N-乙酰半胱氨酸对大鼠急性坏死性胰腺炎的作用

目的:探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对大鼠急性坏死性胰腺炎(ANP)的作用及作用机制。方法:30只SD大鼠随机分为假手术(SO)组、ANP组、NAC组3组。采用胰胆管逆行注射4%牛磺胆酸钠(1 ml/1 kg)诱导ANP模型,NAC组于造模后30 min腹腔注射5%NAC(2 ml/kg)。造模后12 h取材,同时观察胰腺病理变化、大鼠血清淀粉酶(AMY)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、还原性谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、过氧化氢酶(CAT)、胰腺组织髓过氧化物酶(MPO)及胰腺组织中核因子-κB(NF-κB)的表达。结果:ANP组胰腺病理损伤、AMY、MDA、MPO及NF-κB表达明显高于NAC组和SO组(P<0.01),NAC组这些指标显著低于ANP组(P<0.01),但高于SO组(P<0.01);GSH、GSH-PX、CAT在ANP组明显低于NAC组和SO组(P<0.05),经NAC处理后这些指标明显高于ANP组(P<0.05),但低于SO组(P<0.01);SOD在ANP组和NAC处理组无明显差异(P>0.05),但均低于SO组(P<0.01)。结论:NAC可通过抑制NF-κB活化和中性粒细胞聚集,减少氧自由基产生,减轻胰腺损伤,对ANP具有重要的治疗和保护作用。     

N-乙酰半胱氨酸对大鼠缺血再灌注肝脏NF-κB表达的影响

目的探讨N-乙酰半胱氨酸（NAC）对大鼠缺血再灌注（I/R）诱导的急性肝损伤（AHI）大的保护作用及对NF-κB表达的影响。方法30只大鼠随机均分成三组：a组假手术组（Sham）：仅开腹,不阻断肝血流;b组I/R组;c组干预组（NAC）。b、c组均阻断肝大部血流后恢复灌注,其中c组于阻断血流前1 h,腹腔注射NAC（500 mg/kg）。各组大鼠于再灌注3 h后开腹,采血,切取肝左中叶常规病理检测：免疫组化染色（ABC法）检测NF-κB在肝组织中的表达。结果I/R组大鼠血清ALT与AST的活性、中性粒细胞（polymorphonuclear neutrophil,PMN）计数及NF-κB表达比均明显高于S组（P〈0.01）,肝脏在光镜与电镜下的显微与超微结构损伤明显;NAC组的各项指标均明显好于I/R组（P〈0.01）,但差于S组（P〈0.01）。结论I/R大鼠肝脏组织内NF-κB的表达增加,NAC可通过抑制NF-κB的激活减轻急性肝损伤的炎症程度。     

N-乙酰半胱氨酸对肺微血管内皮细胞核因子κB活性影响的体外研究

目的探讨N-乙酰半胱氨酸（NAC）对人肺微血管内皮细胞（HPMEC）核岗子κB（NF—κB）结合活性和环氧合酶-2（COX-2）表达的影响机制。方法体外培养HPMEC细胞株,采用四甲基偶氮唑盐（MTT）检测NAC对HPMEC增殖活化的抑制作用,分别采用NAC（1mmol／L）处理1h,肿瘤坏死因子α（TNF-α）（100ng／mL）处理1h。NAC＋TNF-α联合处理。凝胶电泳移动抑制实验检测HPMECNF—κB的结合活性;免疫蛋白质印迹检测相应的HPMEC胞质内NF—κB抑制蛋白（IKB—α）的表达;免疫细胞化学观察HPMECNF—κB表达的核内转移;激光共聚焦检测NAC对HPMEC中COX-2表达的影响。结果NAC对HPMEC的增殖活化有明显抑制作用,NAC＋TNF-α联合处理组吸光度值明显低于TNF-α处理组,差异均有统计学意义（均P〈0．05）。TNF—α刺激后具有诱导HPMECNF—κB结合活性．且IKB-α表达明显减弱,NAC处理组IKB-α表达高于TNF—α处理组,差异有高度统计学意义（P〈0．01）。TNF—α处理1h后．HPMECNF—κB的主要表达从细胞质转移至细胞核内;NAC预处理后联合TNF—α刺激,HPMECNF—κB表达主要位于细胞质．出现核内转移极少。HPMEC经TNF-α处理后细胞内COX-2表达明显高于NAC＋TNF—α联合处理组以及正常对照组．差异均有统计学意义（均P〈0．05）;而NAC＋TNF-α联合处理组与正常对照组比较。差异无统计学意义（P〉0．05）。结论NAC可抑制HPMEC增殖活化;NAC可抑制HPMECNF—κB结合活性、减少核内转移发生和COX-2的表达。     

