心肌肌钙蛋白T基因突变在心肌病发病机制中的研究进展

肥厚型和扩张型心肌病中,基因缺陷分别占发病的50%和35%,其病理生理机制,主要包括肌小节蛋白基因突变引起的收缩力产生缺陷,细胞骨架蛋白基因突变引起的收缩力传递缺陷等。心肌肌钙蛋白T将肌钙蛋白C和肌钙蛋白I连接到肌动蛋白和原肌球蛋白上,在心肌细胞收缩和舒张过程中发挥重要作用。在肥厚型和扩张型心肌病中发现了多种心肌肌钙蛋白T的基因突变,围绕心肌肌钙蛋白T的研究有助于阐明心肌病的发病机制。本文总结了心肌肌钙蛋白T基因突变在心肌病发病机制中的研究情况。     

肌钙蛋白自身抗体的检测和临床应用

肌钙蛋白是心肌损伤敏感、特异的生物学指标。肌钙蛋白(cTn)是细肌丝组成成分,CTnC和钙离子结合,CTnT与原肌球蛋白结合,cTnI则抑制肌动蛋白与肌球蛋白结合,在肌肉的兴奋收缩偶联中起关键性作用。肌钙蛋白(cTnI和cTnT)主要位于肌肉细胞的肌质网内,小鼠心肌细胞膜上有少部分cTnI分布,生     

心肌肌钙蛋白I基因Arg170GIn突变——de novo突变与肥厚型心肌病

肥厚型心肌病(HcM)为常染色体显性遗传疾病^[1,2]，目前已发现的HCM致病基因共13个，其中11个是编码肌小节蛋白的基因^[3,4]。心肌肌钙蛋白I(cardiac troponin I，cTnI)是肌钙蛋白复合体的重要组成，参与调节心肌纤维的兴奋收缩耦联。自1997年Kimura等发现cTnI基因突变可以导致HcM，至今已发现10多种cTnI突变^[5]，其基因型与     

心肌肌钙蛋白I基因Arg170Gln突变——de novo突变与肥厚型心肌病

肥厚型心肌病 (HCM)为常染色体显性遗传疾病[1,2 ] ,目前已发现的HCM致病基因共 13个 ,其中 11个是编码肌小节蛋白的基因[3 ,4] 。心肌肌钙蛋白I(cardiactroponinI,cTnI)是肌钙蛋白复合体的重要组成 ,参与调节心肌纤维的兴奋收缩耦联。自 1997年Kimura等发现cTnI基因突变可以导致HCM ,至今已发现 10多种cTnI突变[5] ,其基因型与临床表型密切相关[4] 。目前中国人群HCM的cTnI基因突变情况尚少报道 ,cTnI基因型和临床表型的关系亦不清楚。我们对此进行了初步研究。一、对象与方法1 对象 :临床收集的 10 0例无血缘关系的HCM患者。…     

一种新发现的肥厚型心肌病心肌肌钙蛋白Ⅰ基因突变

1997年Kimura等首次报道心肌肌钙蛋白Ⅰ基因突变与肥厚型心肌病相关，现已发现10种心肌肌钙蛋白Ⅰ基因突变，大部分位于第7、第8号外显子。目前同内尚未见相关研究报道。本研究对58例肥厚型心肌病患者心肌肌钙蛋白Ⅰ基因第7、第8号外显子进行了分析，筛查有无突变。     

心肌微环境对胎盘间充质干细胞向心肌细胞分化的影响

目的 观察心肌微环境对胎盘间充质干细胞(human placenta-derived mesenchymal stem cells,hPDMSCs)向心肌细胞分化的影响.方法 用心肌细胞培养上清液模拟心肌微环境诱导hPDMSCs向心肌细胞分化,同时设置20％DMEM培养的对照组.每天于显微镜下观察细胞形态学变化,每两天台盼蓝拒染法计数细胞,免疫组织化学法检测α-横纹肌肌动蛋白的表达,免疫荧光法检测心肌肌钙蛋白I(cardiac troponin I,cTnI)的表达,RT-PCR法检测心钠素(atrial natriuretic factor,ANF)、β-肌球蛋白重链(beta-myocin heavy chain,β-MHC)mRNA的表达.结果 对照组细胞保持较快的增殖速度,不表达α-横纹肌肌动蛋白、cTn I、ANF、β-MHC;心肌细胞培养上清液模拟的心肌微环境组细胞增殖速度较慢,表达α-横纹肌肌动蛋白、cTn I、ANF、β-MHC.结论 心肌微环境能够诱导hPDMSCs向心肌细胞分化.     

