净肠茶的致突变作用研究

本文通过小鼠显性致死试验及小鼠骨髓多染红细胞微核试验的检测,观察了灌胃给予净肠茶有无致突变潜在毒性。结果表明,在本试验剂量范围内,观测到净肠茶对小鼠生殖细胞、骨髓多染红细胞无致突变作用。     

胃炎冲剂的致畸试验

研究结果表明:给大鼠连续ig 10d,180g(生药),Kg/天,对其生育力和胚胎发育无影响。     

谷参肠安胶囊长期毒性试验

本文报告谷参肠安胶囊大鼠长期毒性试验,结果表明,谷参肠安胶囊对动物的一般状况,体重增长、外周血象、肝肾功能及病理组织学检查等未见明显毒性。     

PGLC对小鼠致畸实验研究

观察了乙交酯-L-丙交酯-ε-己内酯三元无规共聚物材料(PGLC)对昆明种小鼠孕期和胎鼠的影响。结果表明，PGLCA组(1000mg／kg)、B组(500mg／kg)、C组(250mg／kg)各组孕鼠和胎鼠各项指标与阴性对照组(c^-，PBS液每日0．5ml／鼠)差异无显性(P＞0．05)，与阳性对照组(c^ ，CP，14mg／kg)差异有高度显性(P＜0．01)。PGLC剂量在1000～250mg／kg范围内对小鼠生殖能力和胎鼠发育无明显影响。PGLC作为植入体内的长效药物载体无生殖毒性作用。     

盐酸小檗碱慢性毒性实验

目的研究小檗碱的慢性毒性反应。方法在急性毒性试验中,给予大鼠不同小檗碱剂量测试小檗碱的半数致死量(LD50)和最大耐受剂量。慢性毒性试验中,给予大鼠0.25,0.5,1g/(kg·d)连续给药12周,然后观察大鼠生长发育、血液学、生化、脏器指数和脏器形态学变化。结果急性毒性试验中,大鼠给予最大灌胃剂量3000mg/kg后未见大鼠死亡,半数致死量和最大耐受量未检出。慢性毒性试验中,与对照组大鼠相比,除中、高剂量组大鼠存在稀便现象外,各剂量组大鼠在行为学,血液学、生化、脏器指数等方面均无显著差异。结论小檗碱对大鼠没有明显的急慢性毒性,可连续安全口服。     

环磷酰胺对SD大鼠的致畸作用及其致神经管畸形形态发生的观察

本实验选用雌性SD大鼠,妊娠第13天腹腔注射环磷酰胺(15mg/kg体重),分別于给药后4、8、12、24、48小时及妊娠第20天剖腹取胎,进行大体形态、光镜和透射电镜观察。结果显示环磷酰胺有明显的胚胎毒作用和致畸作用(致畸率为97.46％),神经管畸形较常见。在光镜下可见给药后8小时,神经上皮细胞开始变性、死亡,最早受影响的部位是端脑和后脑神经上皮的套层;给药后24小时损伤最重,范围广泛。电镜观察见线粒体、内质网等细胞器肿胀、溶解;单位膜模糊;细胞核固缩,电子密度增高。受损区域可见许多髓样小体、空泡、残余体等,神经管周围的间充质细胞排列紊乱,细胞死亡伴间质水肿。给药后48小时,吞噬细胞清除坏死组织并留下较大间隙。上述结果提示,环磷酰胺主要作用于DNA合成活跃的神经上皮细胞,并使其变性、死亡,还可引起线粒体等细胞超微结构的破坏;并能损伤神经管周围的间充质,干扰骨的发生过程。     

被动吸烟对胚胎致畸作用的研究和致畸动物模型的建立

目的探讨被动吸烟对胚胎的致畸作用,并建立一个理想的被动吸烟致畸的动物模型方法采用自制的半封闭式被动吸烟染毒箱,对不同孕期的金黄地鼠以不同时间及不同剂量的分组组合,给予烟熏处理后,进行致畸效果的观察分别计数各组孕鼠的胚胎植入数活胎、吸收胎、死胎及致畸率,并进行统计学分析。结果被动吸烟对胚胎有明显的致畸作用(χ2=86.23,P<0.05或P<0.01),孕6、7、8d期间,每日3次,共6h的烟熏,其致畸率最高,为41.6%,吸收胎数相对较低,活胎平均体重最低。结论孕6、7、8d的金黄地鼠,每日3次,共6h的烟熏,致畸率高,吸收率较低,可产生严重的畸形,是一个比较理想的被动吸烟致畸动物模型。     

