动脉血栓形成与止血相关的遗传性危险因子(二)

血小板表面的糖蛋白膜是血小板与血小板之间、血小板与血管壁粘附的基本条件。GPⅡb/Ⅲa(αⅡbβ_3)为Fbg的主要受体,并能与vWF、FN、VN结合。GPⅠb-Ⅸ-Ⅴ复合物为vWF的主要受体。GPⅠa/Ⅱa为胶原的一个重要受体。3.1 GPⅡb/Ⅲa(Ⅱb3整合素)Weiss(1996)等首次报告此受体基因的变异与MI相关,表4总结了相关的报告。这些作者     

整合素拮抗剂治疗脑胶质瘤的研究进展

1987年,Richard Hyncs首次提出整合素的概念,它是指存在于细胞膜表面的跨膜糖蛋白受体,是关联细胞间或者细胞与细胞外基质的一族粘附分子.所有的整合素分子都是由α、β两条异源二聚体蛋白通过非共价键连接而成,目前发现的至少存在25种α亚单位和11种β亚单位,亚单位之间通过非随机的连接组合,组成大约20多种不同的整合素分子.     

整合素和TGF-β受体在增生性瘢痕成纤维细胞中的表达研究

目的 了解增生性瘢痕成纤维细胞表面整合素α1-3、αv、β1和转化生长因子β(TGF-β)受体1分布的情况及相互关系。方法 采用免疫组化染色的方法,观察10例人体增生性瘢痕和10例正常人皮肤组织成纤维细胞表面各整合素亚单位和TGF-β受体I表达的差异,以了解两者间的相关程度。结果 增生性瘢痕成纤维细胞表面整合素α1-3、αv、β1和TGF-β受体I的表达均明显高于正常对照组(P<0.01),其中以整合素α1、α3和β1的表达更为显著。增生性瘢痕成纤维细胞表面各整合素亚单位(除了α2以外)与TGF-β受体I在表达强度上呈正相关(P<0.05)。结论 增生性瘢痕成纤维细胞表面各整合素亚单位的高度表达是瘢痕产生与发展的重要因素之一;TGF-β受体I的高度表达提示增生性瘢痕成纤维细胞对于TGF-β的高反应性;整合素与TGF-β受体I在瘢痕形成过程中相互影响。     

整合素和TGF-β受体在增生性瘢痕成纤维细胞中的表达研究

目的了解增生性瘢痕成纤维细胞表面整合素α1-3、αv、β1和转化生长因子β(TGF-β)受体Ⅰ分布的情况及相互关系.方法采用免疫组化染色的方法,观察10例人体增生性瘢痕和10例正常人皮肤组织成纤维细胞表面各整合素亚单位和TGF-β受体Ⅰ表达的差异,以了解两者间的相关程度.结果增生性瘢痕成纤维细胞表面整合素α1-3、αv、β1和TGF-β受体Ⅰ的表达均明显高于正常对照组(P＜0.01),其中以整合素α1、α3和β1的表达更为显著.增生性瘢痕成纤维细胞表面各整合素亚单位(除了α2以外)与TGF-β受体Ⅰ在表达强度上呈正相关(P＜0.05).结论增生性瘢痕成纤维细胞表面各整合素亚单位的高度表达是瘢痕产生与发展的重要因素之一;TGF-β受体Ⅰ的高度表达提示增生性瘢痕成纤维细胞对于TGF-β的高反应性;整合素与TGF-β受体Ⅰ在瘢痕形成过程中相互影响.     

血小板糖蛋白Ⅱb／Ⅲa受体及拮抗剂在心血管疾病中的应用

动脉粥样硬化性心脏病是心血管疾病中最常见的死亡原因 ,动脉粥样硬化斑块破裂导致血栓形成是急性冠状动脉事件的主要原因 ,血小板聚集在此发挥了关键作用。而血小板糖蛋白 ( ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ ,ＧＰ)Ⅱｂ/Ⅲａ(αⅡｂβ3)受体是存在于血小板膜表面最丰富的一种整合素 ,在血小板激活时大量表达 ,是引起血小板聚集的最后共同通路[1 ] 。因此 ,ＧＰⅡｂ/Ⅲａ受体拮抗剂作为减少急性冠状动脉综合症 (ａｃｕｔｅｃｏｒｏ ｎａｒｙｓｙｎｄｒｏｍｅｓ)患者发生心脏事件 ,冠脉介入治疗伴发的慢性期再狭窄等的重要药物正受到广泛关注。本文…     

