鱼藤酮致帕金森大鼠的脑黑质中凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达改变

目的 研究鱼藤酮致帕金森病(PD)大鼠中脑黑质凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达的改变.方法 Wistar大鼠每日颈背部皮下注射鱼藤酮2 mg(kg·d) (3～6周)造模,依据所建立的评分体系记录动物行为变化,在行为学有记分并停止给鱼藤酮4、10 d时,中脑黑质病理切片免疫组化染色比较黑质区域Bcl-2、Bax的表达. 结果在有行为学记分4 d时,记4分和8分的大鼠中脑黑质Bcl-2表达均显著减少;所有PD大鼠中脑黑质Bax表达均显著增加;Bcl-2/Bax比率均显著减少;有记分4 d时,行为学记分与Bcl-2/Bax比值成负相关性. 结论细胞凋亡参与了鱼藤酮帕金森模型大鼠黑质多巴胺神经细胞的损伤.     

重度肥胖病人的淋巴细胞线粒体呼吸链中复合酶体的变化

目的：研究重度肥胖病人淋巴细胞线粒体呼吸链的功能。方法：测定５９例重度肥胖女性（肥胖组，体重指数为４９．６±１．７，年龄为４１．１±１．１岁）与６０例正常体重女性（对照组，体重指数为２２．５±０．６，年龄为４４．１±１．６岁）的淋巴细胞线粒体呼吸链中第三对复合酶体－辅酶Ｑ细胞色素ｃ氧化还原酶（ＣⅢ）的活性及酶动力学分析。结果：肥胖组ＣⅢ的活性显著高于对照组（Ｐ＜０．０１），以Ｍｉｃｈａｅｌｉｓ－Ｍｅｎｔｏｎ酶动力学方法分折，肥胖组ＣⅢ的最大反应速率（Ｖｍａｘ）及米氏常数（Ｋｍ）均显著高于对照组（Ｐ＜０．０１）。结论：肥胖病人淋巴细胞线粒体呼吸链中电子流量增加伴复合酶体的效率下降，可能导致线粒体中自由基产生的增加．各种疾病的发病率增加。     

过表达线粒体铁蛋白对鱼藤酮致果蝇帕金森模型的保护作用

目的:帕金森病(Parkinson's disease,PD)是一种多发生于中年以上患者黑质纹状体通路的神经退行性疾病,以黑质多巴胺能神经元变性缺失和路易小体形成为病理特征,一些神经毒剂如鱼藤酮(Rotenone)和6-羟多巴胺(6-OHDA)等可以在一些实验模型中模拟这一病理过程。大量资料显示,PD患者脑组织铁含量显著增高。线粒体铁蛋白(mitochondrial ferritin,FtM t)是一种定位于线粒体的蛋白质,具有亚铁氧化酶活性,可将有毒性的二价铁氧化而降低氧化损伤,此外FtM t还可以储存过量的铁。已有研究结果表明,过表达FtM t在6-羟多巴胺(6-OHDA)诱导的细胞PD模型中具有保护作用。而本实验的目的在于探究FtM t对鱼藤酮诱导的果蝇帕金森模型是否具有保护作用。方法:将过表达线粒体铁蛋白果蝇(Fer3HCH Over Expression,Fer3HCH OE)和野生型(W1118)果蝇成虫进行自身对照和两两对照。挑取羽化12 h以内的雄性和雌性成虫,随机分组,分别饲养于普通玉米培养基和添加了500mM ol/L鱼藤酮的培养基中,连续饲养30 d,每天统计死亡率;每3 d进行一次抗重力攀爬实验(Climbing assey)测定。结果:培养在500mM ol/L鱼藤酮培养基中的两种果蝇攀爬能力都有所下降,且均在第6天开始出现明显下降。而线粒体铁蛋白过表达果蝇,攀爬能力受到鱼藤酮影响不能在18s内爬上6cm的果蝇所占的百分比小于野生型果蝇,且具有较低的死亡率。取连续饲喂鱼藤酮第14 d的果蝇,提取头部蛋白,进行Western blot检测酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)水平,可以看出,不论是雄性还是雌性,线粒体铁蛋白过表达的果蝇TH的含量都高于野生型果蝇,即表明其体内多巴胺能神经元活性受到鱼藤酮损伤较小。结论:过表达的线粒体铁蛋白有可能对鱼藤酮致黑腹果蝇的PD模型具有一定的保护作用。其机制可能是通过调节细胞内铁的平衡,抑制Fenton反应,从而减少活性氧的生成,抑制凋亡信号通路上促凋亡蛋白的表达,从而起到对细胞的保护作用。     

