黄芩苷纳米胶束的制备、表征及其对MCF-7细胞抑制作用的研究

目的制备黄芩苷(baicalin,BCN)聚乙二醇维生素E琥珀酸酯(TPGS)纳米胶束(BCN-TPGS-PMs)以改善其溶解性和体外抗肿瘤效果。方法采用薄膜水化法制备BCN-TPGS-PMs;透射电子显微镜观察纳米胶束形态;粒度测定仪考察其粒径和Zeta电位;超速离心法考察制剂的包封率及载药量;动态膜透析法考察体外释药特性;四甲基偶氮唑盐(MTT)法考察其对人乳腺癌细胞(MCF-7)的抑制作用。结果所制备的BCN-TPGS-PMs平均粒径为(11.91±0.14)nm;载药量和包封率分别为(5.42±0.04)%和(95.83±7.34)%;在体外p H 7.4、6.5的磷酸盐缓冲液(PBS)中24 h内分别释放28.53%和35.06%;表明所制备胶束粒径较小且均一,体外释放具有一定缓释性。同时体外细胞毒性实验表明BCN-TPGS-PMs较BCN能够显著地抑制MCF-7细胞的增殖(P0.05)。结论所制备的BCN-TPGS-PMs粒径小,载药量高,稳定性好,能显著提高BCN的体外抗肿瘤效果。     

pH依赖型黄芩苷纳米晶体结肠靶向微丸的制备及体外释药研究

目的制备pH依赖型黄芩苷纳米晶体结肠靶向微丸,并对影响其体外释药行为的包衣处方进行优化。方法采用探头超声联合高压均质技术制备黄芩苷纳米混悬剂,用流化床干燥法固化成纳米晶体微丸,并考察其再分散后的粒径、Zeta电位和多分散指数。然后,将上述纳米晶体微丸进行流化床包衣,以微丸体外释放度为评价指标,对包衣处方进行优化。结果黄芩苷纳米晶体微丸再分散后,平均粒径为(281.90±10.56)nm,多分散指数(PI)为(0.195 1±0.043 2),Zeta电位为(-31.7±2.1)m V。最优包衣处方为以Eudragit S100为包衣材料,8%的柠檬酸三乙酯(TEC)为增塑剂,50%的滑石粉为抗黏剂,包衣增重量为15%。所制得的黄芩苷纳米晶体结肠靶向微丸在人工胃液2 h、小肠液4 h中的累积释药率小于13%,而在人工结肠液4 h中达93%。结论该制剂具有良好的结肠靶向释药性能。     

以甘草酸为稳定剂制备黄芩苷固体纳米晶体

目的制备以甘草酸为稳定剂的黄芩苷固体纳米晶体(baicalin solid nanocrystal,BCN-SN),并考察其体外释放特性。方法采用高速剪切-高压均质法制备黄芩苷纳米混悬剂,并进一步冷冻干燥得BCN-SN,以平均粒径及多分散指数(PDI)为指标采用单因素实验优化处方及工艺参数,对所得BCN-SN进行理化性质表征,并测定其体外溶出度。结果以甘草酸为稳定剂,甘露醇-甘草酸为冻干保护剂制备的BCN-SN平均粒径为(478.0±6.5)nm,PDI为0.230±0.015。扫描电镜显示BCN-SN呈不规则球形,大小较均匀;差式扫描量热法表明黄芩苷制备成固体纳米晶体后,以无定形状态存在;体外释放结果表明BCN-SN的溶出速率和溶解度显著高于物理混合物。结论以甘草酸作为天然稳定剂的固体纳米晶体制备方法简便,能显著改善难溶性药物的溶解性,具有广阔的应有前景。     

