TNF-α、SP-A在儿童不同程度肺炎中的表达和临床意义

目的：观察不同程度小儿肺炎时,血清致炎性因子肿瘤坏死因子（TNF-α）、肺表面活性蛋白A（SP-A）表达含量的变化及其临床意义。方法将195例肺炎儿童根据病情严重程度将其分为普通肺炎患儿及重症肺炎患儿,另外选择65例非肺炎患儿作为对照组,采用ELISA方法检测不同程度肺炎血清中的TNF-α和 SP-A 水平。结果 TNF-α、SP-A在普通、重症肺炎患儿血清中表达水平显著升高,且重症肺炎组的TNF-α、SP-A表达水平显著高于普通肺炎组。结论在小儿重症肺炎患儿发病过程中,血清中肿瘤坏死因子TNF-α和肺表面活性蛋白SP-A的表达水平明显增多,可以反映肺损伤程度,可作为临床检测指标。     

急性肺损伤早期肺表面活性蛋白A、B含量的变化

目的　探讨油酸性急性肺损伤早期表面活性蛋白A、B(SP A、SP B)含量的变化。方法　复制油酸性大鼠急性肺损伤模型 ,采用WesternBlot和ELISA术检测支气管肺泡灌洗液 (BALF)中SP A、SP B的含量。结果　BALF中SP A、SP B的含量在急性肺损伤后 1h就出现明显降低 (P <0 .0 1) ,并在 6h内维持较低水平。结论　急性肺损伤早期即出现SP A、SP B含量下降 ,同时 ,本研究所建立的表面活性蛋白含量监测方法灵敏度高 ,特异性好 ,可供实验研究采用。     

SP-A1在甲醇酵母中的分泌表达及产物的鉴定

目的：研究人肺表面活性物质相关蛋白A1(SP-A1)在甲醇酵母Pichia pastoris(P．pastoris)中的分泌表达、产物的分离纯化及免疫活性测定。方法：将人SP-A1基因克隆至P.pastoris的分泌表达质粒pPIC9K上，获得重组表达质粒pPIC9K／SP-A，转化P.pastoris GS115、KM71。通过G418筛选获得高拷贝转化子(HIS4Mut^ )，在摇瓶中培养、甲醇诱导表达SP-A1，纯化目的蛋白，并免疫小鼠，ELISA法和western blotting分析SP-A1的免疫活性。结果：SDS-PAGE结果显示，在P.pastoris中经甲醇诱导，SP-A1获得表达，其表达量在上清中为200mg／L。经过纯化可获得纯度达95％以上的蛋白质。ELISA法和western blotting结果表明，目的蛋白可被多克隆抗体识别。可刺激小鼠产生抗体。结论：人组织特异性蛋白SP-A1可在P.pastoris中表达，表达产物具有免疫原性。     

吸入异氟烷对大鼠肺表面活性蛋白A(SP-A)基因表达的影响

目的 观察大鼠吸入1.5%异氟烷不同时间后肺表面活性蛋白-A(SP-A)的含量及其基因表达的改变情况.方法 雄性Wister大鼠40只,随机分为5组,每组8只.正常对照组(Con),异氟烷2h组、4h组和8h组分别为吸入40%O2 1.5%异氟醚2、4和8h组;停药2h组(10h组)吸入40%O2 1.5%异氟醚8h后再吸入40%O2 2h.各组于实验结束后取出大鼠迅速处死,检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中表面活性蛋白A(SP-A)的含量(Western Blot法);肺组织内SP-A含量(Western Blot法)以及Sp-AmRNA的表达(RT-PCR法).结果 吸入异氟烷2h组BALF中SPA的含量与对照组比较无明显变化,4h、8h组均较对照组显著下降(P<0.01),10h组未见明显恢复(P<0.01).肺组织内Sp-A的含量在2h组无明显改变,但4h、8h组明显下降(P<0.01),10h组有所恢复,但仍低于对照组(P<0.05).吸入异氟烷的各组Sp-AmRNA的表达均有降低趋势(P<0.05),停药2h后(10h)明显恢复.结论 吸入1.5%异氟烷2h以上可降低肺组织Sp-A的基因表达,继而SP-A的合成与分泌减少;但停止吸入2h后,Sp-A基因表达可恢复至正常水平,而其合成与分泌功能仍未能完全恢复.     

