hTERT基因永生化人毛乳头细胞系的转化特征

目的 探讨hTERT基因永生化人毛乳头细胞系是否具有转化特征.方法 采用脂质体转染法,将hTERT基因导入体外培养的正常人毛乳头细胞,经G418筛选得到阳性克隆,连续传代培养.应用RT-PCR 法检测 hTERT mRNA 的表达.采用细胞形态学观察、染色体核型分析、软琼脂克隆形成实验和裸鼠致瘤实验分析转染细胞是否具有转化特征.结果 转染后获得1个阳性细胞克隆,扩大培养后细胞生长良好,现已连续传至50代.检测证实转染细胞稳定表达hTERT mRNA,细胞形态与未转染细胞基本相同,染色体核型正常,在软琼脂内不能生长,无裸鼠致瘤性.结论 hTERT基因永生化人毛乳头细胞系基本上是正常细胞而无明显转化特征.     

人肝细胞肝癌细胞系HCC-9903生物学特性的初步观察

目的新建一株人肝癌细胞系,为肝癌研究提供新的实验模型.方法用组织块法培养,并按细胞系建立标准检测细胞的一系列生物学特性.结果细胞维持培养15个月,传代100代,细胞形态及超微结构具有恶性细胞的特征,45代细胞的倍增时间为21.3h,细胞能在软琼脂上生长,形成集落,染色体众数60～67条,主干系为亚三倍体.1q(i)和t(6,11)为其标记染色体,细胞对刀豆球蛋白有凝集反应,5×106细胞接种于裸鼠皮下,肿瘤呈进行性生长.结论该细胞系符合建系标准,是一株新建的肝癌细胞系.     

人膀胱癌细胞系BC-6的建立及其生物学特性

目的:建立人膀胱癌细胞系BC-6,为膀胱癌的基础研究提供实验模型.方法:18例膀胱癌标本采用组织块直接培养法、8例采用细胞悬液培养法行原代培养;其中12例同时行裸鼠皮下移植,在皮下生长后,连续裸鼠体内传代3次,再行体外培养.结果:组织块直接培养和细胞悬液培养均未成功.12例裸鼠皮下接种肿瘤有3例生长,l例裸鼠意外死亡,l例裸鼠体内传代F2代肿瘤消失.1例肿瘤裸鼠皮下接种后生长较快,裸鼠体内传代3次后,取部分肿瘤组织体外培养得到膀胱癌细胞系BC-6,其形态结构,分化程度与原发瘤保持一致,染色体形态仍为人类核型,众数维持在66～72之间,占82%,细胞周期分析G1期0.58,G2期0.08,S1期0.35,细胞群体培增时间为44h.结论:通过裸鼠体内移植瘤建立的膀胱癌细胞系BC-6,与原发癌保持相同的生物学特性,体外连续传代1 a以上,传代92代.细胞形态不变,生长周期恒定,己经成为一个稳定的细胞系.     

宫颈癌细胞系HCE1的建立及其生物学特性

从 5例手术切除宫颈癌标本中取材进行体外培养 ,并建成一个新的连续细胞系 ,命名为湖南宫颈癌上皮细胞系 1号 (HCE1)。该细胞已在体外生存 18个多月 ,传 80多代。其生物学特性显示 :①该细胞系接种至裸鼠后可致瘤 ,其移植瘤细胞形态与原实体瘤相似 ;②电镜下可观察到细胞表面有丰富的微绒毛及核糖体 ;③检测第 2 5代细胞生长曲线 ,其倍增时间为 45 8h ;④计数 6个平皿软琼脂集落形成率平均值为 14 8% ;⑤染色体核型分析为非整倍体 ,众数为 85条     

