抗人脑胶质瘤单克隆抗体SZ-39特异性及其识别抗原的初步鉴定

本文以人脑恶性胶质瘤细胞系SHG-44为抗原免疫BALB/C小鼠,通过杂交瘤技术获得了一株稳定地分泌抗胶质瘤细胞单克隆抗体的杂交瘤细胞株SZ-39。经ELISA、间接免疫荧光法和ABC免疫组化法分别检测了SZ-39与各种肿瘤和正常细胞、脑瘤和正常人体组织     

抗胶质瘤细胞单克隆抗体SZ—38及其识别抗原的生化特征

本文以人脑胶质瘤细胞系SHG-44为抗原,利用杂交瘤技术建立了一株恒定地分泌抗胶质瘤细胞单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株SZ-38。McAb SZ-38     

单克隆抗体携带药物免疫导向治疗人脑胶质瘤的体外、体内实验研究

本研究室将抗人脑胶质瘤单克隆抗体SZ-39携带上抗肿瘤药物阿霉素制备成免疫交联物对脑胶质瘤进行了导向治疗实验研究。脑胶质瘤为中枢神经系统最常见的恶性肿瘤,死亡率甚高,手术、化疗、放疗效果均不理想。人们对利用单克隆抗体携带药物特异性导向治疗胶质瘤寄于很大希望。笔者以人脑胶质瘤细胞系SHG-44为抗原,通过杂交瘤技术制备了抗人脑胶质瘤单克隆抗体SZ-39。经化学分析其     

免疫沉淀法鉴定抗人血小板单克隆抗体识别的抗原

以~3H和~175I标记血小板膜蛋白,采用葡萄球菌蛋白A免疫沉淀技术对14株(8株经鉴定为IgG)单克隆抗体所识别的血小板抗原进行鉴定,结果5株单克隆抗体获阳性结果,SZ-1,SZ-2,SZ-3均作用于血小板膜糖蛋白Ib(GPIb),SZ-21和SZ-22所作用的抗原为GPⅡb/Ⅲa     

大鼠抗小鼠重组膜联蛋白A2单克隆抗体的制备与鉴定

目的建立能够分泌特异性抗小鼠膜联蛋白A2（AnxA2）的大鼠-小鼠融合单克隆抗体杂交瘤细胞系。方法利用重组小鼠AnxA2蛋白作为抗原免疫Wistar大鼠,通过细胞融合和杂交瘤筛选技术建立特异分泌抗小鼠AnxA2蛋白的大鼠-小鼠融合单抗杂交瘤细胞株。采用酶联免疫吸附方法确定单克隆抗体亚型,免疫印迹和流式细胞术验证所筛选的单克隆抗体的特异性。结果通过对30多个分泌抗体的融合细胞克隆的筛选,获得一株分泌特异性抗小鼠AnxA2的大鼠-小鼠融合单克隆抗体杂交瘤细胞系SZ-158,连续培养传代后染色体分析证实,Wistar大鼠脾细胞与小鼠SP2/0细胞稳定融合;免疫印迹和流式细胞术显示该单克隆抗体可以特异识别小鼠AnxA2重组蛋白。结论该研究所获得的大鼠-小鼠融合单克隆抗体特异性针对小鼠AnxA2蛋白,可用于AnxA2转基因小鼠中AnxA2表达的检测,为深入研究AnxA2的功能提供了物质保障。     

大鼠抗小鼠重组膜联蛋白A2单克隆抗体的制备与鉴定

目的 建立能够分泌特异性抗小鼠膜联蛋白A2( AnxA2)的大鼠—小鼠融合单克隆抗体杂交瘤细胞系.方法 利用重组小鼠AnxA2蛋白作为抗原免疫Wistar大鼠,通过细胞融合和杂交瘤筛选技术建立特异分泌抗小鼠AnxA2蛋白的大鼠—小鼠融合单抗杂交瘤细胞株.采用酶联免疫吸附方法确定单克隆抗体亚型,免疫印迹和流式细胞术验证所筛选的单克隆抗体的特异性.结果 通过对30多个分泌抗体的融合细胞克隆的筛选,获得一株分泌特异性抗小鼠AnxA2的大鼠—小鼠融合单克隆抗体杂交瘤细胞系SZ-158,连续培养传代后染色体分析证实,Wistar大鼠脾细胞与小鼠SP2/0细胞稳定融合;免疫印迹和流式细胞术显示该单克隆抗体可以特异识别小鼠AnxA2重组蛋白.结论 该研究所获得的大鼠—小鼠融合单克隆抗体特异性针对小鼠AnxA2蛋白,可用于AnxA2转基因小鼠中AnxA2表达的检测,为深入研究AnxA2的功能提供了物质保障.     

