湖北省22株B群脑膜炎奈瑟菌分子分型分析

湖北省自2006年以来多次出现B群流行性脑脊髓膜炎(流脑)病例,健康人群B群菌株的带菌率也很高,占96.56％[1].本研究对湖北省2006-2010年流脑病例和健康人群分离的22株B群脑膜炎奈瑟菌(Nm)菌株进行分析.     

中国W群脑膜炎奈瑟菌分子流行病学特征北大核心

目的分析中国W群脑膜炎奈瑟菌(Neisseria meningitidis,Nm)的分子流行病学特征。方法选择1979-2018年分离于中国19个省份的流行性脑脊髓膜炎(流脑)病例和健康携带者W群Nm菌株,进行多位点序列分型(MLST),分析序列型(ST型)并构建最小生成树,以及分析部分菌株疫苗相关蛋白PorA(114株)、FHbp(93株)、NadA(52株)和NHBA(51株)的分子型别和序列特征。结果共获得246株W群Nm,其中流脑病例19株、健康携带者227株。所有菌株分为24种ST型,其中20种(240株)可归入5个已知克隆群—CC11、CC4821、CC174、CC175和CC5,4种(6株)不能归入任何克隆群。健康携带者Nm菌株的克隆群2004年前主要为CC174(7株),2005年后主要为CC11(121株)和CC4821(73株)。流脑病例Nm菌株的PorA型主要为P1.5,2(16株)、P1.5-3,10-2(1株)。93条完整的FHbp蛋白氨基酸序列分为变异2型(91株)、变异1型(1株)和变异3型(1株)。52株检测菌株中32株含有nadA基因,其中30株属于CC11,均为NadA-2/3型。51条NHBA氨基酸序列包括6种型别,主要为29型(28株)和697型(18株)。结论2005年后中国W群Nm主要流行克隆群发生变化,以CC11和CC4821为主且其疫苗相关蛋白多态性较强;应更有针对性地研发疫苗或开展通用疫苗研究。     

江西省2005-2008年C群脑膜炎奈瑟菌分子分型分析

对2005-2008年江西省流脑暴发、常规监测中分离的79株C群脑膜炎奈瑟菌进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)和多位点测序(MLST)分析,描述江西省C群脑膜炎奈瑟菌的菌型分布和变迁,从分子水平了解其流行特征.     

可变数目串联重复序列技术用于中国C群脑膜炎奈瑟菌基因分型的研究

目的利用脑膜炎奈瑟菌基因组中可变数目串联重复序列（VNTR）特征,对中国C群脑膜炎奈瑟菌菌株进行基因分型.方法中国C群脑膜炎奈瑟菌菌株109株,选择脑膜炎奈瑟菌DNA中4个VNTR位点,PCR扩增含有串联重复序列的DNA片段,选择每一个VNTR位点有差别的PCR产物进行测序,序列比对,测算串联重复序列的拷贝数.Bio-Rad Gel DocTM XR凝胶成像分析系统计算PCR产物DNA片段的碱基含量,换算成串联重复数;对109株菌株4个位点的串联重复序列拷贝数进行聚类分析,依据聚类分析结果进行基因分型,并将VNTR基因分型结果与脉冲场凝胶电泳基因分型（PFGE）结果进行比较.结果109株C群脑膜炎奈瑟菌菌株分为22个VNTR基因型,同一暴发来源的菌株具有相同VNTR特征;VNTR基因分型方法与PFGE基因分型具有相关关系.结论应用VNTR技术可以对中国C群脑膜炎奈瑟菌进行基因分型和分子流行病学方面的研究,VNTR基因分型可较好地应用于追溯流行性脑脊髓膜炎暴发传染源.     

江西省2005-2008年C群脑膜炎奈瑟菌分子分型分析

对2005-2008年江西省流脑暴发、常规监测中分离的79株C群脑膜炎奈瑟菌进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)和多位点测序(MLST)分析,描述江西省C群脑膜炎奈瑟菌的菌型分布和变迁,从分子水平了解其流行特征.     

