LDLr表达失衡在阿霉素肾病大鼠肾小球硬化中的作用

目的：观察阿霉素肾病大鼠肾小球硬化过程中低密度脂蛋白受体（ LDLr）的表达情况,及辛伐他汀对LDLr表达的影响,探讨LDLr在脂质导致肾病大鼠肾脏损害过程中的作用及他汀类药物肾脏保护的机制。方法：雄性SD大鼠随机分为正常对照组、阿霉素肾病组（模型组）和阿霉素肾病辛伐他汀治疗组（治疗组）,12周后收集标本,光镜观察肾小球硬化情况,酶比色法和油红染色法检测肾组织内胆固醇含量,RT-PCR和Western-blot技术分别检测肾组织LDLr、胆固醇调节元件结合蛋白-2（SREBP-2） mRNA和蛋白质表达。结果：模型组出现明显肾小球硬化（P〈0.01）,LDLr、SREBP-2 mRNA和蛋白表达明显增强（P均〈0.01）,肾组织内胆固醇含量明显升高（P〈0.01）;线性回归分析显示肾组织LDLr、SREBP-2蛋白表达上调与肾组织胆固醇酯（CE）含量呈显著正相关性（P均〈0.01）。治疗组肾小球硬化明显减轻（P〈0.01）,LDLr、SREBP-2 mRNA和蛋白表达、肾组织内胆固醇含量均较模型组低（分别P〈0.05或P〈0.01）。结论：肾病大鼠肾小球硬化过程中,肾组织内SREBP-2、LDLr表达明显上调,脂质可能通过过度表达的LDLr途径在肾组织内沉积,加重肾小球硬化;辛伐他汀可能通过下调LDLr途径,减少脂质在肾脏组织内沉积,发挥肾脏保护作用。     

阿霉素肾病肾小球硬化动物模型的研究

目的:探讨肾小球硬化不同病理发展阶段动物模型的制作.方法:采用单侧肾切除并高低剂量阿霉素尾静脉注射法建立大鼠肾小球硬化模型,观察各组大鼠血尿生化和肾组织病理改变.结果:8周时高低剂量阿霉素模型组均出现尿蛋白排出增加,血脂升高,肾功能下降;高剂量阿霉素注射组光镜下肾小球硬化达80%以上,呈弥漫性,其中25%～50%呈球性硬化,肾小球脏层上皮细胞足突广泛融合或消失;肾小管病变严重,肾小管上皮细胞肿胀、颗粒变性、坏死甚至脱落入小管腔,可见大量蛋白管型;间质纤维化和大量炎细胞浸润;低剂量阿霉素注射组肾小球硬化呈局灶节段性分布,肾小球肥大,肾小囊扩张,约50%肾小球有不同程度的硬化,球性硬化达10%左右,间质可见明显纤维化和局灶性炎细胞.结论:阿霉素对肾小球脏层上皮细胞、毛细血管内皮细胞及肾小管上皮细胞均有明显毒性损伤;高低剂量阿霉素注射组均为病变稳定的肾小球硬化模型,其中高剂量阿霉素注射组肾小球硬化模型为中晚期病理改变;低剂量阿霉素注射组为肾小球硬化早期病理改变.     

卡托普利不能抑制激素对大鼠阿霉素肾病肾小球硬化的恶化作用

目的 :探讨血管紧张素转换酶抑制剂 (ACEI)卡托普利能否抑制肾上腺糖皮质激素 (激素 )对大鼠阿霉素肾病肾脏病理损害的加重作用。方法 :40只SD雄性大鼠分成A(正常对照 )组、B(阿霉素 )组、C(阿霉素 +泼尼松 )组和D(阿霉素 +泼尼松 +卡托普利 )组。注射阿霉素后 4周开始经饮水给予入泼尼松及卡托普利 ,其浓度分别为 5 0mg/dl和 2 5mg/dl。在注射阿霉素之后的第 16周及 2 8周末每组分别用 5只大鼠取血及肾脏组织 ,分别作生化及病理检查。结果 :注射阿霉素 1周以后尿蛋白 (Upro)开始升高 ,4周以后达到 (16 8.45± 76 .2 8)mg/d。B组、C组及D组注射阿霉素后第 16周末及 2 8周末Upro、血清肌酐 (Scr)、甘油三酯 (Trg)及血清总胆固醇 (ChL)都显著高于A组 ,血清白蛋白 (Salb)则显著低于A组。B组、C组及D组组内第 2 8周与第 16周比较 ,Upro、Scr升高有显著性差异 ,Salb降低有显著差异。C组与B组比较 ,Upro、Scr、Trg及ChL显著升高。而D组上述生化指标的变化与C组比较都无显著性差异。B组肾脏病理积分显著高于A组 ,且第 2 8周末显著高于第 16周末 ;C组及D组第 16周末肾脏病理积分显著高于B组 ,但D组与C组比较无显著差异。结论 :卡托普利不能阻抑激素对大鼠阿霉素肾病病理损害的加重作用     