鱼藤酮帕金森大鼠多脑区铁积聚与胶质细胞激活

【摘要】目的 观察鱼藤酮帕金森病（PD）大鼠铁积聚脑区胶质细胞是否激活。方法 雄性Wistar大鼠予颈背部皮下注射鱼藤酮（2mg/kg）葵花油乳化液,每日一次,连续注射4到6周制备PD模型,8周时做冰冻切片,行免疫组化染色观察PD大鼠铁积聚脑区小胶质细胞（OX42）和星形胶质细胞（GFAP）。结果 PD大鼠黑质致密部、海马齿状回颗粒细胞层、纹状体苍白球、小脑齿状-间位核及小脑面神经核中铁染色显著积聚区域内小胶质细胞和星形胶质细胞染色积分光密度值较正常组明显增加(P＜0.05)。结论 鱼藤酮PD大鼠铁积聚脑区小胶质细胞、星型胶质细胞均呈激活状态。     

呼吸链酶复合体Ⅰ研究进展

上世纪80年代,首次报道线粒体肌病和Leber视神经病患者线粒体DNA有突变,提示此疾病患者线粒体呼吸链有缺失,拉开了线粒体呼吸链缺失与疾病关系研究的序幕.现已发现100多种疾病(包括成人和儿童)与线粒体呼吸链缺失有密切关系.呼吸链酶复合体Ⅰ是线粒体呼吸链上第1个蛋白复合物,是线粒体呼吸第1个门户,在维持线粒体功能方面起中枢作用.有研究发现呼吸链酶复合体Ⅰ缺失不仅存在于帕金森等老年疾病,而且是神经变性疾病儿童阶段发病的动因[1].     

辅酶Q10和复方丹参对心肌线粒体呼吸链的保护作用

目的 制备异丙基肾上腺素对心肌损伤模型。探讨辅酶Ｑ１０和复方丹参对心肌线粒体呼吸链的保护作用。方法 采用Ｉｎ－ｃｈｅｏｌ Ｋｉｍ法和Ｌｕｃｉｌｅ－Ｓｍｉｔｈ法分别测定对照组,异丙肾损伤组,丹参保护组和辅酶Ｑ１０保护组的琥珀酸脱氢酶比活力、心肌线粒体辅酶Ｑ１０含量等多项指标。结果 复方丹参组和辅酶Ｑ１０组心肌线粒体琥珀酸脱氢酶比活力,心肌线粒体辅酶Ｑ１０含量都显著高于异丙肾组。结论 辅酶Ｑ１０和复方丹参对心肌线粒体呼吸链有明显地保护作用。     

大鼠脑线粒体呼吸功能测定的方法探讨

大鼠脑线粒体呼吸功能测定的方法探讨Ａｎａｐｐｒｏａｃｈｔｏｍｅａｓｕｒｅｔｈｅｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｉｓｏｌａｔｅｄｃｅｒｅｂｒａｌｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｉｎｒａｔｓ李露斯，郑彩梅（第三军医大学西南医院神经内科）６３００３８关键...     

烧伤焦痂毒性物质提取物D1对大鼠肝线粒体呼吸链的损害

本文报告烧伤焦痂提取物中可溶于有机溶剂组分Ｄ１对大鼠肝线粒体功能及呼吸链的损害作用。结果表明第３态呼吸受Ｄ１抑制，第４态受Ｄ１刺激而增高，耗氧率变化与Ｄ１用量之间存在着显著的量效关系。低剂量时耗氧率的改变缓慢，高剂量时耗氧率的变化急剧。这个转折点在Ｄ１浓度为１ｍｇ／ｍｌ处。氰化羰酰－３－氟苯腙（ＦＣＣＰ）／第４态耗氧率比值随Ｄ１浓度增加而下降，磷酸化位点１底物与位点２底物的实验结果相似，在Ｄ１浓度     

