中药骨康对成骨细胞IL-1、IL-6和TNF-α表达的影响

目的 通过观察骨康含药血清对成骨细胞IL-1、IL-6和TNF-α表达的影响,探讨其治疗骨质疏松的作用机制.方法 体外分离、培养成骨细胞,实验分为3组:正常血清组、中药骨康血清组和雌二醇含药血清组.采用酶联免疫吸附法.检测成骨细胞IL-1、IL-6和TNF-α表达.结果 中药骨康含药血清组IL-1、IL-6和TNF-α含量显著低于空白对照组(P<0.05),中药骨康含药血清组与雌二醇含药血清组IL-1、IL-6和TNF-α的含量无明显差异.结论 在去势状态下,中药骨康可能是抑制IL-1、IL-6和TNF-α分泌,而达到治疗骨质疏松症的作用.     

左归丸含药血清对成骨细胞OPG、RANKL mRNA表达的影响

目的通过观察左归丸含药血清对成骨细胞骨保护素(OPG)、细胞核因子-κB受体活化因子配基(RANKL)mRNA表达的影响,探讨其治疗骨质疏松症的作用机制。方法体外分离、培养成骨细胞,实验分为3组:正常血清组、卵巢切除血清组、卵巢切除含药血清组。采用原位杂交法,检测成骨细胞OPG、RANKL mRNA的表达。结果卵巢切除血清组与正常血清组相比,成骨细胞OPG mRNA的表达显著下调,而RANKL mRNA表达明显上调;卵巢切除含药血清组与卵巢切除血清组相比,成骨细胞OPG mRNA的表达明显上调,RANKL mRNA的表达明显下调;而与正常血清组相比,无显著性差异。结论在去势状态下,左归丸含药血清一方面直接抑制RANKL的分泌,使破骨细胞活性降低;另一方面促进成骨细胞分泌OPG,使之与RANKL的结合增多,进而使破骨细胞活性降低,从而达到治疗骨质疏松的目的。     

PEMF对OVX-OP大鼠骨组织IL-6表达的影响及意义

目的 观察脉冲电磁场(PEMF)对骨质疏松的治疗作用,从IL-6变化的角度探讨其治疗骨质疏松的机理.方法 6月龄雌性未孕Wistar大鼠40只,按体质量随机分为模型组(OVX)、假手术组(Sham)、PEMF组(PEMF OVX PEMF)、雌激素治疗组(Estrogen OVX E).OVX、PEMF、E组行双侧卵巢切除术,Sham组行假手术.术后第9周开始治疗:E组行苯甲酸雌二醇肌肉注射,0.5mg/kg,1次/2周.PEMF组大鼠暴露于脉冲电磁场治疗,1h·次-1·d-1,OVX、Sham组不予以任何处理,作为对照组.治疗10周后处死各组实验动物,测量腰椎骨密度、椎体的最大载荷.采用免疫组化检测椎体骨组织中IL-6表达情况并以图像分析进行组间比较.结果 IL-6主要表达于成骨细胞、骨细胞.PEMF治疗组IL-6的表达较OVX组明显增强;骨组织结构较OVX明显改善;骨密度、生物力学性能优于对照组.结论 PEMF对OVX-OP大鼠具有明显治疗作用;其治疗作用与IL-6在成骨细胞、骨细胞中的表达减弱密切相关.     

盐酸法舒地尔对脑梗死患者的疗效及对血清中IL-6、IL-12和IL-18影响的研究

目的 本实验观察盐酸法舒地尔对脑梗死患者的治疗作用及对血清中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-12(IL-12)和白细胞介素-18(IL-18)的影响,以期为临床工作提供理论帮助.方法 选择118例脑梗死患者,依患者的入院顺序分为两组,观察组共59例,在常规治疗基础上加用盐酸法舒地尔治疗,对照组共59例,只应用常规治疗,观察两组治疗前后血清中IL-6、IL-12和IL-18的含量.结果 观察组患者治疗的总有效率明显高于对照组,观察组与对照组治疗后血清中IL-6、IL-12和IL-18的表达均下降,但是观察组患者的下降值明显高于对照组.结论 盐酸法舒地尔对脑梗死有明显的治疗作用,并能有效下调血清中IL-6、IL-12和IL-18的表达,临床效果理想.     

