移植坐骨神经大鼠相应背根神经节中生长相关蛋白43的表达

背景:周围神经移植后,相应的背根神经节感觉神经元胞体内生长相关蛋白43(GAP-43)表达的时程与规律尚未明确.目的:观察大鼠坐骨神经移植术后GAP-43在相应背根神经节中的表达变化.方法:取健康成年雄性Wistar大鼠,随机分为2组,对照组行假手术组:实验组行坐骨神经移植,分别于术后3 d,1,2,4,6,8周6个时间点处死后取其手术侧L4~L5背根神经节,应用Fn-PCR和Westem Blot技术检测GAP-43 mRNA及其蛋白表达.结果与结论:对照组大鼠背根神经节中GAP-43 mRNA表达量较低,且随时间无明显改变;实验组术后1周时GAP-43 mRNA在相应背根神经节中即有表达增强,2周时达到高峰,6~8周表达逐渐减弱.两组大鼠背根神经节中GAP-43蛋白与GAP-43mRNA表达的变化规律相同.结果表明神经损伤后相应神经元的再生能力存在损伤反应性变化.     

大鼠脑缺血/再灌注损伤后神经再生与Nogo-A蛋白、GAP-43基因表达的关系

目的:探讨大鼠脑缺血/再灌注损伤后神经轴突生长抑制因子(Nogo-A)蛋白及生长相关蛋白-43(GAP-43)基因参与神经再生的表达机制。方法:成年健康雄性Wistar大鼠162只,随机分为TUNEL组、Nogo-A组和GAP-43组各54只,各组按照实验要求再随机分为假手术组(A)大鼠6只和缺血1h再灌注(B)大鼠48只,B根据再灌注后2、6及12h,1、2、3、7和14d各6只,采用改良线栓法成功制备各组中B大鼠脑中动脉闭塞再灌注模型(MCAO),利用免疫组织化学方法检测神经细胞凋亡、Nogo-A蛋白和GAP-43基因在海马、皮质和纹状体区的表达并观察脑缺血半影区神经元再生以及梗死灶修复的动态变化。结果:3组中A大鼠在海马、皮质和纹状体区仅见少量凋亡神经细胞以及Nogo-A蛋白和GAP-43基因表达。B大鼠造模成功后2h点阳性细胞表达均开始增加,3d时凋亡细胞、Nogo-A蛋白和GAP-43基因表达达高峰;14d时凋亡细胞呈显著降低,Nogo-A蛋白表达降至最低水平,而14d时GAP-43基因呈较低表达(均P0.05)。结论:Nogo-A蛋白表达对神经元轴突再生具有抑制作用;而GAP-43基因表达能够促进神经可塑性再生。     

施万细胞移植对中脑损伤神经元修复的影响

背景神经元的功能状态与机体的生命活动密切相关.神经元受损后生长相关蛋白-43(GAP-43)表达预示着神经元是否有再生.目的探讨施万细胞移植对损伤的大鼠中脑神经元修复的影响.设计随机对照实验研究.地点和对象实验地点为北京市神经外科研究所;研究对象Wistar大鼠,雌雄不限,体质量(180±20)g,随机分为实验组和对照组,每组6只动物.干预BrdU标记的新生大鼠施万细胞移植至电针损伤的大鼠中脑区域,不同时间处死动物,免疫组织化学方法观察BrdU和GAP-43的表达并通过图像分析系统处理实验结果.主要观察指标移植的施万细胞在脑内的存活时间;损伤神经元的再生情况.结果施万细胞移植后8个月仍可见BrdU阳性细胞,其数目增加15%,并主要向大脑皮质迁移;移植后1个月损伤的中脑神经元GAP-43的表达与对照组相比差异有显著性意义.结论施万细胞移植可促进中脑损伤神经元的修复.     

