重组葡激酶N端缺失突变体对纤溶酶原的激活作用

目的 比较重组葡激酶（ＳＡＫ）及其Ｎ端缺失突变体地纤溶酶原（ＰＬＧ）激活作用的酶动力学常数,探讨ＳＡＫＮ端结构与功能的关系,以进一步改造ＳＡＫ分子。方法 采用酶反应动力学方法结合生物传感器测定ＳＡＫ、△ＮＳＡＫ与ＰＬＧ、纤溶酶（ＰＬＭ）作用的动力学常数。结果 两者与ＰＬＭ形成的复合物催化ＰＬＧ的Ｋｍ值分别为６．２９、４．６μｍｏｌ／Ｌｍ,Ｋｃａｔ值分别为０．７２５ｓ＾－１、０．３１２ｓ＾－１;两者     

溶栓药APSAC的制备和鉴定

重组链激酶（ｒ－ＳＫ）由工程菌提取液经ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－２００柱纯化，比活性达１０５ＩＵ／ｍｇ，十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）显示分子量为７８．０２４７×１０－２４ｋｇ的一条带。人新鲜血浆经Ｌｙｓｉｎｅ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析，ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２５凝胶过滤制备纤溶酶原（ｐｌｇ），比活性达２３．７ＩＵ／ｍｇ，活性回收率为１３．６％，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示分子量为１４７．７４８９×１０－２４ｋｇ的一条带。对－茴香酸－对－脒基ｒ－ＳＫ和ｐｌｇ的混合物经苯酯盐酸盐（ＡＰＡＮ）修饰后制备茴香酰纤溶酶原链激酶激活剂复合物（ＡＰＳＡＣ），产物经Ｌ－ｌｙｓｉｎｅＳｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示分子量为７８．０２４７×１０－２４ｋｇ和１４７．７４８９×１０－２４ｋｇ两条带，其拟一级水解速率常数为１．２６×１０－４ｓｅｃ－１。体外溶栓实验证明其有溶栓活性。     

小剂量G—CSF对化疗引起的粒细胞减少症的治疗作用

应用小剂量（２μｇ／ｋｇ）粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）于１８例肺癌患者化疗中，以观察预防发生中性粒细胞减少症的疗效。其中小细胞肺癌５例，非小细胞肺癌１３例，随机分成Ｇ－ＣＳＦ组及对照组各９例，化疗方案为ＣＥ（卡铂－ＶＰ１６）。结果Ｇ－ＣＳＦ组粒细胞绝对计数（ＡＮＣ）＜２．０×１０９／Ｌ，发生例数５例，持续天数为３．６±３．５天；对照组持续天数１６．８±７．１天，Ｐ＜０．０５。ＡＮＣ最低值至恢复正常（ＡＮＣ＞２．０×１０９／Ｌ）的天数Ｇ－ＣＳＦ组及对照组分别为２．６±１．３天，８．９±５．３天（Ｐ＜０．０５）。Ｇ－ＣＳＦ组化疗后的第２０天ＡＮＣ均已恢复正常，ＡＮＣ为（９．７±６．８）×１０９／Ｌ故可在第２２天顺利接受第二周期化疗。对照组ＡＮＣ（１．６６±０．８）×１０９／Ｌ（Ｐ＜０．０１）。由此可见，小剂量Ｇ－ＣＳＦ能有效地防治肺癌化疗引起的粒细胞减少症     

消化系肿瘤细胞EGF受体放射分析与EGF的生长调节研究

为研究表皮生长因子（ＥＧＦ）受体功能性表达在消化系肿瘤细胞生长调节上的意义，建立了ＥＧＦ受体放射法，Ｌｉｎｄｍｏ生物活性分数分析显示自标记＾１２５Ｉ－ＥＧＦ具有高的生物活性，温度、时间效应分析确立４℃，３ｈ为最佳受体分析条件，一组消化系肿瘤细胞ＳＧＣ７９０１，ＫＡＴＯⅢ，ＭＫＮ４５，ＳＭＭＣ７７２１，ＨＴ２９的ＥＧＦ受体数目分别为（１．２３±０．４６）×１０＾５，（２．１３±０．６１）×１０＾５，     

