新西兰兔心衰模型心肌损伤改变及其与NO关系的探讨

目的 研究导管术致超容量负荷型实验性心衰兔模型随时间推移的损伤变化及其与NO的关系. 方法 运用导管术造成兔的超容量负荷型心衰模型,然后分别于造模后24 h和造模后7 d处死动物,取心脏组织做光镜检查;NO试剂盒检测血清NO含量、通过流式细胞仪检测心肌细胞凋亡情况、Western blot法检测Caspase-3蛋白水平的表达. 结果 ①光镜观察：正常组心肌细胞无损伤表现,造模24h组及7d组均有心肌细胞损伤表现,造模7 d组损伤更为广泛且严重：②NO试剂盒检测：造模24 h组NO含量（3.33±1.30 μmol/L）和造模7 d组含量（2.81±0.77/μmol/L）高于正常组（2.09±0.22 μmol/L）,且造模24 h高于造模7 d;③AnnexinV联合PI染色：正常组凋亡率较低（3.72%±1.92%）,随着时间推移,凋亡细胞所占比例呈上升趋势,造模7 d（10.73%±2.26%）明显高于造模24 h（7.62%±1.70%）,④Western Blot检测：正常组基本检测不到激活的Caspase-3蛋白酶,在造模后24 h和造模后7 d Caspase-3蛋白酶均有明显表达,但造模7 d有所下降. 结论 超容量负荷型心衰兔模型心肌随时间推移,凋亡率增加、心肌损伤加重;NO在本心衰模型的主要作用以抗心肌细胞凋亡效应作用为主.     

Caspase-3在急性视网膜光损伤模型中的作用

【目的】探讨Caspase-3在急性视网膜光损伤模型中的作用。【方法】利用手术显微镜光源E=(30000±50)lx照射SD大鼠右眼,照射时间为30min,建立急性光损伤模型。分别在照射后6h、1d、3d、7d和15d处死动物,取眼球做光镜和电镜检查;通过流式细胞仪检测视网膜细胞凋亡情况、Caspase-3试剂盒检测其活性、Westernblot法检测Caspase-3蛋白水平的表达。【结果】①光镜及电镜检查表明:随着时间的推移,视网膜的内、外节水肿逐渐加重,其中内节线粒体肿胀逐渐加重、外节盘膜叠状结构解离,而外核层细胞核排列紊乱、核固缩、核层变薄,后期视网膜色素上皮细胞几乎消失。②AnnexinV联合PI染色法结果表明:随着时间推移,凋亡细胞所占的比例呈上升趋势,但7d与15d凋亡细胞的比例无明显差异,分别为83%和81%。③Caspase-3活力测定表明:随着时间推移,Caspase-3活力呈上升趋势,由最初6h时的0.02活力单位,在第7天达最高峰至10.2,然后开始下降,在15d时下降至6.8活力单位。④WesternBlot检测结果表明:6h、1d、3d基本检测不到激活的Caspase-3蛋白酶,而7d与15dCaspase-3蛋白酶含量相似。【结论】急性光损伤引起的SD大鼠视网膜光感受器细胞凋亡与Caspase-3密切相关。     

