SGO-7901和MGC-803肿瘤干细胞中不同分子标志表达的观察

目的:探讨ABCG2、CD133、CK20、CyclinB1和DNA-PKcs在SGC-7901和MGC-803细胞SP(side population)亚群中的表达,探讨其为胃癌干细胞(cancer stem cell)标志的可行性.方法:用Hoe-chest33342染色检测胃癌细胞SGC-7901和MGC-803中SP细胞的比例;通过荧光免疫细胞化学染色比较ABCG2、CD133、CK20、Cyclin B1和DNA-PKcs在SP细胞与非SP细胞中表达的差异.结果:经Hoechst 33342和荧光免疫细胞化学染色显示,SGC-7901细胞中SP细胞占3.8%;SP细胞中ABCG2和CK20表达阳性的细胞比率显著低于非SP细胞,P<0.05;CD133、Cyclin B1和DNA-PKcs在SP细胞和非SP细胞中的表达差异无统计学意义,P0.05.经Hoechst33342和荧光免疫细胞化学染色显示,MGC-803细胞中SP细胞占2.9%;SP细胞中Cyclin B1的阳性表达率显著高于非SP细胞中的(P<0.05),但ABCG2、CD133、CK20及DNA-Pkes的阳性表达率显著低于非SP细胞中的,P<0.05.结论:CK20-/Cyclin B1+或CD133+可能是胃癌干细胞的特异性分子标志,而单项ABCG2、CD133、Cyclin B1及DNA-PKcs在鉴定胃癌千细胞时无特异性.     

Id2在SGC-7901和Colo-205肿瘤干细胞相关亚群中表达的研究

目的:探讨Id2(inhibitor of DNA binding or inhibitor of differentiation)在SGC-7901 和Colo-205细胞株中小亚群(side population, SP)细胞中的表达,并鉴定其是否为胃肠道癌干样细胞的特异性标志.方法:用Hoechest33342染色检测SGC-7901和Colo-205 细胞株中SP细胞的比例;通过荧光免疫细胞化学染色比较Id2在SP细胞与非SP细胞中表达的差异.结果:胃癌SGC-7901 、结肠癌Colo-205细胞中SP细胞的比例分别为3.8%和4.3%;Id2在SGC-7901 细胞SP中的阳性表达率为34.2%,显著低于在非SP中的阳性表达率97.7%,P<0.001,而Id2在Colo-205细胞 SP中的阳性表达率达77.4%,显著高于在非SP中的阳性表达率4.8%,P<0.001.结论:Id2可能是胃癌SGC-7901细胞中SP细胞的阴性分子标志,同时可能是结肠癌Colo-205细胞中SP细胞的阳性分子标志.     

Id2在SGC-7901和Colo-205肿瘤干细胞相关亚群中表达的研究

目的：探讨Id2（inhibitor of DNA binding or inhibitor of dmerentiation）在SGC-7901和Colo-205细胞株中小亚群（side population，SP）细胞中的表达，并鉴定其是否为胃肠道癌干样细胞的特异性标志。方法：用Hoechest33342染色检测SGC-7901和Colo-205细胞株中SP细胞的比例；通过荧光免疫细胞化学染色比较Id2在SP细胞与非SP细胞中表达的差异。结果：胃癌SGC-7901、结肠癌Colo-205细胞中SP细胞的比例分别为3．8％和4．3％；Id2在sGC-7901细胞SP中的阳性表达率为34．2％，显著低于在非SP中的阳性表达率97．7％，P〈0．001，而Id2在Colo-205细胞SP中的阳性表达率达77．4％，显著高于在非SP中的阳性表达率4．8％，P〈0．001。结论：Id2可能是胃癌SGC-7901细胞中SP细胞的阴性分子标志，同时可能是结肠癌Colo-205细胞中SP细胞的阳性分子标志。     