支气管肺癌黏膜Cath D、SP-A和GLUT-1的表达及临床意义

目的 了解支气管肺癌活组织黏膜组织蛋白酶D(Cath D)、肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)和组织葡萄糖转运蛋白1(GLUT-1)的表达. 方法 支气管镜下钳取异常组织黏膜41例,经光镜病理确诊为支气管肺癌38例(其中小细胞肺癌10例,鳞状细胞癌28例),炎症3例.用SP免疫组织化学方法检测Cath D、SP-A和GLUT-1的表达. 结果 ①Cath D:小细胞癌-6例(60%),++4例(40%);鳞状细胞癌-4例(14%),+2例(7%),++8例(28%),+++14例(50%).小细胞癌与鳞状细胞癌对Cath D的表达有明显差异(P<0.01),后者明显高于前者.鳞状细胞癌分化程度不同,Cath D的表达有明显差异(P<0.05),分化程度越低,表达越高;②SP-A:+++3例(炎症),++20例(高分化鳞癌15例,中分化鳞癌5例),+6例(中分化鳞癌),-12例(小细胞癌10例,低分化鳞痛2例);③GLuT-1:小细胞癌-6例,+2例,+++2例;鳞状细胞痛-5例,+7例,++11例,+++5例;炎症+++3例.小细胞癌与鳞状细胞癌对GLUT-1的表达有明显差异(P<0.05),后者明显高于前者;不同分化程度的鳞状细胞癌,GLUT-1的表达无差异(P>0.05);炎症与鳞癌GLUT-1表达有明显差异(P<0.05)与小细胞癌则无差异(P>0.05). 结论 Cath D有助于鳞状细胞癌的诊断和分化程度的评估,SP-A可能有助支气管黏膜炎症与高恶度肿瘤组织的鉴别,GLUT-1在鳞状细胞癌有高表达,有助于鳞状细胞癌的诊断和鉴别诊断.     

脑基因的表达与调控

脑细胞的染色体中包含有与其它器官的细胞完全相同的基因,但是脑细胞所表达的蛋白质如酶、受体、载体、神经肽等却与其它组织完全不同.关键点就是脑基因的表达与调控.     

孕期被动吸烟对新生大鼠肺SP-A和SP-B mRNAs表达影响的研究

目的研究孕期被动吸烟对新生大鼠肺表面活性蛋白A、B(SP-A,SP-B)基因表达的影响,探讨产前被动吸烟对新生大鼠肺损伤的机制.方法分别将SD大鼠于妊娠第1、8和15天置于吸烟箱内每天2 h被动吸烟建立孕鼠被动吸烟动物模型,孕鼠每天置于吸烟箱内2 h不吸烟者为对照组,于妊娠第20天剖宫取胎鼠,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测新生鼠肺组织SP-A、SP-B mRNAs的表达.结果不同孕期被动吸烟SD大鼠所产新生鼠肺组织SP-A、SP-B mRNAs的表达与对照比较和组间无明显差异(P＞0.05).结论孕期被动吸烟对新生大鼠肺组织SP-A和SP-B mRNAs的表达无明显影响.     

血小板源生长因子BB对19d早产鼠肺表面活性物质基因表达的影响

目的 探讨血小板源生长因子ＢＢ（ＰＤＧＦ－ＢＢ）对未成熟肺肺表面活性物质蛋白质（ＳＰ）基因表达的影响及肺成纤维细胞在其中的作用。     

SP-A在急性坏死性胰腺炎肺损伤大鼠的表达和意义

目的探讨肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)在急性坏死性胰腺炎(ANP)并发急性肺损伤(ALI)发病中的意义及其可能的机制。方法将健康SD大鼠100只随机分成两组:假手术组(SO组)和模型组(ANP组)。成功制模后,各组分别在6、12、24、36、48 h采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清及肺泡灌洗液(BALF)中SP-A的浓度。同时进行肺湿/干质量比値(W/D)测定,观察胰腺和肺组织病理形态学的改变。结果 ANP组血清SP-A浓度从6 h开始明显上升,36 h达到高峰,48 h仍强烈表达,数值仍高于SO组(P<0.01)。ANP组BALF中SP-A浓度较SO组相同时间点明显下降(P<0.01)。随着胰腺损伤的逐渐加重,肺损伤程度也逐渐加重。结论血清SP-A浓度的增高及BALF中SP-A浓度减少程度与病情严重程度呈正相关。     