原花青素对大鼠背根神经节神经元突起生长的影响

目的 探讨原花青素（proanthocyanidins, PC）对大鼠背根神经节（dorsal root ganglion, DRG神经元突起生长的作用。方法 在体外,培养原代大鼠DRG神经元细胞并检测不同浓度PC对其突起生长数量、长度及生长锥的影响;在体内,构建大鼠坐骨神经夹伤模型,检测损伤早期生长相关蛋白43(growth-associated protein 43, GAP43)的表达情况。最后在体外采用细胞免疫荧光和ELISA检测PC对DRG神经元中神经生长因子（nerve growth factor, NGF）的表达影响。结果 PC可显著增加DRG神经元突起的数量、长度及生长锥伪足数量;促进大鼠坐骨神经损伤早期GAP43蛋白的表达;增强DRG神经元内NGF的表达。结论 PC可能通过促进大鼠DRG神经元内NGF的表达,加快神经元突起生长。     

坐骨神经震荡伤后腰髓背根神经节病理改变及意义

目的　应用图像分析和免疫组织化学技术观察和分析兔坐骨神经高速弹丸震荡伤后腰髓背根神经节病理改变及意义。方法　大耳白兔 2 5只 (包括正常对照 5只 ) ,致伤靶点为右后肢外侧坐骨神经体表投影线中点 (0 38g钢珠 ,0 6 5g装药量 ) ,观察伤后 1、3、7、14d(n =5 )腰髓背根神经节病理改变及一氧化氮合酶 (nitricoxidesynthase ,NOS)表达变化 (免疫组化法 ) ,并进行神经元计数及神经元截面积图像分析。结果　腰髓背根神经节伤后发生出血、水肿、神经元皱缩、坏死等变化 ,伤后 3dNOS表达显著增强 ,伤后 7d神经元数显著减少 ,神经元平均截面积显著减少。结论　坐骨神经高速弹丸震荡伤后腰髓背根神经节发生了较重的损伤。     

生长相关蛋白-43及mRNA在大鼠损伤坐骨神经中的表达

目的探讨坐骨神经离断后,其远侧端组织中生长相关蛋白-43mRNA(GAP-43mRNA)及其蛋白表达的变化,为临床神经修复过程中更好地改善微环境提供实验依据。方法正常SD大鼠24只,行坐骨神经横断术,术后1,2,3,4周取坐骨神经远侧端组织,以WesternBlot和RT-PCR法检测GAP-43及其mRNA的表达。结果RT-PCR结果显示,正常大鼠坐骨神经组织中GAP-43mRNA表达量较低,损伤坐骨神经远侧端GAP-43mRNA的表达量明显增加,于损伤第2周时达高峰。采用抗GAP-43抗体,进行WesternBlot检测结果:正常坐骨神经43kDa处出现弱阳性反应的蛋白区带,损伤后坐骨神经远侧端43kDa处阳性反应条带着色明显加深,损伤后第3周时阳性反应着色最强。结论GAP-43及其mRNA在大鼠损伤坐骨神经远侧端组织中表达增强,其mRNA表达上调高峰在神经损伤后的第2周;而其蛋白合成增加最为明显的时间是在神经损伤后的第3周。     

骨髓间充质干细胞移植及生长相关蛋白43表达在脑修复中的作用

背景: 研究证实骨髓间充质干细胞移植能够促进脑功能恢复,并对大鼠脑皮质及海马结构损伤具有修复作用,可能与细胞的自身代偿以及神经生长递质的参与有关,也可能是由于神经应激性损伤刺激靶组织细胞分泌各种神经因子的表达有关.目的: 从细胞生物学的角度,观察大鼠脑缺血损伤后骨髓间充质干细胞移植对神经再生及脑的修复作用.方法: 参考改良Nagasawa法建立大脑中动脉闭塞再灌注模型后,实施骨髓间充质干细胞移植,并分别进行跑台运动训练和水迷宫康复训练,进行神经功能评分及学习记忆评分.采用TUNEL法检测脑皮质区及海马区凋亡神经元的表达以及免疫组化技术检测生长相关蛋白43蛋白在两区的表达变化.结果与结论: 移植组16 h移植骨髓间充质干细胞在皮质区及海5 CA1区表达明显增加;7 d细胞表达达高峰,分化细胞明显增加.移植后运动训练7,19,21 d移植组mNSS评分低于模型组(P均<0.01);移植组大鼠水迷宫试验平台潜伏期的时间较模型组明显缩短(P<0.05);移植组大鼠穿越平台次数较模型组增多(P<0.05);缺血再灌注24 h凋亡细胞达高峰,3 d梗死体积测量为最大值;再灌注19 d生长相关蛋白43达高峰.提示大鼠脑缺血损伤介导了神经功能缺损,骨髓间充质干细胞移植促进了神经再生,生长相关蛋白43表达上调抑制神经元凋亡,进一步促进了脑梗死灶的修复.     