细胞外基质及凝集素受体在胃癌细胞株的表达

应用免疫酶ＳＰ法和凝集素亲和组化技术对４株不同分化程度的胃癌细胞进行细胞外基质和凝集素受体的初步研究。结果显示：（１）ＦＮ染色：ＦＧＣ８５＞ＭＧＣ８０－３＞ＳＧＣ－７９０１＞ＭＫＮ２８。（２）ＬＮ染色：ＦＧＣ８５＜ＭＧＣ８０－３＜ＳＧＣ－７９０１＜ＭＫＮ２８。（３）ＰＮＡ染色：ＦＧＣ８５＝ＭＧＣ８０－３＞ＳＧＣ－７９０１＞ＭＫＮ２８。（４）ＰＨＡ染色无差异。提示ＦＮ，ＬＮ及ＰＮＡ受体的表达与细胞的分化程度密切相关。     

再生障碍性贫血治疗新动态

再生障碍性贫血（ＡＡ）在发展中国家较常见,病程冗长。重型ＡＡ（ＳＡＡ）和非常重型ＡＡ（ＶＳＡＡ）治疗困难,病死率高。ＳＡＡ定义：下述４项中有３项,持续３周以上：中性粒细胞＜０．５×１０９／Ｌ,血小板＜２０ ×１０９／Ｌ,网织红细胞＜１０×１０９／Ｌ,骨髓（ＢＭ）活检造血组织＜８０％。ＶＳＡＡ定义：中性粒细胞＜０．２× １０９／Ｌ,其余同 ＳＡＡ［１］。对ＳＡＡ的治疗,除了症状治疗,刺激ＢＭ造血等基本治疗外,治疗总的原则是通过干细胞移植取代ＢＭ中脂肪细胞;通过免疫抑制剂治疗（ＩＳ）终止淋巴细胞的攻击…     

安替可胶囊抗肿瘤作用的机理

目的：探讨安替可（Ａｎｔｉｋｅ）胶囊抗肿瘤的作用机理．方法：采用移植瘤模型、常规体液和细胞免疫测定、细胞毒结晶紫染色、比色及同位素参入等方法，观察Ａｎｔｉｋｅ及其组分蟾皮（ＳＴ）和当归（ＡＳＤ）的抗肿瘤作用、诱导ＴＮＦ、ＮＫＣ、ＩＬ－２活性、血中过氧化氢酶（ＣＡＴ）、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）和组织中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）含量及脾和瘤细胞中３Ｈ－ＵＲ参入ｃｐｍ等指标．结果：①Ａｎｔｉｋｅ，ＳＴ和ＡＳＤ及５－Ｆｕ对Ｈ２２移植瘤的瘤重抑制率分别为４５．０５％，４３．９５％，２７．７９％，５５．７９％（Ｐ＜０．０１）；②Ａｎｔｉｋｅ和ＡＳＤ诱导ＭΦ释放ＴＮＦ分别为２５９．０±４０．８和２１４．８±４３．５Ｕ·μｌ－１（Ｐ＜０．０１），ＮＫＣ杀伤率为７３．３９％，６７．４７％（Ｐ＜０．０１），显著增强ＩＬ－２活性（Ｐ＜０．０１），提高ＣＡＴ，ＧＳＨ－Ｐｘ和移植瘤中ＳＯＤ含量（Ｐ＜０．０１），显著降低瘤细胞ｃｐｍ（Ｐ＜０．０１）；③ＳＴ诱导ＭΦ释放ＴＮＦ为１７７．１±４２．９Ｕ·μｌ－１（Ｐ＜０．０１），ＮＫＣ杀伤率６７．７４％（Ｐ＜０．０１），增强ＩＬ－２活性；但对荷瘤小鼠血中ＣＡＴ，ＧＳＨ－Ｐｘ，ＳＯＤ     

人皮肤成纤维细胞纤连蛋白的纯化及其N-糖链结构

研究人皮肤成纤维细胞纤连蛋白及其片段 Ｎ－糖链结构。用明胶－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂ亲和柱纯化培养的人皮肤成纤维细胞所分泌的纤连蛋白（Ｆｎ），用胰糜蛋白酶限制性水解，获得明胶结合片段和肝素结合片段；用肼化的凝集素与经过碘酸氧化后的辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）缩合的方法制备 ４种 ＨＲＰ－凝集素（Ｃｏｎ Ａ， ＤＳＡ，ＷＧＡ，ＬＣＡ）探针，用Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ法检测明胶结合片段（Ｍｒ４３ × １０３）、肝素结合片段（Ｍｒ３０ ×１０３，２５ ×ｌ０３）在切除唾液酸及平分型 Ｎ－乙酰氨基葡萄糖（ＧＩｃＮＡｃ）前后的 Ｎ－糖链结构。结果： Ｆｎ的 Ｎ－糖链主要存在于 Ｍｒ分别为４３ × １０３、３０ ×１０３、２５ ×１０３的３个片段上，其结构为二、三（主要是Ｃ２Ｃ２６）或四天线的复杂型糖链；糖链末端连有唾液酸（ＳＡ）；都含有核心岩藻糖（ｃ－Ｆｕｃ；平分型 ＧｌｃＮＡｃ只存在于 ４３ × １０３片段所连的糖链中，而且很可能与 Ｃ—Ｆｕｃ共同存在于二天线或Ｃ２Ｃ２６三天线精链上；Ｆｎ的糖链中不含有Ｎ－乙酰乳糖胺重复顺序。结论：在Ｆｎ不同片段上均含有复杂型Ｎ糖链，并存在核心岩藻糖结构，平分型ＧｌｃＮＡｃ只存在于４３ ×１０３片段上。     