受体酪氨酸激酶Axl调控糖蛋白Ⅵ介导的血小板活化

目的研究生长静止特异性基因6的受体Axl对胶原蛋白受体糖蛋白Ⅵ介导的血小板活化的调控作用。方法利用Axl基因敲除小鼠和糖蛋白Ⅵ特异性刺激剂,在体外分别研究血小板的聚集和铺展功能,并应用流式细胞术检测血小板的颗粒释放和整合素αⅡbβ3的活化。结果与野生型小鼠相比,Axl基因敲除小鼠的血小板聚集和铺展功能受到明显抑制;流式细胞术检测结果表明,Axl敲除的血小板的颗粒释放标记物CD62P的表达明显降低（P〈0.05）,整合素αⅡbβ3的活化同样受到明显抑制（P〈0.05）。结论生长静止特异性基因6的受体Axl在糖蛋白Ⅵ介导的血小板活化中发挥重要的调控作用。     

整合素和去整合素在病变眼组织中的作用

整合素广泛表达于多种细胞表面,在体内生理和病理过程中发挥重要作用。去整合素和整合素受体特异结合而抑制细胞的黏附,在血小板的聚集、肿瘤的侵袭与转移方面研究较多,在眼组织的研究较少。现就二者在病变眼组织中的作用综述如下。1　整合素的结构和生物学功能1 1　整合索的结构　整合素为黏附分子中由α亚单位和β亚单位以非共价键连接而成的异二聚体的跨膜蛋白,其中α亚单位分子量介于12 0ku和180ku之间;β亚单位介于90ku至110ku。α亚单位胞内区域较短,而胞外区域较长,含钙离子结合区;而β亚单位胞内区域较长,胞外区域含有胱氨酸重复序…     

血小板的止血功能与出血性疾病

在初期止血和血栓形成过程中血小板起着重要作用。当血管内皮损害暴露内皮下组分时血小板就会被活化 ,发生血小板的粘附和聚集。血小板的粘附、聚集和活化反应是通过血小板膜糖蛋白的功能而实现的。目前进行深入研究的有下列 3类血小板膜糖蛋白 :( 1 )糖蛋白 (ＧＰ)Ｉｂ -ＩＸ作为粘附蛋白ｖＷＦ受体参与血小板粘附于受损血管壁的反应。 ( 2 )ＧＰＩＩｂ -ＩＩＩａ作为粘附蛋白纤维蛋白原 (Ｆｂｇ)的受体在血小板聚集和血栓形成中起重要作用。 ( 3)ＧＭＰ - 1 40 (亦称Ｐ -Ｓｅｌｅｃｔｉｎ)在血小板活化后暴露在血小板膜表面 ,并作为ＰＳＧ…     

凝血栓蛋白-1生物学活性及临床意义

凝血栓蛋白 1 (thrombospondin 1 ,简称TSP 1 ) ,是一种450ku的同源三倍体细胞外糖蛋白 ,最初发现由血小板α 颗粒释放 ,现已发现各种细胞可分泌TSP 1 ,如成纤维细胞、平滑肌细胞、肺泡细胞、巨噬细胞、角质细胞、单核细胞、成骨细胞和肿瘤细胞。TSP 1存在于血浆、激活的血小板上、内皮细胞浆中、基底膜和血管壁中 ,可与一系列因子相互作用 ,包括基质中的一些成分、细胞表面特异性受体 ,如整合素αvβ3、α3β1、α4 β1、α5β1、整合素相关蛋白CD4 7、硫酸乙酰肝素蛋白多糖和CD36[1] 。从而介导细胞 细胞、细胞 基质的相互作用 ,在…     