黄芩苷纳米混悬剂大鼠体内药代动力学研究

[目的]建立液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)的方法,并对大鼠灌胃给药黄芩苷纳米混悬剂(BL-NSPS)后黄芩苷的药代动力学进行研究。[方法]采用LC-MS/MS方法,色谱柱:Waters ACQUITY UPLC~HSS C_(18)柱(1.8μm,2.1 mm×50 mm,美国Waters公司);柱温:30℃;流速:0.3 mL/min;进样量:5μL;流动相:0.1%甲酸水(A)-乙腈(B);梯度洗脱。以卡马西平为内标,采用电喷雾离子源(ESI离子源),在正离子检测方式下进行多反应离子监测(MRM),检测离子对分别为m/z 447.09→270.80(黄芩苷)、m/z 237.10→193.80(卡马西平,内标),测定大鼠灌胃给药BL-NSPS后黄芩苷的血药浓度,并用Win Nonlin 6.0版药动学软件计算其药代动力学参数。[结果]黄芩苷在24.75~4 950.00 ng/m L范围内线性关系良好,血浆中内源性物质无干扰,LC-MS/MS方法回收率、基质效应、精密度、准确度和稳定性均符合生物样品的测定要求。BL-NSPS和黄芩苷原料药(BL-Bulk)的C_(max)分别为(3 329.10±499.10)ng/mL、(1 257.84±158.21)ng/mL。BL-NSPS的C_(max)较BL-Bulk有了显著提高(P0.05),BL-NSPS的相对生物利用度为(160.97±47.78)%。[结论]建立的LC-MS/MS测定方法准确度强、专属性好,可用于黄芩苷的药代动力学研究。结果显示,BLNSPS能增加药物的吸收速率,缩短了药物起效时间,提高药物体内生物利用度,可为黄芩苷制剂的进一步研发奠定基础。     

装载黄芩苷的溶菌酶-低相对分子质量壳聚糖纳米凝胶的制备及表征

目的 基于蛋白-多糖纳米凝胶的制备技术,通过低相对分子质量壳聚糖对溶菌酶的修饰以及对环境因素的调节筛选,控制溶菌酶的自组装行为,制备一种绿色环保的具备核壳结构的溶菌酶-低相对分子质量壳聚糖纳米凝胶,从而达到减小粒径,提高包封率和载药量的目的,使其更有利于肾靶向.方法 利用Maillard反应将溶菌酶与低相对分子质量壳聚...     

注射用黄芩苷镁盐冻干粉在大鼠体内的药代动力学及组织分布

目的:研究尾静脉注射黄芩苷镁盐后药物在大鼠体内的药代动力学和组织分布特征,比较黄芩苷镁盐和黄芩苷的药代动力学差异。方法:大鼠尾静脉注射黄芩苷镁盐和黄芩苷后,在不同时间点眼眶取血,采用HPLC测定各时间点的药物浓度,绘制药-时曲线,利用DAS 3. 0软件计算药代动力学参数,应用SPSS 19. 0软件进行统计学分析。尾静脉注射黄芩苷镁盐后,于不同时间点检测药物在心、肝、脾、肺、肾中的质量分数。结果:当黄芩苷镁盐给药剂量为25～100 mg·kg~(-1)时,药时曲线下面积AUC_(0-t)和AUC_(0-∞)与剂量呈良好的线性关系(r 0. 95),而其他药代动力学参数各剂量组间大部分无明显差异。与黄芩苷等摩尔剂量组比较,黄芩苷镁盐中剂量组的平均驻留时间(MRT_(0-t))显著增高。静脉注射黄芩苷镁盐0. 25 h后各组织中药物浓度最高,至0. 75 h时目标成分质量分数迅速降低,其中肾脏中分布最多,其次是肺,在心、肝和脾中分布量较少。结论:注射给药后,黄芩苷镁盐能迅速在体内分布且快速消除,其主要从肾脏排泄。     

黄芩苷纳米结晶的制备工艺

目的： 优选黄芩苷纳米结晶的制备工艺并考察其稳定性。 方法： 以粒径及多分散系数（PDI）为指标,采用单因素试验优选黄芩苷纳米混悬液的制备工艺;经离心富集和冷冻干燥制备黄芩苷纳米结晶,观察结晶形态,比较混悬液与冻干粉的初步稳定性;采用摇瓶法测定平衡溶解度。 结果： 最佳制备工艺为黄芩苷溶于二甲基亚砜中配成50 g·L^-1的溶液,注入20倍量0.5%卵磷脂水溶液中,冰水浴下30 000 r·min^-1高速剪切8 min;制备的纳米混悬液粒径280.6 nm （PDI=0.047）,纳米结晶粒径583.6 nm （PDI=0.12）,结晶呈类球形;室温放置30 d后混悬液粒径急剧增大,而冻干粉粒径无明显变化。纳米结晶溶解度较原药提高了1.64倍。 结论： 沉淀法制备黄芩苷纳米混悬液简便可行且可显著提高纳米结晶中黄芩苷的溶解度,但工艺条件对纳米结晶粒径及稳定性存在一定影响。     