N-乙酰半胱氨酸对H2O2刺激的支气管上皮细胞表达IL-8影响

目的:探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对过氧化氢(H2O2)诱导的支气管上皮细胞分泌白介素-8(IL-8)影响.方法:将6例人支气管上皮细胞培养传代后分为:对照组,H2O2组,NAC+ H2O2组.NAC+ H2O2组中先给予NAC预孵育4 h之后给予H2O2.通过MTT法检测NAC和H2O2对细胞作用合适浓度,通过EL...     

乙酰半胱氨酸对急性酒精性肝损伤大鼠NF-κB和TNF-α的影响

目的探讨乙酰半胱氨酸对酒精所致大鼠急性肝损伤的保护作用及机制。方法采用酒精灌胃法制作急性酒精性肝损伤大鼠模型。50只雄性Wistar大鼠随机分为5组（n=10）：正常对照组、急性酒精肝损伤模型组、乙酰半胱氨酸低、中、高剂量（150,300,600mg／kg）组。测定并比较各组大鼠肝脏中核转录因子-κB（NF-κB）的表达及血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的含量。结果急性酒精性肝损伤大鼠模型制作成功。与模型组比较,治疗结束后,乙酰半胱氨酸各剂量组急性酒精性肝损伤大鼠肝组织中NF-κB的表达均减少（P〈0．01）,血清TNF-α的含量降低（P〈0．01）,炎性介质的释放不同程度地减少。结论乙酰半胱氨酸可以减轻肝脏的炎性损伤,对大鼠急性酒精性肝损伤起到保护作用。     

N-乙酰半胱氨酸对博莱霉素致小鼠肺间质纤维化形成及NF-κB、IL-4表达的影响

目的:探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对博莱霉素(BLM)致小鼠肺间质纤维化形成及核转录因子-κB(NF-κB)、白细胞介素-4(IL-4)表达的影响。方法:75只雌性C57BL/6小鼠随机分为3组:BLM组25只,气管注射BLM5mg/kg制作肺间质纤维化模型;NAC组25只,于注射BLM前5天开始,每天给予NAC250mg/kg直至取材;对照组25只,气管注射生理盐水。第1、3、7、14、28天处死小鼠,取右肺组织行HE染色和Masson染色,左肺组织测羟脯氨酸(HYP)含量;分别采用ELISA法和SP免疫组化染色检测支气管肺泡灌洗液中IL-4的含量和灌洗细胞中NF-κBp65的表达。结果:第7、14、28天,BLM组肺组织病理可见实变及胶原沉积,而NAC组明显减轻;3组小鼠肺组织HYP含量差异有统计学意义,NAC组HYP含量低于BLM组(P<0.05);第1、3、7天,3组小鼠支气管肺泡灌洗细胞NF-κBp65的表达水平及支气管肺泡灌洗液中IL-4的含量差异有统计学意义,且NAC组2指标均低于BLM组(P均<0.05)。结论:NAC可能通过抑制NF-κB的活化,减少致纤维化相关细胞因子IL-4的产生,进而减轻BLM所致小鼠肺间质纤维化。     

吡格列酮对缺氧/复氧后新生大鼠心肌细胞线粒体膜电位的影响

目的 观察过氧化物酶体增殖物激活型受体γ(PPARγ)受体激动剂吡格列酮对缺氧/复氧后的大鼠心肌细胞线粒体膜电位的影响,探讨其可能的机制.方法 原代培养的新生SD大鼠心肌细胞,经DMSO溶媒、不同浓度吡格列酮单独或联合PPARγ受体抑制剂GW9662及蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)抑制剂Ch...     