黑色素瘤细胞系HME1的建立及其生物学特性分析

目的：建立一株黑色素瘤细胞系,并分析其体外生物学特性。方法：取黑色素瘤活检组织进行组织块法原代培养,待长满90%后,消化传代培养并进行生长动力学、形态学及致瘤性等生物学特性鉴定。结果：该细胞系已在体外培养生存18个多月,传90余代。其生物学特性如下：该细胞系接种至裸鼠后可致瘤,其移植瘤细胞形态与原实体瘤相似;检测第20代细胞生长曲线,其倍增时间为56.9 h;第20代细胞软琼脂集落形成率平均为19.1%;染色体核型分析为非整倍体,众数为 92条;透射电镜下可观察到细胞表面有丰富的微绒毛、核糖体及黑色素颗粒;SP免疫组化分析显示,细胞有HMB-45表达。结论：该黑色素瘤细胞经体外培养后已永生化,形成了连续传代细胞系,具有黑色素瘤恶性表型的特征。     

宫颈癌细胞系HCE1的建立及其生物学特性

从５例手术切除宫颈癌标本中取材进行体外培养,并建成一个新的连续细胞系,命名为湖南宫颈癌上皮细胞系１号（ＨＣＥ１）。该细胞已在体外生存１８个多月,传８０多代。其生物学特性显示：①该细胞第接种至裸鼠后可致瘤,其移植瘤细胞形态与原实体瘤相似;②电镜下可观察到细胞表面有丰富的微绒毛及核糖体;③检测第２５代细胞生长曲线,其倍增时间为４８．５ｈ;④计数６个平皿软琼脂集落形成率平均值为１４．８％;⑤染色体核型分     

人卵巢上皮癌细胞原代培养及细胞系BUPH:OVSC-1的建立

目的:为人卵巢上皮癌的研究提供更多体外研究模型,确立卵巢上皮癌原代培养的条件,建立细胞系.方法: 将25例卵巢上皮癌手术切除的肿瘤组织或腹水标本进行体外培养,比较不同组织培养方法的效果.对所建卵巢癌细胞系的形态学、染色体核型、生长增殖及裸鼠种植情况进行观察.结果: 建立一套人卵巢上皮癌原代培养方法,使其体外培养传代数扩展至10～15代.经原代培养得到一株人卵巢癌细胞系BUPH:OVSC-1,其形态学、染色体核型分析、接种致瘤性的观察结果表明,该细胞系符合人体恶性细胞特征.裸鼠种植瘤病理切片该细胞呈肉瘤样细胞形态,电镜及角蛋白免疫组化证实其为上皮起源.结论:应用改良的卵巢上皮癌原代培养方法能改善细胞的体外生存期.BUPH:OVSC-1是一株特殊的人卵巢癌细胞系,符合人卵巢肉瘤样癌细胞系的特征,可作为卵巢肉瘤样癌研究的实验模型.     

两株人成骨肉瘤克隆细胞株的建立及其生物学特性

通过克隆技术及体内移植,从自建的成骨肉瘤细胞 Ｌ Ｔ Ｈ Ｏ Ｓ（简称 Ｓ）中获得两株细胞克隆 Ｓ１ 和 Ｓ２,应用组织形态学观察、染色体分析、软琼脂克隆形成法以及裸小鼠体内成瘤试验研究癌细胞的生物学特性。结果发现 Ｓ１ 和 Ｓ２ 两株均保持人类染色体核型,所形成肿瘤显示人成骨肉瘤上皮样组织形态,其中 Ｓ１ 的细胞电泳率高达１．０, Ｓ２ 为０．７０, Ｓ１ 的群体倍增时间为２２．４ ｈ,软琼脂形成率为３３．５％ , Ｓ２ 群体倍增时间为２４．０ ｈ,软琼脂形成率为２３．１％ 。裸小鼠右后肢皮下接种 Ｓ１ 和 Ｓ２,发现 Ｓ１ 成瘤时间短,细胞增殖快,但在４ 周内两者均不发生转移;通过尾静脉注射 Ｓ１ 和 Ｓ２ 细胞,发现４ 周时,接种 Ｓ１ 细胞的裸鼠出现广泛的实验性肺转移,接种 Ｓ２ 细胞的裸鼠肺部仅见几个分散的癌细胞。     