黄芩汤中黄芩苷在大鼠体内的药代动力学研究

目的:研究黄芩汤中黄芩苷在大鼠体内的药代动力学规律。方法:大鼠灌胃黄芩汤后,用HPLC方法分析血浆中黄芩苷浓度,测定黄芩苷浓度的经时变化。结果:大鼠灌服黄芩汤4.5g/kg后,黄芩苷主要药代学参数分别为:tmax1=(20±7.07)min,tmax2=(6.4±0.94)h,Cmax1=(0.88±0.15)μg/ml,Cmax2=(1.33±0.22)μg/ml,t1/2=(7.22±1.5)1h,Vd=(21.75±6.2)l/kg,Cl=(2.07±0.19)l/kg.h。结论:本方法简单、灵敏、准确,可用于黄芩苷血药浓度分析及其药代动力学研究。     

黄芪甲苷PEG-PE纳米胶束的制备、细胞内分布及抗心肌细胞凋亡的研究

目的 研究黄芪甲苷聚乙二醇衍生化磷脂酰乙醇胺(PEG-PE)纳米胶束的制备、细胞内分布及抗心肌细胞凋亡.方法 采用薄膜水化法制备黄芪甲苷PEG-PE(AST-Ⅳ@PEG-PE)纳米胶束,并进行表征观察;采用稳定性实验和体外释药对载药系统进行评价;以香豆素-6作为荧光探针,评价PEG-PE纳米胶柬的细胞摄取及细胞内分布;...     

黄芩苷在大鼠体内的药动学研究

目的：测定黄芩苷的药动学参数，为临床合理用药提供科学依据。方法：采用高效液相色谱法，以电化学检测测定黄芩苷在大鼠体内的药动学参数。结果：黄芩苷在大鼠体内呈二室模型分布，其药动学参数是Ｖｄ＝２．５３Ｌ，Ｋｅ＝４．１７ｈ－１，Ｋ１２＝５．２５ｈ－１，Ｋ２１＝０．６３ｈ－１，ｔ１／２＝０．１６ｈ，α＝１０．２９ｎｇ·ｍｌ－１·ｈ－１，β＝０．２９ｎｇ·ｍｌ－１·ｈ－１，ＡＵＣ＝１．９３μｇ·ｈ·ｍｌ－１。     

蝙蝠葛碱复合纳米胶束的制备及大鼠体内药动学研究

目的 使用聚乙烯己内酰胺-聚醋酸乙烯酯-聚乙二醇接枝共聚物(Soluplus(R))和D-α-维生素E聚乙二醇琥珀酸酯(TPGS)作为载体材料制备蝙蝠葛碱复合纳米胶束(dauricine composite nanomicelles,Dau-CNMs),并通过大鼠ig给药评价其药动学情况.方法 采用溶剂蒸发-薄膜分散法...     

黄芩苷对大鼠心肌缺血再灌注时细胞凋亡的影响

目的:研究黄芩苷对大鼠心肌缺血再灌注时细胞凋亡的影响。方法:结扎大鼠左冠状动脉前降支复制心肌缺血再灌注损伤模型,黄芩苷100mg/kg于冠脉结扎前10min静脉注射后,再灌注结束后称重法检测心肌梗死面积,分光光度法测定组织丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)和髓过氧化物酶(MPO)活性,原位末端标记(TUNEL)法和HE染色观察凋亡心肌细胞和组织病理学改变。结果:黄芩苷可明显抑制缺血再灌注所致心肌梗死面积增大,降低组织MDA、MPO含量,升高SOD活性,抑制心肌细胞凋亡和炎性细胞浸润。结论:黄芩苷可通过抑制心肌细胞凋亡而保护缺血再灌注心肌。     