大鼠坐骨神经损伤性疼痛的行为观察和背根神经节中生长相关蛋白表达的变化

目的:观测坐骨神经损伤对大鼠行为的改变,以及运用免疫组化技术观察大鼠坐骨神经损伤对相应背根神经节中生长相关蛋白表达的影响,探讨生长相关蛋白与神经损伤所致的自发性疼痛的关系。方法:实验于2004-04/2005-04在汕头大学医学院第二附属医院外科和病理实验室完成。250只Wistar大鼠随机分成3组:神经切断组120只、神经压榨组120只、正常对照组10只;神经切断组,神经压榨组按存活时间不同再各分为3,7,14,21,30,60d6个亚组,每个亚组20只。用自噬评分方法观察大鼠神经损伤后的行为改变;并处死取材L5节段损伤侧背根神经节用免疫组化方法研究生长相关蛋白表达的变化。结果:250只大鼠全部进入结果分析。①自噬评分:神经损伤后,神经切断各亚组自噬发生率均比神经压榨各亚组高,程度也较重。神经切断60d组自噬平均分为2.1,而神经压榨60d组仅为0.7分。②生长相关蛋白表达:神经切断组背根神经节生长相关蛋白免疫阳性标志平均吸光度表达伤后7d达高峰(0.614±0.004),持续到伤后60d仍有高表达(0.515±0.004);而神经压榨组伤后14d才达高峰(0.583±0.006),伤后21d即有所下降(0.563±0.008),伤后60d基本回复到正常水平(0.231±0.003);正常对照组背根神经节仅有少量表达(0.225±0.005)。神经损伤后神经切断组、神经压榨组生长相关蛋白的表达与正常对照组比较差异有显著性意义(t=14.726,t=4.074,P≤0.05);神经切断组、神经压榨组伤后的表达差异也存在显著性意义(t=3.357,P≤0.05)。结论:不同的坐骨神经损伤方法所致的大鼠自噬程度和生长相关蛋白表达变化不同,提示神经源性疼痛的发生可能与神经的可塑性有关。     

施万细胞移植对中脑损伤神经元修复的影响

背景：神经元的功能状态与机体的生命活动密切相关。神经元受损后生长相关蛋白-43(GAP-43)表达预示着神经元是否有再生。目的：探讨施万细胞移植对损伤的大鼠中脑神经元修复的影响。设计：随机对照实验研究。地点和对象：实验地点为北京市神经外科研究所；研究对象Wistar大鼠，雌雄不限，体质量(180&;#177;20)g,随机分为实验组和对照组，每组6只动物。干预：BrdU标记的新生大鼠施万细胞移植至电针损伤的大鼠中脑区域，不同时间处死动物，免疫组织化学方法观察BrdU和GAP-43的表达并通过图像分析系统处理实验结果。主要观察指标：移植的施万细胞在脑内的存活时间；损伤神经元的再生情况。结果：施万细胞移植后8个月仍可见BrdU阳性细胞，其数目增加15％，并主要向大脑皮质迁移；移植后1个月损伤的中脑神经元GAP-43的表达与对照组相比差异有显著性意义。结论：施万细胞移植可促进中脑损伤神经元的修复。     