阿霉素肾硬化大鼠肾小球细胞增殖和p27蛋白表达的研究

目的 :研究肾硬化大鼠中细胞周期负调控蛋白 p2 7的表达和肾小球细胞增殖的关系 ,以探讨肾硬化发展过程中肾小球细胞增殖的分子机制。方法 :3月龄雄性Wistar大鼠随机分为对照组 (18只 )和实验组 (2 2只 )。在实验第 4周、8周和 12周测定血尿素氮 (BUN)、血肌酐 (Scr)和 2 4h尿蛋白定量 (TP/2 4h)并于第 12周测定大鼠平均动脉压 (MAP)。用半定量RT -PCR方法检测肾小球中PCNAmRNA的表达 ,同时采取免疫组织化学方法检测肾小球内增殖细胞核抗原 (PCNA)和细胞周期负调控蛋白 p2 7的表达。 结果 :BUN、Scr和TP/2 4h在各时间点均较同期对照组明显升高 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。实验组大鼠平均动脉压显著升高 (P <0 .0 1)且肾脏组织病理损害进行性发展。实验组各时间点PCNAmRNA表达明显增强 ,增殖指数进行性升高。对照组p2 7蛋白有一定水平表达 ,而实验组其表达进行性下降 ;p2 7蛋白表达与增殖指数和PCNAmRNA表达呈负相关。 结论 :肾硬化大鼠中肾小球细胞增殖随病变的进展而进行性增加 ,细胞周期调控蛋白 p2 7可能参与了肾硬化中肾小球细胞增殖的调控。     

高脂血症在大鼠阿霉素肾病进行性发展过程中的作用

高脂血症在大鼠阿霉素肾病进行性发展过程中的作用傅鹏，崔若兰，张晓瑛，龚志锦众所周知，高脂血症在动脉粥样硬化（ＡＳ）的发病过程中起着重要的作用。而近来研究表明肾小球硬化与ＡＳ在病理生理学方面存在诸多相似之处［ｋｉｄｎｅｙＩｎｔｌ９８８，３３：９ｌ７．］...     

阿霉素诱导的局灶节段性肾小球硬化小鼠TGF-β/MAPK信号通路的表达

目的观察阿霉素(ADR)诱导的局灶节段性肾小球硬化(FSGS)模型小鼠肾脏转化生长因子-β1 (TGF-β1)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的表达。 方法将8周龄雄性BALB/c小鼠(18～23 g)分为实验组和对照组,用ADR尾静脉注射进实验组小鼠,生理盐水注射入对照组,分别收集各组小鼠血、尿及肾脏组织。利用ELISA方法检测尿蛋白及血清肌酐、尿素氮,观察肾脏病理改变,实时荧光定量PCR技术检测转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad7和IV型胶原(Col IV)mRNA水平,Western印迹方法检测磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK1/2)和磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38MAPK)的蛋白水平。采用Graphpad Prism 5软件对结果进行单因素方差分析,P<0.05为差异有统计学意义。 结果实验组显示在第3天出现24 h尿蛋白增多,第22天升高更明显,与对照组相比差异有统计学意义(t＝ 8.718,P<0.001);实验组中血清肌酐及尿素氮与对照组相比,第22天升高(t＝5.12,t＝11.7;P<0.001),第32天达高峰(t＝25.7,t＝16.21;P<0.001);肾脏病理：实验组第22天可见部分肾小球系膜基质增多和系膜细胞增生,第32天出现系膜基质和系膜细胞轻至中度增生,节段加重,伴足细胞损伤,且可发现血管袢和肾小球囊粘连,符合FSGS的病理特点;荧光实时定量PCR结果显示：实验组第22天时肾脏TGF-β1 mRNA水平明显高于对照组(q＝5.091,P<0.05),Col IV mRNA相对表达量随着诱导天数而增加,在第32天时达到最高,与对照组相比差异有统计学意义(q＝5.222,P<0.05);Smad7的表达量在第32天时显著减少,与对照组比较差异有统计学意义(q＝10.64,P<0.01),与第22天比较差异亦有统计学意义(q＝9.643,P<0.01);Western印迹结果显示,第22天实验组p-ERK1/2蛋白水平较对照组降低(q＝5.570,P<0.05),第32天较对照组降低更明显(q＝8.881,P<0.01);第22天实验组p-p38MAPK表达较对照组增加(q＝30.65,P<0.001),第32天p-p38MAPK较对照组比较差异仍有统计学意义(q＝31.76,P<0.001)。 结论FSGS模型小鼠TGF-β/MAPK信号通路的表达量较对照组相比明显增加,提示TGF-β/MAPK通路有可能被激活从而参与FSGS的发病过程。     