环氧合酶-2在非酒精性脂肪肝病中的表达及意义

目的:探讨环氧合酶-2(cyclcoxygenase-2,COX-2)在大鼠非酒精性脂肪肝(Nonalcoholic Fatty Liver Disease,NAFLD)中的表达及意义.方法:建立大鼠NAFLD动物模型,用免疫组化,RT-PCR,Western-blot检测COX-2在NAFLD中的表达.结果:光镜下模型组肝损伤明显,治疗组较轻.模型组血清白细胞介素-1(IL-1)及肝组织血栓素B2(TB2)比正常组明显升高(P<0.05),与模型组相比,治疗组大鼠血清IL-1及肝组织TXB2明显降低(P<0.05);肝组织6-Keto-pros-taglandin FI alpha(6-k-PGF1α)模型组较对照组低(P<0.05),治疗组较模型组升高;正常组大鼠肝细胞中COX-2mRNA几乎无表达,模型组表达阳性,与正常组比较明显升高(P<0.05);模型组COX-2蛋白含量较正常大鼠增高(P<0.05);经Celecoxib治疗后,同8,12 wk组比COX-2的表达减弱(P<0.05).结论:COX-2介导的酶活性增加,启动脂质过氧化反应,促进脂肪肝的形成和发展;应用特异性COX-2抑制剂,下调COX-2的表达,阻断氧应激,可减轻NAFLD的肝损害.     

大鼠垂体IL-2表达和组织定位及卵巢切除对其表达的影响

目的:探讨在大鼠垂体前叶中是否有白细胞介素-2(IL-2)表达,并明确其组织定位,以及卵巢切除(OVX)对其表达的影响. 方法:将大鼠分为正常对照组(NOR)、卵巢切除组(OVX)、卵巢切除 雌二醇组(OVX E)、卵巢切除 油剂组(OVX O)和假手术组(SO),取垂体前叶标本进行免疫组化染色,并以图像分析方法分析垂体前叶细胞中IL-2免疫阳性物质含量的变化. 结果:IL-2免疫反应阳性物质仅分布于前叶,在中叶和后叶则未见. 与正常对照组相比,OVX组和OVX O组IL-2免疫阳性物质含量明显增多;而OVX E组IL-2免疫阳性物质含量无明显变化. 结论:我们首次报道IL-2在大鼠垂体的组织定位,机体雌激素水平下降可明显上调其表达.     

IL-18、COX-2在子宫内膜异位症中的表达及意义

目的探讨白细胞介素-18和环氧化酶-2在子宫内膜异位症患者中的表达。方法采用用酶联免疫吸附双抗体夹心法检测EMS患者腹腔及血清中IL-18的含量与正常对照组的差别,免疫组化法检测患者异位内膜组织中COX-2的表达与正常子宫内膜组织表达的差异。结果与正常对照组比较,EMS患者腹腔及血清中IL-18的含量明显增高,COX-2的表达明显增强,阳性率提高,且Ⅲ、Ⅳ期患者比Ⅰ、Ⅱ期程度明显加重。结论细胞介素18和环氧化酶-2与子宫内膜异位症的发生有关,深入研究IL-18、COX-2对子宫内膜异位症的诊断和寻找新的治疗靶点有重要意义。     

左归丸含药血清对大鼠海马神经元和胶质细胞氧糖剥夺损伤的保护作用及机制研究

目的:探讨左归丸含药血清对大鼠海马神经元和胶质细胞氧糖剥夺损伤的保护作用及机制。方法:原代培养大鼠海马神经元和胶质细胞混合细胞,分为对照组、模型组、含药血清组和抑制剂组。对照组细胞不做特别处理。模型组细胞给予氧糖剥夺。含药血清组细胞除给予氧糖剥夺+左归丸含药血清。抑制剂组细胞给予氧糖剥夺+左归丸含药血清+雌激素受体(ER)非特异性拮抗剂ICI182780。采用CCK-8法检测各组细胞存活率。采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组细胞氧化应激和炎症因子谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)表达水平。采用Western blot检测TNF-α、IL-1β、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关x蛋白(Bax)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)及磷脂酰肌醇激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)通路相关蛋白表达水平。结果:与对照组比较,模型组细胞存活率、GSH-Px水平下降,MDA、TNF-α、IL-1β水平升高,Bcl-2、磷酸化磷脂酰肌醇激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)蛋白表...     