以连续浸提法研究铜宫内节育器的大鼠致畸敏感期生殖毒性

背景:铜宫内节育器是目前中国常用的宫腔内植入避孕三类医疗器械,在长期植入后意外怀孕或停止使用后短期内怀孕的情况下,是否对胚胎或胎儿有影响尚无明确结论。目的:通过观察大鼠致畸敏感期尾静脉注射铜宫内节育器浸提液对孕鼠和胎鼠的影响,评价铜宫内节育器的安全性。方法:将60只雌性妊娠SD大鼠随机均分为对照组、高剂量组、中剂量组与低剂量组,高、中、低剂量组从妊娠的第1天开始分别尾静脉注射浸提比例为0.2,0.1,0.05 g/mL的铜宫内节育器浸提液,每日注射量是0.01 mL/g,对照组给予同体积的生理盐水,连续注射20 d。20 d后处死孕鼠,测量体质量,检查两侧子宫和内脏器官,分离胎鼠,记录子宫与胎鼠质量、黄体数、着床数、死胎、活胎和吸收胎等;记录胎鼠体质量、身长、尾长、枕骨骨化程度及外观、骨骼、内脏的异常情况。结果与结论:高、中、低剂量组的窝数、着床数、活胎数、黄体数、活胎率、死胎率、子宫连胎质量、吸收胎数与对照组比较差异无显著性意义(P0.05),各组孕鼠内脏无畸形及异常。高、中、低剂量组胎鼠身长、尾长、体质量、上枕骨骨化率与对照组比较差异无显著性意义(P0.05),胎鼠外观、骨骼、内脏无畸形及异常。表明在致畸敏感期大鼠静脉注射铜宫内节育器浸提液后,未见母体毒性、胚胎生长发育异常及胎鼠畸形及其他胚胎毒性。     

环磷酰胺对不同等级SD大鼠胚胎骨骼发育的影响

目的观察环磷酰胺对SPF级、普通级SD大鼠胚胎骨骼发育的影响。方法采用SD大鼠致畸实验方法。分组：SPF级孕鼠22只为A组（A1、A2组,每组11只）,普通级孕鼠20只为B组（B1、B2组,每组10只）。A1、B1组于孕第13天腹腔注射生理盐水1ml/100g bw 1次,A2、B2组于孕第13天腹腔注射环磷酰胺12.5mg/kg bw 1次。各组孕鼠第18天麻醉、解剖、取出胚胎,测量胚胎的基本发育指标,通过骨骼双染法对部分胚胎进行各部骨发育情况观察。结果 SPF级、普通级两大组在胚胎整体发育中除胚胎体重在2个NS组间有差异（P〈0.01）外,其余各项指标仅在两大组内的NS组与CP组间之间有显著性差异（P〈0.01）。在胚胎骨骼发育中胸骨节骨化点仅在SPF级组内的NS、CP组间之间有差异（P〈0.01）外,枕骨评分、胸骨节数、尾椎数及全部四肢长骨骨化长度均在SPF级、普通级两大组内的NS组与CP组间之间均有显著性差异（P〈0.01）,而所有组别的肋骨数、颈椎数、胸椎数、腰椎数、荐骨数均无差异（P〉0.05）。结论本实验条件下NS组胚胎的胎盘重量与胸骨骨化点数在SPF级比普通级发育的要早一点,其它指标及环磷酰胺诱导下的胚胎发育情况在两大组（A、B）之间基本一致。建议致畸实验尽可能选用SPF级SD大鼠。     