槲皮素对阿霉素致大鼠肾小球硬化的干预作用

目的:观察槲皮素对阿霉素致大鼠肾小球硬化的干预作用。方法:采用单侧右肾切除术加两次尾静脉注射阿霉素建立肾小球硬化模型。将大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、槲皮素(25 mg·kg~(-1)·d~(-1)、50 mg·kg~(-1)·d~(-1)、100 mg·kg~(-1)·d~(-1))剂量组,总共干预8周。于槲皮素干预0、2、4、6、8周末检测24 h尿蛋白,实验结束后观察大鼠血生化、行HE染色观察肾组织病理并评估肾小球硬化程度,Western blot技术检测ZO-1、Nephrin、α-SMA以及FSP-1的表达。结果:与正常组和假手术组相比,模型组大鼠24 h尿蛋白量、尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)、胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、肾小球硬化指数(CSI)均明显升高,肾小球α-SMA、FSP-1表达显著增加(P 0. 05),总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)、肾小球ZO-1、Nephrin的表达均明显减少(P 0. 05)。与模型组相比,槲皮素干预组24 h尿蛋白量、BUN、Scr、TC、TG水平以及CSI呈剂量依赖性地降低,肾小球α-SMA、FSP-1的表达呈剂量依赖性地减少(P 0. 05),TP、Alb、ZO-1、Nephrin的表达呈剂量依赖性地增加(P 0. 05)。正常组与假手术组相比,各项指标差异无统计学意义。结论:槲皮素可以延缓肾小球硬化的发生。     

血管内皮生长因子在阿霉素肾病大鼠中的表达及其意义

血管内皮生长因子(VEGF)具有增加血管通透性和促进新生血管形成的作用。但病理状态下它的生物学功能及在肾小球疾病发生发展中的作用尚不明确。我们观察了阿霉素肾病(ADR)大鼠血清、肾组织VEGF的表达及与尿蛋白的关系,以探讨VEGF在ADR发病中的意义。 一、材料与方法 1.实验动物与分组:SD雄性健康大鼠30只,体重180-220 g,随机分为3组:(1)A组:正常对照组(n=10),大鼠     

罗格列酮对阿霉素肾小球硬化大鼠肾脏Ⅳ型胶原表达的影响

目的：探讨罗格列酮对阿霉素诱导的肾小球硬化大鼠肾脏Ⅳ型胶原表达的影响。方法：SD大鼠随机分成3组：对照组,模型组（阿霉素硬化组）,罗格列酮治疗组。采用单侧肾切除联合两次尾静脉注射阿霉素的方法建立肾小球硬化大鼠模型。HE染色后在光镜下观察各组大鼠肾脏组织病理学改变,并计算肾小球硬化指数,免疫组化方法检测各组大鼠肾组织中Ⅳ型胶原的表达情况。结果：肾小球硬化指数分别为模型组（158.27±38.46）,治疗组（92.52±29.58）,对照组（15.85±8.12）,治疗组硬化程度较模型组明显减轻,差异具有统计学意义（P〈0.05）;各组大鼠肾组织Ⅳ型胶原的表达：模型组和治疗组大鼠肾组织Ⅳ型胶原表达明显强于对照组,Ⅳ型胶原的积光度、染色面积、平均光密度显著升高,差异有统计学意义（P〈0.01）;治疗组大鼠肾组织Ⅳ型胶原表达低于模型组,Ⅳ型胶原的积光度、染色面积、平均光密度显著升高,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：罗格列酮可通过抑制Ⅳ型胶原的表达,减轻肾小球硬化,从而发挥其肾脏保护作用。     