抗人脑胶质瘤单克隆抗体的制备及其相关特征的研究

目的：研究单克隆抗体荧光标记脑胶质瘤术中显像。方法：采用人脑恶性胶质瘤细胞系ＳＨＧ－４４作为抗原，制备了一组分泌抗人脑胶质瘤细胞单克隆抗体的杂交瘤细胞株。结果：该杂交瘤细胞株分泌抗人脑胶质瘤细胞单克隆抗体Ｈ１２具有与脑胶质瘤细胞物异性结合的特性。结论：可以进一步用于研究单克隆抗体荧光标记脑胶质瘤术中显像的脑胶质瘤组织与正常脑组织之间的界线识别。     

第二组分泌抗人血小板单克隆抗体的小鼠杂交瘤细胞

用杂交瘤技术获得了第二组抗人血小板的单克隆抗体。这些单克隆抗体在体外对正常人血小板聚集功能有不同程度和性质的影响。其中SZ-21的E亚克隆分泌的单克隆抗体能完全抑制胶原诱导的血小板聚集并能部分抑制肾上腺素、ADP诱导的血小板聚集。SZ-21E单克隆抗体影响血小板功能的性质,提示其识别的抗原决定簇可能是血小板膜糖蛋白Ⅱ/Ⅲ。其他各株细胞及其亚克隆也有进一步研究的价值。     

抗人血小板糖蛋白单克降抗体的杂交瘤细胞的染色体研究

报导我院籍助杂交瘤技术建立的二组分泌抗人血小板单克隆抗体的SZ-2和SZ-21杂交瘤细胞株的常规、C显带和G显带染色体的研究。染色体分析证明杂交瘤SZ-2和SZ-21均具有亲本的特点,确由小鼠脾细胞与NS-1细胞融合而来。     

抗人胰腺癌单克隆抗体SZ-121的制备和初步鉴定

目的探讨抗人胰腺癌单克隆抗体SZ-121的制备并对其进行初步鉴定。方法用人胰腺癌细胞株Patu8988作为免疫原,利用杂交瘤技术制备抗人胰腺癌单克隆抗体,应用流式细胞术和免疫组化鉴定抗体的特异性。结果成功获得一株能够稳定分泌特异性抗体的杂交瘤细胞系SZ-121,该抗体与胰腺癌组织呈阳性反应,与胰腺良性病变组织呈弱阳性反应。结论单抗SZ-121对胰腺癌的早期诊断可能具有一定的潜在价值。     

LOCALIZATION OF 131I-LABELLED ANTI-GLIOMA MONOCLONAL ANTIBODY S2-39 IN HUMAN BRAIN TUMOR TRANSPLANTED IN NUDE MICE*

The Jocalization of i:iI.McAb SZ-39 in human brain tumor nude mice model NHG-I (bearing glioma), NHE-2 (bearing ependymoma) and NHG3 (bearing metastatic adenocarcinoma) was studied with v-imaging autoradiography and radioactivity distri. bution. Satisfactorytumor imaging was obtained in NHG148.163 hoJ ter injection of 131McAb SZ 39 and the d:~f,:smafTeojNT (tumor/normal tissue) value increased i l.0 t0 144.9 times. No tumor imaging was obtained in NHE-2 0r NHC-3 receiving 131I.McAb S2-39 and NHG-1 receiving 131l-normal mouse IgG; the 72 hour TiNT <2. These in vivo studies dcmonstrate the specificity of S2-39 and in- dicatc that it may be used for clinical diagr:tosis and Targctingtrcatment.     

SZ-121单抗在人胰腺癌病理学诊断中的初步研究

目的　探讨一株新的高特异性抗人胰腺癌单克隆抗体SZ 12 1(McAbSZ 12 1)在人胰腺癌组织中的特异结合程度。方法　以人胰腺癌细胞株Patu8988为抗原 ,免疫Balb/C小鼠 ,利用杂交瘤技术 ,研制出一株McAbSZ 12 1。通过免疫组织化学方法检测了SZ 12 1在 4 7例不同分化胰腺癌及 10例良性胰腺组织上的结合反应。结果　SZ 12 1在良性胰腺组织上的结合率仅为 10 % ;而在 12例低分化胰腺癌上的结合率为 10 0 % ,14例中分化胰腺癌上的结合率为 85 .7% ,2 1例高分化胰腺癌上的结合率为 76 %。SZ 12 1在胰腺癌组织上的结合反应显著高于正常胰腺组织 (P <0 .0 0 1)。结论　SZ 12 1在人胰腺癌中的特异性高结合 ,可以为胰腺癌的诊断提供新的手段。     

单克隆抗体SZ—39识别的人脑胶质瘤细胞SHG—44膜蛋白的提取

目的：提取ＭｃＡｂ ＳＺ－３９识别的人脑胶质瘤细胞ＳＨＧ－４４膜抗原蛋白,为其进一步研究作准备。方法：分别以两组去污剂（１）２％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１１４;（２）１％ＳＤＳ、１％去氧胆酸钠、１％ＮＰ－４０、１ｍｍｏｌ／Ｌ ＥＤＴＡ裂解ＳＨＧ－４４细胞,提取细胞蛋白,再以ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法分离蛋白,并以Ｗｅｓｔｅｒｎ－Ｂｌｏｔ法分析鉴定。结果：ＭｃＡｂ ＳＺ－３９识别的蛋白呈一条区带,分子量为６０ｋＤ     