N-乙酰半胱氨酸对大鼠神经元凋亡及神经病理性疼痛的影响

目的 观察N-乙酰半胱氨酸(NAC)对坐骨神经结扎大鼠脊髓神经元凋亡及神经病理性疼痛的影响.方法 60只Sprague-Dawley大鼠随机分为对照组(Sham组)、NAC组和0.9%氯化钠溶液组(NS组).NAC组和NS组大鼠采用Bennett and Xie模型行大鼠右侧坐骨神经结扎术,NAC组大鼠每日腹腔注射NAC300 mg/kg,NC组大鼠腹腔注射等量0.9%氯化钠溶液.检测超氧化物歧化酶(SOD)的变化,同时以caspase-3免疫组织化学及末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)技术观察脊髓神经元凋亡的情况,以热痛阈作为痛觉过敏反应的指标,比较NAC组与NS组神经元凋亡及热痛阚的差异.结果 术后1、3、7、10 d,Sham组大鼠的热痛阈显著高于NAC组和NS组(P值均<0.05),NAC组又显著高于NS组(P值均<0.05).术后7 d,NAC组和NS组的脊髓SOD水平降至最低,分别为(20.099±5.265)和(21.171±7.616)U/mg,均显著低于Sham组的(35.088±3.616)U/mg(P值均<0.05),其余时间点各组脊髓SOD水平的差异均无统计学意义(P值均>0.05).Sham组大鼠脊髓caspase-3的表达较少,NAC组和NS组大鼠脊髓Ⅰ、Ⅱ层caspase-3阳性神经元细胞明显增加,但NAC组明显少于NS组.NAC组的神经元凋亡细胞数显著高于Sham组(P<0.05),但显著低于NS组(P<0.05).结论 NAC可抑制坐骨神经结扎大鼠脊髓神经元凋亡,同时也可缓解热痛觉过敏反应.NAC可能作为一种新的治疗神经病理性疼痛的药物.     

N-乙酰半胱氨酸对大鼠背部随意型皮瓣活力影响的实验研究

目的:观察抗氧化剂N乙酰半胱氨酸(Nacetylcysteine,NAC)对随意型皮瓣成活的影响。方法:采用Wistar大白鼠为实验动物,在其背部形成7cm×2cm的任意型皮瓣,将实验动物随机分为两组:对照组术后即刻腹膜下注射生理盐水,实验组术后即刻腹膜下注射NAC,并分别于术后1,12,24和48h取皮瓣组织作形态学观察并采用免疫组织化学方法(SP法)检测术后3h皮瓣组织TNFα的表达。结果:实验组皮瓣成活率明显高于对照组(P<0.01);组织学检查发现实验组皮瓣组织结构的破坏较对照组轻,炎症细胞浸润情况,术后1h两组差异无显著性意义(P>0.05),术后12,24和48h炎症细胞计数实验组低于对照组,两组差异有显著性意义(分别为P<0.05,P<0.01和P<0.01);两组术后3h皮瓣组织浸润的炎症细胞中均有TNFα表达,实验组为弱阳性,而对照组为强阳性。结论:腹膜下注射NAC可以提高大鼠背部随意型皮瓣成活率,其机制可能与下调TNFα等细胞因子的表达从而减少炎症细胞在皮瓣组织的浸润有关。     

N-乙酰半胱氨酸(NAC)对体外LPS刺激下小鼠巨噬细胞HIF-1α表达的影响

目的:探讨NF-κB抑制剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)对脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞内HIF-1表达的影响及意义。方法:取健康Balb/c小鼠,分离腹腔巨噬细胞并将其分为正常对照组、LPS刺激组、不同剂量NAC加LPS组。采用RT-PCR检测各组HIF-1α、TNF-αmRNA表达,细胞免疫化学检测HIF-1α、VEGF的蛋白表达。结果:与LPS刺激组比较,NAC+LPS组HIF-1αmRNA表达无明显差异、TNF-αmRNA明显减少,HIF-1α、VEGF蛋白表达显著减少(P<0.01)。结论:NAC可降低LPS刺激下小鼠巨噬细胞TNF-αmRNA表达,TNF-α的降低可能通过HIF-1α转录后途径下调该蛋白的表达,进而下调VEGF表达。提示在急性炎性反应中,NF-κB可能通过增加TNF-α在转录后水平影响HIF-1α的表达。     

