紫草素在人表皮共培养体系中对酪氨酸酶活性及黑素生成的影响

目的：探讨紫草素在人表皮共培养体系中对酪氨酸酶活性及黑素生成的影响。方法在共培养体系中测定紫草素对酪氨酸酶活性和黑素生成的影响。结果0.25μmol/L、0.5μmol/L和1μmol/L紫草素对于人表皮共培养细胞增殖无影响,0.25μmol/L、0.5μmol/L和1μmol/L紫草素对于表皮共培养细胞酪氨酸酶活性及黑素生成均有较强的剂量相关性激活作用,0.5μmol/L及1μmol/L紫草素与对照组相比差异具有统计学意义（P〈0.01）。结论紫草素对于人表皮共培养体系中酪氨酸酶活性和黑素生成有一定促进作用。     

不同组方祛白脂对小鼠B16黑素瘤细胞代谢的影响

目的：探寻祛白脂组方中影响小鼠B16黑素瘤细胞代谢的因素。方法：以小鼠B16细胞增殖活性、黑素生成量、酪氨酸酶活性为指标,以8-甲氧补骨脂素（8-MOP）浓度和辅药为考察因素,选用3×2析因设计研究不同组方祛白脂对小鼠B16黑素瘤细胞代谢的影响,用SPSSl 3.0软件辅助数据分析。结果：8-MOP 10μmol·L-1处理组小鼠B16黑素瘤细胞增殖能力明显高于其他组（P〈0.01）,8-MOP 50μmol·L-1处理组小鼠B16黑素瘤细胞黑素含量、酪氨酸酶活性明显高于其他组（P〈0.01）;加入辅药小鼠B16黑素瘤细胞增殖能力、黑素含量、酪氨酸酶活性显著高于不加辅药组（P〈0.01）;8-MOP浓度和辅药处理的交互作用对小鼠B16黑素瘤细胞增殖能力、黑素含量、酪氨酸酶活性有显著影响（P〈0.01）。结论：祛白脂中8-MOP浓度和辅药是影响小鼠B16黑素瘤细胞代谢的主要因素。     

高良姜总黄酮对B16细胞增殖和酪氨酸酶活性及黑素合成的影响

目的探讨高良姜总黄酮对B16小鼠黑素瘤细胞增殖、酪氨酸酶活性及黑素合成的影响。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定细胞增殖,比色法测定酪氨酸酶活性和黑素含量。结果在浓度为0.25～10.00μmol.L-1范围内,高良姜总黄酮均可显著促进B16细胞的增殖(P<0.01);浓度为0.5,1.0μmol.L-1时,高良姜总黄酮能够促进酪氨酸酶活性和黑素合成。结论高良姜总黄酮在一定浓度范围内能够促进B16细胞增殖、酪氨酸酶活性升高和黑素合成。     

Apoptin基因活化caspase-3诱导人黑素瘤细胞A375凋亡

为研究肿瘤细胞凋亡基因（apoptingene）诱导人黑素瘤细胞系A375凋亡时是否通过活化easpase-3发挥作用，用含有apoptin基因的真核表达载体短时转染体外培养的人黑素瘤细胞A375；采用RT-PER、DNA凝胶电泳、流式细胞术检测A375细胞的凋亡；以比色法检测easpase-3的相对活性。结果表明，apoptin基因短时转染的A375细胞可出现典型的细胞凋亡所具有的DNA梯状带；流式细胞术显示实验组细胞凋亡率明显高于其它各组（P〈0．01）；转染后24h实验组caspase-3的活性开始升高，72h达高峰，明显高于其它各组（P〈0．01）。结论：apoptin基因可活化caspase-3诱导人黑素瘤细胞A375凋亡。     

驱白艾力勒思亚散乙醇提取物对小鼠B16黑素瘤细胞增殖及黑素生成的影响

目的研究维药复方驱白艾力勒思亚散(QBALLSYS)乙醇提取物对小鼠B16黑素瘤细胞增殖、黑素合成以及酪氨酸酶活性的影响。方法以MTT法测定培养的B16黑素瘤细胞的增殖活性;氢氧化钠法测定黑素生成量;体外氧化多巴反应方法测定酪氨酸酶活性。结果与空白对照组相比,驱白艾力勒思亚散乙醇提取物对B16黑素瘤细胞的增殖活性、黑素生成量、酪氨酸酶活性均有显著性作用(P<0.05或P<0.01)。驱白艾力勒思亚散乙醇提取物对小鼠B16黑素瘤细胞的增殖活性有上调作用,对细胞黑素生成以及酪氨酸酶的活性均有不同程度的促进作用。结论驱白艾力勒思亚散的乙醇提取物具有促进黑素细胞增殖和合成黑素的作用。     