ABCG2及CD133在体内外不同分化胃癌中的表达水平研究

目的 研究ABCG2及CD133两种待定肿瘤干细胞标志物的表达与不同分化胃腺癌的数量关系。方法 (1)在78例人胃腺癌组织中以免疫荧光法检测ABCG2和CD133的表达;(2)以流式细胞技术对未分化胃癌细胞系HGC-27、低分化胃癌细胞系BGC-823及中-低分化胃腺癌细胞系SGC-7901中ABCG2、CD133的表达进行测定;(3)用上述三种细胞系建立裸鼠胃壁移植成瘤模型,采用免疫荧光染色的方法对体内环境下ABCG2和CD133在移植瘤中的表达情况进行检测。结果 (1)ABCG2和CD133的表达均与肿瘤分化程度相关。在人胃腺癌标本中,两种标志物的表达随着胃癌恶性程度的增加而增加,分化越差的胃癌ABCG2、CD133表达水平越高;并且根据Lauren分型,CD133在人弥散型胃癌中的表达高于肠型胃癌;(2)未分化细胞系HGC-27中ABCG2和CD133的表达要比中-低分化细胞系高;(3)三种胃癌细胞移植鼠模型中移植瘤组织ABCG2和CD133表达水平与人胃癌组织和不同分化胃癌细胞系的表达水平相似,低分化胃癌细胞株HGC-27移植瘤ABCG2、CD133表达水平最高。结论 肿瘤干细胞标志物ABCG2和CD133在不同分化胃癌中的表达有差异,且低分化胃癌其肿瘤干细胞标志物表达水平较高。     

干细胞标志物在卵巢癌SKOV3细胞侧群细胞中的表达

目的：检测干细胞相关标志物在卵巢癌SKOV3细胞系侧群（side population,SP）细胞和非侧群（Non-SP）细胞中的表达差异,确定卵巢癌干细胞特异性标志物。 方法： Hoechst 33342染色检测SKOV3细胞中SP细胞的比例,流式细胞术检测SKOV3细胞的SP和Non-SP细胞中干细胞标志物CD133、CD117、CD44、ABCG2、ALDH1 的表达情况,荧光定量PCR检测SP和Non-SP细胞中 ABCG2、ALDH2、NANOG、OCT4、SOX2、CD133、CD117 mRNA的表达水平。 结果： SKOV3细胞中SP细胞比例为(1.56±0.35)%。 ALDH1、ABCG2在SP细胞中表达率分别为（87.3±5.76）%、（29.48±4.43）%,在Non-SP的表达率分别为（5.32±0.47）%、（3.01±1.69）%,差异有统计学意义（ P <0.01）;CD44在这两种细胞亚群中的表达率均高于99%（ P >005）;CD133、CD117在这两种细胞亚群中均不表达。 ALDH1、ABCG2、 NANOG、OCT4和SOX2 mRNA在SP细胞中的表达分别是Non-SP细胞的21.03倍（ P =0.001）、3.14倍（ P =0.001）、23.94倍（ P =0.001）、10.73倍（ P =0.009）和21.46倍( P =0001), CD133、CD117 mRNA在两种细胞亚群中均不表达。 结论： 人卵巢癌细胞株SKOV3中存在SP细胞亚群, ALDH1、ABCG2和NANOG、OCT4、SOX2 mRNA可能是卵巢癌干细胞标志物,为诊断及治疗卵巢癌提供了潜在的靶点。     

胃癌细胞外泌体调控M2型巨噬细胞极化及对胃癌细胞增殖和迁移的影响

目的:探究胃癌细胞外泌体调控M2型巨噬细胞极化及对胃癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法:差速离心法提取胃黏膜上皮细胞GES-1和胃癌细胞株MGC-803、SGC-7901外泌体,透射电镜和Western blot鉴定外泌体,将U937细胞与PMA共孵育诱导U937细胞分化为巨噬细胞的同时分别与PBS、GES-1 exo、MGC-803 exo、SGC-7901 exo、IL-4孵育48 h,流式细胞术检测孵育后各组细胞CD206和HLA-DR表达,qRT-PCR检测CCL17、CXCL8、IL-10、TGF-β、TNF-α、IL-6、IL-1β表达,Western blot检测p-NF-κB、NF-κB、IκBα表达水平,将各组诱导后的U937细胞与MGC-803、SGC-7901共培养后,收集MGC-803、SGC-7901细胞,MTT检测各组细胞的增殖能力,Transwell小室法检测各组细胞的迁移能力。结果:差速离心法提取的外泌体符合外泌体的形态特征,并且在激光共聚焦显微镜下观察到外泌体可被U937细胞摄取,与MGC-803 exo、SGC-7901 exo共孵育后的U937细胞CD206显著高表达,HLA-DR低表达（P＜0.05）,CCL17、CXCL8、IL-10、TGF-β表达显著上调（P＜0.05）,TNF-α、IL-6、IL-1β表达显著下调（P＜0.05）,NF-κB磷酸化水平显著增加（P＜0.05）,IκBα表达显著增加（P＜0.05）,并且与MGC-803 exo、SGC-7901 exo诱导极化后的巨噬细胞共培养组MGC-803、SGC-7901细胞增殖和迁移能力显著增强（P＜0.05）。结论:胃癌细胞能够通过激活NF-κB信号通路促进M2型巨噬细胞极化进而诱导MGC-803、SGC-7901细胞增殖和迁移能力的增强。     