膜电位的不同波动对小鼠大脑皮质GABA能神经元内在特性的影响

目的探讨膜电位的不同波动对小鼠大脑皮质γ-氨基丁酸（GABA）能神经元内在特性影响及对神经编码的调控。方法取出生15~20 d FVB-Tg（Gad GFP）45 704 Swn/J小鼠进行麻醉,断头取脑制作切片,将脑片置于充分氧合的人工脑脊液中继续孵育2 h。采用全细胞记录方法进一步探讨快速后超极化（fAHP）、慢速后超极化（sAHP）、动作电位不同复极和快速后去极化（fADP）对神经元内在特性的影响及对神经编码的调控。结果fAHP和sAHP相比,fAHP影响下的动作电位的绝对不应期（ARP₂）较短（P < 0.01）,阈值（Vts-Vr₃）较高（P < 0.01）;与fAHP相比,动作电位未完全复极时,ARP₂较短,当为阈强度0.25倍时,ARP₂最短（P < 0.05）;与fAHP比较,fADP程度越低,ARP₂越短,当在静息电位水平时,ARP₂最短（P < 0.05）。结论大脑皮层GABA能神经元在整合突触输入后,当膜电位波动时其内在特性发生可塑性变化,不同输入模式通过影响大脑皮层GABA能神经元动作电位的内在特性,从而调控GABA能神经元对输入信号的编程能力。     

大鼠大脑皮层神经元缺氧后细胞凋亡情况的动态观察

目的 观察大鼠大脑皮层神经元缺氧后细胞凋亡动态变化.方法 制备大鼠大脑皮层神经元体外原代培养模型,免疫细胞化学鉴定大鼠大脑皮层神经元,透射电镜下观察不同时间点各实验组神经元超微结构的变化,TUNEL法观察不同时间点各实验组神经元凋亡情况.结果 正常对照组神经元透射电镜下形态及染色质正常、内质网、线粒体等结构正常,缺氧组神经元水肿,细胞器破坏或消失;TUNEL法检测神经元凋亡:缺氧后各组神经元凋亡明显增加,与相应正常对照组相比有显著差异(P＜0.01),缺氧48 h神经元凋亡达高峰(IOD为0.187 ±0.007),与缺氧12、24h及72 h相比有显著差异(P＜0.01).结论 细胞凋亡在缺血、缺氧性脑损伤中呈动态变化,是神经元死亡的重要形式.恰当时间窗内对神经元凋亡进行干预将是缺血、缺氧性脑病的有效治疗措施.     

Effect of coriaria lactone on membrane potential of hippocampal neurons in rats

It was reported that general or local (cerebralcortex and hippocampus) administration of chemicalconvulsants both induced general or focal epilepticform mal accompanied by change in electroencephalogram['.'j. In this study, coriaria lactone (CL)was microinjected into hippocampus of Wistar rats toinduce acute focal epilepsy. Hippocampal electroencephalogram was recorded by using metal electrodesplaced on dorsal hippocampus. Membrane potentialof neurons'in CAZ of hippocampus was recorded intra…     