人β珠蛋白基因的表达调控

细胞分化的机制及其调控是生物医学界的一个国际性重要研究课题。哺乳类红细胞的发生是多能干细胞或其祖细胞增生和沿着一定方向进行分化的过程，伴随着红细胞的终要分化，细胞按基固有的基因表达程序，顺序地表达诸多可检测的细胞蛋白质产物和出现类型特征，其中细胞如何按发育阶段启劝不珠蛋白基因表达和出现自然排核现象，一直是吸引着人们用研究细胞分化和基因表达调控和理想模型。     

内皮素—1对肺组织肺表面活性物质合成的调控

采用无血清成年大鼠肺组织培养，观察ＥＴ－１对ＰＳ合成的影响。结果显示：（１）ＥＴ－１促进肺组织＾３－Ｈ胆碱掺入，量效和时效关系显著。１０＾－１０ｍｏｌ．Ｌ＾－１ＥＴ－１可显著提高肺组织总磷脂及ＰＳ主要组分ＰＣ和ＰＧ的含量，而细胞膜特征性磷脂组分ＰＥ，ＰＩ，Ｐｓｅ和ＳＭ均无显著变化，（２）ＥＴＡ受体阻断剂ＢＱ１２３（１０＾－６ｍｏｌ．Ｌ＾－１）可使１０＾－１２和１０＾－１０ｍｏｌ．Ｌ＾－１ＥＴ－１组     

fGenistein 后处理对缺血再灌注大鼠SP-A的影响

摘要：目的 观察 Genistein 药物后处理对缺血再灌注损伤（IRI）大鼠肺表面活性物质相关蛋白A的影响,并探讨该方法对肺缺血再灌注损伤的作用机制。方法 32只雄性SD大鼠随机分为空白对照组（Sham）、缺血再灌注组（IR）、缺血后处理组（IPO）、药物后处理组（Genistein）,每组8只。测定肺组织湿／干重比（W／D）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、一氧化氮合酶（NOS）、肺表面活性物质相关蛋白A（SP-A）含量,并在光镜下观察各实验组肺组织结构变化,结果 与IR组相比较,药物后处理组W／D、MDA、iNOS／T-NOS比值显著降低（P〈0．05）,SOD、SP-A显著升高（P〈0．05）。而药物后处理组和缺血后处理组的各项指标均无明显差异（P〉0．05）。光镜下观察可见缺血后处理组和药物后处理组肺泡和支气管壁充血水肿较缺血再灌注组明显减轻,与空白对照组较为接近。结论 Genistein药物后处理对肺缺血再灌注损伤有保护作用,效果与缺血后处理相似,可能与灭活氧自由基,减少sP-A的损失有关。     

致敏豚鼠气道及肺组织fos基因的表达

哮喘是呼吸系统常见病之一，其发病机制至今未明。有研究表明，哮喘与原癌基因调控有关［１］。我们通过本实验探讨原癌基因在哮喘发病中的作用，拟从基因水平探索哮喘的发生机制。一、材料与方法盐酸胍、ＳＤＳ购自美国Ｓｉｇｍａ公司，［α－３２Ｐ］ｄＡＴＰ（放射比活度为１１１ＧＢｑ／ｍｍｏｌ）为北京福瑞公司产品。ｃ－ｆｏｓ质粒及ＦＯＳ蛋白抗体由本校解剖教研室提供。实验动物及模型建立：选用３５０－４５０ｇ健康豚鼠。（１）哮喘组：动物１８只用１％卵蛋白１．５ｍｌ腹腔注射致敏，两周后用１％卵蛋白超声雾化吸入诱发哮喘，…     