4-1BB基因在不同分化胃癌细胞株中的表达

目的：研究共刺激因子4-1BB在人胃高分化腺癌细胞株MKN-28、人胃中分化腺癌细胞株SGC-7901、人胃低分化腺癌细胞株BGC-823、人胃粘液腺癌细胞株MGC-803中的表达及其生物学意义。方法：用RT-PCR法测定胃癌细胞株中4-1BB mRNA表达;免疫细胞化学法测定胃癌细胞株中4-1BB蛋白表达;MTT法测定人淋巴细胞对胃癌细胞的体外杀伤活性;ELISA法检测人淋巴细胞与胃癌细胞共培养上清液中IL-2、IL-10、TNF-α的含量。结果：RT-PCR结果示4-1BB mRNA表达率从高到低依次为：MGC-803（77.30%）、BGC-823（71.68%）、SGC-7901（40.06%）、MKN-28（37.65%）。免疫细胞化学结果显示4-1BB着色程度由深到浅依次为：MGC-803、BGC-823、SGC-7901、MKN-28。MTT结果显示各时间段（24、48、72h）不同效靶比（10∶1,20∶1,40,∶1）下,人淋巴细胞对胃癌细胞的体外杀伤活性由高到低的顺序为：MKN-28、SGC-7901、BGC-823、MGC-803。ELISA结果显示在各效靶细胞比下,人淋巴细胞与胃癌细胞共培养上清液中IL-2、TNF-α的含量由高到低的顺序均为：MKN-28、SGC-7901、BGC-823、MGC-803。而IL-10的含量由高到低的顺序为：MGC-803、BGC-823、SGC-7901、MKN-28。结论：人胃癌细胞株MKN-28、SGC-7901、BGC-823、MGC-803中4-1BB基因的mRNA和蛋白均有表达,且胃癌细胞株的恶性程度越高其4-1BB表达水平越高;淋巴细胞对低表达4-1BB胃癌细胞的杀伤力较高;提示4-1BB可能通过抑制细胞因子TNF-α、IL-2和促进细胞因子IL-10的产生调节肿瘤免疫。     

低氧对人胃癌SGC7901细胞株SP细胞比例影响及其与HIF-2α和ABCG2表达相关性的分析

目的:通过观察低氧对SGC7901细胞株SP细胞的影响及其与HIF-2α和ABCG2表达变化的关系,初步探讨低氧对肿瘤干细胞的影响及机制。方法:用氯化钴(CoCl2)创建低氧模型。Hoechst33342染色法检测SP细胞比例,免疫荧光细胞化学法检测ABCG2在SP和非SP细胞中的表达,免疫细胞化学法检测HIF-2α和ABCG2蛋白的表达,RT-PCR法检测ABCG2mRNA的表达。结果:SP细胞比例为2.36%,低氧诱导后其比例逐渐增加,P<0.05。ABCG2在SP细胞中的表达明显高于非SP细胞(P<0.01),低氧诱导后在SP细胞和非SP细胞中的表达均增强(P值均<0.01),且在SP细胞中的表达高于非SP细胞,P<0.01。低氧诱导后HIF-2α、ABCG2蛋白及ABCG2mRNA的表达较常氧组明显增强(P值均<0.01),且HIF-2α与ABCG2蛋白表达呈高度正相关(n=4,r=0.893,P<0.05)。结论:低氧能促进SGC7901细胞株SP细胞比例的增加,其机制可能与低氧激活HIF-2-αABCG2通路的表达,促进肿瘤细胞的干细胞化及维持干细胞的未分化状态有关。     