霉酚酸酯对糖尿病肾病大鼠肾小球硬化的研究

目的通过霉酚酸酯对链脲佐菌素（STZ）糖尿病肾病大鼠模型的干预治疗,探讨其对肾组织转化生长因子β1（TGF-β1）及血浆内皮素（ETI）的影响。方法采用STZ腹腔注射法建立糖尿病肾病动物模型,将60只Wistar大鼠随机分为正常对照组（A组）、糖尿病肾病组（B组）及霉酚酸酯治疗组（C组）,每组各20只。C组给予霉酚酸酯（15mg·kg^-1·d^-1）灌胃治疗,12周后检测各组大鼠24h尿白蛋白、肌酐清除率（Ccr）、血糖、血ET-1浓度、HE和PAS染色观察肾脏病理改变、免疫组化方法检测TGF-β1的表达。结果霉酚酸酯能降低糖尿病肾病大鼠的24h尿蛋白定量、血ET-1、TGF-β1的表达;升高Ccr;减轻肾组织系膜细胞、系膜基质增生,减轻基底膜肥厚,肾小球硬化明显减少。结论霉酚酸酯对糖尿病大鼠肾脏有保护作用,其机制可能与减少蛋白尿,降低血ET-1、TGF-β1的表达有关。     

p38信号通路激活与肾小球硬化的研究进展

肾小球硬化是各种肾小球疾病发展的最终结局,是慢性。肾小球肾炎进展的主要原因。细胞内信号通路在肾小球硬化中的作用是目前研究的热点。MAPK（有丝分裂原激活的蛋白激酶）是调节细胞内一系列病理、生理功能改变的重要信号通路,p38MAPK通路在炎症、应激、细胞周期、凋亡等多种细胞生理／病理过程发挥着重要的作用,本文综述如下。     

越婢汤对阿霉素肾病大鼠肾小球超微结构的影响

目的：观察越婢汤对阿霉素肾病（adriamycin nephropathy,AN）大鼠肾小球超微结构的影响。方法：尾静脉注射阿霉素6mg/kg建立AN大鼠模型,并随机分为空白组（A组）、模型组（B组）、越婢汤（C组）、激素（D组）、苯那普利（E组）,给予相应干预;第3周、7周留取肾皮质,以醋酸铀和柠檬酸铅双重染色法,H-600透射电镜观察GBM超微结构,并计数单位肾小球基底膜上足突个数。结果：（1）造模成功后与A组相比,模型组大鼠24h尿蛋白显著升高（P〈0.01）,血清Alb明显下降（P〈0.01）,血清TG和TC明显升高（P〈0.01）。（2）模型成功时透射电镜示模型组大鼠肾小球足突呈部分或弥漫性融合,单位长度基底膜上足突计数明显减少。（3）干预结束后与B组相比,C、D组超微结构明显改善,足突计数明显增加,且排列相对整齐（P〈0.01）。结论：越婢汤可改善AN大鼠肾小球超微结构,从而改善修复肾小球电荷屏障。     

Hedgehog信号传导通路相关基因在肝癌组织中的表达研究

目的 研究Hedgehog信号传导通路相关基因在肝癌组织中的表达,及其抑制剂对肿瘤细胞生长的影响.方法 免疫组化法检测14例肝癌组织切片、4个肝癌细胞系和正常肝细胞中Hedgehog信号传导通路成员Ihh、Ptch、Smo、Gli的蛋白表达;Western blot检测9例新鲜肝癌组织标本、6例正常肝组织标本和肝癌细胞系中Ihh、Ptch、Smo、Gh的蛋白表达;RT-PCR检测3肝癌组织标本和肝癌细胞系中Ihh、Ptch、Smo、Gli、Hip mRNA表达.结果 14例肝癌组织中免疫组化染色阳性的Gli 6例(42.9%),Ptch 10例(71.4%),Ihh 10例(71.4%),Smo 12例(85.7%).Western blot和RT-PCR检测显示,肿瘤组织中Gli基因的mRNA和蛋白表达均高于正常肝脏细胞,Hip基因的mRNA表达低于正常肝细胞.肝癌细胞系HepG2,Bel-7402和QGY-7701免疫细胞化学染色Pteh和Gli同时为阳性,证明为Hedgehog通路活化的细胞系.在环耙明(KAAD-cyclopamine)作用后,3个细胞系Ptch及Gli基因的mRNA表达下调(Ptch基因tHepG2=3.78,tBel-7402=9.03,tQGY-7701=5.63,Gli基因tHepG2=9.61,tBel-7402=4.15,tQGY-7701=20.30,均P＜0.05);QGY-7701组Hip基因RNA表达上调(t=4.70,P＜0.05).环耙明抑制肝癌细胞系QGY-7701的作用最明显.结论 原发性肝癌组织中Hedgehog信号传导通路有多种基因表达,环耙明有抑制肝癌细胞生长的作用.     