肾病综合症患者IL-2、IL-6水平测定

目的研究白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)在肾病综合症(NS)患者中的水平变化及其临床意义。方法采用特异性酶联免疫吸附实验检测40例体检健康者,30例NS发作组和28例NS缓解组患者血清中IL-2和IL-6水平及其动态变化。结果NS发作组IL-2及IL-6水平均明显高于正常对照组(P<0.01)及NS缓解组(P<0.01),而NS缓解组IL-2及IL-6水平与正常对照组无显著性差异。结论研究提示IL-2及IL-6水平升高可作为NS活动性的检测指标。     

消旋卡多曲对秋季腹泻的治疗作用及对血清中IL-1、IL-8和IL-12的影响

目的:探讨消旋卡多曲辅助治疗秋季腹泻患儿的效果,探讨治疗后血清中白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-8(IL-8)和白细胞介素-12(IL-12)为主的炎性因子的变化,以期为临床治疗提供帮助。方法:选取138例在我院确诊为秋季腹泻的患儿,随机分为两组,观察组69例,在常规治疗基础上加用消旋卡多曲治疗,对照组69例,应用常规治疗,并对两组的治疗效果及两组病例治疗前后血清中IL-1、IL-8和IL-12的表达进行分析。结果:观察组疗效明显高于对照组,治疗后观察组患儿血清中IL-1、IL-8和IL-12的表达明显低于对照组。结论:秋季腹泻患儿在常规治疗基础上加用消旋卡多曲的治疗效果好,且能有效调节血清中IL-1、IL-8和IL-12的表达,有效抑制机体的炎性环境,可用于临床辅助治疗。     

基于基因组学比较左归丸和戊酸雌二醇防治绝经后骨质疏松症的作用机制

目的 采用生物信息学分析技术深入挖掘骨髓间充质干细胞（BMSCs）基因表达谱改变,比较左归丸和其阳性对照药戊酸雌二醇防治去卵巢所致骨质疏松症的关键基因与生物学通路。方法 36只大鼠分为模型组、假手术组、左归丸组和戊酸雌二醇组,后2组术后2周开始相应予左归丸和戊酸雌二醇灌胃治疗至第4、8、12周,其余2组蒸馏水灌胃。取材并培养、纯化BMSCs后制备基因表达谱芯片。采用差异基因鉴定、生物学通路富集与相关性分析、WGCNA分析及PPI网络分析等多种生物信息学方法逐层深入进行分析。结果 术后12周,模型组大鼠各位点骨密度降低,而左归丸组和戊酸雌二醇组大鼠骨密度均高于模型组,提示造模成功,中西药均可提高去势大鼠骨密度。差异分析显示相比模型组,左归丸组在术后4、8、12周分别筛选了405、403和618个差异基因;戊酸雌二醇组筛选了78、326和232个差异基因。通路分析发现许多差异基因与炎症和免疫反应通路高度相关,如Il1b、Tnf与病毒感染有关,Itga2、Fgf21同PI3K-Akt信号通路有关,Cxcl12同白细胞经内皮迁移相关等。WGCNA分析结果也显示某些重要节点与PI3K-Akt信号通路及炎症性肠病有关。而PPI网络分析中左归丸组关联到了338个节点,戊酸雌二醇组则包括133个。结论 在骨髓微环境中,左归丸和戊酸雌二醇都具有调节炎症和免疫反应的作用,而本研究所筛选出的通路及基因有可能作为其防治本病的潜在靶标。      