整合素αⅡbβ3缺陷对血小板由内到外信号传导的影响

目的 :探讨整合素αⅡbβ3缺陷对血小板由内到外信号传导的影响。方法 :采用DNA序列分析、流式细胞术、RT PCR和Westernblotting等检测细胞中转染cDNA的存在、表达及细胞结合PAC 1、纤维蛋白原 (fibrinogen ,Fb)的能力。结果 :血小板无力症 (GT)患者整合素αⅡbβ3明显低下 ,且血小板在ADP激活后不能结合PAC 1,转染β3和αⅡb(突变αⅡbR995A 或正常αⅡb)cDNA的CHO细胞株分别表达αⅡbR995A β3和αⅡbβ3,并且突变株中国仓鼠卵巢细胞(Chinesehamsterovary ,CHO)细胞αⅡb基因 30外显子上第 30 77和 30 78位碱基由CG突变为GC ,导致第 995位精氨酸被替换为丙氨酸 ;在未活化的情况下 ,αⅡbβ3CHO细胞几乎不结合PAC 1,但能结合Fb ,而αⅡbR995Aβ3CHO细胞能结合PAC 1,且Fb明显增加。结论 :αⅡbR995A 突变能诱导血小板内到外信号传导 ,使αⅡbR995Aβ3表现为激活型受体 ;而GT患者却因整合素αⅡbβ3缺陷使αⅡbβ3介导的血小板由内到外信号传导受阻 ,使该GT患者表现出血小板聚集异常。     

活化血小板葡萄糖摄取及血小板膜整合素对其的影响

目的：了解活化血小板葡萄糖摄取过程及血小板膜整合素对其影响，探讨整合素与血小板能量代谢的关系，旨在研究血小板能量代谢涉及的信号传导，并为目前临床应用血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa(GPⅡb/Ⅲa)单抗抗血小板活化提供新的理论依据。方法：用液态闪烁计数方法检测在血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa单抗10E5及血小板整合素αvβ3单抗609干预与否情况下凝血酶激活后血小板摄取氚标2－脱氧葡萄糖[^3H]2-DG)率。结果：在生理浓度范围内活化血小板[^3H]2-DG摄取率较静息时明显升高，单抗10E5可充分阻断活化血小板葡萄糖摄取，单抗609可部分阻断。结论：整合素家族单抗可抑制血小板激活后葡萄糖摄取，提示其可能参与血小板能量代谢信号传导过程，并可能以GPⅡb/Ⅲa为主。     

血小板膜糖蛋白I ba基因多态性与心血管疾病

血栓形成是导致冠脉闭塞的主要形式,血小板的突然聚集阻断了动脉的血液供应,导致心肌组织梗死。血小板膜糖蛋白(GP)Ib-Ⅸ-Ⅴ是参与血小板粘附的关键因素。血小板膜糖蛋白GP Ibα是血小板膜上含量最多的糖蛋白,可以结合vWF及凝血酶。GP Ibα基因至少有3种多态性:Kozak序列-5T/C多态性、HPA-2a/2b(humanplatelet antigen)多态性和VNTR(variant number of tandemrepeats)多态性。有证据支持Kozak序列-5C、蛋氨酸145和VNTR B/C基因型是心脑血管疾病的危险因素。有必要进行进一步的研究证实GP Ⅰbα基因多态性与心血管疾病的关系。1.GPIbα的结构组成 GP Ib-Ⅸ是血小板膜的主要糖蛋白之一,每个血小板表面约有25 000个GP Ib-Ⅸ分子。GP Ib-Ⅸ-Ⅴ复合物包括两个GP Ib-Ⅸ单位和GPV。GP Ibα(分了量14万)     