氢化可的松对B-16黑素瘤细胞酪氨酸酶及黑素生成影响研究

目的　探讨氢化可的松体外对酪氨酸酶活性影响 ,以及对小鼠B 16黑素瘤细胞株细胞增殖、黑素合成以及细胞内酪氨酸酶活性的作用。方法　利用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定药物对细胞增殖的影响 ;采用酶学方法研究药物对酪氨酸酶活性的影响 ;用 5 70nm比色法测定黑素含量。结果　氢化可的松体外可激活酪氨酸酶活性 ,增强B16鼠黑素瘤细胞增殖 ,提高酪氨酸酶和黑色素合成能力。结论　氢化可的松可增强酪氨酸酶活性 ,进而促进黑素合成。     

3种药物对鼠黑素瘤细胞系B16F10黑素合成和细胞增殖的影响

目的 研究氨茶碱、前列腺素E1和雌激素是否能够影响B16F10鼠黑素瘤细胞的生物活性并探讨其可能的机制.方法 将上述3种药物各配制成4种不同的浓度加入到RPMI-1640培养液中与B16F10黑素瘤细胞共同培养.结果 氨茶碱在40 mg/L、160 mg/L的较高浓度时、前列腺素E1在0.01～0.64 mg/L、雌二醇在0.025～1.6 mg/L范围内对细胞增殖均有刺激作用(P＜0.05或＜0.01);氨茶碱于10～160 mg/L、前列腺素E1在0.01～0.64 mg/L、雌二醇在0.025～1.6 mg/L范围内对酪氨酸酶均有激活作用(P＜0.05或＜0.01);氨茶碱在40 mg/L、160 mg/L的较高浓度时、前列腺素E1在0.04～0.64 mg/L、雌二醇在0.025～1.6 mg/L范围内对黑素合成均有显著的促进作用(P＜0.05或＜0.01).结论 雌激素、前列腺素E1及较高浓度的氨茶碱均能对B16F10鼠黑素瘤细胞的细胞增殖、酪氨酸酶活性和黑素合成产生刺激作用.     

甲胺鸢尾素对H2O2损伤大鼠心肌细胞线粒体膜电位的影响

目的：研究新型化合物甲胺鸢尾素（methyl-amine irisolidone,MMI）预处理对H2O2损伤大鼠心肌细胞线粒体膜电位变化的影响。方法：甲胺鸢尾素预处理心肌细胞12 h后,采用H2O2诱导细胞氧化应激损伤,瑞氏-吉姆萨染色观察细胞形态,MTT法检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞线粒体膜电位变化。结果：与正常对照组比较,模型组心肌细胞存活率明显降低（P〈0.01）。MMI0.1μmol/L组与模型组相比细胞存活率相近（P〉0.05）,0.5、1、5、10μmol/L组显著增高（P〈0.05,P〈0.01）。与模型组比较,10μmol/L MMI减轻细胞形态变化,1、5、10μmol/L MMI显著抑制线粒体膜电位下降（P〈0.05,P〈0.01）。结论：甲胺鸢尾素可改善H2O2所致心肌细胞氧化应激损伤,其机制与稳定细胞膜、抑制线粒体膜电位下降,进而抑制心肌细胞凋亡有关。     

高良姜素对H_2O_2诱导A375细胞氧化损伤的保护作用

目的探讨高良姜素对人A375黑素瘤细胞氧化损伤的保护作用。方法以700μmol·L-1的H2O2处理人A375黑素瘤细胞,建立氧化损伤模型,并以1,5和10μg·mL-1的高良姜素拮抗其作用。用倒置显微镜观察细胞形态;采用MTT比色法检测细胞存活率;并检测各组细胞上清液中丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(T-AOC)、过氧化氢酶(CAT)、一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)。结果高良姜素能明显改善H2O2损伤后的A375细胞形态,显著提高人A375黑素瘤细胞的存活率。与模型组相比,高良姜素给药后均能提高A375细胞T-AOC、CAT、SOD和GSH-Px活力(P<0.05),而MDA和NOS明显降低(P<0.05)。结论高良姜素对H2O2诱导的A375细胞氧化损伤具有保护作用。     