维生素A和E对梭曼中毒大鼠过氧化物酶的影响

目的　研究维生素 A,E(Vit.A,E)及其联合作用对梭曼中毒大鼠的全血和肝组织谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH-Px)和过氧化氢酶 (CAT)活性的影响 ,探讨抗氧化剂 Vit.A,E对梭曼中毒过氧化损伤的保护作用 .方法　雄性大鼠 50只 ,随机分为阴性组、阳性组、Vit.A组、Vit.E组和联合组 .阴性组和阳性组每日 ig5m L· kg-1的油 ;Vit.A组每日 ig2m L· kg-1的 Vit.A;Vit.E组每日 ig 2 5 m L· kg-1的 Vit.E;联合组以上各试剂剂量减半 ,共 ig 1 0 d.第 1 1日除阴性组外其余各组大鼠均 sc 0 .9LD50 梭曼 ,2 h后取样 ,测定各组全血和肝组织的 GSH- Px和 CAT活性 .结果　梭曼中毒 2 h后 ,肝组织 GSH- Px活性降低 .提前给大鼠 Vit.A,E及其联合 ,均可提高全血和肝组织 GSH- Px和 CAT活性 .结论　Vit.A,E对梭曼中毒大鼠过氧化损伤具有保护作用 ,提示Vit.A,E可能对梭曼中毒有预防作用     

大鼠视皮层硫化软骨素粘多糖降解对闪光诱发电位的影响

目的在视觉发育可塑性关键期终止前后,观察软骨素酶ABC(chondroitinase ABC,ChABC)降解LongEvans大鼠视皮层硫化软骨素粘多糖(chondroitin sulfate proteoglycans,CSPGs)后闪光视觉诱发电位(flash visual evoked potential,F-VEP)的变化。方法对出生后21、35、49d正常组及同时间点ChABC酶视皮层灌注组大鼠进行F-VEP检查。结果正常组大鼠21、35、49d,F-VEP主波的潜时逐渐缩短,分别为[(63.5±10.1),(50.8±6.4),(44.9±6.3)ms,P0.05],波峰值由21d的(15.7±3.8)ms增加至35d的(26.6±4.0)ms(P0.05),49d较35d稍降低。35、49dChABC酶视皮层灌注组大鼠F-VEP主波的潜时分别为(62.5±8.0),(58.4±7.6)ms,较同时间点正常组明显延长(P0.05),主波振幅两组间各时间点无明显差异(P0.05)。结论在视觉发育可塑性关键期终止前后,降解大鼠视皮层CSPGs影响了F-VEP的发育变化。     

Effect of dingxin recipe on intracellular free calcium, membrane potential and mitochondria membrane potential in normal and hypoxia myocytes of rat

To elucidate the molecular mechanism on anti-arrhythmic function of Dingxin Recipe (DXR).

Methods  

Cardiac myocytes isolated by trypsin method were cultured and labeled with various fluorescence stains. DXR contained serum induced changes of cellular calcium concentration [Ca²⁺]i, cell membrane potential (MP) and mitochondria membrane potential (MMP) were determined with laser confocal microscopy.     

苦参碱对大鼠原代培养皮质神经元GABAR蛋白表达的影响

目的观察苦参碱对大鼠原代培养皮质神经元γ-氨基丁酸受体（GABAR）蛋白表达的影响，探讨苦参碱抑制中枢的作用机制。方法对Wistar新生大鼠原代培养皮质神经元分别给予剂量为0．5、1．0、2．0mmol／L培养基的苦参碱进行药物干预，4h后用细胞免疫组化方法测定GABAR的蛋白表达。结果与阴性对照组相比，各给药组神经元GABAR蛋白表达均显著增加（P〈0．05）。结论苦参碱使GABAR蛋白表达增强。     

吸入麻醉药对离体鼠肝线粒体跨膜电位的影响

目的：通过观察吸入麻醉药对离体鼠肝线粒体跨膜电位的影响，研究吸入麻醉药肝毒性与线粒体能量代谢的关系，方法：应用碱性藏红为探针，在3ml的反应体系中分别加入5，10，20，50μg/ml氟烷，恩氟烷，异氟烷及七氟烷，用UV－3000分光光度计进行双波长（511－533nm)扫描，观察上述4种药物对ATP或琥珀酸能化及非能化鼠肝线粒体跨膜电位（Δψ）的影响。结果：氟烷与经典的解耦联剂氰化－对－三氟甲氧基苯腙相似，能明显降低能化及非能化线粒体的跨膜电位，而其余3种药物仅在大剂量时才降低线粒体的跨膜电位。结论：氟烷具有解耦联作用，氟烷与其他吸入麻醉药在能量代谢上的这种差异是否为它们肝毒性差异的原因值得引起重视。     