血清肌钙蛋白测定在糖尿病性心肌病患者中的临床意义

[目的 ]探讨血清肌钙蛋白 (cTnI)在糖尿病心肌病中的变化。 [方法 ]用化学发光免疫分析法测定 4 0例正常人 ,4 0例糖尿病患者及 4 0例糖尿病心肌病患者血清肌钙蛋白 (cTnI)、同时测定部分代谢指标。 [结果 ]糖尿病心肌病患者血清cTnI浓度与糖尿病组及正常对照组比较差别有显著性 (P <0 0 1)。 [结论 ]cTnI测定有助于糖尿病心肌损害的早期诊断。     

肥厚型心肌病的致病机理研究进展

肥厚型心肌病 (Hypertrophiccardiomyopathy,HCM )是一种不明原因的心肌肥厚 ,心肌纤维排列紊乱为特征的心肌病。它的发病率为 0 0 4 %～ 0 4% [1 ] 。它可以表现为多样的临床症状 ,是青少年患者发生心脏性猝死的常见原因 ,大部分患者以家族性常染色体显性遗传的规律发生 ,具有基因的异质性。本文综述了目前HCM发病机理的研究进展情况 ,重点阐述了β肌球蛋白的突变及定位、与临床表现及预后之间的关系、心脏肌钙蛋白T、肌钙蛋白I和α -原肌球蛋白的突变定位、还有环境因素及一些原癌基因对HCM的作用。1　遗传因素与家族性肥厚型心肌…     

糖尿病心肌病患者血清肌钙蛋白及血浆心钠素水平变化的临床意义

目的探讨血清肌钙蛋白（cTnI）及血浆心钠素（ANP）水平在糖尿病心肌病中的变化。方法用化学发光免疫分析法和放射免疫分析法分别测定48例体检健康者、48例糖尿病无心肌病患者及48例糖尿病心肌病患者血清cTnI及血浆ANP水平。结果糖尿病心肌病组及糖尿病组患者血清cTnI浓度均显著高于正常对照组（均P〈0.01）;且糖尿病心肌病组血清cTnI浓度显著高于糖尿病组（P〈0.01）;糖尿病心肌病组血浆ANP浓度显著高于糖尿病组及正常对照组（均P〈0.01）,糖尿病组血浆ANP浓度与正常对照组比较增高不明显（P〉0.05）。结论 ANP可作为糖尿病引起心肌损害的指标,而cTnI作为糖尿病引起心肌损害的指标尚且证据不足;cTnI、ANP提示糖尿病心肌损害的特异性未明确,有待于将其他心脏疾病导致的心肌损害纳入加以研究。     

乳小鼠心肌成纤维细胞和心肌细胞的分离培养及荧光鉴定

目的探讨和建立适用于乳小鼠心肌成纤维细胞和心肌细胞体外分离、培养及鉴定的技术方法。方法乳小鼠心脏剪成组织块,用Ⅱ型胶原酶加胰蛋白酶联合消化法分离细胞,再通过差速贴壁分离法分别收集、培养乳小鼠心肌成纤维细胞和心肌细胞。光学显微镜下分别观察成纤维细胞和心肌细胞的基本形态特征的变化,并对2种细胞行苏木素-伊红(HE)染色,用第2代心肌成纤维细胞行波形蛋白免疫荧光鉴定,而原代心肌细胞行α-横纹肌肌动蛋白、心肌肌钙蛋白和心肌肌球蛋白重链免疫荧光鉴定。结果差速贴壁分离法心肌成纤维细胞原代培养90 min基本贴壁,贴壁较早,培养第3～5代细胞生长良好,72 h心肌成纤维细胞波形蛋白免疫荧光鉴定纯度高达97%;而心肌细胞贴壁较晚,24 h贴壁后部分心肌细胞出现自发性搏动现象,48 h后细胞逐渐展开,72 h后逐渐形成细胞簇并出现同步搏动,心肌肌球蛋白重链、心肌横纹肌肌动蛋白、心肌肌钙蛋白免疫荧光鉴定心肌细胞纯度分别为95%、93%、95%。结论差速贴壁分离法结合免疫荧光鉴定可分离乳小鼠心肌成纤维细胞和心肌细胞,此方法成熟、稳定、有效,为研究心脏疾病的基础与临床研究提供了理想的实验模型。     