基于偏最小二乘回归法分析药用紫草抗肿瘤谱效关系

目的 研究药用紫草高效液相色谱-质谱-多反应监测(UHPLC-QTRAP-MS/MS(MRM)特征轮廓谱与抗肿瘤活性的谱效关系,为明确紫草抗肿瘤作用物质基础提供依据.方法(2018年5月至2019年12月,数据来源于嘉应学院医学院客家药用生物资源研究所)采用UHPLC-QTRAP-MS/MS(MRM)技术建立药用紫草的特征轮廓谱,以A549细胞抑制率为药效指标,采用偏最小二乘回归法分析其谱效关系,并对部分化合物进行活性验证.结果 分析辨识了24个与紫草抗肿瘤作用具有重要影响的成分,其作用相关性由高到低依次为峰59、9、66、32、62、45、46、58、43、71、13、63、41、44、5、39、34、65、49、21、12、3、22和60.验证结果显示紫草呋喃A(19.86±0.55)μmol/L、紫草素(1.10±0.05)μmol/L、紫草呋喃E(22.60±0.92)μmol/L、乙酰紫草素(2.53±0.11)μmol/L、去氧紫草素(5.43±0.24)μmol/L、异丁酰紫草素(2.16±0.10)μmol/L、β,β-二甲基丙烯酰紫草素(3.50±0.16)μmol/L和α-甲基丁酰紫草素(0.74±0.03)μmol/L对A549细胞均有一定抑制作用,其IC50值为0.74～22.60μmol/L,而阳性药紫杉醇的半数抑制浓度(IC50值)为(3.45±0.16)μmol/L.结论 紫草的抗肿瘤药效是多种成分共同作用的结果,该研究初步明确了紫草抗肿瘤药效物质基础,为紫草后续研究和开发提供了科学依据.     

麝香保心丸促进血管新生作用的活性成分筛选

目的对麝香保心丸中单体入血促进血管新生活性成分进行筛选,以确定其中发挥促进血管新生作用的药效物质。方法采用实时细胞分析仪（xCELLigence系统）检测麝香保心丸及其单体入血成分对内皮细胞增殖、迁移活性的影响,并建立细胞体外成管模型和大鼠主动脉环模型评价麝香保心丸及其入血单体成分的体外血管新生活性。结果细胞增殖、迁移及体外成管实验结果显示,不同浓度的麝香保心丸（10^-4-10^-2μg/ml）、人参皂苷Rg3（1-10μmol/L）和人参皂苷Rh2（1-10μmol/L）能够明显促进人脐静脉内皮细胞（HUVECs）增殖、迁移及管腔结构形成（P〈0.05）。此外,与对照组相比,高浓度麝香保心丸（10-2μg/ml）、Rg3（10μmol/L）和Rh2（10μmol/L）具有诱导主动脉环内皮细胞出芽的活性（P〈0.05）。结论麝香保心丸及人参皂苷Rg3、Rh2均在体外具有促进血管新生的活性。     

姜黄素对胶质瘤U87细胞增殖和迁移能力的影响

目的：探讨姜黄素对胶质瘤细胞系U87细胞增殖及迁移能力的影响。方法应用CCK-8比色法检测经正常培养液及含不同浓度（25、50、100μmol/L）姜黄素的培养液培养24、48、72 h后的U87细胞的存活率;应用细胞划痕实验检测100μmol/L姜黄素对U87细胞迁移能力的影响;将20只SD大鼠制备成胶质瘤模型,随机分成对照组及实验1、2、3组,每组5只,模型制备后第7天对照组给予生理盐水灌胃,实验1、2、3组分别给予姜黄素100、200、300 mg/kg灌胃,1/d,连续14 d,第15天用microPET-CT对载瘤大鼠肿瘤体积进行测定。结果 U87细胞存活率随着培养液中姜黄素浓度的升高和培养时间的延长而降低（ P〈0．05）;给予100μmol/L姜黄素的培养液培养24和48 h后U87细胞迁移度均低于空白对照组（P〈0．05）;实验2、3组肿瘤体积均小于实验1组和对照组（P〈0．05）。结论姜黄素可抑制胶质瘤U87细胞的增殖及迁移。     