中国7株W135群脑膜炎奈瑟菌基因特征分析

我国流行性脑脊髓膜炎（流脑）的暴发与流行主要由A群和C群引起，W135群脑膜炎奈瑟菌在本世纪初曾引起暴发与流行。目前我国仅从健康人群中分离到W135菌株。我们对健康人群分离的W135群菌株进行多位点序列基因型（MLST）、PorA基因亚型和多位点串联重复序列分析（MLVA）基因特征分析，并与致病性W135群菌株的基因特征进行比较，初步探讨我国W135群菌株是否具有致病性。     

中国C群脑膜炎奈瑟菌脉冲场凝胶电泳分析

目的对中国C群脑膜炎奈瑟菌分离株进行脉冲场凝胶电泳（PFGE）分析，了解安徽省C群流行性脑脊髓膜炎（流脑）暴发菌株及国内C群脑膜炎奈瑟菌菌株的分子流行病学特征。方法212株C群脑膜炎奈瑟菌菌株分离自流脑患者、密切接触者和健康人群鼻咽部，包括安徽省C群流脑菌株48株，其中38株与C群流脑暴发相关。脉冲场凝胶电泳选用NheI限制性内切酶，聚类分析选用BioNumerics软件。结果212株C群脑膜炎奈瑟菌菌株共分为43个PFGE带型，命名为AH1～AH43，AH1是中国C群脑膜炎奈瑟菌主要的带型，占69．3％（”=147），分布于11个省市。安徽省48株C群菌株共分为3个PFGE型别（AH1、AH2、AH3），45株（93．8％）为AH1型。安徽省38株与C群流脑暴发相关的菌株中，37株（97．4％）为AH1型。全国53株流脑患者分离菌株中，AH1型菌株占67．9％（36／53）；121株流脑病例密切接触者分离菌株中，AH1型占71．9％（87／121），38株健康人群鼻咽部分离菌株中，AH1型占63．2％（24／38）。结论AH1型C群脑膜炎奈瑟菌是中国目前C群流脑流行的主要克隆群，安徽省C群流脑暴发是由AH1型C群脑膜炎奈瑟菌引起的，已在全国呈扩散流行的趋势。     

四川省B群脑膜炎奈瑟菌脉冲场凝胶电泳分型分析

[目的]对四川省B群脑膜炎奈瑟菌分离菌株进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析,了解四川省B群脑膜炎奈瑟菌菌株的分子流行病学特征.[方法]对健康人群和流行性脑脊髓膜炎病例密切接触者分离的55株B群脑膜炎奈瑟菌使用限制性内切酶NheI酶切、脉冲场凝胶电泳,电泳结果用BioNumerics软件进行聚类分析.[结果]55株B群脑膜炎奈瑟菌共分为33种PFGE型,呈现高度的多态性.其中健康带菌者的45株菌分为24个型,带型分布在年份和地区上没有关联,但局部地区的菌株呈现出PFGE型别一致的特征;10株病例的密切接触者分离的菌株分为9个型,无优势型别.[结论]四川省B群脑膜炎奈瑟菌菌株具有高度的遗传多样性,但在局部地区菜一时间段存在优势的PFGE型别的B群脑膜炎奈瑟菌菌株.     

流脑病人血液中检出C群脑膜炎奈瑟菌

20 0 2年 1～ 3月份 ,广西壮族自治区来宾县良塘乡发生流脑流行 ,共发现流脑病人 15例 ,死亡 3例。从暴发点患者血液中分离出一株病原菌 ,经鉴定为革兰染色阴性双球菌 ,其菌落形态、生长试验及生化反应均符合奈瑟菌特征。采用原中国预防医科院流研所和兰州生物制品研究所生产的诊断血清进行玻片凝集试验 ,鉴定为C群脑膜炎奈瑟菌。经调查 ,15例流脑病人中有 7例在发病前 1个多月已接种A群流脑多糖菌苗 ,但没有起保护作用。根据实验室检验结果 ,结合流行病学调查 ,初步确定这是一起由C群脑膜炎奈瑟菌引起的流脑局部暴发疫情。1980年以后 ,我…     

湖南省B群脑膜炎奈瑟菌药物敏感性及分型

近年来,湖南省流行性脑脊髓膜炎(简称流脑)流行以C群脑膜炎奈瑟菌(Nm)为主⁽¹⁾,2009年2月,首次从流脑患者身上分离出B群脑膜炎奈瑟菌,2010年在健康人群流脑咽拭子中,同时分离到4株B群脑膜炎奈瑟菌。     