补肾方药对皮质酮损伤型大鼠海马神经细胞形态结构的影响

目的：探讨补肾方药左归丸与右归丸含药鼠血清对皮质酮（CORT）损伤型大鼠海马病理细胞模型形态结构的影响。方法：以新生SD乳鼠的海马组织为材料,原代培养海马神经细胞;以10^-4mol／LCORT处理培养的细胞制作大鼠海马病理细胞模型,并用RU38486进行拮抗。采用NSE和Nissl染色、FDA／PI、SYTO-13／PI双重染色法等观察模型细胞形态结构变化及左归丸与右归丸含药鼠血清的保护作用。结果：与正常对照组比较,加入1014mol／LCORT以处理培养的细胞,可使海马神经细胞明显受损,死细胞增多;左归丸与右归丸含药鼠血清均可使蓝色荧光的活细胞显著增多,呈红色荧光的死亡细胞明显减少。结论：加入10^-4mol／LCORT处理神经细胞可以制作海马病理细胞模型,补肾方药左归丸或右归丸含药血清对CORT损伤型海马病理细胞模型有明显的保护作用。     

电针结合左归丸对脑缺血再灌注大鼠SYN表达及突触超微结构的影响

目的：观察电针、左归丸对脑缺血再灌注大鼠突触素（synaptophysin,SYN）在缺血侧额顶叶皮层不同时间表达的影响,以探讨电针、左归丸促进脑缺血损伤后突触可塑性的相关机制。方法：采用线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注动物模型,随机分为假手术组、模型组、左归丸组、电针组、电针结合左归丸组（针药组）。电针组电针百会、大椎、心俞、肾俞,左归丸组给予左归丸灌胃,电针加左归丸组同时用电针、左归丸治疗。应用免疫组织化学法检测电针、左归丸对缺血区额顶叶皮层突触素的表达。结果：与模型组比较,在第7、14天,电针组、左归丸组、针药组SYN表达极显著增高（P〈0.01）。与电针组比较：在第7、14天,针药组SYN表达极显著增高（P〈0.01）,左归丸组SYN表达水平极显著降低（P〈0.01）;与左归丸组比较,针药组在第7、14天均极显著高于左归丸组（P〈0.01）。电针和左归丸促进脑缺血大鼠额顶叶皮层病理损伤具有改善作用,明显促进突触超微结构的恢复。结论：电针和左归丸促进脑缺血大鼠额顶叶皮层突触超微结构的恢复,促进突触重建。左归丸及电针对脑缺血再灌注模型大鼠SYN表达均具有不同程度的促进作用,它们可能通过保护大鼠缺血区皮层的突触超微结构促进突触可塑性的形成。     

左归丸对磷酰胺氮芥体外诱导损伤颗粒细胞自噬与凋亡的影响

目的探讨磷酰胺氮芥(phosphoramide mustard,PM)诱导卵巢颗粒细胞损伤的机制及左归丸含药血清对受损颗粒细胞自噬与凋亡的影响。方法制备左归丸含药血清,体外培养原代大鼠卵巢颗粒细胞,待细胞生长至底壁的75%-80%时随机分为4组:①对照组(Control);②模型组(M);③左归丸含药血清组(10%ZGW);④模型+左归丸含药血清组(M+10%ZGW)、以PM处理②④组24 h建立化疗源性颗粒细胞损伤模型后,①②组中加入10%正常大鼠血清,③④组中加入10%左归丸含药血清,37℃,5%CO2条件下培养24 h。流式细胞术检测各组颗粒细胞凋亡率,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测卵巢自噬启动因子Beclin-1、微管结合蛋白轻链3(LC3B)、自噬受体蛋白P62、凋亡蛋白Bax、Caspase3的表达。结果与对照组相比:模型组细胞凋亡率明显上升,Beclin-1、LC3B、Bax及Caspase3蛋白表达量增高,P62蛋白表达量下降,差异均具有统计学意义(P<0.05)。10%左归丸含药血清可显著降低模型组颗粒细胞凋亡率,下调受损颗粒细胞中Beclin-1、LC3B、Bax及Caspase3蛋白的表达,上调受损颗粒细胞中P62蛋白的表达,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 PM诱导了卵巢颗粒细胞损伤,促进了颗粒细胞凋亡,激活了颗粒细胞自噬/溶酶体降解途径;10%左归丸含药血清可降低化疗损伤性颗粒细胞凋亡率,与自噬相关蛋白的表达相关。     