黄芩苷对心肌缺血再灌注损伤大鼠心功能的影响

目的:研究黄芩苷(Bai)对心肌缺血再灌注损伤大鼠心功能的影响.方法:结扎大鼠左冠状动脉前降支复制心肌缺血再灌注损伤模型.Bai 50、100mg/kg于冠脉结扎前10min静脉注射后,左心室插管测定缺血再灌注大鼠左心室功能的变化.结果:Bai对正常麻醉大鼠心肌收缩性能有短时的抑制作用,一过性升高LVEDP,减慢HR,降低心肌耗氧量(HR×LVSP);能明显改善缺血再灌注损伤大鼠左室心功能各参数,增加再灌注区心肌干湿重之比,改善心脏舒张功能.结论:黄芩苷对心肌缺血再灌注损伤大鼠左心室功能具有保护作用.     

根皮素聚乙二醇-聚乳酸纳米胶束的制备、表征及口服药动学研究

目的 制备根皮素聚乙二醇-聚乳酸[methoxy poly(ethylene glycol)-poly(lactic acid),mPEG-PLA]纳米胶束(phloretin mPEG-PLA nanomicelles,Phl@mPEG-PLA/NM)处方,考察其口服药动学行为。方法 薄膜分散-探头超声法制备Phl@mPEGPLA/NM。采用包封率、载药量、沉降率为指标,单因素结合Box-Behnken设计-效应面法优化处方。透射电子显微镜(TEM)观察外貌形态,透析法考察体外释药行为。SD大鼠分别ig给予根皮素混悬液和Phl@mPEG-PLA/NM,HPLC法测定根皮素血药浓度,计算主要药动学参数。结果 Phl@mPEG-PLA/NM最佳处方为m PEG-PLA用量为105 mg、水化体积为9.5 mL、水化温度40℃。包封率、载药量、沉降率、粒径及ζ电位分别为(88.52±1.86)%、(8.84±0.32)%、(8.04±0.23)%、(85.07±6.12)nm和(-23.56±1.49)mV。纳米胶束外貌为球形。Phl@mPEG-PLA/NM的半衰期(t_1/2     

双黄连含片黄芩苷含量测定方法的改进

 目的 改进双黄连含片黄芩苷含量测定中的提取方法。方法 采用正交试验法,以含量为指标,对提取过程所用甲醇浓度、超声提取时间、溶剂用量等多因素多水平进行考察,运用数理统计方法找出影响结果的主要因素及最佳提取方案。结果 甲醇的浓度是影响的主要因素(P＜0.01),提取方法以甲醇超声30 min为佳,经方法学考察,本法加样回收率99.96% RSD=1.4%,n=6,重现性 RSD=1.3%,n=10。结论 本法准确、灵敏、重现性好。     

载H102肽的PEG-PLGA纳米粒的制备、表征及其体内研究简

 目的 制备载H102肽的聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PEG-PLGA)纳米粒(H102-NP), 考察其体内外特性。方法 采用正交设计法优化纳米粒的处方及制备工艺, 并对载H102肽的聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸共聚物的形态、粒径、Zeta电位、包封率、体外释药及稳定性进行表征;小鼠尾静脉注射载H102肽的聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸共聚物, 液质联用测定血和脑中药物浓度。结果 载H102肽的聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸共聚物呈球状、均一性好, 平均粒径为137 nm, Zeta电位为-38 mV, 包封率为64%。载H102肽的聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸共聚物在pH 7.4 PBS和血浆中12 d累积释放分别为93%和95%。载H102肽的聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸共聚物与血浆及脑匀浆孵育12 h, 药物降解约5%。静注H102肽溶液, 血中消除快, 脑内含量低;而将其载于纳米粒中, 药物血中消除减慢, 且脑内H102浓度较高、维持时间较长。载H102肽的聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸共聚物在血和脑内AUC值分别是溶液剂的245倍和11倍。结论 所制备的载H102肽的聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸共聚物具有良好的体内外特性, 有望应用于阿尔茨海默病的治疗。     