IGF-1基因转染促进胚胎干细胞诱导分化的心肌细胞中IGF-1、肌球蛋白、肌动蛋白及心肌特异性肌钙蛋白-T的表达

目的 观察胰岛素样生长因子-T(IGF-1)基因转染对胚胎干细胞(ES细胞)诱导分化的心肌细胞中IGF-1、肌球蛋白(myoglobulin)、肌动蛋白(actin)及心肌特异性肌钙蛋白-T(Troponin-T)表达的影响.方法 将含有IGF-1基因的真核质粒转染人大鼠胚胎干细胞诱导分化的心肌细胞中,采用免疫组织化学方法对心肌细胞内上述4种蛋白的表达进行检测.利用HPIAS-2000图像分析系统测定4种蛋白在各组中表达的平均吸光度值和平均阳性面积率.结果 IGF-1基因转染后的心肌细胞内上述4种蛋白的表达明显高于未转染的对照组(P<0.05).结论 IGF-1基因转染的心肌细胞较未转染的心肌细胞合成IGF-1、肌球蛋白、肌动蛋白及心肌特异性肌钙蛋白-T的能力增强,为IGF-1基因治疗心肌梗死提供了实验依据.     

心肌钙蛋白Ⅰ的物种同源性

<正>肌钙蛋白(troponin)由三个亚单位组成:肌钙蛋白I(TnI)与抑制肌动蛋白Mg~(2+)-ATP酶有关,TnC结合于Ca~(2+)并解除TnI抑制,TnT为原肌球蛋白的结合亚单位。Ca~(2+)结合于TnC的调节位点后增强了TnT与TnC的相互作用,同时削弱了TnI对肌动蛋白的抑制。与其他收缩蛋白不同,TnI的心型异构体(isoform)-cTnI仅在心脏组织表达,在胎儿期表达较少,出生后增多,受生长、发育的调控,无论在胎儿、新生儿抑或成年期,其在心房、心室的分布相同:脊椎动物cTnI结构特征是在N末端含有一特异性cAMP依赖的蛋白激酶,与心肌细胞对β-肾上腺能刺激后的反应有关。     

心脏肌钙蛋白临床应用

肌动蛋白与肌球蛋白(钙-依赖的)的相互作用使肌肉收缩、舒张。肌钙蛋白调节这一相互作用。骨骼肌与心肌表达的肌钙蛋白C相同,而表达的肌钙蛋白(TnT)的氨基酸序列互不相同,交叉反应少,可资鉴别。与已有的几种血清学标志比较,其特点、临床意义,优越性如何?尚未明确。比利时学者Wer F在其最近的述评中提出心脏肌钙蛋白升高似反映病人有不稳定冠脉斑块的假说。认为其入院时水平的测定有助于急性冠心症候群病人的危险分层,有助于治疗决策。若能通过其     

人心肌肌球蛋白轻链的提取、纯化和电泳分析

用一种简便有效的方法，从１３０ｇ成人心室肌中先提职心肌肌球蛋白纯品３１８ｍｇ，再从中进一步分离和纯化得到肌球蛋白轻链１８ｍｇ。纯化肌球蛋白轻链的核酸含量＜０．０１％，基本不含有肌动蛋白、原肌球蛋白、肌钙蛋白及其它蛋白。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示，人肌球蛋白轻链１和轻链２的分子量为２４ｋＤ和２０ｋＤ。纯化猪心肌球蛋白的Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性为０．４６μｍｏｌＰｉ／ｍｇ／ｍｉｎ，其分离后的轻链亚基则无此活性。本文对人和猪的心室肌肌球蛋白轻链的电泳行为进行了分析。     

肥厚型和扩张型心肌病患者β肌球蛋白重链基因错义突变的研究

肥厚型和扩张型心肌病患者β肌球蛋白重链基因错义突变的研究徐军，李运有，张寄南，马文珠，王敬良近年来，β肌球蛋白重链（βＭＨＣ）基因突变是心肌疾病研究的焦点之一，有研究认为βＭＨＣ基因中的点突变是家族性肥厚型心肌病（ＦＨＣＭ）的重要发病原因［１］。本研...     