腺苷诱导HepG2细胞凋亡过程中caspase-3,-8,-9的活性变化

目的:探讨腺苷诱导HepG2肝癌细胞凋亡过程中caspase-3,-8,-9活性变化,确定caspase-3,-8,-9在腺苷诱导的肝癌细胞凋亡中的作用。方法:用3 mmol/L腺苷处理HepG2细胞,作用48 h后,用DNA末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)和流式细胞仪定量检测凋亡细胞细胞比例;分别作用0,12,24,36,48 h,用荧光比色法检测HepG2细胞凋亡过程中caspase-3,-8,-9的活性变化,Western-blotting法检测caspase-3的活性片段;并检测加入caspase-3抑制剂后经3 mmol/L腺苷作用48 h后细胞凋亡变化情况。结果:3 mmol/L腺苷处理肝癌细胞48 h,检测到(27.5±2.1)%的细胞出现凋亡,而对照组仅有(1.1±0.1)%的细胞出现凋亡(P<0.01)。3 mmol/L腺苷处理肝癌细胞12 h后caspase-3活性开始升高,于36 h达到高峰,与对照组比较差异有显著性(P<0.05),而caspase-8,-9活性无明显变化。3 mmol/L腺苷处理肝癌细胞36 h后Western-blotting分析发现caspase-3被蛋白酶水解切断后形成的17 kU活性片段。使用caspase-3抑制剂30 min后,再经3 mmol/L腺苷作用48 h,肝癌细胞凋亡比例明显下降,抑制剂组与腺苷组比较,差异有显著性(P<0.05)。结论:在腺苷诱导肝癌细胞凋亡过程中caspase-3被活化,caspase-8和-9没有被活化,caspase-3可能参与了腺苷诱导的HepG2肝癌细胞凋亡。     

caspase-3-RNAi对阿尔茨海默病细胞的抗凋亡作用

目的:探讨caspase-3-RNAi对阿尔茨海默病(AD)细胞的抗凋亡作用。方法:NGF诱导PC12细胞为类神经细胞。随机分为对照组、模型组、caspase-3siRNA组。造模前24h转染。检测Caspase-3及细胞凋亡率。结果:模型组细胞凋亡率(30.33±9.10)%明显高于对照组(3.05±0.98)%,差异有统计学意义(P<0.01)。siRNA组(10.74±3.00)%明显低于模型组(P<0.01)。模型组的caspase-3阳性率(35.70±7.00)%明显高于对照组(8.10±2.15)%,差异有统计学意义(P<0.01)。siRNA组caspase-3阳性率(15.10±6.75)%明显低于模型组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:caspase-3-RNAi能有效地抑制阿尔茨海默病细胞凋亡。对Aβ毒性作用下的神经细胞损伤有一定的保护作用。     

Caspase-3在柔红霉素诱导的人视网膜色素上皮细胞凋亡中作用

目的　探讨天冬酰胺特异酶切的半胱氨酸蛋白酶(caspase)成员 caspase- 3在柔红霉素诱导的人视网膜色素上皮 (RPE)细胞凋亡中的变化 .方法　原代培养的人 RPE细胞经 2 0 0μg· L- 1 柔红霉素诱导 8,2 4和 36 h后 ,按照 caspase- 3荧光检测试剂盒说明处理细胞 ,再通过荧光比色法间接检测细胞碎片中 caspase- 3的活性 .结果　正常 caspase- 3的活性为(0 .0 94± 0 .0 0 5 ) nmol AFC,8h后增加为 (0 .44 6± 0 .0 2 9)nm ol AFC,2 4h后为 (0 .75 4± 0 .0 5 6 ) nmol AFC,36 h又下降到 (0 .486± 0 .0 33) nmol AFC,但都高于正常水平 (P<0 .0 1) .加入特异性四肽抑制物 DEVD- CHO1μL 后活性为 (0 .0 40±0 .0 0 3) nm ol AFC,显著低于正常 (P<0 .0 1) .结论　 Caspase-3参与了柔红霉素诱导的人视网膜色素上皮细胞的凋亡 ,柔红霉素可使其活性增加 .     

新生大鼠缺氧缺血对脑皮质Fas-L影响的实验研究

目的:探讨缺氧缺血脑损伤对新生大鼠HIBD脑皮质Fas-L蛋白表达的影响以及有关分子机制。方法:建立HIBD动物模型后分为实验组、假手术组,根据检测需要,在缺氧缺血后24h、3d、7d应用免疫组化SP法测定脑皮质Fas-L蛋白表达情况。结果:左脑皮质Fas-L蛋白表达阳性率假手术组、实验组24h依次为8.04±3.50、120.20±6.10;3d依次为8.20±3.10,87.6±5.90;7d依次为8.01±2.80、8.32±2.90,实验组与假手术组比较,7d(P>0.05),无显著差异;24h、3d明显增多,差异显著(P<0.05)。结论:新生大鼠HIBD后24h,3d、7d结扎侧脑皮质Fas-L蛋白开始表达增高,后降低。     