C—erbB—2基因在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的 探讨C—erbB一2基因在非小细胞肺癌(NSCLC)形成和进展中的作用。方法 应用免疫组织化学技术(SP法)检测30例NSCLC和10例正常肺组织中C—erbB一2基因的表达情况。结果 C—erbB一2基因在正常肺组织中未见表达(0/10)，在肺鳞癌表达率为6．3％(1／16)，肺腺癌为50．0％(7／14)，后两者差异显著(P＜0．05)。在病理组织学分级为Ⅰ级分化中的表达率为0％(0／9)。Ⅱ级分化为15．3％(2／13)，Ⅲ级分化为75.0％(6／8)，C—erbB一2基因在不同组织学分级中的表达差异明显(P＜0．05)；在有淋巴结转移组为43．8％(7／l6)，无转移组为7．14％(1／14)，两者差异显者(P＜0．05)。结论 C—erbB一2基因在NSCLC的形成和进展中发挥重要作用。     

ob基因研究进展

ｏｂ基因研究进展齐可民丁宗一江载芳研究表明,目前至少有６种单基因突变或表达异常均可导致鼠肥胖表型的发生,同时在人类亦发现了这些基因的同源性基因。因而单从遗传学的角度看,肥胖发生的机制正经历着多基因控制向单基因或主导基因控制的转变［１］。ｏｂ基因作为这...     

肺表面活性蛋白A（SP-A）检测在诊断新生儿肺炎方面的临床价值分析

分析新生儿肺炎患儿与非新生儿肺炎患儿肺表面活性蛋白A(SP-A)水平的差异性及检测肺表面活性蛋白A(SP-A)水平在诊断新生儿肺炎方面的临床价值。方法：将2013年1月至2014年1月我院收治的50例新生儿肺炎患儿分为重症肺炎观察组和普通肺炎观察组,重症肺炎观察组有20例患儿,普通肺炎观察组有30例患儿。另选择2013年1月至2013年12月我院收治的15例未患新生儿肺炎的患儿作为对照组。分别为3组患儿进行SP-A水平检测和血气分析,并对比观察其检测结果。结果：重症肺炎观察组、普通肺炎观察组与对照组患儿肺表面活性蛋白A的水平相比较差异显著,P<0.05,具有统计学意义。此病患儿血清中肺表面活性蛋白A的水平与动脉血氧分压呈负相关,相关系数是r=-0.703,P<0.05。结论：检测肺表面活性蛋白A(SP-A)的水平在判定新生儿是否发生肺部感染方面具有一定的临床价值。     

淡水淹溺大鼠肺表面活性物质相关蛋白质A表达变化的研究

目的观察淹溺后大鼠呼吸、血气、病理及肺表面活性物质相关蛋白质A(SP-A)的变化特点。方法将24只健康雄性大鼠随机分为对照组(6只)和淹溺组(18只),再将淹溺组分为淹溺后2h组、淹溺后4h组和淹溺后6h组,每个亚组6只大鼠。于上述时间点记录大鼠的呼吸频率,经颈动脉采血测血气。处死大鼠后取肺组织行HE染色,观察淹溺后肺组织普通病理变化,采用免疫组织化学法检测SP-A在灌注后不同时间点的变化。结果淹溺组大鼠淡水灌注后呼吸先增快,以后逐渐减慢,但未降至正常范围。PaO2在灌入淡水后5min显著下降[(48.7±3.93)mmHg比(93.65±6.02)mmHg,P<0.05],之后虽有回升,但维持在较低水平。PaCO2在灌入淡水后5min显著上升[(36.20±4.41)mmHg比(55.96±4.60)mmHg,P<0.05],随后降低,显著低于正常水平(P<0.05)。对照组大鼠SP-A主要以膜状形式连续分布于肺泡腔表面。淹溺组大鼠肺泡壁有不同程度的断裂,肺泡腔内可见红细胞聚集,间质水肿明显,呈局灶性肺不张,SP-A主要以颗粒状聚集在肺泡腔内表面和渗液表面,SP-A表达量较对照组显著降低(P<0.05)且进行性下降。结论淡水淹溺后造成肺损伤,导致SP-A的质和量发生改变。