杏仁油对黑色素瘤细胞B16细胞增殖及黑素合成的影响

目的探讨杏仁油对小鼠黑色素瘤细胞B16增殖及黑素合成的影响。方法采用MTT法测定杏仁油对小鼠黑色素瘤细胞B16增殖的影响,L-dopa氧化法测定酪氨酸酶活性,NaOH裂解法测定黑素合成。结果杏仁油浓度在0.1～100μg/mL时对小鼠黑色素瘤细胞B16增殖无影响(P>0.05),对酪氨酸酶活性和黑素含量均呈浓度依赖性抑制,均具有显著性抑制作用(P<0.05)。结论杏仁油对黑色素瘤细胞B16酪氨酸酶活性和黑素生成有较强的剂量相关性抑制作用。     

香菇多糖对人膀胱癌BIU-87细胞增殖的抑制作用

目的探讨香菇多糖对人膀胱癌BIU-87细胞增殖的影响以及作用机制。方法配制不同浓度（0、10、100、500、1000、2000μmol／L）的香菇多糖溶液,每个浓度取100μl为不同浓度组,分别作用于经培养处理后的BIU-87细胞,检测各组细胞的增殖和凋亡情况、线粒体膜电位变化以及活性氧含量。结果BIU-87细胞的OD值随香菇多糖浓度的增大逐渐降低,各组OD值与对照组（0μmol／L）比较差异均有统计学意义（P〈0．05）;不同浓度的香菇多糖对BIU-87细胞捌亡率无显著影响（P〉0．05）,但细胞死亡率与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）;BIU-87细胞线粒体膜电位水平随着香菇多糖浓度的增大呈下降趋势,除10μmlol／L组外,其余各组与对照组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）;活性氧水平则随着香菇多糖浓度的增大而呈上升趋势,各组与对照组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论香菇多糖可使人膀胱癌BIU-87细胞线粒体膜电位去极化,诱发细胞内活性氧的产生,导致细胞死亡,从而抑制肿瘤的生长。     

蛋白激酶C抑制药enzastaurin对吉非替尼耐药的人非小细胞肺癌细胞株生长的影响

目的：观察新型靶向制剂enzastaurin单独或联合吉非替尼对耐药人非小细胞肺癌细胞株的影响,设计合理的治疗药物组合。方法：CCK8法检测细胞增殖,Chou-Talalay联用指数法判定联合用药效果,流式细胞仪检测细胞周期变化。结果：单药吉非替尼及enzastaurin作用NCI-H460耐药肺癌细胞72 h的半数抑制浓度（IC50）分别为6.99μmol·L-1（95%CI 3.55~13.79μmol·L-1）,7.25μmol·L-1（95%CI 4.77~1.02μmol·L-1）。两药联合应用对肺癌细胞的抑制作用增强（P 〈0.05）,同时给药组抑制效果更显著（P〈0.01）。同时给药组、序贯给药组（先用吉非替尼）和序贯给药组（先用enzastaurin）吉非替尼对H460细胞的IC50值分别为0.006μmol·L-1（95%CI 0.002~0.020μmol·L-1）,0.02μmol·L-1（95%CI 0.011~0.037μmol·L-1）,0.085μmol·L-1（95%CI 0.042~0.170μmol·L-1）。联合指数法显示在吉非替尼浓度0.05μmol·L-1以上时,同时给药组联合指数均〈1。细胞周期分布实验结果显示同时给药组可显著提高G0/G1期细胞比例（P〈0.05）,阻滞细胞于G1期。结论：蛋白激酶C抑制药enzastaurin与EGFR抑制药吉非替尼联用具有较好的协同作用,两药联合应用可能是出现吉非替尼耐药的非小细胞肺癌后续治疗的一个新选择。     

白黎芦醇对心肌细胞去乙酰化酶1表达时序的影响

目的探讨白黎芦醇(RES)在心肌细胞中对去乙酰化酶(SIRT)1表达时序的影响。方法大鼠心肌细胞株H9c2培养48h后,分别以0(对照组)、10(低剂量组)、20(中等剂量组)、50、100μmol/L(高剂量组)的RES处理0、12、24、36、48h,采用噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞活力;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分析SIRT1 mRNA表达情况,Western blot法检测SIRT1蛋白表达水平的变化。结果H9c2心肌细胞经RES处理后,MTT测得的吸光度(A)值在低、中剂量升高,20μmol/L组作用最显著(P<0.05),50μmol/L组开始下降,低于对照组(P>0.05),100μmol/L组降至最低(P<0.05);各组SIRT1 mRNA和蛋白表达A值均高于对照组(P<0.05),与低、高剂量组相比,中等剂量组表达最高(P<0.05);中等剂量组RES处理0、12、24、36、48h后,不同时间点SIRT1 mRNA和蛋白表达A值均高于对照组(P<0.05),以24h时表达最强(P<0.01)。结论20μmol/LRES作用24h时心肌细胞的SIRT1表达最强。     