HGPRT基因突变技术在检测化学诱变剂中的应用

本研究用Ｎ－甲基Ｎ＇－硝基亚硝基胍（ＭＮＮＧ）和苯并芘（Ｂ（ａ）Ｐ）诱导了中国仓鼠Ｖ７９细胞毒性和次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖基转移酶（ＨＧＰＲＴ）基因突变。结果表明，ＭＮＮＧ（０．７３５ｍｇ，Ｌ－１）和Ｂ（ａ）Ｐ（１ｍｇ·Ｌ－１）引起细胞存活率分别为７４．１％和７７．８％。阴性对照如空白对照、Ｓ９对照和溶剂对照的细胞自发突变频率低于０．４３×１０－５。ＭＮＮＧ和Ｂ（ａ）Ｐ＋Ｓ９诱发Ｖ７９细胞６－巯基鸟嘌呤抗性ＨＧＰＲＴ突变频率分别为１．１７×１０－５和１．３４×１０－５，比溶剂对照高４．９０和３．３５倍（Ｐ＜０．０１和Ｐ＜０．０５）。提示ＭＮＮＧ和Ｂ（ａ）Ｐ对Ｖ７９细胞呈细胞毒性和遗传毒性效应。     

肺癌患者凝血、抗凝及纤溶变化的研究

目的探讨肺癌患者凝血、抗凝及纤溶方面的变化。方法对３１例肺癌患者进行了凝血酶元时间（ＰＴ）、白陶土部分凝血活酶时间（ＫＰＴＴ）、纤维蛋白元定量（Ｆｂｇ）、抗凝血酶Ⅲ（ＡＴⅢ）、Ⅷ因子活性（Ⅷ：Ｃ）、Ⅷ因子相关抗原（ⅧＲ：Ａｇ）、纤溶酶元（ＰＬＧ）测定。结果肺癌患者ＰＴ、ＫＰＴＴ、ＡＴⅧ结果均正常,Ｆｂｇ３．９０±０．９１ｇ／Ｌ、Ⅷ：Ｃ（１３１．０３±２７．１１）％、ⅧＲ：Ａｇ（１４３．０７±４２．４９）％、ＰＬＧ（１９９．３１±３１．９２）ｍｇ／Ｌ。结论３１例肺癌患者Ｆｂｇ、Ⅷ：Ｃ、ⅧＲ：Ａｇ含量增高,ＰＬＧ含量减低,说明肺癌患者凝血与纤溶系统功能亢进。     

抗脲激酶单克隆抗体的研制和初步鉴定

用上海生物化学制药厂赠送的脲激酶（Ｈ－ＵＫ），免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，取脾细胞与骨髓瘤细胞ＮＳ－１融合，用高纯度Ｈ－ＵＫ包被筛选阳性克隆，获得抗Ｈ－ＵＫ单克隆抗体ＮＵＫ－１和ＮＵＫ－２两细胞株。酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测效价为１０４～１０５，经亚类测定分属ＩｇＧ１和ＩｇＧ２。为研究脲激酶的结构和导向治疗血栓提供了可能。     