银杏叶提取物对百草枯致PC12细胞损伤的保护作用及机制

目的探讨百草枯(PQ)对PC12细胞的损伤作用,观测银杏叶提取物(EGB761)对该损伤的保护作用并探讨其作用机制.方法MTT比色试验检测细胞活性;乳酸脱氢酶(LDH)测定细胞损伤程度;流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡;caspase-3免疫细胞化学染色观察细胞凋亡.结果40mg/L EGB761对300μmol/LPQ作用于PC12细胞24h,具有一定的保护作用;EGB761可明显抑制PQ诱导的PC12细胞LDH的释放(0.25±0.01)(与PQ组比较,P<0.05);EGB761可降低PC12细胞的凋亡百分率,PQ组凋亡百分率为66.7%,使用EGB761保护后凋亡百分率降为17.1%;并可减少PQ诱导的PC12细胞caspase-3过度表达.结论EGB761可减轻PQ诱导的PC12细胞损伤和凋亡,该作用可能与抑制caspase-3蛋白酶的激活有关.     

高压氧对HIBD新生大鼠凋亡的影响

目的利用新生大鼠HIBD动物模型,观察HIBD后不同时间caspase-3（半胱氨酸蛋白酶3）的表达变化,TUNEL检测的凋亡灰度值的变化,探讨HBO与细胞凋亡的关系。方法7日龄大鼠,根据实验设计,观察caspase-3的表达和TUNEL测定凋亡灰度值的变化。结果凋亡灰度值和caspase-3的表达均于HIBD后24h达高峰,72h仍有少量表达。高压氧使凋亡减轻。结论HBO稳压30min和60min均可能通过抑制凋亡发挥神经保护作用。     

大鼠脊髓进行性压迫性损伤半胱氨酸蛋白水解酶-12表达与细胞凋亡

目的探讨大鼠脊髓进行性压迫损伤细胞凋亡、半胱氨酸蛋白水解酶（caspase-12）表达变化规律及其关系。方法随机选用健康成年Wistar大鼠120只,分为两组：手术组和对照组各60只,每个时间点各10只,按白行设计的方法作脊髓压迫模型;对照组,仅做脊髓显露。分别于术后1、3、7、14、21、28d观察脊髓受压后细胞凋亡及caspase-12的表达变化系。结果在各压迫组神经细胞出现凋亡,凋亡的发生率在1、3、7、14、21、28d分别为12．5％±2．3％、13．0％±3．6％、17．2％±4．3％、29．4％±4．4％、36．1％±6．5％、2．3％±7．9％,并伴随caspase-12的表达增强而增加,14、21、28d组间比较差异有统计学意义（均P〈0．05）。结论caspase-12可能参与了脊髓进行性压迫缺血所致的细胞凋亡。     

大剂量甲基强的松龙对创伤性脑损伤后神经细胞凋亡的影响

目的探讨大剂量甲基强的松龙对创伤性脑损伤后神经细胞凋亡的影响。方法SD大鼠70只,随机分为单纯脑损伤组（A组）和脑损伤后应用大剂量甲基强的松龙组（B组）,每组35只。Feeney法致伤,B组伤后静脉注射大剂量甲基强的松龙30mg/kg,分别在伤后1、6、24h和2、3、7、14d处死,每组采集伤灶皮层下白质,应用原位缺口末端标记法（TUNEL）检测神经细胞凋亡的变化,免疫组化ABC法检测caspase-3蛋白的表达。结果A、B两组中均发现凋亡细胞和caspase-3阳性表达。伤后2d达峰值时,A、B两组TNUEL阳性凋亡神经细胞数分别为41.54±9.93和20.44±7.09,caspase-3阳性细胞数分别为29.03±4.56和15.77±3.04。两组比较,差异均有高度统计学意义（P〈0.01）。结论创伤性脑损伤可导致神经细胞凋亡;大剂量甲基强的松龙能抑制细胞凋亡。     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