IL-6与骨质疏松症关系的初步探讨

为探讨 Ｉ Ｌ－ ６ 在骨质疏松症发病中的作用,随机选择绝经后妇女６６ 例,根据 Ｂ Ｍ Ｄ 分为绝经后骨质疏松组（ Ｏ Ｐ组） ,绝经后非骨质疏松组（ Ｎ Ｏ Ｐ组） 及２７ 例绝经前健康妇女（ 对照组） ,采用 Ｉ Ｌ－ ６ 酶标法、放免法检测血清中 Ｉ Ｌ－ ６ 以及雌激素（ Ｅ２） 水平变化,结果显示：绝经后妇女 Ｉ Ｌ－ ６ 水平显著高于对照组（ Ｐ＜ ０ ．０５） ,而雌激素显著低于对照组（ Ｐ＜ ０ ．０１） ; Ｏ Ｐ组与 Ｎ Ｏ Ｐ 组亦存在显著差异（ Ｐ＜ ０ ．０５） ;在 Ｏ Ｐ组中 Ｉ Ｌ－ ６ 与年龄无相关关系,与骨密度（ Ｂ Ｍ Ｄ） 和雌激素（ Ｅ２） 呈负相关。结果提示,雌激素的减少与 Ｉ Ｌ－ ６ 高表达有关,即可使分泌 Ｉ Ｌ－ ６ 的细胞活化, Ｉ Ｌ－ ６ 分泌增多,从而促使骨吸收增多,骨密度降低,可能是导致骨质疏松的重要原因之一。     

雷洛昔芬对去势大鼠骨密度IL-6的影响

目的观察雷洛昔芬对去势大鼠骨密度、血清IL-6的影响,探讨雷洛昔芬抗骨质疏松的作用机制。方法48只3月龄雌性SD大鼠,随机分为假手术组(SHAM),单纯去势组(OVX),去势 雌激素组(OVX E2),去势 雷洛昔芬组(OVX R),每组12只。3个月后处死,取大鼠股骨测定各组骨密度。采集血清,用放射免疫分析法检测并比较各组IL-6的表达,用单因素方差分析进行统计学分析。结果雷洛昔芬组大鼠骨密度显著高于去卵巢组(P<0.05),血清IL-6浓度值显著降低(P<0.01)。结论雷洛昔芬治疗骨质疏松的作用与血清IL-6水平降低相关。     

左归丸对甲强龙脉冲治疗Graves眼病骨代谢水平的影响

目的?探讨经方左归丸对甲强龙脉冲治疗Graves眼病(GO)骨代谢指标:1型前胶原N-端前肽（P1NP）、β-1型胶原羧基端肽（β-CTX）、25羟维生素D(25OHD)和碱性磷酸酶(ALP)的影响。方法?选取符合条件的GO肾阴亏虚患者60例,其中治疗组32例,对照组28例,治疗组给予脉冲治疗联合左归丸,对照组给予脉冲治疗联合安慰剂,观察治疗前后2组证候积分、骨生化标记物的变化。结果?治疗组治疗后证候评分较前明显好转（P<0.05）,其中腰膝酸软、潮热盗汗改善明显优于对照组（P<0.05）,疗效优于对照组（P<0.01）。血β-CTX、ALP水平明显降低,其中β-CTX水平与对照组比有显著性差异（P<0.05）。2组治疗后CAS积分、充血、水肿、疼痛症状都有明显改善(P<0.01),但组间比,P>0.05。结论?中药左归丸可以改善肾阴虚证候,抑制破骨细胞活性,纠正高骨转换,对预防糖皮质激素导致的骨质疏松有一定疗效。      

Expression of cyclooxygenase-2 and its pathogenic effects in nonalcoholic fatty liver disease