结肠癌Colo205细胞系SP细胞分子标志的初步观察

目的：寻找结肠癌Colo205细胞株中SP（side population）亚群细胞的特异性分子标志。方法：结肠癌Colo205细胞经Hoechest33342染色处理后固定,后续PI复染对其中的SP细胞进行定位,并通过荧光免疫细胞化学染色比较SP细胞与非SP细胞在DNA-PKcs、p16、FHIT、NF-κB／p65及Id2中表达的异同。结果：结肠癌Colo205细胞中Ho—echst33342低染的SP细胞比例的均数为7％;结肠癌Colo205 SP细胞的胞核体积较大,呈圆形或椭圆形,符合干细胞的形态学特点;SP细胞DNA—PKcs表达定位于整个胞核,而非SP细胞定位于核膜及其邻近核质。SP细胞DNA—PKcs表达的阳性强度明显高于非SP细胞;SP细胞Id2表达的阳性强度明显高于非SP细胞;SP细胞的p16表达的阳性强度明显低于非SP细胞;SP细胞FHIT的表达为阴性或微弱阳性;SP细胞NFκB／p65表达的阳性强度明显低于非SP细胞。结论：DNA-PKcs和Id2可能为结肠癌Colo205细胞中SP细胞的阳性分子标志,而p16、NF-κB／p65和FHIT可能为结肠癌SP细胞的阴性分子标志。     

香加皮杠柳苷联用TRAIL对胃癌SGC-7901和MGC-803细胞的作用及其机制

目的:探讨香加皮杠柳苷(cortex periplocae,CPP)联用肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand,TRAIL)对胃癌细胞的作用及其机制.方法:人胃癌细胞系SGC-7901、MGC-803培养完成后,采用50、100、200 ng/ml的CPP和1μg/ml的TRAIL单用或联合处理.MTS法检测SGC-7901和MGC-803细胞的增殖情况,流式细胞术检测其凋亡率,Westcm boltting检测pro-BID、Mcl-l、cleaved caspase-3、DR4、DR5的表达水平.结果:SGC-7901和MGC-803细胞经CPP (50、100、200 ng/ml)和TRAIL(1 μg/ml)联合处理24 h后,细胞增殖率明显低于空白对照组和对应的CPP各剂量单独处理组(/＜0.05或P＜0.01).SGC-7901和MGC-803细胞凋亡率均明显高于空白对照组和对应的CPP各剂量单独处理组(P＜0.05或P＜0.01).SGC-7901和MGC-803细胞中pro-BID、Mcl-1表达水平明显降低(均P＜0.05),cleaved caspase-3表达水平明显升高(P＜0.05),DR4和DR5受体的表达水平升高(均P＜0.05).结论:CPP协同TRAIL可明显诱导人胃癌SGC-7901和MGC-803细胞凋亡,增强人胃癌细胞对TRAIL的敏感性.     

人胆囊癌SP细胞的分离及其干细胞标记物的表达*

目的:探索在人胆囊癌GBC-SD 细胞系中是否存在具有干细胞特性的SP细胞（side population cells）,以及SP细胞、非SP细胞和GBC-SD 细胞系表达常见干细胞标记物ABCG2、Oct- 4、CD34的情况。方法:采用荧光激活细胞分选技术（FACS）分选出人胆囊癌SP细胞和非SP细胞,通过RT-PCR、Western blot、流式细胞术以及免疫荧光化学技术检测SP细胞、非SP细胞以及GBC-SD 细胞系表达ABCG2、Oct- 4 和CD34的情况。结果:人胆囊癌GBC-SD 细胞系中存在着少量的具有干细胞潜能的SP细胞,其所占的比例为（0.64± 0.08）% ,SP细胞相对于非SP细胞和GBC-SD 细胞,具有更强的体外侵袭力（P<0.05）;并且ABCG2 在胆囊癌SP细胞中呈现出高表达的状态（89.56±3.86）% ,在非SP细胞中几乎不表达（1.32± 0.49）% ,在未分选胆囊癌细胞系中ABCG2 呈弱表达（12.37± 1.61）% ,P=0.001;Oct- 4 在三种细胞中的表达分别为:（94.87± 1.40）% 、（88.16± 2.34）% 、（90.17± 1.61）% ,P>0.05;CD34在mRNA水平高表达于非SP细胞和GBC-SD 细胞,不表达于SP细胞;在蛋白水平几乎均不表达于这三种细胞,其含量依次为:（1.78± 0.51）% 、（0.63± 0.21）% 、（0.96± 0.38）% ,P>0.05。结论:人胆囊癌GBC-SD 细胞系中存在具有干细胞特性的SP细胞,并且具有ABCG2+Oct- 4+CD34-的表型特征。      