我国A群脑膜炎奈瑟氏菌的克隆群体结构与流行病学意义

应用多位点酶电泳技术对从我国17个省市搜集的200株A群脑膜炎奈瑟氏菌(Nm)进行了克隆群体结构分(?)。结果表明,可将200株A群Nm分为23个电泳型(ET),7个克隆群,其中Ⅳ克隆群和Ⅴ克隆群为优势克隆群,两者的遗传距离为0.53。自60年代以来,每次流脑流行周期均以一种克隆群为主,如60年代和80年代主要由Ⅳ克隆群引起流行,分别占同时期菌株数的85.7％和82.4％;70年代的流行主要由Ⅴ克隆群引起,占该期间菌株数的88.4％。优势克隆群优势十分明显,流行时间长,地区分布广,而且不同周期A群Nm优势克隆群的变迁与其优势亚型的变化基本吻合。我国A群Nm的优势克隆群及优势亚型在流脑不同流行周期内皆显示了周期性变换的特征。     

云南省6株C群脑膜炎奈瑟菌分子生物学特征分析

目的了解云南省分离出的C群脑膜炎奈瑟菌的分子特征。方法对C群菌株进行脉冲场凝胶电泳分型（PF-GE）、多位点测序技术（MLST）分型。结果对6株C群脑膜炎奈瑟菌进行脉冲场凝胶电泳,发现6种带型;6株C群做了MLST分型,分属5种,有4种MLST在当时的数据库中未找。结论云南省C群脑膜炎奈瑟菌的基因具有高度多样性,且没有典型的流行菌群。     

海南省脑膜炎奈瑟菌多位点序列分型研究

目的 了解海南省脑膜炎奈瑟菌（Nm）的分子分型特征。方法 采用多位点序列分析（MLST）技术,对2005-2015年海南省流行性脑脊髓膜炎（ECM）病人、密切接触者和健康带菌者样本中分离到的16株Nm和1份脑脊液样本进行核酸序列分析。结果 17份样本共分为11种不同的Nm ST型别,分属于ST-4821、ST-11、ST-5、ST-175、ST-364克隆群和5个无序列群分类（UA）,其中前3个克隆群为高致病性克隆群,分别占29.41%（5株）、17.65%（3株）、5.88%（1株）。ST-4821克隆群有ST-4821型和ST-3200型。ST-4821型来自3例C群ECM病例和1株不可分群密切接触者。ST-3200型来自2005年的C群健康带菌者。ST-11、ST-5克隆群分别只有W135群的ST-11型和不可分群的ST-7型,均来自健康带菌者。B群5株有5种ST,其中ST-11127型和ST-11134型为新发现的ST,2015年海口市首例B群病人是ST-7962型,与2010年分离自儋州市ECM密切接触者的B群ST-11127型同源,均为UA,其他不同基因群序列型相互间进化关系较远。结论 海南省Nm分子型别具有基因多样性,Nm C群ST-4821型是优势序列群。健康人群中携带有高致病性克隆群菌株。     

2006-2017年贵州省脑膜炎奈瑟菌多位点序列分型北大核心

目的了解2006-2017年贵州省脑膜炎奈瑟菌(Neisseria meningitidis,Nm)分离株的血清群和基因型特征。方法采用细菌分离培养和多位点序列分型(Multilocus sequence typing,MLST)技术,对2006-2017年贵州省Nm分离株进行血清群复核鉴定,对Nm的7个管家基因序列进行检测以确定克隆群(Clonal complex,CC)和序列型(Sequence type,ST),并构建遗传进化图谱以分析菌株间进化关系。结果共获得33株Nm,其中A群15株(45.5%)、C群4株(12.1%)、B群3株(9.1%)、W135群7株(21.2%)、不可分群4株(12.1%);得到6种CC和9种ST。A群、C群、W135群菌株的ST/CC基因型分别以ST-7/ST-5 Complex/subgroupⅢ(93.3%)、ST-4821/ST-4821 Complex(75.0%)、ST-6933/ST-174 Complex(85.7%)为主,B群基因型较分散。ST-5 Complex、ST-174 Complex基因型相对稳定,ST-4821 Complex具有遗传多样性;ST-5和ST-4821为高致病性克隆群。结论2006-2017年贵州省Nm存在多种基因型流行,A群、C群分别以ST-7/ST-5 Complex、ST-4821/ST-4821 Complex为优势基因型,B群基因型分散且活跃;需持续加强Nm分子流行病学监测。     

深圳市2005-2006年健康人群B群脑膜炎奈瑟菌分型研究

脑膜炎奈瑟菌(Nm)是导致流行性脑脊髓膜炎(流脑)的病原体之一,对健康人群咽部分离到的Nm进行分子流行病学研究,有利于了解Nm菌群的特点,同时与流脑病例分离到的Nm进行比较,结合流行病学资料,可以对流脑的传播做出推测,有利于流脑防控.     