三聚氰胺亚慢性毒性实验研究

目的研究三聚氰胺亚慢性染毒对大鼠的毒性作用。方法 SD大鼠140只,雌雄各半,随机分为4组,每组各28只。给药组以三聚氰胺0.25、0.5、1.0 g/kg进行大鼠灌胃,空白对照组给予4 ml/kg生理盐水溶液灌胃,给药30 d,停药后恢复观察15 d,分别在实验的第30、45天末取血及主要脏器,观察三聚氰胺对大鼠生长、组织病理变化、血常规、血液生化指标的影响。结果三聚氰胺对SD大鼠生长没有明显的影响,血常规指标检查结果均在正常范围内;给药末期及恢复期,0.5 g/kg组、1.0 g/kg组大鼠肾脏、膀胱质量及脏器系数高于空白对照组,差异有统计学意义（P〈0.01）;0.5 g/kg、1.0 g/kg组大鼠BUN、CRE、UA含量均较高,差异有统计学意义（P〈0.05）;1.0 g/kg组,肾组织间质有大量炎细胞浸润,肾小管变性、坏死,肾剖面可见大量放射状结晶。给药末期0.5 g/kg组、1.0 g/kg组尿潜血阳性率与空白对照组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论三聚氰胺对SD大鼠有亚慢性毒性作用,毒性作用的主要靶器官是肾、膀胱,亚慢性染毒可严重损伤肾功能,对大鼠造成的损伤在短期内不可逆,有迟发性毒性作用。     

肠神经元及肠胶质细胞在肠易激综合征不同亚型中的意义及替加色罗干预的作用

为了探讨肠神经元及肠胶质细胞在肠易激综合征(IBS)不同亚型发病中的意义及替加色罗干预的作用,将45只成年雄性SD大鼠随机分为5组:(1)腹泻型IBS组(D-IBS组):采用乙酸灌肠和束缚应激的方法造成D-IBS动物模型;(2)便秘型C-IBS组(C-IBS组):采用每日冰水灌胃(连续14d)的方法造成C-IBS动物模型;(3)替加色罗干预的D-IBS组:D-IBS动物模型鼠同时加用替加色罗2mg/kg每日灌胃,共7d;(4)替加色罗干预的C-IBS组:C-IBS动物模型鼠在第8d加用替加色罗2mg/kg每日灌胃,共7d;(5)空白对照组。各组动物在存活一定时间后被处死,并用蛋白基因产物9.5(PGP9.5)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的免疫组化方法,检测各组大鼠肠肌间神经丛的肠神经元及肠胶质细胞数量的变化。实验结果显示:各组大鼠肠肌间神经丛内肠胶质细胞的数目差别无统计学意义(F=0.50,P>0.05)。D-IBS组(8.54±2.46)和C-IBS组(8.88±3.00)大鼠肠肌间神经丛内每mm的肠神经元数目显著低于对照组(12.80±2.54,P<0.05);而替加色罗干预的C-IBS组(11.91±3.70)、替加色罗干预的D-IBS组(12.00±3.16)与对照组比较无统计学差异(P>0.05)。本研究结果表明,肠肌间神经丛内肠神经元数量的减少可能是D-IBS和C-IBS发病的共同机制;替加色罗在恢复D-IBS和C-IBS肠神经元可塑性方面发挥一定的作用。     

复合脂质体对大鼠肠缺血再灌注保护作用的研究

目的:探讨人工合成的富含L-精氨酸、亚硒酸钠、牛磺酸的复合脂质体对抗大鼠肠缺血再灌注损伤的作用及机制。方法:Wistar大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组(I/R)、缺血前给药组和再灌时给药组。夹闭大鼠肠系膜上动脉(SMA)60min造成缺血,松夹即为再灌注,再灌注2h后分别测定各组肠组织丙二醛(MDA)含量、T-SOD活性及Ca²⁺-Mg²⁺-ATP酶活性,并观察各组肠组织超微结构及bcl-2蛋白的表达情况。结果:缺血前给药组和再灌时给药组MDA含量均明显低于缺血再灌注组(P＜0.01),T-SOD和Ca²⁺-Mg²⁺-ATPase活性均明显高于缺血再灌注组(P＜0.01),bcl-2蛋白在正常组适当表达,在缺血再灌注组不表达,而缺血前给药组和再灌时给药组均表达强阳性(P＜0.01),且两用药组间各项指标比较无明显差异(P＞0.05)。结论:复合脂质体可能通过抑制脂质过氧化、稳定内环境、诱导bcl-2蛋白的高表达以阻止肠组织细胞凋亡的发生等机制对抗肠缺血再灌注损伤。     