一株具有抗HBc及抗HBs双重反应性的抗HBV单克隆抗体细胞株的选育

以富含Dane颗粒的HBV抗原作免疫原进行研究，选育出一株分泌具有抗HBc及抗HBs双重反应性McAb的杂交瘤细胞株。该细胞株经5次连续克隆化证实其克隆单一性，常规染色体检查证实为双倍体细胞（染色体89.5±3.6条），在ELISA中能与基因重组HBcAg、血源性富含Dane颗粒之HBV抗原、小圆颗粒HBV抗原及HBsAg阳性血清发生反应。对四者的反应效价大致相同，但对HBcAg的反应强度显著高于其它三者。此外还发现该McAb在改良双抗原夹心ELISA中能与桥连方式同时与HBcAg及HBsAg相结合。     

抗人肝癌单克隆抗体的制备及鉴定

The hepatocellular carcinoma (HCC) cell line, QGY-7703, derived from a Chinese patient, was used to immunize the BALB/c mice. Fifteen hybridomas producing McAb that reacted with QGY-7703 cells were isolated from 858 hybridomas created in three cell fusions. In further studies two McAb, namely, AQGY1 and A-QGY2, were selected which specifically stained HCC cells grown in vitro. The reactivity of these McAb was not removed by the absorption by homogenates of the normal liver, but was by homogenates of HCC cells. A-QGY1 and A-QGY2 also reacted definitely with HCC cells in liver tissues of HCC patients, but neither with other cells in the tissues nor with nontransformed liver tissues of the same patients. Furthermore these two McAb stained the adult or fetal liver tissues, nor all of the other normal or tumor tissues that had been tested. Blocking and absorbing experiments revealed that A-QGY1 and AQGY2 antigens had no immunohomogenicity with antigens such as HBsAg, HBcAg, HBeAg, AFP and CEA. The specificity of these two McAb may be used potentially for the sero diagnosis, histologic identification, radioimmunoimaging and destruction of human hepatocellular carcinoma.     

调节Th1／Th2平衡对脑胶质瘤细胞增殖的影响

目的研究外源性细胞因子调节Th1/Th2平衡对脑胶质瘤细胞增殖的影响.方法分别将IFN-γ+IL-4单抗或IL-4+IFN-γ单抗与脑胶质瘤细胞共同孵育,半定量RT-PCR方法观察Th1/Th2类细胞因子基因表达的变化,并用MTT方法检测其对脑胶质瘤细胞生长情况的影响.结果脑胶质瘤细胞Th2类细胞因子的表达明显强于Th1类(P＜0.01),IFN-γ+IL-4单抗可以增强IFN-γ的表达,抑制脑胶质瘤细胞的增殖并呈剂量依赖性关系(P＜0.01);IL-4+IFN-γ单抗则使Th2类细胞因子的表达有所增强,促进脑胶质瘤细胞的增殖,也呈剂量依赖性关系(P＜0.01).结论 外源性的细胞因子或细胞因子单抗可以调节Th1/Th2平衡,逆转Th2优势,影响脑胶质瘤细胞的生长.     

人脑胶质瘤的实验系列研究

1979～1989年,我室建立了人脑胶质瘤的体外和体内模型,在实验肿瘤的生物学、形态学、动力学、遗传学、神经生化,免疫组化、细胞杂交、单抗分子生物学、放射免疫、生物导弹和实验治疗等多方面进行了探索,其中大部分的结果己经或即将发表。本文旨在系统归纳,以利同道检索。     

免疫磁珠法分选人脑胶质瘤干细胞的体外培养及鉴定

目的:旨在从人脑胶质瘤组织和细胞株中分离脑胶质瘤干细胞、进行体外培养并对其干细胞特性加以鉴定,以期对后续个体化敏感药物化疗奠定基础。方法:采用以CD133为标志的免疫磁珠法从人脑胶质瘤组织和细胞株中分离脑胶质瘤干细胞并进行体外培养,通过免疫荧光技术检测干细胞标志物CD133、Nestin,干细胞特性加以鉴定。结果:新鲜人脑胶质母细胞培养得到悬浮生长的肿瘤干细胞球,其能在体外自我更新、增殖,形成新的克隆性细胞球,保持连续稳定的传代,能表达神经干细胞表面标志物CD133。在含血清培养基中能够分化为与原肿瘤组织相似的贴壁生长的细胞。结论:胶质母瘤细胞株中存在的一小部分CD133+胶质瘤细胞具有干细胞的属性,并能稳定传代增生。     

抗人肝癌单克隆抗体的制备及鉴定

用国人肝癌细胞免疫BALB/c鼠,经三次细胞融合、反复筛选及克隆化,得到了15株杂交瘤;又经正常肝组织及肝癌细胞吸收试验,进一步选出两株杂交瘤。它们分别能持续稳定地分泌特异性抗人肝癌单克隆抗体A-QGY_1和A-QGY_2。此两株单克隆抗体只与体外培养或患者组织中的肝癌细胞产生反应,而不与正常成人和胎儿肝组织及其他多种正常或肿瘤组织发生反应,与乙肝病毒抗原及甲胎蛋白、癌胚抗原等也无免疫交叉反应。