非胰岛素依赖型糖尿病患者红细胞膜ATPase活性改变及其影响因素

目的探讨非胰岛素依赖型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）患者红细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ及Ｃａ２＋－ＡＴ－Ｐａｓｅ活性改变的影响因素。方法测定７７例ＮＩＤＤＭ患者和５０例正常人血糖、总胆固醇（ＴＣ）、甘油三酯（ＴＧ）、高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬＣ）、脂质过氧化物（ＬＰＯ）、谷胱甘肽（ＧＳＨ）、糖化血红蛋白（ＨｂＡｌｃ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨＰＸ）、红细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴ－Ｐａｓｅ和Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性。ｔ检验、直线相关分析和多元逐步回归分析。结果ＮＩＤＤＭ组血糖、ＨｂＡｌｃ、ＴＣ、ＴＧ、ＴＣ／ＨＤＬＣ、ＬＰＯ显著高于对照组（Ｐ＜０．０１），ＨＤＬＣ、ＧＳＨ、ＳＯＤ、ＧＳＨＰＸ、红细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ和Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性低于对照组（除ＧＳＨ的Ｐ＜０．０５外，其他Ｐ＜０．０１）；不同ＨｂＡｌｃ、ＴＣ／ＨＤＬＣ、ＧＳＨ、ＬＰＯ、ＴＣ组的红细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ活性有显著性差别。红细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ活性＝１２．８０＋０．２７（ＧＳＨ）－０．１２（ＬＰＯ）－０．０９（ＴＣ／ＨＤＬＣ），红细胞胞膜Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性＝１０８．２０＋１．     

自体LAK细胞制备及其在临床上的应用

以基因重组白细胞介素Ⅱ（ｒＩＬ－２）诱导患者自体ＬＡＫ细胞。使用ＬＡＫ／ｒＩＬ－２治疗３例经病理或临床确诊为妇科晚期恶性肿瘤患者。ＬＡＫ细胞（２．２～３．１）×１０９／ｒＩＬ－２１．６×１０６单位治疗一个疗程。治疗前后用Ｂ超、Ｘ线平片观察肿块变化。结果显示，１例癌肿块明显缩小（ＰＲ），１例肿块缩小（ＭＲ），１例肿块无改变（ＳＤ）。患者主观症状改善，生活质量提高。除１例病人在治疗时出现一过性发热外，未见其他毒副作用。     

天冬氨酸激酶的部分提纯和特性研究

研究了Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍｇｌｕｔａｍｉｃｕｍ菌的天冬氨酸激酶（下简称为Ａｓｐ激酶）的部分纯化和某些特性。由于使用了添加硫酸铵和天冬氨酸的磷酸缓冲液，成功地获得了纯度较高、比活力提高１０～１５倍的Ａｓｐ激酶。当硫酸铵以０．１～０．８Ｍ浓度添加时，对酶活性的促进作用最强。对照研究了一些氨基酸对脱盐酶液和Ｇ－２００酶液的不同影响，在５２４菌株种子培养时，以２０小时种龄，２５０ｍｌ／Ｌ装量，激酶的比活力最高；发酵培养时，２３小时后酶活力开始明显下降，但可随尿素的添加而回升。Ａｓｐ激酶的动力学常数是：ＫＡＳＰ为２０１．４ｍＭ；ＫＡＴＰ为３６．４ｍＭ；最适ｐＨ为９．０－９．５；Ｌ－苏氨酸Ｌ－苏氨酸＋Ｌ－赖氨酸对该酶的抑制，与ＡＳＰ是竞争性的，而与ＡＴＰ则是混合性的。     

~（99m）Tc－新半乳糖白蛋白体外受体介导结合特性的研究

本文报道￣９９ｍＴｃ－新半乳糖白蛋白（￣９９ｍＴｃ－ＮＧＡ）与大鼠肝细胞膜进行体外结合试验。结果表明：￣９９ｍＴｃ－ＮＧＡ系与肝细胞膜上的高亲和力低容量（Ｋ＿１：８．４０８９×１０￣９Ｌ／ｍｏｌ；Ｒ＿１：１．７３５０×１０￣（－１２）ｍｏｌ／ｍｇ）和低亲和力高容量（Ｋ＿２：２．０８２７×１０￣８Ｌ／ｍｏｌ；Ｒ＿２：６．９５３０×１０￣（－１２）ｍｏｌ／ｍｇ）２个结合位点相结合，其结合表现出高特异性、可饱和性及对细胞膜蛋白浓度的线性依赖性，具备受体介导结合的基本特征。￣（９９ｍ）Ｔｃ－ＮＧＡ是一个很有希望的肝受体显像剂。     

凝血和纤溶系统多参数测定在急性心肌梗塞溶栓治疗中的探讨

应用免疫比浊和发色底物法测定１５例ＡＭＩ患者血浆中的ＡＴ－Ⅲ、ＰＬＧ、α－ＡＰＬ、ＰＴ、ＰＡ、ＦＩＢ。结果显示：ＡＭＩ患者ＡＴ－Ⅲ为８６．４０±３０．４０与对照组１０９．８０±１４．８０相比存在显著差异（Ｐ＜０．０１）；溶栓前、后ＰＴ、ＰＡ、ＦＪＢ、ＰＬＧ、α２－ＡＰＬ有极显著性差异（Ｐ＜０．００１）。提示上述指标可作为ＡＭＩ辅助诊断、溶栓治疗监护和预防出血的指标。     