Effects of adenosine and ATP on the membrane potential and synaptic transmission in neurons of the rat locus coeruleus

Effects of adenosine (Ado) and adenosine 5'-triphosphate (ATP) on the membrane potential and synaptic transmission in neurons of the rat locus coeruleus (LC) were examined, in vitro. Ado (30-300 microM) produced a hyperpolarizing response and inhibited spontaneous firing activity in neurons of the rat LC. Ado decreased input resistance of LC neurons. The Ado-induced hyperpolarization reversed polarity near the equilibrium potential of K+ (EK). Ado (100-300 microM) depressed both excitatory postsynaptic potential (EPSP) and inhibitory postsynaptic potential (IPSP). Ado (300 microM) did not alter the hyperpolarization induced by norepinephrine (30 microM). N6-Cyclopentyladenosine (CPA, 100 microM), an A1 receptor agonist, also produced a hyperpolarizing response and depressed both the EPSP and IPSP. Another A1 receptor agonist, adenosine amine congener (ADAC, 30 microM) also produced a hyperpolarizing response and consistently depressed the EPSP and IPSP. Application of ATP (100 microM) to LC neurons caused a depolarizing response associated with an increase in the firing rate of spontaneous action potential in LC neurons. The ATP-induced depolarization was accompanied by an increased input resistance and reversed polarity at--91 mV. ATP (100 microM) consistently depressed the IPSP, while it did not change the amplitude of the EPSP in a majority of neurons. alpha, beta-Methylene ATP (alpha, beta-meATP, 30 micro/M), a P2 receptor agonist, mimicked these effects of ATP. Adenosine 5'-(beta, gamma-imido) triphosphate (AMP-PNP, 100 microM), a non-metabolizable analogue of ATP, produced a depolarizing response in LC neurons, but it produced no obvious depression of the EPSP and IPSP. These results suggest that Ado and ATP cause inhibitory and excitatory modulation, respectively, of neuronal activity and synaptic transmission in the rat LC.     

Effect of acetylcholine on membrane potential in toad dorsal root ganglion neurons and its underlying ionic basis

Intracellular recordings were made to investigate the responses of membrane potential to acetylcholine (ACh) on neurons in isolated toad dorsal root ganglion (DRG). In the 73 neurons examined, 67 were of type A, and the remaining 6 of type C cell. The resting membrane potential of these two types of cells was −67.5±1.3 mV (× ±SE). During the application of ACh (4 × 10^-4–6 × 10^-4 mol/L), the changes in membrane potential were as follows: 1) hyperpolarization, with amplitude of 9.1±3.0 mV (X ± SE; n = 23); 2) depolarization, with amplitude of 12.9 ±2.2 mV (X ±SE; n = 20); 3) biphasic response, i.e., hyperpolarization with amplitude of 8.0±2.4 mV (X±SE) followed by depolarization with amplitude of 10.9±2.1 mV (X±SE) (n=24); no effect (n=6). The hyperpolarization induced by ACh was blocked by superfusion with atropine (1.3 × 10^-5 mol/L; n = 23), while ACh depolarization was blocked by the mixture of d-tubocurarine (1.4 × 10^-5 mol/L) and hexamethonium (1.4 ×10^-5 mol/L) (n = 18). When ACh caused hyperpolarization, the membrane conductance wascin reased by 13.8% and the reversal potential was about -96 mV (n=3). TEA (20 mmol/L) superfusion enhanced ACh depolarization amplitude by 48.2 ±3.2 % (× ± SE;n = 6), and depressed ACh hyperpolarization amplitude by 79.4 ±4.3 % (× ± SE; n= 8).MnCl₂ (4 mmol/l) superfusion decreased the amplitudes of ACh depolarization and hyperpolarization by 54.2 ±7.2 % (X ±SE; n= 5) and by 69.2±6.4 % (X±SE; n = 14) respectively. These results suggest that the depolarization and hyperpolarization induced by ACh are mediated by nicotinic and muscarinic receptors on the soma of toad DRG neurons separately, and it seems that ACh hyperpolarization involves activation of calcium-activated potassium conductance.