CD133和巢蛋白阳性细胞在脑胶质瘤中的表达及分布特征

目的：探讨脑肿瘤干细胞标记物CD133、巢蛋白（Nestin）和CD34标记的微血管密度（CD34-MVD）在人脑胶质瘤中的表达情况,分析三者的关系及其意义。方法：应用免疫组化方法分析62例人脑胶质瘤中的CD133、Nestin和CD34-MVD的表达情况。结果：脑肿瘤干细胞标记物CD133、Nestin在正常脑组织中未见表达,在低级别脑胶质瘤中低表达,在高级别脑胶质瘤中高表达,各组之间表达有显著性差异（P〈0．05）。CD133表达与Nestin表达之间有相关性,两者呈正相关（P〈0．05）。CD133、Nestin均阳性染色组的CD34-MVD值高于两者均阴性组（P〈0．01）。结论：CD133和Nestin表达呈正相关性,两者与人脑胶质瘤的病理分级呈正相关,与CD34-MVD在分布及数量上存在相关性。     

人骨肉瘤细胞MG-63侧群细胞的分离及耐药性研究

 目的 分选人骨肉瘤细胞MG-63中的侧群（side population,SP）细胞,并探讨SP细胞对化疗药物耐药的机制。方法 以流式细胞术仪检测、分选经DNA染料Hoechst 33342染色后MG-63中的SP细胞,采用CCK-8法检测顺铂对SP细胞与非侧群（non-SP）细胞的抑制率,并计算半数抑制浓度（IC₅₀）。荧光定量 PCＲ法检测SP细胞和non-SP细胞中 MRP、XRCC1、MGMT、ABCG2 mＲNA 的表达水平。结果 MG-63 细胞在细胞密度为9×10⁵个/ml、 Hoechst 33342 终质量浓度为5 μg/ml 时,MG-63 SP 细胞的比例最稳定,为（1.45±0.23）%,且细胞保持良好的活性。顺铂对SP细胞的IC₅₀为11.608 μg/ml,对non-SP细胞的IC50为6.876 μg/ml,两者比较差异有统计学意义（P<0.05）。MRP、XRCC1 、MGMT 和ABCG2 mＲNA 在 SP细胞中的表达分别是non-SP 细胞的 1.58 倍、1.61倍、2.36倍和3.14倍（P<0.05）。 结论 人骨肉瘤MG-63细胞中存在SP细胞亚群,与non-SP细胞相比,SP细胞对顺铂的耐药性更为明显,可能与其耐药基因MRP、XRCC1 、MGMT、ABCG2 mRNA的高水平表达有关。     