裸鼠脊髓转移灶粘液表皮样癌细胞系Ms的建立及生物学特性

目的 :建立Mc3细胞的脏器转移细胞系 .方法 :采用瘤细胞尾静脉注射法、组织块细胞培养法 ,从裸鼠体获得Mc3细胞系脊髓转移细胞亚系 .用染色体显示、细胞形态及细胞致瘤性观察证明其性质 ;用细胞生长曲线、流式细胞仪测定增值速度 .结果 :从5 0只受试裸鼠中获得一只截瘫的裸鼠 ,取其脊髓组织行原代及传代培养获得细胞并建立细胞系 ,传代 5 0次以上 ,生长稳定 ,倍增时间为 4 3h ,S期细胞占 2 2 .7% ,染色体众数为 6 1,保持人类染色体形态 ,细胞形态与其母细胞相似 ,相差显微镜观察活细胞呈“铺路石”样外观 .裸鼠肺内转移肿瘤组织切片显示为…     

体内连续筛选法建立自发性肺转移人肝癌细胞系

目的　从人肝癌裸鼠肺转移灶中建立人肝癌细胞系 ,为探索肝癌转移的分子机制提供模型。方法　用高转移性人肝癌克隆细胞株MHCC97 H接种裸鼠 ,进行 3次肺转移筛选 ,取肺转移瘤建成皮下接种后自发性肺转移的细胞系。检测下列指标 :形态学、生长曲线、克隆形成率、运动速度、核型分析、流式细胞分析、免疫细胞化学检查、HBVDNA、成瘤性和转移性。结果　从裸鼠肺转移灶中培养出人肝癌细胞系HCCLM3,为多边形上皮性癌细胞 ,亚三倍体核型 ,染色体众数范围 5 5～ 5 8条 ;细胞倍增时间 34 9h ;克隆形成率 32 4 %± 3 2 % ;细胞运动速度 (2 0± 2 ) μm/h ;免疫细胞化学显示甲胎蛋白、白蛋白、细胞角质蛋白 8、P16阳性 ,P5 3、nm2 3、HBsAg阴性 ;细胞基因组中有HBVDNA整合。裸鼠皮下接种成瘤率 10 0 % ,5周后自发性肺转移率为 10 0 % ,肺转移灶中位数 12 1个 /裸鼠。瘤组织原位接种于裸鼠肝脏 ,5周后腹壁转移 10 0 %、腹腔内转移 80 %、肝内转移 10 0 %、膈肌转移 70 %、肺转移10 0 % ,肺转移灶中位数 2 6 8个 /裸鼠。结论　建成一个皮下和原位接种均出现自发性高转移的人肝癌细胞系 ,为研究肝癌转移提供了新的实验模型     

Management of a patient with a complete rupture of a main bronchus in a community hospital

We describe the successful use of a portable extracorporeal membrane oxygenation machine for a patient with complete rupture of the left main bronchus after a road crash. The machine was used before and during left main bronchus reanastomosis at a community hospital 30 km from Melbourne, and then during acute interhospital transfer.     

追女现形记

当男人们在社交场合遇到吸引他的心仪对象时，他们心中有什么想法？又会采取什么样的行动呢？[编者按]     

Choledochoscopy: a comparison of a rigid and a flexible fibreoptic instrument

A comparison of choledochoscopy using a Storz rigid choledochoscope and a flexible Olympus instrument has been made. After using both instruments during a 12-month period, it is felt that the rigid instrument has practical advantages for general use, while the flexible instrument offers additional benefits, but requires more skill and care in its use.     

一起小学生食物中毒调查报告

丹东市宽甸县某小学发生一起食用课间餐（油炸糕）的食物中毒事件。中毒人数300人，经临床症状分析，流行病学调查及实验室检验证实，此次食物中毒是由油脂酸败引起的。