谷氨酰胺全肠外营养对短肠大鼠消化器的影响——Ⅰ.小肠、胃和结肠的形态学研究

研究采用35只雄性Wistar大鼠,手术建成短肠大鼠全肠外营养模型,分为饮食、常规全肠外营养、2%谷氨酰胺-全肠外营养和正常组,持续8天静脉输液或喂养后,采用光镜、电镜和图像分析等方法,对残留小肠、胃和结肠进行形态学观察和相关指标的测定,结果提示:2%谷氨酰胺-全肠外营养组残留小肠的绒毛高度、隐窝深度、粘膜及肠壁全层厚度均明显大于常规全肠外营养组,饮食组的各组相关指标,均明显大于其它各组.透射电镜观察:2%谷氨酰胺-全肠外营养组小肠上皮细胞的微绒毛明显高于常规全肠外营养组,饮食组小肠上皮细胞的微绒毛明显高于其它各组.并且2%谷氨酰胺-全肠外营养组胃和结肠粘膜和全层厚度均明显大于常规全肠外营养组,饮食组胃的相关指标明显大于其它各组.研究证明:含2%谷氨酰胺的静脉营养液可防止短肠大鼠残留小肠|胃和结肠粘膜的萎缩,饮食刺激是胃肠道粘膜生长的重要因素.     

大鼠肠肌丛胆碱酯酶和亮氨酸脑啡肽双染法研究

应用酶组织化学和免疫组织化学双染法,对大鼠肠肌丛内胆碱酯酶阳性和亮氨酸脑啡肽神经元进行了研究.在同一张标本上同时显示胆碱酯酶阳性和亮氨酸脑啡肽神经元,后者用二盐酸联苯胺作显色剂.结果观察到三种不同染色的神经元:(1)胆碱酯酶阳性神经元;(2)亮氨酸脑啡肽单染神经元;(3)胆碱酯酶-亮氨酸脑啡肽双染神经元.并同时统计了30个肌间神经节,发现平均每个肌间神经节含这三种神经元的数目依次为8.33,0.07和2.40.以上结果提示亮氨酸脑啡肽可以与乙酰胆碱共存于经典的胆碱能神经元.本文还对大鼠肠肌丛内.胆碱能神经元的类型及其与脑啡肽神经元之间的关系进行了讨论.     

槲皮素增强肠易激综合征模型大鼠肠屏障功能的实验研究

目的：探讨槲皮素（Que）改善肠易激综合征（IBS）模型大鼠结肠上皮屏障功能的机制。方法：选择出生后2d的新生SD乳大鼠100只,随机分为对照组20只和模型组80只。模型组采用新生期乳大鼠母源性分离（NMS）联合醋酸（AA）灌肠法制作IBS模型（NMS＋AA）。造模结束后4～5周,选择满足条件的雄性幼鼠作为研究对象。其中对照组随机选择8只（生理盐水,10ml／kg）;模型组在造模成功者中随机选分成4组,即盐水组（10ml／kg）、培菲康组（210mg／只,含活菌数0．1×10。CFU）、Que低剂量组（50mg／kg）和Que高剂量组（200mg／kg）,每组8只。各组均予相应药物灌胃处理,每天1次,连续2周。采用腹壁撤退反射（AWR）评分评估结肠敏感性,”Cr—EDTA检测全消化道通透性,HE染色法检测结肠粘膜炎症细胞浸润,ELISA法检测结肠细胞因子TNF-a水平,Westernblot法检测结肠上皮紧密连接蛋白（TJs）occludin和claudin-l的表达。结果：采用NMS＋AA法可制作IBS大鼠模型,造模成功率达86．3％。模型鼠内脏敏感性提高,结肠通透性增加,大量炎细胞浸润远端结肠粘膜固有层,TNF-a含量增加,claudin-1和occludin表达下降。Que在结、直肠扩张（CRD）一定压力范围内可降低模型鼠的内脏敏感性（AWR评分降低）（P〈0．05）;高剂量Que可降低模型鼠全消化道通透性（P〈0．05）,减少结肠粘膜炎细胞的浸润水平和TNF-a含量（尸〈0．05）,并上调结肠claudin-1和occludin的表达（P〈0．05）。结论：采用NMS＋AA法可成功制作内脏高敏感伴结肠通透性增加的IBS大鼠模型。Que可通过调节IBS模型大鼠细胞因子TNF-a的含量和紧密连接蛋白claudin-1、occludin的表达,减少结肠粘膜炎症,降低消化道通透性,进而增强肠屏障功能,并可改善IBS模型大鼠的痛觉过敏。     