重组人血管抑素的纯化和生物活性鉴定

目的：纯化大肠杆菌表达的重组人血管抑素（ｒｈＡＧＮ）并鉴定其抗血管生成生物活性。方法：通过超声破碎、包涵体洗涤、Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－１００ 凝胶过滤层析等步骤初步纯化ｒｈＡＧＮ,Ｌｏｗｒｙ法测定蛋白浓度,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析观察其纯度;应用 ＭＴＴ法观察在终浓度为 ０．１～３．０ ｍｇ／Ｌ范围内 ｒｈＡＧＮ对 １０ μｇ／Ｌ ＥＧＦ刺激的人真皮微血管内皮细胞系ＨＤＭＥＣ的增殖抑制活性;以ＰＢＳ为对照（ｎ＝５）,应用原位鸡胚绒毛尿囊膜（ＣＡＭ）技术观察１００ μｇ／只（ｎ＝５）和２００ μｇ／只（ｎ＝５）ｒｈＡＧＮ作用７２ ｈ对３０ｎｇ ｂＦＧＦ 诱导的鸡胚ＣＡＭ毛细血管生成的抑制作用。结果：①ｒｈＡＧＮ电泳纯度达到 ９６％,总回收率为 ６１．７％;②ｒｈＡＧＮ对 ＨＤＭＥＣ细胞增殖的最大抑制剂量约为 ２．０ ｍｇ／Ｌ,抑制率约９２．３％．半数最大抑制剂量在１．０ ｍｇ／Ｌ附近;③１００ μｇ／只和２００ μｇ／只ｒｈＡＧＮ组鸡胚ＣＡＭ 载样滤纸片下毛细血管数目分别为７９±２３条和３７±１１条,两组间比较差异显著（Ｐ＜０．０５）;与对照组（１４５±３６条）相比,均有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。结论：ｒｈＡＧＮ达到了较高的电泳纯度,     

分泌型磷脂酶A2 cDNA与载体pRc／CMV定向克隆及表达

为了构建分泌型磷脂酶Ａ２（ｓｅｃｒｅｔａｒｙ ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅＡ２,ｓＰＬＡ２）ｃＤＮＡ的有效表达系统,该文从无效表达的重组体ｓＰＬ０Ａ２－ｐＧＥＭ７中制备ｓＰＬＡ２片段,将其插入中间载体Ｂｌｕｅｓｃｒｉｐｔ ＢＳＳＫＲ的ＥｃｏＲ１位点,利用ｓＰＬＡ２－ＢＳＳＫ重组体转化ＤＨ１感染态细胞,筛选ａｎｔｉｓｅｎｓｅ ｓＰＬＡ２－ＢＳＳＫ重组体,应用Ｘｂａｌ、Ｈｉｎｇｄ３双酶消化该重组体并回收     

白血病患者抗凝和纤溶系统变化的研究

目的 研究白血病患者抗凝和纤溶系统的变化。方法 采用单向免疫扩散法测定患者血清α１－抗胰蛋白酶（α１－ＡＴ），α２－巨球蛋白（α２－Ｍ）血浆纤溶酶原（ＰＬＧ）火箭免疫电泳法测血浆抗凝血酶Ⅲ抗原含量（ＡＴ－Ⅲ，Ａｇ）；刚果红显色法测纤溶酶（ＰＬ）活性，血凝法测纤维蛋白（原）降解产物（ＦＤＰ）；全自动生化分析仪测纤维蛋白原（ＦＧ）。结果 α１－ＡＴ，α２－Ｍ，ＡＴ－Ⅲ；Ａｇ，ＰＬ活性，ＦＤＰ高于正常，     

CHANGES OF ENDOTHELIN-1 GENE EXPRESSION IN RAT BRAINS DURING ISCHEMIA AND ISCHEMIC REPERFUSION

ＣＨＡＮＧＥＳＯＦＥＮＤＯＴＨＥＬＩＮ－１ＧＥＮＥＥＸＰＲＥＳＳＩＯＮＩＮＲＡＴＢＲＡＩＮＳＤＵＲＩＮＧＩＳＣＨＥＭＩＡＡＮＤＩＳＣＨＥＭＩＣＲＥＰＥＲＦＵＳＩＯＮＷｕＷｅｉｐｉｎｇ（吴卫平）；ＫｕａｎｇＰｅｉｇｅｎ（匡培根）ａｎｄＬｉＺｈｅｎｚｈｏ...