低氧调节大鼠骨骼肌线粒体呼吸链复合体非协同性表达

目的观察慢性低氧时大鼠线粒体呼吸链复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ蛋白表达变化并讨论其病理生理学意义。方法成年雄性Wistar大鼠随机分为慢性低氧(4500m,30d)组和对照组,取双侧腓肠肌,分离线粒体,用Clark氧电极法检测线粒体Ⅲ态呼吸(state3,ST3)、Ⅳ态呼吸(state4,ST4)和呼吸控制率(respiratory control ratio,RCR),用Western blot检测线粒体呼吸链复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ蛋白的表达。结果慢性低氧组大鼠腓肠肌线粒体ST3和RCR显著低于对照组(P<0.05)。慢性低氧组大鼠腓肠肌线粒体复合体Ⅰ30×103亚基、复合体Ⅱ70×103亚基、复合体Ⅴα亚基蛋白表达量显著低对照组(P<0.05)。2组线粒体ST4和复合体Ⅲ核心亚基2蛋白表达无显著性差异(P>0.05)。结论低氧可调节大鼠骨骼机线粒体复合体蛋白非协同性表达,导致线粒体氧化磷酸化功能下降。     

呼吸链酶活性与子痫前期的关系

目的探讨呼吸链酶活性改变与子痫前期的关系。方法采用酶组织化学方法对11例轻度子痫前期患者,8例重度子痫前期患者及9例正常妊娠孕妇的胎盘绒毛组织中呼吸链酶活性进行测定。结果重度子痫前期患者胎盘绒毛组织中细胞色素C氧化酶及腺苷三磷酸酶的活性比正常妊娠孕妇低(P＜0．05),辅酶I黄递酶、葡萄糖6磷酸酶、碱性磷酸酶的活性在三组间差异无统计学意义(P＞0．05)。结论呼吸链酶活性降低可能是子痫前期的发病机制之一。     

帕金森病模型大鼠结肠电-机械活动的改变

目的探讨帕金森病(Parkinson’s disease,PD)大鼠模型结肠功能紊乱与结肠电-机械活动、神经型一氧化氮合酶(nNOS)和胃肠调节肽之间的关系。方法以6-羟多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)诱导制备实验性帕金森病大鼠模型,并用左旋多巴(levodopa)处理正常大鼠和模型鼠,记录其结肠电-机械活动,观察PD和左旋多巴对结肠电-机械活动的影响。采用免疫组织化学方法观察结肠肌间神经丛nNOS和血管活性肠肽(VIP)以及酪氨酸羟化酶(TH)的变化,并用Western blotting法定量检测TH在结肠肌间神经丛的表达。结果1)与正常对照组比较,未接受左旋多巴治疗的PD组大鼠模型的结肠慢波峰值频率明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),正常慢波百分比明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),运动平均振幅明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。2)与正常对照组比较,左旋多巴组结肠慢波峰值频率呈增高趋势,但差异无统计学意义,运动峰值频率明显增高,差异有统计学意义(P<0.05)。3)与正常对照组比较,PD+左旋多巴组运动峰值频率明显增高,差异有统计学意义(P<0.05),运动平均振幅明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),正常慢波百分比明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。4)PD组和PD+左旋多巴组结肠肌间神经丛表达nNOS的神经元个数明显增加(P<0.05),灰度值明显降低(P<0.05)。5)各组结肠黏膜下神经丛VIP未发现有异常改变。6)PD组TH染色阳性的神经元显著减少,差异有统计学意义(P<0.05),TH的蛋白表达降低。结论NO能神经元可能参与PD结肠活动的抑制过程,而VIP能神经元可能并未参与PD结肠活动的调节。PD还可能造成胃肠道多巴胺能神经元的缺陷,多巴胺能神经元减少对于PD结肠功能障碍也可能起一定作用。     

帕金森病模型大鼠丘脑底核神经元电生理活动的研究

目的：建立6-羟多巴胺（6-OHDA）诱导的帕金森病（Parkinson＇s disease,PD）大鼠模型,研究丘脑底核（subthalamicnucleus,STN）神经元电生理活动的改变,探讨PD的病理生理学机制。方法：采用立体定向技术将6-0HDA两点法注入大鼠左侧黑质致密部（substantia nigra pars compacta,SNc）建立帕金森病大鼠模型,对诱发成功的大鼠模型和对照组均采用玻璃微电极细胞外记录法记录STN神经元放电。结果：分别观察和分析了对照组大鼠STN中的20个神经元和PD组大鼠STN中的37个神经元。两组神经元的放电频率无显著差异（P〉0．05）。但PD组大鼠STN神经元中爆发放电的神经元多于对照组,而不规则放电的神经元少于对照组（P〈0．05）。结论：PD状态下STN神经元放电频率与对照组无显著差异,但放电形式发生了改变,爆发放电的神经元显著增多,说明STN神经元的活动增强。     