大鼠肠黏膜微血管内皮细胞的体外培养

目的培养大鼠肠黏膜微血管内皮细胞,为内皮细胞的体外研究提供实验材料。方法利用机械吹打法和酶消化法分别分离出肠绒毛固有层,采用植块培养法培养原代内皮细胞,依次以局部消化法和差速黏附法进行纯化,细胞鉴定采用第Ⅷ因子相关抗原免疫荧光检测和硝酸银染色。结果成功分离培养出大鼠的肠黏膜微血管内皮细胞,纯化后的细胞可传到18代以上。结论为肠黏膜微血管内皮细胞的体外培养建立了一种操作简单、成本低廉的方法。     

山楂代用茶对大鼠经口急性毒性实验

目的 通过大鼠经口急性毒性动物实验评价山楂代用茶的安全性。方法 选择20只SD大鼠,随机分为实验组和对照组,各10只（雌雄各半）,实验组给予山楂代用茶最大浓度0.3 g/ml、3 ml/只、2次/d灌胃,对照组给予生理盐水3 ml/只、2次/d灌胃,连续观察7 d。比较两组大鼠一般情况、有无死亡、血液生化、脏器系数及病理组织。结果 ①一般情况:两组大鼠排尿、粪便、活动度均正常,两组第1、3、5、7 天进食量及体重比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）;②两组均无大鼠死亡;③血液生化指标:两组ALT、AST、AST/ALT、TP、ALB、GLO、TBIL、ALP、Urea、UA及Crea比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）;④大体解剖:解剖后肉眼观察到两组心、肝、肾、肺体积、颜色、质地均无异常。脏器系数结果显示,两组雌性、雄性大鼠心、肝、脾、肺、肾系数比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）,且皆符合相应月龄大鼠的脏器系数;⑤病理观察:两组肝脏均正常,仅见肝细胞中央汇管区有少量的炎细胞浸润;两组肾小管结构正常,皮髓质分界清,肾小管上皮、淋巴细胞未见病理性改变。结论 山楂代用茶对大鼠的日累积剂量为临床成人（按 60 kg计算）拟推荐日用剂量的108倍,在此剂量下大鼠一般情况、血液生化指标、肝脏、肾脏的病理组织均无毒性反应,提示山楂代用茶对小鼠无急性毒性作用。     

腹腔镜胆肠吻合术的动物实验和临床应用研究

目的　探索腹腔镜胆囊空肠吻合术的技术可行性和微创治疗效果 .方法　选取中型猪 10只 ,在腹腔镜下或腹腔镜辅助下行胆囊空肠吻合术 .术前术后监测肝功能 ,包括转氨酶、转肽酶、碱性磷酸酶等 ,术后监测体重变化 ;术后半个月处死动物 ,了解吻合口的大小及愈合情况 .5例晚期胰腺癌经腹腔镜和腹腔镜超声探查分期后行腹腔镜胆囊空肠吻合及胃空肠吻合术 ,其中 3例采用吻合器、2例行手工缝合完成手术 .结果　动物实验组 2例在腹腔镜辅助下行胆囊空肠吻合术及空肠Braun’s吻合术 .第 1例因术中未行气管插管而致术中缺氧 ,手术完成后 4小时死亡 .8例行腹腔镜胆囊空肠吻合术 ,手术历时 12 0～ 180分钟 ,平均 15 0分钟 .存活动物术前术后肝功能各项指标无明显变化 (p>0 .0 5 ) ,术后猪只的体重增加与正常猪相仿 .处死动物后检查胆肠吻合直径介于 17mm± 3.5mm ,空肠Braun’s吻合口直径为 2 2mm± 4 .2mm ,吻合口生长良好 ,未见吻合瘘 .5例病人腹腔镜手术均顺利完成 ,平均手术时间12 0分钟 ,平均住院 7天 ,无腹腔镜手术并发症 ,平均随访 8个月生存良好 .结论　腹腔镜胆肠吻合术或其辅助下的胆肠吻合术技术安全可行 ,可作为不能手术切除的晚期胰腺肿瘤有效的微创姑息治疗新途径