hTERT启动子调控的CD：UPRT／5-FC自杀基因对人胃癌裸鼠移植瘤的抑制作用

目的：研究人端粒酶逆转录酶（hTERT）启动子调控的胞嘧啶脱氨酶：尿嘧啶磷酸核糖转移酶／5-氟胞嘧啶（CD：UPRT／5-FC）融合自杀基因系统在体内对人胃癌SGC7901细胞的杀伤作用。方法：构建胃癌皮下移植瘤模型,随机分成3组处理。观察30天,测量肿瘤体积,计算抑瘤率。肿瘤组织做常规病理检查,免疫组化检测CD蛋白的表达。结果：成功构建胃癌皮下移植瘤模型。治疗30天后,B组（瘤内注射hTERT—CD：UPRT＋腹腔注射PBS）和c组（单纯腹腔注射PBS）的肿瘤生长迅速,肿瘤体积分别为（2．72±0．35）cm’、（2．67-＇i-0．30）tin’,A组（瘤内注射hTERT—CD：UPRT＋腹腔注射5-Fc）的肿瘤生长受到明显抑制,第30天体积为（1．10±0．13）cm’,与前两组相比差异有统计学意义（P〈0．05）,其抑瘤率为59．6％。裸鼠移植瘤病理切片镜检,A组可见大量肿瘤细胞排列稀疏,部分肿瘤细胞核固缩、核碎裂;B组和C组则见大量肿瘤细胞排列紧密,细胞形态和细胞核呈多形性,核大深染,核分裂像多见。免疫组化显示,A组和B组可见CD的表达,C组cD表达呈阴性。结论：hTERT启动子调控的cD：UPRT／5-FC融合自杀基因系统对裸鼠胃癌皮下移植瘤有显著的杀伤作用,为胃癌的基因治疗提供了-种可能的方法。     

Side population in oral squamous cell carcinoma possesses tumor stem cell phenotypes

To characterize the biological features of side population (SP) in oral squamous cell carcinoma (OCC), SP and non-SP were sorted and compared. The SP cells were more clonogenic and in nude mice, only 10,000 SP cells were needed for tumor development compared to 1,000,000 non-SP cells. The SP cells expressed higher levels of ABCG2, ABCB1, CD44, Oct-4, Bmi-1, NSPc1 and CK19. The SP cells generated SP and non-SP populations, whereas the non-SP cells generated only non-SP. These findings provide the first evidence that SP in OCC possesses tumor stem cell phenotypes and may play an important role in OCC tumorigenesis.     

结直肠腺瘤OD133和p53表达及其临床病理意义

目的：探讨CD133蛋白和p53蛋白在结直肠腺瘤组织中的表达及其临床病理学意义。方法：运用免疫组化PV9000二步法检测CD133及p53在172例结直肠腺瘤及正常黏膜组织中的表达。结果：结直肠腺瘤CD133和p53的阳性率分别为40．7％和21．5％。CD133和p53的表达均与肿瘤的大小、病变程度及肿瘤组织学分型有关,P值均〈0．05。CD133和p53在结直肠腺瘤中的表达呈正相关,r=0．344,P〈0．05。CD133及p53在腺瘤组织中表达明显高于正常黏膜组织,P〈0．05。结论：CD133及p53在结直肠腺瘤的发生发展中起着重要作用,可能成为临床新的辅助诊断和监测预后的指标。     

异隐丹参酮对胃癌细胞增殖、周期和凋亡的影响

目的 探讨异隐丹参酮（ICTS）对胃癌BGC-823和SGC-7901细胞增殖、周期、凋亡的影响及可能机制。方法 体外培养胃癌细胞系BGC-823、SGC-7901,采用0、5、10、20 μmol／L ICTS处理24、48、72 h后, CCK-8法检测细胞的增殖抑制率;确定ICTS抑制BGC-823和SGC-7901细胞的最佳浓度和最佳作用时间后,流式细胞术检测其细胞周期和凋亡率。Western blotting检测ICTS处理后胃癌细胞中Cyclin D1、Bcl-2、p53、p21蛋白的表达。结果 0、5、10、20 μmol／L ICTS处理BGC-823细胞24 h的增殖抑制率分别为（0.789±0.048）％、（16.74±1.55）％、（33.58±2.26）％、（54.62±2.61）％,差异具有统计学意义（P＜0.05）;0、5、10、20 μmol／L ICTS 处理SGC-7901细胞24 h的增殖抑制率分别为（-0.184±0.023）％、（12.76±1.73）％、（32.95±2.47）％、（53.80±2.65）％,差异具有统计学意义（P＜0.05）。20 μmol／L ICTS 处理BGC-823细胞24、48、72 h的增殖抑制率分别为（54.62±2.61）％、（55.08±2.35）％、（59.72±2.53）％,差异无统计学意义（P＞0.05）;20 μmol／L ICTS 处理SGC-7901细胞24、48、72 h的增殖抑制率分别为（53.80±2.65）％、（55.76±2.47）％、（61.83±2.82）％,差异无统计学意义（P＞0.05）。20 μmol／L ICTS处理BGC-823、SGC-7901细胞24 h后G0／G1期细胞比例为（78.34±7.13）％和（79.57±7.34）％,均高于对照组,差异具有统计学意义（P＜0.05）。ICTS处理组BGC-823、SGC-7901凋亡率分别为（24.78±3.42）％和（28.76±4.21）％,均高于对照组,差异具有统计学意义（P＜0.05）。20 μmol／L ICTS处理BGC-823、SGC-7901细胞24 h后Cyclin D1和Bcl-2蛋白表达量均显著低于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;p53和p21蛋白表达量显著高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 ICTS通过增加p53、p21表达,降低Cyclin D1和Bcl-2表达,进而抑制细胞增殖,增加细胞G0／G1阻滞和凋亡,发挥抗胃癌的作用。     