6-羟多巴胺诱导帕金森病大鼠模型行为学评价方法的探讨

目的：复制类帕金森病（Parkinson's disease,PD）大鼠模型并根据行为学检查结果对此模型进行较为全面的评价,以建立治疗此疾病的新型实验平台。方法：运用6-羟多巴胺（6-hydroxydopamine）单点定向注射黑质-纹状体的方法,损毁SD大鼠左侧中脑多巴胺能神经元,动物术后3周腹腔注射（ip）阿扑吗啡（apomorphine,APO）观察是否诱导动物向健侧旋转行为,复制PD模型。分别应用转棒实验和旷场实验分析测定动物的运动功能,应用肌电测试实验测定大鼠的震颤频率和幅度,并据此对动物模型进行评价和分类。结果：造模后,部分大鼠转棒实验在棒时间显著缩短,旷场实验横向跨格次数减少,出现运动功能障碍;肌电检测结果显示部分大鼠肌肉震颤频率和幅度均增加。结论：行为学测试为PD动物模型的评价以及进行不同类型的分组提供了实验依据。     

左旋多巴诱发异动症6-羟基多巴帕金森病大鼠模型的建立及行为学评价

目的应用左旋多巴（L-DOPA）建立帕金森病（PD）大鼠异动症模型,对其行为学进行评价。方法对25只SD大鼠右内侧前脑束注射6-羟基多巴（6-OHDA）建立PD大鼠模型,两周后行阿朴吗啡（1mg/kg）皮下注射,将成功PD大鼠模型随机分成两组,分别予生理盐水（NS）45mg/kg和L-DOPA（25mg/kg＋6.25mg/kg苄丝肼）腹腔注射,2次/d,共治疗21d,在治疗第2、9、11、18、21d进行前肢功能测定、异常不自主运动（AIM）评分和旋转反应时间测定。结果 20只建模成功的PD大鼠模型中,10只给以生理盐水（NS）治疗,另10只给以L-DOPA治疗。NS组治疗前后前肢跨步数无明显差异（P〉0.05）,治疗期间始终未出现AIM;L-DOPA治疗组后前肢跨步数较治疗前显著增加（P〈0.01）,8只出现不同程度的AIM表现,并随治疗时间的延长,AIM评分逐渐升高,第21dAIM总分较第2d增加（P〈0.05）,旋转反应时间随治疗时间的延长而缩短,第18、21d和第2d相比,显著缩短（P〈0.05）。结论 L-DOPA诱发6-OHDA的PD大鼠AIM与PD患者服用美多巴出现的异动症某些方面相似,为研究异动症提供了理想的模型。     

代谢型谷氨酸受体5拮抗剂对临床早期帕金森病模型大鼠行为变化的影响及神经保护作用

目的 探讨代谢型谷氨酸受体5(mGluR5)拮抗剂6-甲基-2-苯基吡啶(MPEP)对黑质-纹状体通路部分损伤的帕金森病(PD)大鼠行为活动的影响及神经保护作用.方法 雄性SD大鼠37只随机分为假手术组(11只)、生理盐水组(15只)和MPEP治疗组(11只).生理盐水组和MPEP组内侧前脑柬(MFB)注射6-羟多巴胺...     

还原型谷胱甘肽合用粉防己碱对帕金森病大鼠脑线粒体酶复合体I及活性氧的影响

目的 观察还原型谷胱甘肽(GSH)合用粉防己碱(Tet)对帕金森病(PD)大鼠氧化应激水平的影响并探讨其作用机制.方法 应用6-羟基多巴立体定向注射制作PD大鼠模型,将成功大鼠模型随机分为模型组、GSH组、GSH Tet组、左旋多巴组,另设正常对照组,给药50d后测定鼠脑黑质线粒体酶复合体I活性及纹状体活性氧(ROS)含量.结果 GSH Tet对PD大鼠黑质线粒体酶复合体I有保护作用,GSH Tet能明显降低PD大鼠纹状体活性氧(ROS)水平.结论 GSH Tet能减轻PD大鼠黑质及纹状体氧化应激损伤,并对线粒体呼吸链有一定保护作用.     