正常增殖期子宫内膜细胞增生状态的定量观察

以＾３氢－胸腺嘧啶核苷放射自显影法及ＨＥ染色，观察并分别测定了１８例正常子宫内膜增殖中期，１５例增殖晚期的腺上皮细胞或间质细胞的标记指数、分裂指数。结果显示：子宫内膜增殖晚期腺上皮细胞或间质细胞之ＬＩ均明显高于增殖中期。同时，增殖晚间质细胞之ＭＩ也明显高于增殖中期，即此两种细胞在增殖晚期中增生明显，其增生状态初步获得了定位定量测定的正常值。     

人工全髋关节置换术的手术配合

目的：介绍人工全髋关节置换术的手术配合做法;方法：主要在手术配合的六个方面,解决防感染、防栓塞等问题。结果：30例人工全髋关节置换术均获成功,结论：手术配合是护士责任心和基本功的全面体现,对提高手术效果有至关重要的影响。     

尿微量白蛋白检测在继发性肾脏疾病中的临床意义

目的探讨尿微量白蛋白（m-Alb）检测在继发性肾脏疾病中的临床意义。方法采用Beckman Immage全自动特种蛋白分析仪对糖尿病组、高血压组、心脏病组患者进行了m-Alb测定,同时与健康组结果作对比。结果m-Alb检测糖尿病组为3.7±5.26mg/dl,高血压组为7.5±8.18mg/dl,心脏病组为7.8±3.76mg/dl,健康组为0.66±0.48mg/dl,各试验组m-Alb增高百分率为糖尿病组48.9%,高血压组37.5%,心脏病组26.9%。结论尿蛋白阴性的糖尿病、高血压、心脏病患者进行m-Alb检测,可以监测病程的进展。     

尿液pH值对红细胞检验影响的探讨

[目的 ]通过尿液 pH值对红细胞检验影响的观察 ,更加科学、准确地诊断血尿和血红蛋白尿。[方法 ]采用干化学分析仪检测和尿液显微镜红细胞计数 ,观察 180例正常人尿标本加入正常人血标本后 ,不同 pH值 ,不同时间内 ,观察红细胞溶解情况。 [结果 ]pH <5 .5以下时 ,随着时间的延长 ,红细胞溶解现象明显。 1h后观察有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;2h后有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。[结论 ]pH <5 .5时对红细胞计数影响较大 ,易致红细胞发生溶解现象 ,出现假性血红蛋白尿 ,对血尿和血红蛋白尿很难区分 ,给临床诊断造成不便 ,更易引起漏诊和误诊。     

80例局限性银屑病误诊原因分析

本文报告80例局限于小腿或手或足的银屑病。均经皮肤组织病理检查确诊。因部位比较特殊。受多种理化因素影响,使皮疹形态发生轻重程度不同的变化,常看不到典型损害,因而误诊为神经性皮炎,湿疹,慢性皮炎及癣等。作者对误诊原因进行了分析后,提出了鉴别诊断方法。     

腰椎间盘突出症再次手术的原因分析

目的解决腰椎间盘突出症手术中神经压迫。方法对1980～1998年再手术资料进行统计分析,讨论分析再手术原因,再次手术前影像学检查,观察病理变化以确定再手术方法。结果对11例随访6个月～1年,优7例(68．4％),良3例(36．8％),差1例(2．8％)。结论初次手术前详细查体和分析X线片,术中用导尿管和神经剥离探查,尽量避免髓核遗留,手术范围不宜太大,尽量减少对软组织和脊柱结构的破坏,避免形成硬膜囊与神经根粘连而致单纯形疤痕。