高同型半胱氨酸血症与急性脑梗死相关性分析

目的:探讨急性脑梗死与高同型半胱氨酸(Hcy)血症的关系。方法:选取150例合并高血压的急性脑梗死住院患者为观察组,另选取同期门诊就诊的未发生脑梗死的高血压患者150例为对照组。两组患者分别进行空腹Hcy水平的测定,并进行比较。根据入院24 h内Hcy是否升高,将150例脑梗死住院患者分为高Hcy组(88例)和正常Hcy组(62例),两组患者分别于住院时及发病4周时进行神经功能缺损评分(NIHSS评分)。结果:高同型半胱氨酸血症在观察组中占58.7%,对照组中占15.3%(P<0.01);空腹Hcy浓度观察组为(31.26±4.61)μmol/L,对照组为(15.92±3.43)μmol/L,差异有统计学意义(P<0.01)。高Hcy组与正常Hcy组入院时NIHSS评分比较,差异无统计学意义(P>0.05)。两组于发病4周时进行NIHSS评分,高Hcy组评分高于正常Hcy组(P<0.01)。结论:高Hcy血症是脑梗死发生的重要危险因素,高Hcy的脑梗死患者预后较差。积极干预高Hcy血症有助于防止脑梗死的发生或改善脑梗死患者的预后。     

脂肪酸酰胺水解酶抑制剂URB597对人肝癌细胞MHCC97H生长和侵袭的抑制作用及机制研究

目的：观察脂肪酸酰胺水解酶抑制剂URB597对人肝癌高转移细胞MHCC97H细胞生长和侵袭性的抑制作用。方法：不同浓度URB597（1、5、10μmol/L）作用于MHCC97H细胞后不同时间,应用MTT法及流式细胞仪检测该种细胞生长活力及凋亡细胞数目的改变;应用Transwell实验检测该种细胞的运动能力及侵袭能力;应用蛋白质印迹法检测该种细胞内磷酸化Akt（p-Akt）和Akt表达量的变化。结果：上述3种浓度的URB597作用于该种细胞3-7d后,细胞活力明显降低,呈时间及剂量依赖性;10μmol/L URB597作用3-7d可显著增加凋亡细胞数目。URB597作用于细胞48h后,与对照组比较,5、10μmol/L URB597可显著抑制MHCC97H细胞侵袭能力（P〈0.01,P〈0.001）。3种浓度URB597作用于细胞24h后,5、10μmol/L URB597可显著下调细胞内p-Akt水平（P〈0.05,P〈0.01）。结论：URB597对体外生长的人肝癌细胞MHCC97H的生长和侵袭有明显抑制作用,该作用可能与其抑制磷酯酰肌醇-3激酶（PI3K）/Akt信号通路有关。     

松茸及多种植物提取物的美白功效研究

目的评价松茸、桑白皮、虎杖及葛根提取物对酪氨酸酶活性及黑色素合成的抑制作用,为美白类产品的开发提供试验依据。方法测定不同浓度松茸、桑白皮、虎杖及葛根提取物对酪氨酸酶活性,B16细胞增殖的影响及对B16细胞内黑色素含量及酪氨酸酶活性的抑制作用。以阳性药光甘草定作为对照。采用SigmaStat软件进行统计学处理。结果在B16细胞模型中,松茸提取物抑制活性优于桑白皮、虎杖和葛根提取物（P〈0.05）,高浓度（25 mg/L）松茸提取物对黑色素合成及酪氨酸酶活性的抑制率分别为（46.70±7.79）%和（65.73±0.58）%,与光甘草定的作用效果相当[抑制率分别是（30.48±3.05）%和（73.53±0.80）%]。结论高浓度松茸提取物对酪氨酸酶活性及黑色素合成的抑制作用与光甘草定相当,其作为天然来源的皮肤美白剂具有一定的开发潜力。