整合素αⅡbβ3缺陷对血小板由内到外信号传导的影响

目的：探讨整合素αⅡbβ3缺陷对血小板由内到外信号传导的影响。方法：采用DNA序列分析、流式细胞术、RT－PCR和Western blotting等检测细胞中转染cDNA的存在、表达及细胞结合PAC－1、纤维蛋白原（fibrinogen,Fb)的能力。结果：血小板无力症（GT）患者整合素αⅡbβ3明显低下，且血小板在ADP激活后不能结合PAC－1，转染β3和αⅡb（突变αⅡb^R995A或正常αⅡb）cDNA的CHO细胞株分别表达αⅡb^R995Aβ3和αⅡbβ3，并且突变株中国仓鼠卵巢细胞（Chinese hamster ovary,CHO)细胞αⅡb基因30外显子上第3077和3078位碱基由CG突变为GC，导致第995位精氨酸被替换为丙氨酸；在未活化的情况下，αⅡbβ3 CHO细胞几乎不结合PAC－1，但能结合Fb，而αⅡb^R995Aβ3 CHO细胞能结合PAC－1，且Fb明显增加。结论：αⅡb^R995A突变能诱导血小板内到外信号传导，使αⅡb^R995Aβ3表现为激活型受体；而GT患者却因整合素αⅡbβ3缺陷使αⅡbβ3介导的血小板由内到外信号传导受阻，使该GT患者表现出血小板聚集异常。     

辅酶Q_(10)通过调控糖蛋白Ⅵ信号通路抑制血小板聚集和活化

目的血小板过度活化在血栓以及动脉粥样硬化(AS)的发生发展中发挥重要的作用,糖蛋白Ⅵ(GPⅥ)是血小板表面重要的受体,在血管损伤处通过与胶原结合介导血小板活化参与血栓以及AS的形成。辅酶Q_(10)(CoQ_(10))作为膳食补充剂通过抗炎、抗氧化等发挥预防心血管疾病的功能,尤其是抗AS作用。但是CoQ_(10)是否影响血小板功能尚未见报道,因此本研究通过体外实验探讨CoQ_(10)对血小板活化的影响及其对GPⅥ信号通路调控作用。方法用不同浓度CoQ_(10)(0、1、10、100μmol/L)与健康人纯化血小板在体外共同孵育50 min,采用血小板聚集仪测定胶原诱导的血小板聚集率;用流式细胞术测定血小板表面CD62P、CD63、α_(Ⅱb)β_3的活化和纤维蛋白原结合率(Fibrinogen binding);用West-ern blot检测胶原诱导的血小板GPⅥ信号通路相关蛋白磷酸化水平。结果 CoQ_(10)可以显著降低胶原诱导的血小板聚集率,抑制血小板表面CD62P和CD63的表达,并能显著抑制αⅡbβ3的活化以及降低Fibrinogen binding百分率。CoQ_(10)下调胶原诱导的GPⅥ信号通路中Syk、LAT、SLP76、PLCγ2以及PKC的磷酸化水平。结论 CoQ_(10)抑制胶原诱导的血小板活化可能是通过下调GPⅥ信号通路来实现。     

蛇毒蛋白与血小板血栓形成

多种蛇毒蛋白具有与血小板表面整多种蛇毒蛋白具有与血小板表面整合素、膜糖蛋白Ⅰb（GPⅠb）或血管性血友病因子（VWF）相互作用而影响血栓形成的功能。影响血小板血栓形成的蛇毒蛋白目前分为3类：去整合素、VWF调节蛇毒蛋白及GPⅠb结合蛋白。其中,去整合素具有高效抑制血小板聚集的功能;VWF调节蛇毒蛋白具有体外介导VWF依赖型血小板聚集的功能;而GPⅠb结合蛇毒蛋白又分为2组：GPⅠb激动剂和GPⅠb拮抗剂,分别起诱导血小板聚集与抑制VWF介导的血小板聚集的功能。本文将对上述影响血小板血栓形成的蛇毒蛋白的结构、功能及其在临床上的研究与应用进行综述。的结构、功能及其在临床上的研究与应用进行综述。     

血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa与血栓性疾病

血小板膜糖蛋白在血小板粘附、聚集和释放反应中起着重要作用。当血小板受到刺激时被活化 ,血小板膜糖蛋白发生改变。血小板活化时 ,膜表面形成GPⅡb/Ⅲa复合体 ,其上有纤维蛋白原的结合位点 ,分别是血管性假性血友病因子 (vWF)、纤维蛋白原 (Fg)的受体。血小板聚集主要取决于GPⅡb/Ⅲa复合体与粘附蛋白Fs、vWF、纤维连接蛋白和体外连接蛋白的潜在相互作用。血小板聚集除与GPⅡb/Ⅲa受体数量有关外 ,主要还取决于GPⅡb/Ⅲa受体亲和力高低。GPⅡb/Ⅲa与粘附蛋白结合是多种因素引起血小板聚集的不可缺少的共同通道 ,GPⅡb/Ⅲa可直接反…     