Objective:To investigate the expression of cyclooxygenase-2 and its pathological effect in the experimental nonalcoholic fatty liver of rats,and to explore its possible mechanism.Methods:The rat NAFLD model was established by giving a fat-enriched diet.The blood samples were obtained form abdominal aorta and the levels of serum ALT,AST and IL-1,changes in the hepatic tissue 6-k-PGF1α TXB2 were measured.The expression level of COX-2 in rats livers were assayed by immunohistochemistry,RT-PCR and Western-blot.Results:Light microscope analysis revealed that hepatocytes were injured in the model group and slightly in the treatment group.The levels of serum TXB2 and IL-1 in the fatty liver rats were increased.Compared with the model group,the IL-1 and TXB2 increased significantly(P < 0.05),on the contrary,compared with the normal group,the hepatic tissue 6-Keto-prostagland decreased significantly in the model group(P < 0.05),the treatment group also increased but P > 0.05.There was no positive expression of COX-2 in hepatic tissue of normal rats.In the model group,there was positive expression of COX-2 antigen and the number of COX positive cells progressively increased at 4,8,12 wks.The intensity of expression of COX-2 had significantly increased(P < 0.05)and the intensity of COX-2 expression in the treated group decreased remarkably compared with the model group(P < 0.05).The expression of COX-2 mRNA and the level of COX-2 protein were significantly stronger in the liver of model rats compared with normal rats,and significantly weaker in treated rats,than in 8W and 12W model rats(P < 0.05).Conclusion:The increase of COX-2 expression in NAFLD is closely associated with the severity of liver inflammation and damage.COX-2 may play an important role in the progression of rat NAFLD,and the expression of COX-2 mRNA is downregulated by cyclooxygenase-2 inhibitor,which can depress the oxidative stress and control inflammatory response efficiently.     

参苓白术散对溃疡性结肠炎脾虚湿困证大鼠结肠组织TLR2、MyD88、COX-2表达的影响

目的观察参苓白术散对溃疡性结肠炎脾虚湿困证大鼠结肠组织Toll样受体2(TLR2)、髓样分化因子88(MyD88)及环氧化酶-2(COX-2)表达的影响,探讨参苓白术散改善溃疡性结肠炎的作用机制。方法采用TNBS/乙醇灌肠结合环境与饮食干预法复制溃疡性结肠炎脾虚湿困证大鼠模型。按照随机数字表将大鼠分为正常组、模型组、参苓白术散组(15.6 g/kg)、参苓白术散(15.6 g/kg)+TLR2激动剂(50μg/只)组、参苓白术散(15.6 g/kg)+TLR2拮抗剂组(0.121 2μg/g),每组12只,连续给药14 d。ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)及白细胞介素1β(IL-1β)水平,免疫组织化学法和Western blot法测定结肠组织中TLR2、MyD88、COX-2蛋白表达,Real-time PCR法检测结肠组织TLR2、MyD88、COX-2 mRNA表达。结果模型组大鼠血清TNF-α、IL-6及IL-1β水平均升高(P<0.05),结肠组织TLR2、MyD88、COX-2蛋白和mRNA表达增强(P<0.01);与模型组比较,参苓白术散组和参苓白术散+TLR2拮抗剂组大鼠血清TNF-α、IL-6及IL-1β水平均下降,结肠组织TLR2、MyD88、COX-2蛋白和mRNA表达下调(P<0.01)。与参苓白术散组比较,参苓白术散+TLR2拮抗剂组大鼠血清TNF-α、IL-6及IL-1β水平,结肠组织TLR2、MyD88、COX-2蛋白和mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05);参苓白术散+TLR2激动剂组大鼠血清TNF-α、IL-6及IL-1β水平,结肠组织TLR2、MyD88、COX-2蛋白和mRNA表达均高于参苓白术散组(P<0.01)。结论参苓白术散可下调溃疡性结肠炎脾虚湿困证大鼠结肠组织TLR2、MyD88、COX-2表达,降低炎性因子的释放;参苓白术散通过负性调控TLR2/MyD88信号通路,减轻肠道炎症反应,可能是其治疗溃疡性结肠炎的重要机制之一。