鞘内转染AAV6-hNGFβ对糖尿病神经病变大鼠的修复作用

目的观察鞘内转染腺相关病毒6-人神经生长因子β(AAV6-hNGFβ)对糖尿病神经病变(DPN)大鼠背神经节损伤修复的影响。方法将72只SD大鼠随机均分为4组,正常组、模型组、hNGFβ组(模型组+AAV6-hNGFβ-EGFP)和阴性对照组(模型组+AAV6-EGFP)。正常组注射等量生理盐水,hNGFβ组、阴性对照组和模型组均建立糖尿病周围神经病变模型,并于造模后分别在鞘内注射AAV6-hNGFβ-EGFP、AAV6-EGFP和等量生理盐水。8周后观察大鼠背根神经节组织形态,并测定不同病程(1周、4周、8周)大鼠坐骨神经传导速度,同时检测背根神经节神经生长因子(NGF)、细胞因子(ICAM-1、TNF-α)的mRNA和蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组大鼠背根神经节尼氏小体明显减少且染色变浅,伴有空泡样变化,神经组织出现损伤,同时坐骨神经传导速度降低,背根神经节NGF表达减少,炎性因子表达增多,差异有统计学意义(P 0. 05);模型组和阴性组大鼠以上指标比较均无显著差异;与模型组和阴性对照组比较,hNGFβ组大鼠背根神经节尼氏小体明显增多,坐骨神经传导速度明显提高,背根神经节NGF表达增加,炎性因子表达降低,差异有统计学意义(P 0. 05)。结论鞘内转染AAV6-hNGFβ可上调NGF同时抑制细胞因子,从而修复DPN大鼠的神经节损伤。     

Nerve blocks

Local and regional analgesia, achieved by injecting a local anesthetic into tissues, or in proximity to certain parts of the peripheral nervous system, or into the epidural/subarachnoid space, to relieve pain has been used widely for many years. While nerve blocks no longer have the preeminent role as the pain management in cancer patients, they will remain useful tools in managing pain and increasing 'quality of life' of the cancer patients, only if they properly applied. The purpose of this chapter is to present an updated version of the regional analgesia in cancer pain management.     

Nerve Stimulator-Guided Occipital Nerve Blockade for Postdural Puncture Headache

Postdural puncture headache (PDPH) is one of the most common complications of spinal anesthesia, where adequate hydration with bed rest in the horizontal position is the initial recommendation. Epidural blood patch is to date the most effective treatment, but it is an invasive procedure that may result in serious complications. The aim of the current study was to conduct a prospective, randomized, single-blinded comparison between bilateral occipital blockade and conventional expectant therapy in adults suffering from PDPH. A primary hypothesis was that occipital blockade would result in better pain management and quicker return to normal activity. Fifty adult patients diagnosed with PDPH were randomly divided into two equal groups of 25 each. All patients in the block group received greater and lesser occipital nerve blocks, whereas the control group received adequate hydration, complete bed rest, and analgesics. Forty-seven patients entered into the final analysis as three patients withdrew from study. Complete pain relief was achieved in 68.4% of block patients after 1 to 2 blocks, with 31.6% ultimately receiving up to 4 blocks. Visual analog scales were significantly lower in the block group ( P  < 0.01), and the block group consumed significantly less analgesics in the follow-up period ( P  < 0.05) compared with control group. Block patients had significantly shorter hospital stays and sick leave periods ( P  < 0.001). The studied method is superior to expectant conservative therapy in the treatment of patients suffering from PDPH.     

腓浅神经浅支移植修复桡神经缺损

[目的]探讨腓浅神经浅支修复桡神经缺损的临床效果。[方法]对腓浅神经浅支与桡神经形态结构进行比较，并对腓浅神经浅支移植修复桡神经缺损性损伤5例进行临床分析。[结果]腓浅神经浅支与桡神经形态结构大体一致．5例病例平均随访11(8～26)个月．按文献标准评定，优3例，良2例。[结论]腓浅神经浅支可作为修复桡神经缺损理想的供体神经。