.应用免疫组织化学、免疫荧光等方法评价其改善心脏功能可能机制.结果 成功分离ADSC并且通过流式细胞术表明大多数分离的脂肪干细胞CD90抗体阳性、CD29抗体阳性、CD45抗体和CD34抗体阴性.脂肪干细胞能够经过诱导分化成成脂、成骨细胞.PBS＋ADSC组以及ADSC＋bFGF组在室壁厚度、梗死面积、梗死区域微血管形成能力与PBS组相比,差异均有统计学意义,且以ADSC＋bFGF组最为显著（P＜0.01）.ADSC移植到大鼠心脏4周后,可以分化为cTnT阳性细胞、SMA阳性细胞以及vWAg阳性细胞.心功能检测结果表明PBS＋ADSC组同ADSC＋bFGF组一样,具有心梗修复能力.结论 移植ADSC的同时增加bFGF能促进梗死区的心肌再生以及血管化,并能显著改善心脏功能.     

AG490对HEL细胞VEGF和HIF-1α表达的影响

 目的: 探讨JAK2抑制剂AG490对人红白血病(HEL)细胞迁移及对VEGF和HIF-1α表达的影响。方法: 用不同浓度的AG490处理HEL细胞,CCK-8法检测细胞活力,Hoechst 33342荧光染色检测细胞凋亡,流式细胞术检测细胞凋亡及周期,Transwell小室检测细胞迁移能力,RT-PCR检测JAK2的mRNA水平,Western blot检测p-JAK2、VEGF和HIF-1α的蛋白水平。结果: AG490能够抑制HEL细胞的活力,不同浓度(20、40、60、80和100 μmol/L)AG490作用HEL细胞48 h后,细胞活力分别为88%、75%、48%、10%和0.12%(P<0.05);Hoechst 33342凋亡细胞染色显示80 μmol/L AG490处理细胞48 h后,亮蓝色凋亡细胞较对照组明显增多(P<0.05);流式结果显示80 μmol/L AG490作用细胞48 h后,凋亡率上升;细胞迁移实验结果显示20 μmol/L AG490处理细胞24 h后漏出细胞明显低于对照组(P<0.05);RT-PCR结果显示不同浓度AG490处理HEL细胞48 h后JAK2 mRNA呈剂量依赖性减低;Western blot结果显示实验组细胞的p-JAK2、VEGF和HIF-1α蛋白水平较对照组明显减低(P<0.05)。结论: AG490可通过抑制JAK2信号通路,抑制HEL细胞血管新生因子VEGF和HIF-1α的表达。     

大鼠心肌梗死后心功能变化与新生血管的关系

目的 探讨大鼠心肌梗死后心功能变化及其与血管新生之间的关系。 方法 结扎大鼠左冠状动脉前降支,制备心肌梗死模型,术后利用心脏彩超分别评价梗死后1周、2周、3周和4周的心功能,采用免疫组织化学和Western blotting方法,检测各周大鼠梗死边缘Ⅷ因子和血管内皮生长因子（VEGF）的表达变化。结果 大鼠心肌梗死1周时心功能最差,2周和3周心功能有所改善,4周时心功能降低;Ⅷ因子与VEGF于术后1周、2周呈高表达,3周表达开始降低,4周时已接近正常水平。 结论 梗死后心功能的变化与血管新生不一致,心肌梗死早期血管密度的增加不能明显改善心功能。     

伊马替尼对醋酸去氧皮质酮诱导的盐敏感性高血压大鼠心肌纤维化的干预作用

目的: 研究血小板源性生长因子受体拮抗剂伊马替尼(IMA)对醋酸去氧皮质酮(DOCA)诱导的盐敏感性高血压大鼠心肌纤维化的干预作用及相关机制。方法: 60只雄性SD大鼠行右肾切除术,术后给予1%NaCl和0.2%KCl饮水4周并随机分为3组:对照组(control组);DOCA组;DOCA+IMA组。尾套法测定大鼠动脉收缩压(SBP),HE染色观察心肌组织炎症反应情况,苦味酸-天狼星红染色观察大鼠心肌间质胶原容积分数(CVF)和血管周围胶原面积比(PVCA),免疫组化法观察心肌组织单核巨噬细胞抗原(ED-1)表达,免疫印迹法检测血小板源性生长因子(PDGF-A和PDGF-C)、血小板源性生长因子受体α(PDGFRα)和磷酸化血小板源性生长因子受体α(p-PDGFRα)表达。结果: (1)DOCA组和DOCA+IMA组大鼠SBP显著升高,两组相比无显著差异(P>0.05),但均显著高于对照组(P<0.01);(2)DOCA组出现严重心肌纤维化,其CVF和PVCA值明显高于对照组(P<0.01),DOCA+IMA组CVF和PVCA值虽高于对照组(P<0.05),但较DOCA组显著减小(P<0.05);(3)与对照组相比,DOCA组及DOCA+IMA组心肌间质可见明显炎症渗出及单核巨噬细胞浸润;(4)DOCA组及DOCA+IMA组PDGF-A、PDGF-C和PDGFRα表达均明显高于对照组(P<0.01),但DOCA+IMA组p-PDGFRα表达较DOCA组明显减少(P<0.05)。结论: 盐皮质激素致心肌纤维化与心肌组织炎症反应、单核巨噬细胞浸润增加及PDGF-A、PDGF-C、PDGFRα表达增多有关,应用伊马替尼可以抑制这一纤维化过程,其机制可能与其抑制成纤维细胞表面PDGFRα活性、中断PDGFs信号途径介导的成纤维细胞分裂增殖相关。     

左西孟旦对大鼠急性心肌梗死后心肌纤维化及心功能的影响

目的 探讨左西孟旦对心肌梗死（myocardial infarction,MI）大鼠心肌纤维化的影响及其作用机制。 方法 通过结扎大鼠左冠状动脉前降支建立MI模型。30只存活的MI大鼠随机分为模型组和左西孟旦组（Levo组）,每组15只。假手术组（n=10）的大鼠接受相同的外科手术,只是不进行动脉结扎。Levo组胃灌注左西孟旦4.67 μg·kg-1·d-1治疗28 d。假手术组和模型组大鼠同时给等量蒸馏水。采用二维超声心动图评价心功能,Masson-trichrome评价心肌纤维化程度,RT-qPCR检测COL1A1、COL3A1基因表达,Western blot检测SIRT1/TGF-β1/Smad3信号通路蛋白表达。 结果 超声心动图测量显示,与模型组相比,Levo组大鼠的左室收缩末期内径降低（P<0.05）,而射血分数和缩短分数显著升高（P<0.01）。Masson-trichrome显示,左西孟旦治疗可显著减少坏死心肌组织、抑制炎性细胞的浸润并减少胶原蛋白沉积。RT-qPCR分析显示,左西孟旦治疗显著降低了MI大鼠心肌组织中Ⅰ型和Ⅲ型胶原的含量（P<0.01）。Western blot检测显示,左西孟旦治疗可显著上调MI大鼠心肌组织中SIRT1蛋白表达（P<0.01）,下调TGF-β1和p-Smad3蛋白表达（P<0.01）。 结论 左西孟旦具有抗纤维化和心保护作用。这些作用可能通过SIRT1/TGF-β1/Smad3信号通路介导。