内皮祖细胞作为干扰素基因载体的体外抑瘤实验

目的 研究用人骨髓诱导培养内皮祖细胞（EPCs）并以其作为免疫性基因载体治疗肿瘤的可行性。方法 采用梯度离心法从人骨髓中分离单个核细胞,加入人血管内皮生长因子(VEGF165）诱导培养,用流式细胞仪测定细胞表面标志CD133、KDR和CD34的表达情况。以增强型绿色荧光蛋白基因（EGFP）作为报告基因,用流式细胞仪检测携带EGFP基因的腺病毒载体（Ad-EGFP）对EPCs的感染效率。携带人干扰素γ（hγIFN）基因的腺病毒载体（Ad-hγIFN）感染EPCs（EPCs-hγIFN）,ELISA法检测细胞EPCs-hγIFN分泌 hγIFN的情况。将EPCs-hγIFN与肺癌细胞株H460、胃癌细胞株SGC7901、大肠癌细胞株LoVo混合培养,观察EPCs-hγIFN对肿瘤细胞的作用。结果 经过诱导培养2周后,贴壁的单核细胞开始表达CD133、KDR和CD34。Ad-EGFP的感染复数（MOI）为150pfu／EPCs时,感染率达90％以上。EPCs-hγIFN培养上清可以测得浓度稳定且高水平的hγIFN,第1天上清液中的hγIFN浓度为1305.28pg／ml,第14天为1419.10pg／ml。EPCs-hγIFN与H460、SGC7901、LoVo细胞株混合培养4天,肿瘤细胞的生长受到明显的抑制,肿瘤细胞存活率分别为（77.87 ± 6.50）％、（79.36 ± 4.35）％和（69.52 ± 3.78）％, 均显著低于对照组（P＜0.05）。结论携带hγIFN目的基因的腺病毒转染EPCs后基因表达情况良好,体外实验中表现为抑制肿瘤细胞的生长,可作为免疫性基因载体开展进一步的研究。     

CD133、Nestin在星形细胞肿瘤中的表达及与病理级别的关系

背景与目的：脑胶质瘤治疗效果一直不理想，这与脑胶质瘤中存在一部分肿瘤干细胞有关。本研究旨在探讨脑肿瘤干细胞标记物CDl33及Nestin在脑星形细胞肿瘤中的表达的临床意义。方法：采用免疫组织化学SP法检测CDl33、Nestin在127例脑星形细胞肿瘤组织中的表达。结果：（1）按照WH02000年的神经系统肿瘤分类分级标准所有标本分为I级15例，Ⅱ级42例，Ⅲ级42例，Ⅳ级28例。（2）脑肿瘤干细胞标记物在低级别星形细胞肿瘤中低表达，在高级别星形细胞肿瘤中高表达，在低级别和高级别之间表达有显著性差异（P=0．000）。（3）CDl33表达与Nestin表达之间有相关性，二者呈正相关（r=0．411，P=0．000）。（4）CDl33阳细胞性率与患者性别、年龄无关（P=0、136、P=0．412），Nestin的阳性细胞率与患者性别、年龄无关（P=0．412、P=0．153）。结论：CDl33及Nestin在低级别星形细胞瘤中低表达．在高级别星形细胞肿瘤中高表达。