黄芩中黄芩苷的分离与结构表征

目的:从中药黄芩中提取分离出有效成分,并对其组成和分子结构进行鉴定与表征。方法:采用醇提酸沉法提取分离出粗品,经过对粗品进行反复重结晶处理,得到淡黄色针状晶体。利用红外光谱(FTIR)、紫外-可见光谱(UV-Vis)、质谱(MS)、氢谱(1H-NMR)及碳谱(13C-NMR)等分析测试手段对该有效成分进行组成和分子结构的鉴定与表征。结果:从60g黄芩粗粉中提取分离得亮黄色粉末粗品3.17g,提取率5.29%;1.55g粗品经反复重结晶处理得晶体0.36g,提取率为23.2%,显色反应及波谱分析均显示其为黄酮化合物。结论:该有效成分鉴定为5,6-二羟基黄酮7-O-β-D-葡萄吡喃糖醛酸苷(黄芩苷),分子式为C21H18O11。     

甘草酸-F127/TPGS混合纳米胶束的制备及其大鼠在体肠吸收研究

目的制备甘草酸(GL)-普朗尼克F127(F127)/聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯(TPGS)混合纳米胶束(MMs)(GL-F127/TPGS-MMs),以改善GL的口服吸收。方法采用薄膜分散法制备GL-F127/TPGS-MMs,以胶束包封率、载药量为评价指标,单因素实验优化处方及工艺,包括F127与TPGS的比例、聚合物的质量浓度、GL的用量、水化温度、水化时间;采用透射电镜考察胶束形态;以吸收速率常数(K_a)和表观吸收系数(P_(app))为评价指标,采用大鼠在体单向肠灌流法考察GL-F127/TPGS-MMs的肠吸收特性。结果优化得到处方和工艺为TPGS 180 mg、F127 270 mg、GL 70 mg、水化温度50℃、水化时间3 h。所制备GL-F127/TPGS-MMs澄明度好,平均粒径为(28.20±5.63)nm,多分散系数为0.20±0.06,Zeta电位为(-5.24±1.55)m V,包封率为(97.57±5.29)%,载药量为(13.13±0.71)%;胶束呈球形,可见明显的囊泡结构。与回肠段比较,GL在空肠段吸收较好,且差异有统计学意义(P0.05);与GL原料药比较,GL-F127/TPGS-MMs的肠吸收较好,且差异有统计学意义(P0.05)。结论所制备的GL-F127/TPGS-MMs显著地提高了GL的体内吸收。     

RGD环肽修饰的姜黄素/黄芩苷靶向共递送纳米脂质体的制备工艺优化及表征

目的 优化RGD环肽修饰的姜黄素（curcumin,Cur）/黄芩苷（baicalin,Bai）共递送靶向纳米脂质体（RGD-Cur/Bai-Lip）的制备工艺并进行表征评价。方法 采用乙醇注入法制备RGD-Cur/Bai-Lip,首先通过Plackett-Burman筛选实验确定超声时间、胆脂比、水合温度作为制备RGD-Cur/Bai-Lip的关键因素,然后采用Box-Behnken响应面法进行工艺优化,以姜黄素包封率、黄芩苷包封率、总载药量为考察指标,采用AHP-复相关系数法-拉开档次法进行多指标组合赋权以确定各指标权重系数并计算综合评分,从而确定RGD-Cur/Bai-Lip的最优处方及关键工艺参数。最后对其形态、粒径电位、稳定性、体外释放度及溶血性等进行表征评价。结果 优选得到的最佳工艺为胆脂比1：12,水合温度60℃,探头超声时间为10 min。RGD-Cur/Bai-Lip外观澄清透明,呈亮黄色,对光可视淡蓝色乳光,透射电子显微镜下观察形态圆整、分散均匀。平均粒径为（101.10±0.62）nm,多分散系数（PDI）为0.191 0±0.014 3,Zeta电位为（1.59±0.07）mV,姜黄素包封率为（94.28±4.51）%,黄芩苷包封率为（76.93±1.35）%,总载药量为（2.27±0.09）%。7 d内稳定性良好,无溶血性,并具有一定的缓释作用。结论 优化处方后制备的RGD-Cur/Bai-Lip包封率高,粒径分布均匀,7 d内较稳定,无溶血性,并具有一定的缓释作用,为RGD-Cur/Bai-Lip的后续抗肝纤维化体内外研究提供了制剂基础。