活性氧在血小板GPIbα酶切作用中的研究进展

血小板膜糖蛋白(glycoprotein,GP)Ib-IX-V复合物受体在血小板执行止血功能中起着关键作用。当血管内皮细胞受到损伤(如动脉粥样硬化斑块破裂,感染,外伤等),血小板膜表面GPIbα与血管内皮细胞表面暴露的血管性血友病因子(vonWillebrand factor,vWF)识别并结合,启动血小板的粘附并形成血栓,起到止血作用。GPIbα还含有凝血酶、P选择素和Mac-1等多个蛋白的结合位点。因此,血小板GPIbα在参     

P-选择素与缺血性脑血管病

细胞粘附分子是一组表达广泛、功能多样的跨膜糖蛋白 ,其中包括免疫球蛋白超家族 (ＩＣＡＭ - 1,ＶＣＡＭ - 1) ,选择素家族 (Ｐ -选择素 ,Ｅ -选择素 ,Ｌ-选择素 ) ,整合素家族 (β1,β2 ,β3亚族 ) ,血管附着家族 (ＬＡＭ - 1,ＨＣＡＭ)四大类 ,分别存在于血管内皮细胞、中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞、介导细胞与细胞、细胞与细胞外基质之间的相互作用 ,参与体内防御功能、炎症反应、血栓形成、肿瘤浸润转移等多种生理病理过程。其中 ,选择素家族的Ｐ -选择素是ＭｃＥｖｅｒ等 1989年首先在激活的血小板及内皮细胞上发现 ,同年在Ｃｅｌ…     

静脉移植物中整合素α5β1的表达及其与再狭窄的关系

目的 检测人静脉移植物中整合素α5β1的表达.方法 应用免疫荧光组织化学技术对30个静脉移植物再狭窄标本中整合素α5β1和α-smooth muscle actin(α-SMA)的表达进行了检测,用激光共聚焦显微镜拍片,图片用SiliconGraphics Octane进行处理.结果 在正常静脉血管中,整合素α5β1在中膜平滑肌细胞和内皮细胞呈微弱表达;α-SMA在中膜平滑肌细胞表达;在病变静脉血管,整合素α5β1在中膜平滑肌细胞、内膜内皮细胞中的表达呈强阳性,在内膜平滑肌细胞中也有弱表达.α-SMA除在中膜平滑肌细胞表达外,在内膜平滑肌细胞也有表达.结论 静脉移植物整合素α5β1在中膜平滑肌细胞、内膜内皮细胞表达显著上调,提示整合素α5β1参与静脉移植物再狭窄的形成.     

抗人血小板Tetraspanin (CD9)单克隆抗体以不依赖Fc受体的方式激活血小板整合素αⅡbβ3

目的　研究 2种抗人血小板tetraspanin单克隆抗体HI117和SJ9A4引起的血小板整合素活化及其机制。方法　用12 5Ⅰ标记的人纤维蛋白原 ,测定HI117和SJ9A4引起的纤维蛋白原与人血小板的特异的结合 ,表明这 2种单抗激活血小板整合素αⅡbβ3。结果　HI117和SJ9A4 ( 10 μg ml和 2 0 μg ml)引起纤维蛋白原与人血小板特异的结合 ,表明这 2种单抗引起血小板整合素αⅡbβ3激活 ,进一步研究表明这种激活不依赖血小板Fc受体 ,而且HI117和SJ9A4引起的血小板整合素αⅡbβ3激活可由于以Sphingosine、Aspirin、αβ、rase和成PGI2 预处理血小板而被抑制。结论　抗人血小板tetraspanin (CD9)单克隆抗体HI117和SJ9A4能引起血小板整合素αⅡbβ3激活且不依赖Fc受体 ,3种信号途径即血栓烷 ,分泌ADP和CAMP途径可能涉及这一过程 ,蛋白激酶C激活可能是这 3个途径的共同步骤。