肥大性心肌病的基因突变

肥大性心肌病(ＨＭＣ)是基因突变引起的遗传性疾病。其突变基因常位于第十四对染色体。突变基因指导合成了异常β-肌凝蛋白重链和肌钙蛋白Ｔ及α-原肌凝蛋白。这些异常蛋白与心肌肥大关系密切。1　肥大性心肌病的临床特征家族性ＨＭＣ为常染色体显性遗传性疾病。它的特征是无其它原因引起的心肌肥大、肌节排列紊乱,这是区别于心瓣膜病和高血压病引起心肌肥大的标志。其心脏收缩功能正常,但舒张受损。临床表现从无症状到心衰及猝死。青年患者猝死率高于老年。心电图不正常患者猝死率高于正常者。2　ＨＣＭ与β-肌凝蛋白重链基因突变第一个搞…     

血清肌钙蛋白I升高与病毒性心肌炎诊断及病程关系探讨

目的估价血清肌钙蛋白I(cTnI)升高与病毒性心肌炎(VMC)诊断和发展的关系.方法用抗人心肌cTnI单抗2B1.9和2F6.6双夹心ELISA法,定量检测282例VMC患者血清cTnI量,[3HQNB]结合检测cTnI持续升高患者血清对人心肌M2受体数量和亲和力的影响;PCR扩增检测EVs-RNA,淋巴细胞和心肌细胞mtDNA缺失率,部分病例测定柯萨奇B病毒(CVB)IgM及中和抗体滴度.结果临床诊断VMC患者282例,其中157例cTnI升高,阳性率55.7%,3个月转阴率52.3%,6个月转阴率为90.8%.cTnI持续升高的VMC患者,血清内出现抗M受体抗体,减少心肌M受体数目,抑制亲和力,导致心肌M2受体下调和去敏.与扩张型心肌病患者血清抗M受体抗体作用相似.VMC患者心肌细胞与淋巴细胞mtDNA缺失率比正常人明显增高2.5倍和15.8倍.cTnI持续升高3个月患者的CVB-IgM持续时间延长,心律失常和症状改善率明显低于cTnI转阴者.结论血清cTnI升高是诊断VMC心肌损伤的客观证据,cTnI持续升高可能与VMC患者自身抗体出现、心肌受体损伤、mtDNA缺失等向扩张型心肌病发展过程有关.     

肌小节蛋白基因突变是扩张性心肌病病因之一

据2000年343卷第23期报道突发性扩张性心肌病是一种引起收缩机能下降的原发性心肌病,对其分子机理在很大程度上仍不清楚.有些家族性扩张性心肌病是由于心脏的细胞骨骼蛋白发生突变而引起的,这说明收缩力传递不足可作为这种疾病的一种机制,为了阐明心力衰竭的这一重要原因,美国波士顿杨伯翰大学医院暨妇女医院M.Kamisago医生等,对扩张性心肌病其他的基因原因进行研究,临床评价了21个家族性扩张性心肌病病例.在一项泛染色体连接试验中,对编码β-肌球蛋白重链、肌钙蛋白T、肌钙蛋白I和α-原肌球蛋白的基因引起疾病突变进行了研究.     

心肌肌钙蛋白Ⅰ的检测及临床应用

心肌肌钙蛋白I(cTnI)为心肌肌钙蛋白(cTn)的三个亚单位之一,仅存在心肌收缩蛋白的细肌丝上,在肌肉收缩和舒张过程中起重要作用。cTnI是心脏特异性抗原。本文采用Access全自动微粒子化学发光酶免疫分析系统及其试剂盒对其定量检测,结果表明Access定量测定cTnI准确快速,cTnI在心肌损伤的诊断中.其灵敏度和特异性明显高于CK—MB。     

心肌肌钙蛋白I在心血管疾病的临床应用

心肌肌钙蛋白I(cTnI)作为最新的心肌细胞损伤坏死标志物,其高度特异性、高度敏感性和描绘性近年来已受到关注 [1],越来越多地用于心肌梗塞、心绞痛的诊断和鉴别诊断,并逐渐有取代心肌酶的趋势 [2,3],现就其特性、检测方法和临床应用作一综述.1 cTnI特性及检测方法肌钙蛋白复合物位于横纹肌收缩单位细胞肌丝上,包括三个亚单位:原肌凝蛋白亚单位TnT、肌动蛋白-ATP酶抑制亚单位TnI、钙结合亚单位TnC.肌钙蛋白I是心肌细胞所特有,是复合物中的抑制亚单位,其结合于肌动蛋白,在无钙离子时抑制肌动蛋白和肌凝蛋白的相互作用 [4],当心肌损伤时,这些细胞内的蛋白可从损伤的肌细胞中释放入血循环,血清cTnI水平于3～5h升高,于24h达高峰,5～10天后降至正常水平 [5].