呼吸训练治疗帕金森病吞咽障碍的疗效

目的探讨呼吸训练对帕金森病(PD)患者吞咽障碍的治疗作用。方法选择2017年12月至2019年2月在徐州医科大学附属医院神经内科住院及门诊的PD吞咽障碍患者50例。依据治疗方法不同分为呼吸训练组和对照组,每组25例。两组患者均给予常规药物治疗和饮食指导,呼吸训练组在此基础上予以吹口琴式呼吸功能训练(类似缩唇呼吸),每日3次,每次20 min。两组患者治疗前和治疗4周后分别接受洼田饮水试验、吞咽造影检查(VFSS)评估吞咽功能,测量第一秒用力呼气量(FEV_1)、用力肺活量(FVC)、呼气流量峰值(PEF)进行呼吸功能评估。结果治疗4周后,呼吸训练组总有效率为88. 0%(22/25),对照组为0,呼吸训练组临床疗效优于对照组(P <0. 01)。治疗4周后,呼吸训练组患者洼田饮水试验评分和VFSS评分低于治疗前(P <0. 01),对照组洼田饮水试验评分和VFSS评分均高于治疗前(P <0. 01);治疗4周后,呼吸训练组患者洼田饮水试验评分和VFSS评分低于对照组[(2. 20±0. 76)分比(3. 68±0. 56)分,(3. 12±1. 45)分比(6. 12±1. 83)分](P <0. 01)。治疗4周后,呼吸训练组患者FEV_1、FVC、PEF较治疗前显著提高(P <0. 05);对照组患者FEV_1、FVC、PEF均低于治疗前(P <0. 05);治疗4周后,呼吸训练组FEV_1、FVC、PEF高于对照组[(1. 55±0. 45) L比(1. 25±0. 44) L,(1. 93±0. 64) L比(1. 47±0. 55) L,(2. 56±0. 92) L/s比(1. 95±0. 61) L/s](P <0. 05)。结论呼吸训练能通过提高PD患者的呼吸功能改善吞咽功能,为PD吞咽功能障碍患者提供了一个有效的康复训练方法。     

Mitochondrial DNA Haplogroups and the Risk of Sporadic Parkinson's Disease in Han Chinese

Background:

Mitochondrial dysfunction is linked to the pathogenesis of Parkinson''s disease (PD). However, the precise role of mitochondrial DNA (mtDNA) variations is obscure. On the other hand, mtDNA haplogroups have been inconsistently reported to modify the risk of PD among different population. Here, we try to explore the relationship between mtDNA haplogroups and sporadic PD in a Han Chinese population.

Methods:

Nine single-nucleotide polymorphisms, which define the major Asian mtDNA haplogroups (A, B, C, D, F, G), were detected via polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism or denaturing polyacrylamide gel electrophoresis in 279 sporadic PD patients and 510 matched controls of Han population.

Results:

Overall, the distribution of mtDNA haplogroups did not show any significant differences between patients and controls. However, after stratification by age at onset, the frequency of haplogroup B was significantly lower in patients with early-onset PD (EOPD) compared to the controls (odds ratio [OR] =0.225, 95% confidence interval [CI]: 0.082–0.619, P = 0.004), while other haplogroups did not show significant differences. After stratification by age at examination, among subjects younger than 50 years of age: Haplogroup B also showed a lower frequency in PD cases (OR = 0.146, 95% CI: 0.030–0.715, P = 0.018) while haplogroup D presented a higher risk of PD (OR = 3.579, 95% CI: 1.112–11.523, P = 0.033), other haplogroups also did not show significant differences in the group.

Conclusions:

Our study indicates that haplogroup B might confer a lower risk for EOPD and people younger than 50 years in Han Chinese, while haplogroup D probably lead a higher risk of PD in people younger than 50 years of age. In brief, particular Asian mtDNA haplogroups likely play a role in the pathogenesis of PD among Han Chinese.