温阳活血利水方对阿霉素肾病大鼠肾小球足细胞nephrin表达的影响

目的观察温阳活血利水法治疗微小病变肾病综合征的疗效,并观察对足细胞nephrin表达的影响,以探讨其作用机制。方法用阿霉素（ADR）诱导一种类似人类微小病变肾病模型,一周后用温阳活血方（治疗组）治疗,持续4周。并设空白对照组（正常组）、病理对照组（造模组）。观察实验大鼠的一般情况;检测大鼠24小时尿蛋白定量;检测总蛋白、白蛋白、总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白的水平;采用RT-PCR和免疫荧光染色测定大鼠肾小球Nephrin的mRNA和蛋白表达水平;光学显微镜观察肾组织形态学变化;电镜下观察足细胞足突的变化。结果模型组24小时尿蛋白定量明显升高（P〈0．01）,血清总蛋白、白蛋白明显降低（P〈0．01）,血清脂质水平升高（P〈0．01）,NephrinmRNA与蛋白表达明显减少,足突融合明显。两个治疗组均能降低24小时尿蛋白定量,升高血清总蛋白、白蛋白水平（P〈0．01）。温阳活血利水方能降低血清脂质水平（P〈0．01）。两个治疗组均能改善肾组织中NephrinmRNA与蛋白的表达的减少,改善其肾组织的病理改变。结论温阳活血利水方减少蛋白尿,可能与改善阿霉素肾病大鼠肾小球Nephrin的表达减少有关。     

温阳活血利水方对阿霉素肾病大鼠肾小球足细胞podocin表达的影响

目的：观察温阳活血利水法治疗微小病变肾病综合征的疗效并探讨其作用机制。方法：SPF级雄性Wistar大鼠50只,随机分为正常组、模型组、泼尼松组、中药组。正常组尾静脉一次性注射生理盐水1ml,其余各组均采用阿霉素5.5mg/kg一次性尾静脉注射。1周后开始药物干预,持续4周。观察实验大鼠的一般情况;检测大鼠24h尿蛋白定量;检测总蛋白、白蛋白、总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白的水平;采用RT-PCR和免疫荧光染色测定大鼠肾小球podocin的mRNA和蛋白表达水平;光学显微镜观察肾组织形态学变化;电镜下观察足细胞足突的变化。结果：模型组24h尿蛋白定量明显升高（P〈0.01）,血清总蛋白、白蛋白明显降低（P〈0.01）,血清脂质水平升高（P〈0.01）,podocin mRNA与蛋白表达明显减少,足突融合明显。两个治疗组均能降低24h尿蛋白定量,升高血清总蛋白、白蛋白水平（P〈0.01）。温阳活血利水方能降低血清脂质水平（P〈0.01）。两个治疗组均能改善肾组织中podocin mRNA与蛋白的表达的减少,改善其肾组织的病理改变。结论：温阳活血利水方能改善阿霉素肾病大鼠肾小球podocin的表达减少,减轻肾组织的病理改变,这可能是温阳活血利水方减少蛋白尿的重要作用机制。     

Wnt信号通路在肾病发病中的作用

Wnt信号通路早先发现时被认为其主要与细胞增殖旺盛的胚胎发育和肿瘤发生相关[1].目前研究发现,在肾脏发育及急性肾小管损伤中.Wnt信号通路发挥了积极的促进其发育和修复损伤的作用[2,3];但却又是多囊肾病及肾癌的关键发病机制之一[4,5].南此表明,肾脏的发育、形态以及功能的维持均有赖于Wnt信号通路正常"开启"和及时"关闭".本文就近年来Wnt信号通路在肾脏疾病发生、发展中的作用作一综述.     

炎症信号通路在糖尿病肾病中的研究进展

糖尿病肾病（Diabetic Nephropathy,DN）是糖尿病严重的微血管并发症之一,DN发生发展的确切机制不明,目前研究认为与糖代谢紊乱、血流动力学改变、细胞因子以及遗传背景等多种因素综合作用有关。近年来炎症在DN中的作用受到人们的重视,众多前炎性细胞因子、黏附因子、趋化因子和生长调节因子等相互作用、相互交联,扩大了炎症的级联反应,促进了DN的进展。     

转录因子FOXO3a相关信号通路在前列腺癌中的研究进展

FOXO3a是Forkhead转录因子亚家族O的一个重要成员,通过磷酸化、泛素化降解、微小RNA(miRNA)等方式在促进细胞凋亡、诱导细胞周期阻滞、抑制肿瘤细胞增殖、抑制肿瘤转移等中发挥重要作用。研究发现增强FOXO3a表达能够抑制前列腺癌细胞生长,本文主要对FOXO3a在前列腺癌中的调控信号通路研究进展进行综述,拟为前列腺癌临床诊断和靶向治疗提供新的思路。