湖南省B群脑膜炎奈瑟菌的药物敏感性及PFGE分型特征分析

目的 了解湖南省B群脑膜炎奈瑟菌的病原生物学特征、药物敏感性以及PFGE分型特征。 方法 29株B群流脑菌株经生化和血清学鉴定后,对菌株进行药敏试验和脉冲场凝胶电泳分型。 结果 29株B群脑膜炎奈瑟菌菌株对米诺环素、头孢曲松、头孢噻肟、美罗培南、利福平、氯霉素和阿奇霉素全部敏感,对青霉素和氨苄青霉素的敏感率为75.86%和86.21%, 对环丙沙星、左氧氟沙星、复方新诺明耐药率较高,耐药率为34.48%、41.38%和96.55%;29株B群脑膜炎奈瑟菌的PFGE分型共分为22个带型,不同地区间分离株可见带型一致的情况。 结论 B群脑膜炎奈瑟菌对抗菌药物的敏感性与其它血清群基本一致,PFGE分子分型呈现高度多态性,健康人群携带者的带型与病人的带型呈现一定的遗传相关性,应持续开展监测,密切关注菌株的传播趋势。     

脑膜炎奈瑟菌ABC血清群的PCR快速诊断

[目的]建立特异、敏感、快速脑膜炎奈瑟菌检测方法. [方法]分别以Nm保守ctrA基因、荚膜表达基因orf-2和siaD基因设计引物,根据PCR扩增特异性产物对Nm进行鉴定与分群. [结果]PCR扩增Nm ctrA基因得到111 bp特异性产物,非Nm菌株结果为阴性;再以PCR扩增orf-2和siaD基因,分别得到大小400 bp(A群)、450 bp(B群)、250 bp(C群)特异性片断.对60株Nm试验菌进行PCR鉴定,其结果与血清学分型结果一致.[结论]所建立方法可用于Nm快速诊断.     

厦门市人群A群C群脑膜炎奈瑟菌抗体水平调查

目的了解厦门市人群A群、C群脑膜炎奈瑟菌(Nm-A、Nm-C)抗体水平,为流脑防控提供依据。方法 2016年,分层随机采集厦门市常住人口2 112份血清样本,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测Nm-A、Nm-C的IgG水平。结果厦门市人群Nm-A、Nm-C抗体阳性率分别为97.8%和88.7%(年龄性别标化后为98.9%和92.8%)。除了6月龄至1岁组,各年龄组Nm-A抗体阳性率均≥90%;Nm-C抗体阳性率≥3岁组均≥90%,而3岁组的抗体阳性率则较低,在0~、6~和12~月龄组中,Nm-C抗体阳性率分别为15.0%、47.0%和76.5%。结论厦门市人群对A、C群流脑有较高的免疫力,但3岁婴幼儿Nm-C抗体阳性率较低,建议将6月龄婴儿接种A+C流脑蛋白结合苗纳入免疫规划,以进一步提高人群免疫水平。     

河北省A群脑膜炎奈瑟氏菌脂多糖抗原血清型分布及流行病学意义的研究

1985年收集全省8地市A群NM菌153株进行LPS分型,证明L₁₀型分布广,病例数最多,人群带菌率也高,易引起播散,可能是我省流脑暴发流行的主要菌型。菌的型别似与病情轻重无关。     

江西省2005年脑膜炎奈瑟菌带菌调查及C群脑膜炎奈瑟菌脉冲场凝胶电泳分析

目的了解江西省2005年健康人群脑膜炎奈瑟菌(Nm)带菌状况,为预测疫情和制定防治措施提供依据。方法采集健康人群和流行性脑脊髓膜炎(流脑)病人密切接触者的咽拭子标本进行Nm培养和鉴定,C群Nm菌株进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型。结果健康人群1 441份咽拭子标本中分离到A群Nm2株,B群25株,W135群2株。从37份流脑病人的密切接触者咽拭子标本中分离到C群Nm19株,经PFGE分析18株为相同的脉冲场电泳型(AH1)。结论江西省2005年健康人群带菌以B群为主,C群带菌率上升,PFGE分析为相同的菌株型别。